盐酸埃他卡林对H2O2所致PC12细胞损伤的保护

目的: 研究 K_ATP 通道开放剂盐酸埃他卡林(iptakalim hydrochloride, Ipt) 对 H₂O₂ 所致 PC12 细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法: 采用培养的PC12细胞, MTT 法测定细胞存活率, HPLC 法测定细胞培养液中谷氨酸(Glu) 的含量, 荧光法测定胞内钙离子([Ca²⁺]_i) 浓度。结果: Ipt 可浓度依赖性的拮抗H₂O₂ 介导的细胞毒性, 提高细胞生存率, 降低胞外Glu的释放以及胞内 Ca²⁺ 浓度。该保护作用可被200 μmol°L^-1 5-HD(线粒体K ATP 通道阻断剂) 部分拮抗。结论: Ipt 可拮抗 H₂O₂ 介导的细胞损伤作用, 该保护作用可能与线粒体ATP 敏感性钾通道相关。     

埃他卡林对长期低氧大鼠肺动脉平滑肌KATP mRNA 的影响

目的:研究慢性低氧对大鼠肺动脉平滑肌ATP 敏感钾通道(K_ATP) mRNA 表达的影响及新型K_ATP开放剂盐酸埃他卡林的作用。方法:SD 雄性大鼠16 只随机分成对照组、低氧组、低剂量治疗组(盐酸埃他卡林0.75 mg·kg^-1 ·d^-1, ig)、高剂量治疗组(盐酸埃他卡林1.5 mg·kg^-1·d^-1, ig) 。将低氧组和治疗组大鼠放入常压低氧舱制备动物模型;采用RT-PCR 技术, 分析各组肺动脉主干平滑肌K_ATP mRNA表达。结果:低氧组SUR2 mRNA 水平显著低于正常组, 高剂量治疗组SUR2 显著高于低氧组, 各组Kir 6.1 没有显著差异。结论:慢性低氧抑制K_ATP 通道表达, 而盐酸埃他卡林能提高表达, 可从肺动脉高压发病机制上理解该药物治疗价值。     

单硝酸异山梨酯对尼索地平在大鼠体内药代动力学的影响

目的: 考察单硝酸异山梨酯对尼索地平在大鼠体内药代动力学的影响。方法: 12只健康雄性SD大鼠随机分成2组(分别为单独和联合给药组),用LC-MS/MS法测定血浆中尼索地平的浓度。结果: 大鼠单独给予尼索地平和联合给予单硝酸异山梨酯后,尼索地平主要药动学参数如下:C_max分别为(8.67±3.97) μg/L 和(9.21±5.02) μg/L,AUC_0t分别为(19.6±9.9) μg·h·L^-1和(25.7±13.7) μg·h·L^-1,t_1/2分别为(2.26±0.66) h 和(3.17±1.41) h,AUC_0∞分别为(23.7±9.7) μg·h·L^-1和(32.4±12.3) μg·h·L^-1。统计学分析显示,单独用药与联合用药组药动学参数无统计学差异(P＞0.05)。结论: 单硝酸异山梨酯不影响尼索地平在大鼠体内药动学过程,为临床安全有效地联用单硝酸异山梨酯和尼索地平提供了实验依据。     

异甘草素脂质体的制备及其对宫颈癌细胞体外增殖的抑制作用

目的: 研究异甘草素（ISL)脂质体对宫颈癌细胞体外增技的影响。方法: 采用超声波薄膜分散法制备ISL脂质体;葡聚糖凝肢层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;离心加速试验考察其稳定性;活细胞计数法测定生长曲线;MTT法测定细胞增殖。结果: ISL脂质体的平均粒径为233.1 nm,跨距为0.74,包封率为（70.8±2.5) %,稳定性好;ISL脂质体（5~80μmol·L^-1)浓度依赖性地抑制宫颈癌细胞HeLa和SiHa细胞增殖,并呈时间依赖性,于d3达高峰,其抑制率最高分别为83.44%和96.14%;浓度依赖性(5~80 μmol·L^-1)抑制 HeLa 和SiHa 增殖,ICW分别为 34.24 和 29.82 μmol·L^-1 (ISL的 IC₅₀分别为 75.39 和 69.33 μmol·L^-1) 结论: 该制备工艺与处方可行,命制备的ISL脂质体对人宫颈癌细胞体外增殖有明显的抑制作用,且作用明显强于ISL。     

不同剂量甘丙肽拮抗剂在三叉神经主核对甘丙肽外向电流的双向作用

目的 在三叉神经主核(PrV) 上检测不同剂量甘丙肽拮抗剂M35 和M40 对甘丙肽外向电流的作用。方法 全细胞膜片钳记录技术。结果 0.01、0.03及0.1 μmol·L^-1 的M35, 使甘丙肽引发的外向电流分别抑制53.1%、40.4% 及27.2%; 但1、3 μmol·L^-1 M35 使甘丙肽外向电流分别增大16.2%及38.4%。而给予0.01 及0.03 μmol·L^-1M40 时, 甘丙肽外向电流增大93.7%及68.4%;0.3、1 及3 μmol·L^-1 M40 使甘丙肽外向电流分别抑制49.2%、69.9%及87.2%。结论 低浓度M35为甘丙肽拮抗剂, 高浓度M35 有甘丙肽激动剂作用;低浓度M40 为甘丙肽激动剂, 高浓度M40 为甘丙肽拮抗剂, PrV 同一神经元上可能存在不同甘丙肽亚型受体。     

远端缺血再灌注预处理对心肌细胞膜ATP敏感性钾离子通道表达的影响

目的: 观察远端肢体缺血再灌注预处理后心肌细胞膜K_ATP通道在不同时点的表达变化。方法: 夹闭大鼠双侧股动脉 5 min 后开放 5 min,如此重复3次完成远端肢体缺血再灌注预处理,分别于处理后1、4、24和48 h处死大鼠,取其左心室肌组织,检测其心肌细胞膜K_ATP通道各亚基表达变化。结果: 远端肢体缺血再灌注预处理后,心肌细胞膜K_ATP通道的表达量增加,在4～24 h内增加最明显。结论: 远端肢体缺血再灌注预处理可上调心肌细胞膜K_ATP通道的表达,这种表达的改变可能参与了远端肢体缺血再灌注预处理对心脏的保护作用机制。     

三羟基异黄酮和17-β 雌二醇对自由基缩血管效应的影响

目的: 研究自由基引发血管收缩的机制, 并通过血管静息张力的变化探讨三羟基异黄酮和17-β雌二醇对自由基缩血管效应的影响。方法: 制备猪冠状动脉血管环, 固定于恒温肌槽内, 待平衡后, 加入各种药物观察血管张力的变化。结果: 内皮完整的血管环在O₂^·-作用下产生明显的收缩, 去除内皮后无明显反应。1 μmol·L^-1三羟基异黄酮对O₂^·-引发血管收缩有明显的抑制作用(P <0.01, n=16),1 μmol·L^-117-β 雌二醇无明显作用。H₂O₂ 使去内皮血管环产生明显的收缩作用, 对内皮完整的血管环缩血管效应不明显, 30 μmol·L^-1三羟基异黄酮可明显抑制H₂O₂ 的缩血管作用。结论: 三羟基异黄酮可明显抑制O₂^·-和H₂O₂ 的缩血管效应, 其作用明显强于17-β 雌二醇。     

LC-MS 法测定Beagle 犬血浆中苦参碱及其药代动力学

目的: 建立Beagle 犬血浆中苦参碱的LC-MS测定法, 测定其药物动力学及绝对生物利用度。方法: 采用Lichrospher C18 柱, 250 mm×4.6 mm(ID),5 μm, 柱温:25 ℃;流动相:10 mmol·L^-1醋酸胺水溶液∶甲醇(25 ∶75), 流速:1 ml·min^-1 。电喷雾离子化(ESI) 方式, 采用选择性离子检测, 检测离子为正离子, 苦参碱的离子是[M+H] +, m/z 249.2 。结果: 苦参碱在2～5 000 μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9975), 最低检出限达0.3 μg·L^-1。日内和日间误差均小于4.5 %, 方法回收率大于96.6 %;药-时数据符合二室模型, C_max 为3821±705 μg·L^-1, T_max为0.4±0.1 h, T_1/2β为11.2±2.1 h,AUC_0→∞为7446±1456 μg·h·L^-1, 绝对生物利用度为(60.1±19.0) %。结论: 该法灵敏、快速、简单, 专属性强, 苦参碱在Beagle 犬体内有较高的绝对生物利用度。     

氯法拉滨注射液在白血病患者中的单剂量及多剂量临床药代动力学研究

目的: 研究氯法拉滨注射液单剂量及多剂量静脉滴注的人体药动学过程。方法: 4例白血病患者单剂量恒速静脉滴注氯法拉滨注射液 52 mg·m^-2·d^-1 ,单剂量试验结束后进入多剂量给药试验, 52 mg·m^-2·d^-1 ,连续给药 5 d。采用高效液相色谱串联质谱法测定血浆及尿液中氯法拉滨的浓度,并采用DAS药动学软件对试验数据进行处理,求算有关药动学参数。结果: 4例受试者单剂量静脉滴注氯法拉滨注射液后,主要药动学参数分别为C_max(414±205) μg/L,t_max(3.0±1.4) h,t_1/2z(4.4±2.0) h,AUC_0-t(2475±659) μg·h·L^-1,AUC_0-∞(2566±606) μg·h·L^-1,CLz(21.2±5.1) L·h^-1·m^-2,V_z(142±97) L/m²,MRT_(0-t) (6.3±2.2) h,Zeta(0.18±0.07) h^-1,24 h 平均尿液累积排泄率为(39.53±20.98)%。52 mg·m^-2·d^-1静脉滴注氯法拉滨注射液,连续给药5 d,第5日达稳态,主要药动学参数为C_max(581±126) μg/L,t_max(2.0±0.8) h,t_1/2z(6.4±3.1) h,AUC_0-t(2451±349) μg·h·L^-1,AUC_0-∞(2603±409) μg·h·L^-1,CLz(20.4±3.7) L·h^-1·m^-2,V_z(187±80) L/m,Zeta(0.13±0.05) h^-1,MRT_(0-t) (5.1±1.8) h,C_ss(102.14±14.53) μg/L,蓄积因子R(1.04±0.28),血药浓度波动度DF(576.26±226.89)%。结论: 氯法拉滨注射液静脉滴注给药 52 mg·m^-2·d^-1 ,连续给药 5 d,药物在体内无蓄积,安全性好。     

吡格列酮对培养的心肌细胞肥大的抑制作用

目的: 利用体外培养的乳鼠心肌细胞, 观察吡格列酮对高浓度葡萄糖与去甲肾上腺素共同诱导的肥大心肌细胞的影响, 进一步推测吡格列酮对糖尿病性心肌肥大的可能作用及作用机制。方法: 以培养的乳鼠心肌细胞为模型分组给药后, 用显微镜目镜计数心肌细胞搏动的频率;用Lowry' s 法测心肌细胞的蛋白质含量;用[³H] leucine 标记法测定心肌细胞蛋白的合成;利用计算机图象分析系统测心肌细胞的体积。结果: 吡格列酮在1 ～ 10 μmol·L^-1 浓度对25. 5 mmol·L^-1高糖与1 μmol·L^-1去甲肾上腺素联合诱导的肥大心肌细胞的蛋白含量、蛋白合成及体积均有显著的抑制作用。其抑制肥大的效果比1 μmol·L^-1 维拉帕米更为显著;同时观察到10 μmol·L^-1吡格列酮同1 μmol·L^-1维拉帕米一样有抑制心肌细胞搏动的作用。结论: 吡格列酮能有效抑制高糖与去甲肾上腺素联合诱导的心肌细胞肥大。这种作用可能是通过作用于PPARγ来实现的。     

溴泰君与阿霉素单用和联合应用在Beagle犬的毒代动力学研究

目的: 研究溴泰君（W198)在Beagle犬体内毒代动力学,为临床试验提供依据。方法: 采用HPLC紫外或荧光检测方法测定Beagle犬静脉注射溴泰君、阿霉素以及溴泰君与阿霉素联合给药后生物样品中溴泰君和阿霉素的浓度。结果: Beagle犬静脉注射溴泰君15 mg·kg^-1·d^-1,第1次、第3次、第72次给药后的血清药物浓度-时间曲线下的面积(AUC_0-24h分别为 6.15±0.66、26.55±9.43 和33.63±2_31 mg·h^-1·L^-1。Beagle犬静脉注射溴泰君15 mg·kg^-1,第1次和第3次给药后的血清药物 AUC_0-24h分别为 0.70±0.21 和 1.19±0.19 mg·h^-1·L^-1。溴泰君与阿霉素联合给药时,溴泰君连续给药3次、阿霉素给药1次和溴泰君连续给药39次、阿霉素给药3次后溴泰君的血清药物AUC_0-24h分别为 25.52±6.04 和 42.60±4.14 mg·h^-1·L^-1;阿霉素的血清药物AUC_0-24h分别为 0.39±0.05 和 0.77±0.19mg·h^-1·L^-1。结论: 溴泰君和阿霉素连续多次给药后药物在动物体内均有明显蓄积作用。联合给药后溴泰君对阿霉素的消除似有促进作用,揭示溴泰君可以使阿霉素的系统暴露量减低,有利于降低阿霉素的毒性。     

肾功能异常患者司帕沙星的药代动力学

目的 观察司帕沙星在肾功能异常患者体内的药代动力学特征。方法 用高效液相色谱法测定10 例住院患者单剂量和多剂量口服司帕沙星后血清和尿药物浓度, 并计算药代动力学参数。结果 经PKBP-N₁药代动力学软件模拟和计算, 司帕沙星的药物动力学符合一级吸收二室开放模型, 主要药动学参数:单剂量T_1/2(ka)=(1.02±0.22)h, T_1/2(β)=(15.73±3.20)h, T_peak =(3.88±0.75)h, C_max =(0.59±0.17)mg·L^-1,AUC_0-∞=(11.25±2.13)mg·h·L^-1, 尿中24 h 原形药物排除率为(10.58±1.47)%;多剂量T_1/2(ka)= (1.25±0.27)h, T_1/2(β)=(16.90±4.13)h, T_peak =(4.18±0.78)h, C_max =(0.79±0.21)mg·L^-1,AUC_0~∞=(13.34±2.25)mg·h·L^-1, 尿中24 h 原形药物排出率为(11.08±1.94)%。多剂量C_max 和AUC 明显高于单剂量(P<0.05), 蓄积因子为1.19。结论 中度肾功能异常不改变司帕沙星的药代动力学参数。     

口服非那甾胺片和非那甾胺胶囊的人体生物等效性研究

目的: 研究非那甾胺片剂和胶囊在健康志愿者体内的生物等效性。方法: 24 名健康男性志愿者随机三交叉给药, 分别单剂量口服15 mg 试验药非那甾胺片剂、胶囊及非那甾胺片剂对照药, 采用WatersOasis?HLB 固相萃取小柱提取, 反相高效液相色谱法测定血药浓度, 计算药代动力学参数及相对生物利用度。结果: 口服15 mg 试验药非那甾胺片剂和胶囊及片剂对照药的主要药代动力学参数T1 2ke分别为4.38±0.90、4.29±0.78 和4.32±0.86 h;T_max 分别为3.04±0.88、2.98±0.89 和2.59±0.86 h, C_max 分别为117.57±19.15、118.59±20.23和124.53±19.77 μg·L^-1;AUC0-18分别为897.57±185.03、871.57±139.25 和837.59±149.05 μg·h·L^-1;AUC_0-∞分别为970.04±211.83、931.51 +151.07 和896.41±164.92 μg·h·L^-1。结论: 试验药非那甾胺片和胶囊与对照药非那甾胺片剂具有生物等效性, 相对生物利用度分别为(107.27±9.86) %和(105.06±12.10) %。     

新型KATP开放剂埃他卡林对氟哌啶醇诱导的大鼠帕金森样症状的影响

目的:研究ATP 敏感性钾通道(ATP-sensitive potassium channels, K_ATP) 开放剂埃他卡林(I_ptakalim, I_pt) 对由氟哌啶醇(haloperidol) 诱导产生的大鼠帕金森样症状的影响。方法:应用氟哌啶醇诱导大鼠帕金森样症状, 以左旋多巴(levodopa, L-DOPA) 为阳性对照, 观察不同剂量I_pt 对大鼠运动潜伏时间、行走时间以及直立和梳洗次数的影响。结果:I_pt 能显著改善氟哌啶醇引起的大鼠自发性活动减少;能缓解氟哌啶醇引起的大鼠全身僵硬, 并且随剂量的增加,I_pt 的作用逐渐增强。结论:K_ATP 通道开放剂I_pt 能够改善氟哌啶醇引起的大鼠帕金森样症状, 是一个极富治疗潜力的先导化合物。     

小鼠体内1, 6-二磷酸果糖锌和葡萄糖酸锌的药动学比较

目的:比较1, 6-二磷酸果糖锌(Zn-FDP)和葡萄糖酸锌(Zn-G)的药动学参数, 以探讨Zn-FDP 药动学特征, 为该药临床应用提供基础资料。方法:采用电感耦合等离子体发射光谱法对小鼠口服Zn-FDP和Zn-G 后的血锌含量分别进行药动学测定。结果:Zn-FDP 和Zn-G 的Ke 分别为0.27 ±0.12 和0.41 ±0.03 h, t_max 分别为1.65 ±0.04 和1.43 ±0.05 h,C_max分别为9.27 ±0.25 和13.46 ±0.16 mg·L^-1,AUC 分别为47.45 ±2.11 和57.67 ±5.80 mg·h^-1 ·L^-1 。结论:Zn-FDP 给药后血锌低于Zn-G 给药后血锌含量,但心、肝、脑、肾4 个脏器锌含量却无显著差异, 表明Zn-FDP 吸收不及Zn-G, 但由血液转运进入组织却优于Zn-G。     

盐酸埃他卡林对大鼠海马神经元谷氨酸受体功能及突触活动的影响

目的: 研究盐酸埃他卡林(Ipt) 对脑神经元谷氨酸受体功能及突触活动的影响。方法: 采用原代培养的大鼠海马神经元, 应用膜片钳全细胞记录技术, 记录Ipt 对培养的海马神经元谷氨酸或天冬氨酸(NMDA) 诱发电流及神经元突触后电流的影响。结果: Ipt (1 ~ 100 μmol·L^-1) 可浓度依赖性地对抗培养的海马神经元谷氨酸或NMDA 诱发电流, 并为ATP敏感性钾通道拮抗剂格列本脲30 μmol·L^-1所对抗。Ipt 抑制培养的海马神经元之间突触联系形成的自发兴奋性突触后电流, 降低其发放频率, 抑制其电流幅度;但对微小兴奋性突触后电流无显著性影响。结论: Ipt 可阻断脑神经元谷氨酸受体功能, 抑制脑神经元谷氨酸的兴奋性突触传递, 其作用与ATP 敏感性钾通道相关。     

利鲁唑片在健康男性人体内生物等效性研究

目的: 建立利鲁唑片生物浓度的固相萃取后HPLC-UV 检测方法, 研究其在健康男性人体内药代动力学和相对生物利用度。方法: 20 名健康男性志愿者单剂量随机交叉口服150 mg 利鲁唑片剂和进口参比制剂后于不同时间点静脉取血, 血浆经固相萃取, 甲醇洗脱吹干后用少量甲醇溶解后, 采用高效液相色谱-紫外检测器, 应用内标法计算利鲁唑浓度。结果: 利鲁唑片与参比制剂的主要药动学参数C_max 分别为930 ±321 和798 ±306 μg·L^-1, t_max 分别为0. 8 ±0. 5 和1. 2 ±0. 7 h, AUC_{0 ～ t} 分别为3361 ±890和3301 ±886 μg·h^-1·L^-1,AUC_{0 ～ ∞}分别为3661 ±886和3614 ±885 μg·h^-1·L^-1, t_1/2 分别为8. 2 ±2. 8 和8. 1 ±2. 6 h 。AUC_{0 ～ t} 和C_max 的90 %置信区间为:96. 11 %～ 107. 77 %和101. 6 % ±135. 9 %。AUC_{0～ t} 相对生物利用度为102. 8 %±15. 5 %。结论: 国产利鲁唑片剂和进口片两种制剂生物等效。     

HPLC-MS法测定Beagle犬血浆中氧化苦参碱及其药代动力学

目的: 建立Beagle犬血浆中氧化苦参碱的LC-MS测定法,测定它的绝对生物利用度。方法: Beagle犬6只,随机分为2组,采用单剂量双周期自身交叉设计,分别给犬单剂量静脉注射或灌胃氧化苦参碱,用LC-MS法测定给药后的血浆中药物浓度。结果: 氧化苦参碱在2～5000μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9990),最低检出限达0.6μg·L^-1,日内和日间误差均小于4.2 %,方法回收率大于96.7 %;氧化苦参碱的药-时数据符合二室模型,C_max为2.42±0.97μg·L^-1,T_max为1.0±0.3 h,T_1/2β为5.54±1.58h,AUC_0→∝为6.12±1.08μg·L^-1·h^-1,绝对生物利用度为(19.4±9.01)%。结论: 该法灵敏、简单,专属性强;氧化苦参碱在Beagle犬体内绝对生物利用度较低。