双氢青蒿素对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长的影响

目的:探讨双氢青蒿素对小鼠Lewis 肺癌移植瘤的抑瘤效应及其作用机制。方法:50只C57BL/6J 小鼠皮下接种3LL 细胞(2×10⁶), 随机分为5组, 分别为生理盐水组, 阳性对照顺铂组,双氢青蒿素高、中、低剂量组(150、100、50 mg/kg),检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率, 应用流式细胞术进行瘤细胞的DNA 倍体分析。结果:双氢青蒿素中、高剂量组体重无生理盐水组增加明显, 其抑瘤率分别为53.50%及59.24%;流式细胞术检测双氢青蒿素能诱导肿瘤细胞凋亡, 并能影响肿瘤的细胞周期, G0G 期及G₂/M 期细胞数大量减少, 细胞被阻滞在S1期。结论:口服双氢青蒿素对Lewis 小鼠肺癌有明显的抑制作用, 可促进肿瘤细胞凋亡。     

皖南蝮蛇毒抑瘤组分I对人胃癌细胞SGC-7901荷瘤鼠体内抑制作用的研究

目的:研究皖南蝮蛇毒抑瘤组分I(Agkistrodon halys venom antitumor component I,AHVAC-I)对人胃癌细胞SGC-7901荷瘤鼠的体内抑制作用及瘤细胞增殖活性变化,并初步探讨其作用机制。方法: 取生长状态良好的浓度为1×10⁷个/mL的SGC-7901人胃癌细胞悬液 0.1 mL 接种于裸小鼠右侧腋窝皮下,待其成瘤后随机分为模型组、紫杉醇阳性对照组、AHVAC-I高、中、低剂量组,隔日连续给药5次,定期观察肿瘤生长情况,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率,HE染色观察瘤体形态学变化,免疫组化SP法检测Ki-67增殖指数,原位末端标记技术(TUNEL)法检测细胞凋亡指数。结果: AHVAC-I在 1.0 mg/kg 剂量时对SGC-7901细胞有抑制作用,抑瘤率达 42.2%;在 3.0 mg/kg 剂量时有显著抑制作用,抑瘤率达 78.5%。实验组肿瘤内Ki-67阳性细胞数量下降,凋亡细胞明显增多。结论:AHVAC-I能明显抑制裸鼠体内SGC-7901人胃癌细胞的生长,其作用机制可能与诱导胃癌细胞发生凋亡及抑制肿瘤细胞增殖有关。     

川芎嗪对小鼠 Lewis 肺癌的治疗作用

目的: 研究中药川芎嗪(TMP) 对实体肿瘤的疗效及其可能的作用机理。方法: 本研究运用 Lewis肺癌小鼠模型, 观察 TMP 对小鼠 Lewis 肺癌的疗效 、免疫功能、生存质量及不良反应的影响。结果: TMP治疗小鼠 Lewis 肺癌能抑制肿瘤的生长, 稳定病灶,提高荷瘤小鼠的生存质量, 改善免疫功能。结论: TMP 对小鼠 Lewis 肺癌有明显疗效, 其作用机理与其本身对 Lewis 肺癌实体瘤有抑制作用和提高荷瘤小鼠免疫功能有关。     

诺必擂停抗肿瘤作用的实验研究

目的: 观察诺必擂停体内外的抗肿瘤作用。方法: 体内实验采用3 种移植性肿瘤模型(S180、BGC-823、EAC), 计算各用药组抑瘤率、EAC 小鼠生命延长率;体外实验采用2 种肿瘤细胞株(K562、HL-60), MTT 法检测抑制率。结果: 诺必擂停对S180、BGC-823 具有抑制作用, 抑瘤率分别为39.11% ~55.67%、36%~ 58%, EAC 的生命延长率为15.38%~ 24.61%;体外, 诺必擂停可抑制K562、HL-60 的生长, 浓度在2.5 ~ 10 μg·ml^-1时, 抑制率随浓度与时间的增加而升高。结论: 诺必擂停对S180、BGC-823移植性肿瘤及K562、HL-60 肿瘤细胞株具有明显的抑制作用, 对EAC 小鼠具有一定的生命延长作用。     

新一代胸苷酸合成酶抑制剂ZD1694 的体内外抗肿瘤作用

目的: 观察ZD1694 对小鼠体内S180 肉瘤生长的抑制作用及其在体外对人胃腺癌SGC-7901 细胞增殖的影响。方法: 采用荷瘤小鼠模型, 腹腔注射不同剂量的ZD1694, 分单次给药与连续5 d 分次给药两种方案。处死动物后称取肿瘤组织重量, 计算抑瘤率。另外采用MTT 比色法及流式细胞仪观察ZD1694 对人SGC-7901 胃腺癌细胞株生长的影响。结果: ZD1694 可抑制小鼠体内S180 肉瘤的生长, 其抑瘤率无论是单次给药组(200 、100 、50 mg·kg^-1) 还是连续5 d 给药组(40 、20 、10 mg·kg^-1 ·d^-1), 均可见剂量依赖性增加。ZD1694(0.001 ~ 1 000 mmol·L^-1)对SGC-7901 人胃腺癌细胞的生长抑制率呈浓度依赖性和时间依赖性增加, 可使G₀-G₁ 期细胞增多,S 期和G₂-M 期细胞减少。结论: ZD1694 对荷瘤小鼠产生明显的抗瘤作用, 一次性给药的抑瘤率大于相同剂量分5 次给药的抑瘤率。该药在体外可抑制人胃腺癌SGC-7901 细胞生长, 使细胞发生G₁ 期阻滞。     

4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3, 3-二苯基)丙酯盐酸盐在小鼠的抗肿瘤作用

目的: 观察4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3, 3-二苯基) 丙酯盐酸盐(Hyd) 对小鼠移植性肿瘤的抑制作用, 以确定该化合物的应用前景。方法: 采用小鼠肉瘤180 和肝癌22 及人胃癌异种移植裸鼠肿瘤模型, 观察Hyd 对小鼠移植性肿瘤生长的影响。结果: 通过口服灌胃给药, 不同浓度Hyd 对小鼠移植性肉瘤S180抑制率可达到46.4 %~ 59.6 %(P<0.01 ~ 0.001);对小鼠移植性肝癌H22抑制率可达到39.3 %~ 51.6 %(P<0.05 ~ 0.001);对裸鼠人胃癌异种移植瘤的抑制率可达到18.1 %~ 59.0 %。结论: Hyd 对小鼠移植性肝癌H22 和小鼠移植性肉瘤S180有明显抑制作用, 对人胃癌裸小鼠异种移植性肿瘤也有明显抑制作用。     

螺旋藻多糖对小鼠移植性肿瘤化疗后造血恢复及相关细胞因子的影响

目的: 研究螺旋藻多糖(polysaccharide fromspirulina platensis, PSP) 对小鼠移植性肿瘤化疗后造血恢复及相关细胞因子的影响。方法: 通过右前肢皮下接种肿瘤细胞形成小鼠移植性实体瘤, 给予PSP 连续灌胃 10 d, d 4 给予环磷酰胺(CTX) 腹腔注射连续 3 d。于 d 11, 分别观察了外周血细胞、骨髓有核细胞及 CFU-S 计数, 用紫外分光光度计检测骨髓DNA 含量, 用双抗体夹心 ELISA 法检测血清中IL-1、IL-3、GM-CSF、TNF 含量。 结果: CTX 可造成明显骨髓抑制, 而 PSP 则提升了外周血细胞、增加了骨髓中有核细胞计数和 DNA 含量以及促进了 CFU-S形成。 此外, PSP 还增加了血清中 IL-1、IL-3、GM-CSF、TNFα含量。结论: PSP 可能通过促进内源性细胞因子的分泌来实现其促进小鼠移植性肿瘤化疗损伤后的造血恢复。     

西妥昔单抗联合顺铂对鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤生长作用的影响

目的:探讨靶向表皮生长因子受体(EGFR)特异性单抗西妥昔单抗单药及与顺铂联合应用对鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的作用机制。方法:将鼻咽癌细胞HONE1制成细胞悬液后接种于裸鼠皮下,待成瘤后将裸鼠随机分入4个处理组:生理盐水组、西妥昔单抗组、顺铂组及两药联合组。定期测量每只裸鼠肿瘤最大径和最小径,计算肿瘤体积。用药结束后,处死裸鼠,取出肿瘤组织,称重,计算抑瘤率。用免疫组化方法检测肿瘤组织中磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和人磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达。结果:与生理盐水组相比,西妥昔单抗单药组肿瘤体积变化及治疗后平均瘤重差异均无统计学意义,顺铂单药组及两药联合组均有抑瘤效应,以两药联合组抑瘤效果尤为显著。免疫组化显示肿瘤组织AKT和ERK磷酸化水平在顺铂处理组上调,而在西妥昔单抗单药及联用组则较低。结论:西妥昔单抗单药对HONE1鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤的生长无明显影响,但其与顺铂联用可增加顺铂的抑瘤作用。     

不同剂量蛇毒抗高凝状态酶对小鼠肝癌H22 生长作用的实验研究

目的: 探讨不同剂量蛇毒抗高凝状态酶(AHCSE)对小鼠肝癌H22 生长作用的影响。方法: 小鼠皮下接种小鼠肝癌(H22) 后, 待肿瘤长成10mm² 分别经腹腔注射不同剂量AHCSE, 每天1 次, 连续10 d, 观察瘤重抑制率、瘤体积、抑瘤率、脾指数和白细胞及其组成成分, 统计采用LDS-t, 检验水准α=0.05 。采用白细胞及其组分与脾指数的相关和回归。结果: 中、高剂量组AHCSE 具有明显的抗肿瘤作用, 而低剂量组抗肿瘤作用效果不佳, 但高剂量组的小鼠体重降低明显。实验组的脾系数明显高于对照组, 并且随着AHCSE 的剂量增大脾系数也增大。白细胞随着AHCSE 剂量的增大而增大, 白细胞及其组分与脾指数存在相关性和回归直线。结论: 在一定的范围内, 随着AHCSE 的剂量增大, 抗肿瘤效果增强, 但副作用也增大, 其机制可能与凋亡和激活免疫系统有关。     

人参茎叶皂甙对5-氟脲嘧啶抗肿瘤的增强作用

目的: 观察人参茎叶皂甙(GSL) 促进氟脲嘧啶( 5-FU) 对小鼠S180 实体瘤的抑瘤作用。方法: 采用昆明种小鼠, 随机分组进行实验, 分别给予不同剂量人参茎叶皂甙与氟脲嘧啶配伍使用, 观察其对小鼠S180 实体瘤抑瘤率的差别。结果: 低剂量人参茎叶皂甙( 15 mg·kg^-1) 与氟脲嘧啶( 1. 5 mg·kg^-1) 组方对小鼠S180 实体瘤有显著的抑瘤作用( 抑瘤率达26. 90 %, P <0. 05), 对胸腺无抑制作用;阳性对照药5-FU( 25 mg·kg^-1) 的抑瘤率为36. 61 %, 但其对胸腺有显著抑制作用;而人参茎叶皂甙( 100 mg·kg^-1) 单用对小鼠S180 实体瘤抑瘤率为27. 44 %。结论: 低剂量人参茎叶皂甙( 15 mg·kg^-1) 显著促进5-FU( 1. 5mg·kg^-1) 对小鼠S180 实体瘤的抑瘤作用而无胸腺抑制作用, 可并减少5-FU 的毒副作用。     

携带Kringle 5 基因重组腺病毒的构建及其对荷肺癌小鼠生存期的作用

目的 构建携带人纤溶酶原Kringle 5(K5)基因重组腺病毒并观察其在小鼠肺癌细胞中的表达和对荷TC-1 瘤小鼠的生存期的影响。 方法 构建携带人纤溶酶原K5 基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1α-K5, 用RT-PCR 法检测腺病毒感染TC-1细胞后K5 mRNA 的表达, 用免疫沉淀和Westernbloting 法检测腺病毒感染TC-1 细胞后K5 蛋白的表达。建立荷TC-1 小鼠肺癌C57BL/6 小鼠模型,观察重组腺病毒对荷瘤小鼠生存期的影响。取肿瘤组织做免疫组织化学染色并计数微血管密度。 结果 携带K5 基因的人V 型腺病毒能有效感染小鼠肺癌TC-1 细胞, 在转录和翻译水平进行表达, 能有效延长荷瘤鼠的生存期并降低肿瘤微血管密度。 结论 腺病毒可作为便捷的载体携带K5基因感染肿瘤细胞, 分泌表达K5 蛋白, 延长荷瘤小鼠生存期, 可能与其通过抑制肿瘤区血管生成、遏制肿瘤区血供有关。     

大豆异黄酮对YAC-1 细胞和小鼠ESC艾氏肉瘤生长的抑制作用

目的 观察大豆异黄酮对YAC-1 细胞及小鼠ESC艾氏肉瘤生长的抑制作用及对免疫功能的影响。方法 用MT T 法测定大豆异黄酮对YAC-1 细胞生长的抑制率和小鼠淋巴细胞转化刺激指数;LDH 释放法测定小鼠NK 细胞活性;称重观察肿瘤生长和脾指数和胸腺指数。结果 金雀异黄素和大豆甙元剂量依赖性抑制YAC-1 细胞生长, 并随时间延长作用增强;大豆异黄酮50、100、400 mg·kg^-1 灌胃给药均明显升高雌性小鼠脾指数和淋巴细胞转化的刺激指数, 对雄性小鼠则无明显作用;大豆异黄酮100、400 mg·kg^-1 明显抑制小鼠ESC 艾氏肉瘤生长, 同时50、100、400 mg·kg^-1 均降低异常增高的脾指数, 增加NK 细胞活性。结论 大豆异黄酮明显抑制YAC-1 细胞和小鼠ESC 艾氏肉瘤的生长,同时增强非特异性免疫功能, 并可增强正常雌性小鼠免疫功能。     

拟康氏木霉胞外多糖抗肿瘤活性研究

目的: 研究拟康氏木霉胞外多糖体内外抗肿瘤活性。方法: 体外采用MTT法检测拟康氏木霉胞外多糖对人白血病细胞HL-60抑制作用;体内试验是将昆明种小鼠接种S180实体瘤后随机分组,灌胃50、100、200 mg·kg^-1·d^-1剂量的多糖,以生理盐水和环磷酰胺为空白对照组和阳性对照组。检测受试药物对小鼠S180实体瘤的抑制作用,计算小鼠的相对生长率及其免疫器官指数。结果: 经MTT法检测,拟康氏木霉胞外多糖 0.2～1.0 mg/mL 五个浓度对HL-60细胞均有不同程度的抑制作用,并呈现出剂量相关性,其中 1.0 mg/mL 多糖浓度在 72 h 的抑制率可达 40.36%。而该多糖低、中、高三个剂量组均能明显减少S180小鼠的瘤重,其中高、中剂量组能明显提高小鼠的胸腺指数和脾指数(P<0.05,P<0.01),但与空白对照组比较,三个给药组对小鼠的相对生长情况并无明显影响。结论: 拟康氏木霉胞外多糖具有一定的抗肿瘤作用。     

纳米雄黄的抗小鼠原位乳腺癌作用及其机制

目的: 研究纳米雄黄体内体外对小鼠乳腺癌细胞(4T1)的增殖抑制作用及其机制。方法: 以萤火虫荧光素酶(Luciferase, Luc)基因标记小鼠4T1乳腺癌(4T1-Luc)细胞,应用噻唑蓝(MTT)比色法和生物发光法(Bioluminescent method, BLM)检测细胞增殖活性;细胞形态学及Annexin V/PI 双标记法观察细胞凋亡。4T1-Luc细胞接种雌性BALB/c小鼠乳腺脂肪垫制作原位乳腺癌模型,纳米雄黄(4和 8 mg·kg^-1·d^-1)灌胃治疗 20 d,小动物活体成像系统连续动态观察小鼠乳腺肿瘤生长变化,治疗末期处死动物、剥离肿瘤块称重,并制片HE染色和CD₃₄标记观测肿瘤组织内细胞核分裂像、新生血管形成及坏死改变。结果: MTT法和BLM法检测显示 1.56~50 μg/mL 纳米雄黄体外显著抑制 4T1-Luc 细胞的增殖(P<0.05);形态学观察和Annexin V/PI染色显示细胞呈现典型的凋亡改变。体内纳米雄黄呈时间和剂量依赖性地抑制小鼠4T1-Luc原位乳腺癌的生长(P<0.05);肿瘤组织制片观察,经纳米雄黄治疗后肿瘤组织内细胞核分裂像和微小血管显著减少(P<0.01),肿瘤组织内部呈显著的坏死改变。结论: 纳米雄黄体外抑制小鼠乳腺癌4T1细胞增殖和诱导细胞凋亡,并主要通过减低原位肿瘤组织内新生血管的形成而导致肿瘤组织坏死而发挥抗乳腺癌作用。     

青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7血管生成和肿瘤浸润作用研究

目的: 观察青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7血管生成及浸润转移的抑制作用。方法: 建立人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤模型,给予不同剂量青蒿琥酯治疗并观察其对移植瘤的抑制作用;用免疫组化检测移植瘤组织细胞中VEGF、HIF-1α、uPA、E-cadherin蛋白表达和Western blot检测移植瘤组织细胞中HIF-1α、VEGF蛋白表达。结果: 青蒿琥酯低、高剂量组抑瘤率分别为(24.39±10.20) %、(40.24±7.02 ) %;免疫组化结果显示,与生理盐水组比较,青蒿琥酯低、高剂量组VEGF、HIF-1α蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05); uPA和E-cadherin蛋白在生理盐水组和青蒿琥酯低、高剂量组中的表达水平差异均无统计学意义(P>0.05),HIF-1α/VEGF之间表达呈正相关(r=0.983,P=0.000);Western blot 结果显示,青蒿琥酯低、高剂量组中VEGF、HIF-1α蛋白下调,表达量低于生理盐水组,青蒿琥酯高剂量组的蛋白表达量最低。HIF-lα与VEGF蛋白表达之间存在一致性。结论: 青蒿琥酯可显著抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抗肿瘤血管及抑制肿瘤侵袭相关。     

青蒿琥酯诱导肿瘤细胞凋亡与抑制存活蛋白表达有关

目的 探讨青蒿琥酯(artesunate, Art)诱导肿瘤细胞凋亡与存活蛋白(survivin protein)表达的关系。 方法 采用细胞荧光染色、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳法和测定细胞浆Caspase-3 的活性等手段检测肿瘤细胞暴露于不同浓度的Art 时, 对肿瘤细胞凋亡的诱导作用;用RT-PCR、Western Blotting 法,检测不同浓度的Art 作用于肿瘤细胞时, 对survivinmRNA 和survivin 蛋白表达的影响。 结果 HL60 细胞暴露于Art 时, 呈现典型细胞凋亡特征, 如:胞核固缩、形成凋亡小体;凋亡细胞的比例呈浓度依赖性增高;琼脂糖电泳出现明显的“ 梯状” 条带;细胞浆Caspase-3 的活性呈浓度依赖性增高等。RT-PCR 检测表明, A549 细胞暴露于Art 10 和50 g·L^-1 72 h后, survivin mRNA 的表达呈浓度依赖性降低, 对照组、10 和50 mg·L^-1 处理组的survivin 条带和内标GAPDH 条带灰度的比值分别为1.745、0.390 和0.023;Western Blotting 法也检测到Art 抑制Survivin蛋白的表达。 结论 Art诱导肿瘤细胞发生凋亡, 激活Caspase-3 途径, 可能与抑制survivin 基因表达有关。     

IFNγ在抗肿瘤新生血管形成中潜在的作用及机制研究

目的: 探讨干扰素-γ(IFNγ)在抗肿瘤新生血管形成中可能的作用及机制。方法: 建立人脐静脉内皮细胞(human umbilical cord vascular endothelial cell,HUVEC)的体外培养体系,MTT 法检测IFNγ(10、100、1 000 U·ml^-1)对HUVEC 生长的直接影响;应用流式细胞术观察IFNγ对HUVEC 凋亡和细胞周期的影响;半定量逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测IFNγ对HUVEC 凋亡相关基因Bcl-2 和Bax mRNA的表达的影响。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测缺氧状态下IFNγ(30、300、3 000 U·ml^-1)对人肺癌PG细胞分泌到培养上清中VEGF 的影响。结果: IFNγ(10、100、1 000 U·ml^-1)可抑制体外培养的HUVEC的生长(P<0.01);流式细胞术检测IFNγ(10、100、1 000 U·ml^-1)作用的HUVEC,无亚二倍体峰出现,但细胞周期分析显示,IFNγ各给药组均可减少G₂-M期的细胞比例(P<0.05 或P<0.01)。IFNγ(100、1 000 U·ml^-1)对抑凋亡基因Bcl-2 和促凋亡基因Bax 的mRNA 的表达与对照组相比无显著的统计学意义(P>0.05)。缺氧状态下IFNγ3 000 U·ml^-1可抑制人肺癌PG 细胞培养上清中VEGF 的含量,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论: IFNγ可能通过直接抑制肿瘤血管内皮细胞的生长或间接下调肿瘤血管生成刺激因子释放的机制,最终抑制肿瘤新生血管的形成。