顺铂与环磷酰胺联合应用剂量优化的实验研究

目的: 观察低剂量顺铂(DDP)和环磷酰胺(DTX)联合用药治疗恶性肿瘤疗效及其对免疫器官的毒性。方法: 采用小鼠肉瘤S180进行体内实验,观察两药单独及联合使用对小鼠S180 及胸腺和脾脏的影响。结果: DDP组和不同剂量的DTX 配伍应用与DDP组相比抑瘤率分别提高13.6%~29.6%,与相应剂量DTX 组相比抑瘤率分别提高33.5 % ~34.3 %,其中DDP+DTX 0.75 +7.5mg·kg^-1组与DDP及相应剂量DTX 组相比较有显著意义(P<0.01~0.001);DDP组及两药联合应用各剂量组使小鼠胸腺指数和脾指数明显低于对照组。结论: 低剂量DDP与DTX 联合使用加强了对肿瘤生长的抑制作用,与DDP组相比,联合应用引起的免疫器官的萎缩与DDP组无差别。     

紫杉醇+顺铂方案联合沙利度胺治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的: 观察紫杉醇+顺铂(TP)方案联合沙利度胺治疗晚期非小细胞肺癌患者的疗效和安全性。方法: 选择晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者110例,均为ⅢB-Ⅳ期患者,随机分为两组:治疗组55例,给予TP方案联合沙利度胺治疗,21 d 为一周期,并于化疗第一天起给予沙利度胺 100 mg/d, 睡前顿服, 若能耐受,一周后加至 200 mg/d,连续口服3个月;对照组55例,单纯TP方案化疗。所有病例均为初治患者,以前未进行过放化疗,入组的每例患者至少接受2个周期的治疗。结果: 治疗组与对照组有效率分别为 41.18%、37.74%,两组间差异无统计学意义(P＞0.05);临床获益率分别为 86.27%、69.81%,治疗组明显高于对照组(P＜0.05);治疗组食欲增加率、体重增加率及KPS评分好转率均优于对照组(P<0.05)。中位无进展生存时间(PFS)治疗组为 7.45 个月(5～26个月),对照组5.77个月(4～20个月);中位总生存期(OS)治疗组为 12.88 个月(6～26个月),对照组为11.32个月(5～21个月)(P＜0.05)。两组Ⅲ-Ⅳ级不良反应均较少见,除Ⅲ-Ⅳ级恶心、呕吐发生率治疗组明显低于对照组外(P=0.03),余不良反应发生率两组无明显差异(P＞0.05)。沙利度胺最常见的不良反应嗜睡、便秘发生率低(10%～30%),不良反应较轻。结论: TP方案联合沙利度胺治疗晚期NSCLC未能明显提高近期疗效,但临床获益率、生活质量明显提高,生存期延长,无明显毒副作用,安全性高,值得临床推广应用。     

紫杉醇耐药卵巢癌细胞亚株的蛋白组学研究

目的: 建立卵巢癌细胞株与紫杉醇耐药卵巢癌细胞亚株的差异蛋白表达图谱,寻找对紫杉醇药物耐受的相关蛋白。方法: 以人卵巢浆液性囊腺癌细胞株(SKOV3)和对紫杉醇稳定耐药卵巢浆液性囊腺癌细胞亚株(SKOV3-TR30)为研究对象,应用双向电泳技术建立SKOV3与SKOV3-TR30的蛋白质差异表达图谱,并对图谱进行质谱分析。然后应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学方法对其中3个有差异的蛋白进行定量和定位检测。结果: (1)经过组内与组间3次重复,发现每次实验均有相似变化的差异点23个。其中与SKOV3细胞株相比,在SKOV3-TR30细胞株表达上调大于3倍的蛋白质点有16个(P<0.05),表达下调大于3倍的蛋白质点有7个(P<0.05)。(2)通过质谱分析和数据库搜索,其中7个蛋白点得到初步鉴定,分别为可溶性抗药性相关钙结合蛋白(Sorcin)、组织蛋白酶B前体(Cathepsin B)、调宁蛋白3、热休克蛋白27(HSP27)、波形纤维蛋白、尼克酰胺乙酰乙酸水解酶和血红蛋白β链。(3)蛋白免疫印迹结果显示,Sorcin、Cathepsin B及HSP27在SKOV3-TR30细胞中的表达显著高于SKOV3细胞株(P<0.05)。免疫细胞化学的结果表明,SKOV3及SKOV3-TR30均可检测到Sorcin、Cathepsin B及HSP27阳性表达的细胞,并且3个蛋白均分布在细胞浆内,以核周最为明显。结论: 低浓度紫杉醇诱导的上皮性卵巢癌耐药细胞亚株中存在细胞骨架相关信号转导分子表达上调,上调的细胞骨架相关信号转导分子在卵巢癌临床预示耐药与逆转耐药治疗中的作用值得进一步研究。     

铂类抗肿瘤药物甲啶铂的水合反应研究

采用高效液相色谱研究了抗肿瘤药物甲啶铂的水合反应,以及甲啶铂在0.9%NaCl溶液中的稳定性。结果表明,甲啶铂的水合反应遵循一级反应动力学规律,20℃时反应速率常数为k=0.03086h-1,半衰期22.5 h,反应活化能E=80.6 kJ/mol;在0.9%NaCl溶液中,甲啶铂的水合反应被抑制,反应达到平衡后,甲啶铂的降解不超过4%。     

铂类抗肿瘤药物甲啶铂破坏性试验研究

根据药品稳定性试验的要求,采用高效液相色谱分析方法研究甲啶铂在酸、碱、氧化和还原条件下的稳定性,并研究了不同p H值对甲啶铂稳定性的影响,所有溶剂均用0.9%Na Cl溶液配制。研究结果表明,甲啶铂在0.01 mol/L HCl溶液中放置24 h含量降解约7%;在0.01 mol/L Na OH溶液中放置24 h含量降解约78%;在0.3%H2O2溶液中放置24 h含量降解约49%;在0.01%Na HSO3溶液中放置24 h含量降解约9%;p H太高或者太低均不利于甲啶铂的稳定,最稳定的p H在3~5之间。结果说明,甲啶铂在碱性和氧化性环境中极不稳定,在还原性和酸性环境中相对稳定,但还原剂和酸的加入量需严格控制。     

口服铂类抗癌药物赛特铂原料药的稳定性研究

根据中国药典要求,采用高速液相色谱法研究了口服铂类金属抗癌药物赛特铂在一定的环境中放置后其外观、色泽及含量的变化,以此表征赛特铂的稳定性.试验结果表明:赛特铂在80℃和在25℃、RH 92.5%环境中放置10d,或在DMSO体系和纯水中放置8h含量是稳定的;在0.01mol/L HCl中放置8h或在40℃、RH 75%环境中放置6个月,含量略有降低;在25℃、RH 60%环境中放置3年,或在0.1mol/LHCl中放置5h,含量仍≥98%,可确定赛特铂的有效期为3年.赛特铂对光极不稳定,在45001x光照强度下放置10d,含量降低到＜80%,应严格避光储存.试验结果为赛特铂原料药的研究、生产、包装、储运提供了科学依据.     

卡铂原料药细菌内毒素检查方法的研究

参照<中国药典>2005年版二部收载的细菌内毒素检查法中的凝胶法,建立了卡铂细菌内毒素检查方法.5.0 mg/mL的卡铂及稀释液对细菌内毒素检查无干扰,对3个批号的供试品进行检查,结果均符合规定.结果表明,卡铂原料药采用细菌内毒素检查法是可行、有效的.     

吉西他滨联合洛铂或顺铂治疗蒽环类和紫杉类药物耐药晚期乳腺癌的比较研究

目的:比较吉西他滨联合洛铂或顺铂治疗蒽环类和紫杉类药物耐药晚期乳腺癌的疗效和不良反应。方法: 61例晚期乳腺癌患者随机分为吉西他滨加洛铂组(GL组)和吉西他滨加顺铂组(GP组)。至少治疗2个周期后分别评价疗效和不良反应发生情况。结果: GL组和GP组缓解率分别为 43.33%和 38.71%; GL、GP组中位肿瘤进展时间分别为 6.29 个月和 5.59 个月(P>0.05)。GL组的中性粒细胞减少、血小板减少发生率较GP组多见,而GP组的恶心呕吐发生率较GL组多见,两组间有统计学差异(P<0.05)。结论: GL和GP方案均为治疗蒽环类和紫杉类药物耐药晚期乳腺癌的有效方案,两组缓解率及中位肿瘤进展时间相近。但GL组的血液学毒性发生率较GP组多见,而GP组的胃肠道反应较GL组多见。这两种方案可能适合不同人群,值得临床进一步研究。     

培美曲塞联合卡铂与吉西他滨联合卡铂一线治疗晚期非鳞非小细胞肺癌的临床观察

目的: 观察培美曲塞联合卡铂与吉西他滨联合卡铂治疗晚期非鳞非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效及毒副反应。方法: 57例ⅢB-Ⅳ期经病理组织学和(或)细胞学检查确诊的晚期非鳞NSCLC患者,其中培美曲塞组(PC组)26例,吉西他滨组(GC组)31例,分别给予培美曲塞联合卡铂和吉西他滨联合卡铂方案治疗至少2周期以上,评价其近期疗效及毒副反应。结果: PC组和GC组的客观缓解率(42.3% vs 41.9%),疾病控制率(88.5% vs 80.6%),中位无进展生存期(5.9 个月vs 4.7 个月)差异均无统计学意义(P＞0.05)。两组的主要毒副反应均为骨髓抑制和胃肠道反应,PC组Ⅲ-Ⅳ度血小板减少的发生率明显低于GC组(P=0.042)。结论: 培美曲塞联合卡铂和吉西他滨联合卡铂一线治疗晚期非鳞NSCLC疗效相近,培美曲塞组不良反应轻,安全性更好。     

雷公藤多苷增强耐顺铂人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂敏感性的体外研究

目的: 探讨雷公藤多苷（GTW）对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株（SKOV3/DDP）的顺铂（DDP）增敏作用及机制。方法: 将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组：空白对照组、10 μg/mL DDP组、50 μg/mL GTW组、800 μg/mL GTW组、3 200 μg/mL GTW组、10 μg/mL DDP+50 μg/mL GTW组、10 μg/mL DDP+800 μg/mL GTW组、10 μg/mL DDP+3 200 μg/mL GTW组,利用CCK-8法、流式细胞术、Western blot法检测各组细胞生长、细胞凋亡以及细胞谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）基因蛋白、P-糖蛋白（MDR1）、信号转导和转录激活因子3（STAT3）、p-STAT3的表达。结果:DDP与GTW联用在抑制SKOV3/DDP细胞生长作用上呈现相加效应;800、3 200 μg/mL GTW分别与10 μg/mL DDP联用后,可显著促进SKOV3/DDP细胞凋亡,下调p-STAT3的表达（P<0.05）。结论:GTW可显著增强SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是下调STAT3信号通路中的p-STAT3表达。     

UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响

目的: 探讨UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响。方法: 采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）法检测上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中UTP23、P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药基因（MDR1）的mRNA表达水平,使用特异性UTP23-siRNA转染上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞,使用RT-PCR和 Western blot法检测转染后UTP23、P-gp、MDR1基因的表达,使用MTT法检测UTP23-siRNA对上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞生长的影响及耐药性。结果: 耐药组UTP23基因mRNA表达水平明显低于敏感组（P<0.05）,耐药组P-gp、MDR1基因mRNA表达水平明显高于敏感组（P<0.05）;转染组与未转染组、阴性对照组相比较,UTP23 mRNA水平明显升高（P<0.05）, 未转染组与阴性对照组相比较,UTP23 mRNA水平和蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）;转染组与未转染组、阴性对照组相比较,P-gp、MDR1 mRNA表达水平明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）,未转染组与阴性对照组相比较,P-gp、MDR1 mRNA表达水平无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）; 紫杉醇对UTP23-siRNA转染后上皮性卵巢癌耐药细胞的IC50浓度明显高于未转染组和阴性对照组（P<0.05）。结论: UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中低表达,其可能通过间接调控MDR1及P-gp的表达而参与上皮性卵巢癌紫杉醇细胞对紫杉醇的耐药。     

ERCC1蛋白的表达与晚期食管癌含顺铂方案化疗疗效的临床观察

目的: 探讨晚期食管癌患者癌组织中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)蛋白的表达与含顺铂方案联合化疗疗效的相关性。方法: 回顾性检测98例晚期食管癌患者肿瘤组织中ERCC1蛋白的表达,观察患者接受含顺铂方案的联合化疗的疗效,分析ERCC1表达与客观有效率、疾病控制率、无进展生存期、总生存期之间的关系。结果: 98例患者ERCC1表达阳性率为 56.1％(55/98),总疾病控制率为 70.4％(69/98),ERCC1表达阴性组的客观有效率(76.7%)优于表达阳性组(38.2%), 差异有统计学意义(χ²=14.506, P=0.000);ERCC1表达阴性组的疾病控制率(88.4%)优于表达阳性组(56.4%), 差异有统计学意义(χ²=11.867, P=0.001);ERCC1表达阳性和阴性的两组无进展生存期和总生存期变化相近(P＞0.05)。结论: 晚期食管癌病理组织中ERCC1阴性表达患者疗效近期有效率优于ERCC1阳性表达患者。     

每周脂质体紫杉醇联合替吉奥对老年晚期胃癌患者血清肿瘤标志物与可溶性E-钙黏连蛋白的影响

目的:分析每周脂质体紫杉醇联合替吉奥对老年晚期胃癌患者血清肿瘤标志物与可溶性E-钙黏连蛋白（sEC）影响。方法:87例老年晚期胃癌患者按随机数字表法分为41例对照组和46例试验组。对照组奥利沙铂每次130 mg/m2,静脉滴注,每周期第1天,1个疗程为21 d,持续治疗3个疗程;替吉奥每次50 mg（体表面积>1.25 m-2～1.5 m-2）或者60 mg（体表面积≥1.5 m-2）,口服,每周期第1～28天,6周1个疗程,持续治疗2个疗程。试验组替吉奥用法同对照组,脂质体紫杉醇每次60 mg/m2,静脉滴注,每周期第1、8、15、22天,1个疗程为6周。比较两组临床疗效,治疗前后血清肿瘤标志物、sEC水平,不良反应及生存情况分析。结果:治疗后,试验组和对照组疾病控制率分别为65.22%（30例次/46例次）和56.10%（23例次/41例次）,1年生存率分别为58.69%（27例次/46例次）和48.78%（20例次/41例次）,比较无统计学差异（P>0.05）。试验组和对照组血清癌胚抗原（CEA）水平分别为（9.37±2.03）和（8.99±1.48）ng/mL,糖类抗原125（CA125）分别为（24.08±3.98）和（23.22±3.86）U/mL、糖链抗原19-9（CA19-9）分别为（14.57±2.81）和（15.30±2.22）U/mL,sEC分别为（1 903.87±250.17）和（1 934.37±199.46）ng/mL,比较无统计学差异（P>0.05）。两组不良反应以恶心呕吐、贫血、血小板减少、粒细胞减少、腹泻及肝肾功能异常为主,组间各不良反应发生率比较有统计学差异（P<0.05）。结论:每周脂质体紫杉醇联合替吉奥对老年晚期胃癌患者的效果确切,可降低血清肿瘤标志物和sEC水平,且患者耐受性较好。     

靶向药物曲妥珠单抗联合化疗对人类表皮生长因子受体2阳性局部晚期乳腺癌患者临床疗效研究

目的: 观察曲妥珠单抗联合化疗对人类表皮生长因子受体2(HER-2)阳性的局部晚期乳腺癌(LABC)临床治疗结果。方法: 将228例HER-2阳性手术无法切除的晚期乳腺癌病例随机分到曲妥珠单抗辅助疗法+化疗组或单纯化疗组。其中115例接受曲妥珠单抗+化疗,113例单纯接受化疗,经过10个疗程治疗后,观察两组患者中临床和病理的完全缓解人数及符合手术要求的人数。结果: 数据显示与单纯化疗相比,曲妥珠单抗+化疗组病例对治疗的临床完全缓解病例(cCR)(化疗+曲妥珠单抗组89%,单纯化疗组77%)、病理学完全缓解(pCR)病例(两组分别为43%和23%)以及乳房和腋下淋巴结完全缓解(tpCR)病例(分别为39%和20%)比例更高,同时可以使更多的患者获得手术和保留乳房的机会。结论: 曲妥珠单抗联合化疗药物治疗HER-2过度表达的局部晚期乳腺癌均有较好的临床疗效,是治疗晚期乳癌并延长生存时间的一种新方法。     

白蛋白结合型紫杉醇二线及以上治疗晚期非小细胞肺癌的单臂、单中心探索性临床研究

目的:探讨白蛋白结合型紫杉醇二线及以上治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及安全性。方法:选取2012年10月到2015年12月入组前接受过至少一线治疗方案失败的晚期非小细胞肺癌患者63例,给予白蛋白结合型紫杉醇130 mg/m2,第1天和第8天静脉滴注治疗,21 d为一个周期。每2个周期进行疗效评价,用CTCAE4.03版本的标准评价每个周期出现的不良反应。患者疾病进展后通过电话随访获取患者的预后数据。结果:纳入研究的63例患者均可评价疗效,其中接受治疗后疗效达到完全缓解（CR）0例,部分缓解（PR）15例,疾病稳定（SD）21例,疾病进展（PD）27例。该研究的客观缓解率（ORR）为23.81%,疾病控制率（DCR）为57.14%。经过随访预后,63例患者的中位无进展生存期（mPFS）为3.9个月（95%CI：3.1-5.2）,中位总生存期（mOS）为9.3个月（95%CI：7.8-10.4）。安全性方面,主要的2级以上不良反应为中性粒细胞减少,血小板减少,脱发和外周神经毒性,总体不良反应可耐受。结论:白蛋白结合型紫杉醇二线及以上治疗晚期非小细胞肺癌患者具有不错的疗效,不良事件可控,有望成为晚期非小细胞肺癌二线治疗标准。     

PEA-15 磷酸化状态与卵巢上皮性癌预后的相关分析

目的:检测卵巢上皮性癌组织中pPEA-15-Ser104表达水平,探讨其临床意义及与卵巢上皮性癌预后的相关性。方法:选取2009年1月至2013年6月收住皖南医学院第一附属医院弋矶山医院妇产科手术治疗并经病理证实的95例原发卵巢上皮性癌,所有患者术前均未行化疗。免疫组化方法检测95例原发卵巢上皮性癌pPEA-15-Ser104的表达水平,卡方检验分析pPEA-15-Ser104表达水平在不同临床特征卵巢癌患者中差异并随访患者生存情况,采用Kaplan-Meier（K-M）方法分析不同临床特征卵巢上皮癌患者生存率差异,应用多因素Cox比例风险回归模型分析卵巢上皮性癌患者预后影响因素。结果:pPEA-15-Ser104的表达在不同组织学分级、手术病理分期、分型以及有无远处转移的卵巢上皮性癌组织中的表达比较差异均具有统计学意义（P<0.05）;而在年龄、肿瘤位置、肿瘤最大径、有无淋巴结转移比较中差异无统计学意义。K-M生存分析和Cox回归分析显示,pPEA-15-Ser104高表达的卵巢癌患者预后不良,生存时间短,pPEA-15-Ser104可作为卵巢癌不良预后的独立危险因素。结论:磷酸化状态的PEA-15在卵巢上皮性癌的发展过程中发挥重要作用,高表达者预后不良,可能成为预测卵巢癌患者预后的新靶标,有望为卵巢癌患者的治疗提供重要靶点。     

miR-106 b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制研究

目的:探讨miR-106 b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制。方法:随机选取2015年10月至2018年5月在本院进行手术切除的乳腺癌患者58例,取乳腺癌组织和癌旁组织提取细胞DNA,用荧光定量PCR的方法检测miR-106 b的表达量。购买乳腺癌MCF-7细胞系,构建促进miR-106 b表达的高表达组、抑制miR-106 b表达的低表达组细胞系。用不同浓度的顺铂处理,48 h后观察在体外和裸鼠皮下肿瘤的受抑制情况。荧光定量PCR法检测PTEN/PI3K/AKT信号通路相关基因的表达。结果:荧光定量PCR显示乳腺癌组织中miR-106 b的相对表达量高于癌旁组织（P<0.05）。在20、30和40 μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组,对照组相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组（P<0.05）。在20、30和40 μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的荧光强度均低于低表达组,且高表达组均显著低于对照组（P<0.05）。低表达组PTEN的相对表达量显著低于对照组,而高表达组PTEN的相对表达量显著高于对照组（P<0.05）。低表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著高于对照组,高表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著低于对照组（P<0.05）。结论:miR-106 b在乳腺癌中高表达,且表达量越高,乳腺癌细胞对顺铂的化疗敏感性越强。     

长链非编码RNA与结直肠癌耐药的研究进展

结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是一种常见的消化道肿瘤,有较高的发病率与致死率。化疗是结直肠癌重要的治疗方式,但是化疗耐药使得许多患者治疗失败,其具体调控机制尚未完全清楚。长链非编码RNAs（long non-coding RNA,lncRNAs）是指一类不具有蛋白质编码功能且转录本长度大于200核苷酸的长链RNA分子,能通过调节染色质修饰,转录和转录后加工来参与癌症发生和发展。最近越来越多的证据表明lncRNAs在化疗耐药的发展和维持中起到重要作用,lncRNAs可以通过影响药物转运体,细胞凋亡,上皮-间质转化（EMT）和调节信号通路等过程来调控结直肠癌的多药耐药（multidrug resistance,MDR)。本文综述lncRNAs在结直肠癌耐药中的作用机制,为其在临床中解决结直肠癌耐药问题提供理论依据。     

国产重组人粒细胞集落刺激因子在妇科恶性肿瘤化疗中的应用

目的: 探讨不同剂量国产重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF)在妇科恶性肿瘤化疗中的疗效,并与进口 rhG-CSF比较。方法: 98例卵巢癌、宫体癌和宫颈癌患者随机分成3组,分别按75 μg·d^-1和150 μg·d^-1剂量皮下注射国产rhG-CSF和进口75 μg·d^-1 rhG-CSF,直到白细胞或中性粒细胞绝对数升至正常水平以上。结果: 不同剂量国产或进口rhG-CSF均能使3组患者血WBC和ANC水平在用药d4后升至正常水平以上;在初次化疗时,用不同剂量（75 μg 和 150 μg）国产和进口（75 μg) rhG-CSF升WBC至正常水平的天数无显著差异（P>0.05),但重复化疗期间150μg国产rhG-CSF升白细胞的疗效显著优于75μg国产或进口 rhG-CSF;同等剂量国产AG-CSF与进口 rhG-CSF升WBC效果一致。结论: 75μg小剂量国产rhG-CSF在妇科恶性肿瘤初期化疗中升WBC的疗效肯定,重复化疗时较大剂量(150μg）rhG-CSF升WBC的效果优于小剂量rhG-CSF。同等剂量国产rhG-CSF与进口 rhG-CSF的疗效无明显差异。