口服脂溶性苯磷硫胺片与水溶性盐酸硫胺素片的生物利用度评价

目的: 比较口服脂溶性苯磷硫胺片与水溶性盐酸硫胺素片的生物利用度。方法: 20名健康男性志愿者采用2×2交叉试验设计,分别单次给予 300 mg 苯磷硫胺片和 220 mg 盐酸硫胺片。给药后于不同时间点采集肘静脉血并收集 24 h 内的尿液。采用HPLC-Flu法测定血浆及红细胞中硫胺素及二磷酸硫胺素浓度。药动学参数采用WinNonlin软件计算,同时计算马尿酸各时间段的平均排泄速率。结果: 服用苯磷硫胺片和盐酸硫胺片后血浆中硫胺素的t_1/2分别为(2.5±0.2)、(2.0±0.8) h;AUC_0-24分别为(1763.1±432.7)、(182.0±93.8) μg·h·L^-1;AUC_0-∞分别为(1837.3±466.5)、(195.8±96.6) μg·h·L^-1;C_max分别为(568.3±122.0)、(70.5±46.2) μg/L;CL/F分别为(172.3±39.2)、(1831.7±705.0) L/h;Vd/F分别为(627.9±131.8)、(5419.1±3586.6) L。红细胞中二磷酸硫胺素的AUC_0-24分别为(3212.4±740.7)、(881.8±316.2) μg·h·L^-1。与盐酸硫胺相比,苯磷硫胺片中硫胺素的相对生物利用度F为(1147.3±490.3)%,二磷酸硫胺素的相对生物利用度F为(392.1±114.8)%。服用苯磷硫胺后0~4 h 时间段尿液中马尿酸的排泄速率较盐酸硫胺组有明显加快。结论: 苯磷硫胺吸收迅速,相对生物利用度大于盐酸硫胺,给药后在 4 h 内全部转化为硫胺素。     

氯法拉滨注射液在白血病患者中的单剂量及多剂量临床药代动力学研究

目的: 研究氯法拉滨注射液单剂量及多剂量静脉滴注的人体药动学过程。方法: 4例白血病患者单剂量恒速静脉滴注氯法拉滨注射液 52 mg·m^-2·d^-1 ,单剂量试验结束后进入多剂量给药试验, 52 mg·m^-2·d^-1 ,连续给药 5 d。采用高效液相色谱串联质谱法测定血浆及尿液中氯法拉滨的浓度,并采用DAS药动学软件对试验数据进行处理,求算有关药动学参数。结果: 4例受试者单剂量静脉滴注氯法拉滨注射液后,主要药动学参数分别为C_max(414±205) μg/L,t_max(3.0±1.4) h,t_1/2z(4.4±2.0) h,AUC_0-t(2475±659) μg·h·L^-1,AUC_0-∞(2566±606) μg·h·L^-1,CLz(21.2±5.1) L·h^-1·m^-2,V_z(142±97) L/m²,MRT_(0-t) (6.3±2.2) h,Zeta(0.18±0.07) h^-1,24 h 平均尿液累积排泄率为(39.53±20.98)%。52 mg·m^-2·d^-1静脉滴注氯法拉滨注射液,连续给药5 d,第5日达稳态,主要药动学参数为C_max(581±126) μg/L,t_max(2.0±0.8) h,t_1/2z(6.4±3.1) h,AUC_0-t(2451±349) μg·h·L^-1,AUC_0-∞(2603±409) μg·h·L^-1,CLz(20.4±3.7) L·h^-1·m^-2,V_z(187±80) L/m,Zeta(0.13±0.05) h^-1,MRT_(0-t) (5.1±1.8) h,C_ss(102.14±14.53) μg/L,蓄积因子R(1.04±0.28),血药浓度波动度DF(576.26±226.89)%。结论: 氯法拉滨注射液静脉滴注给药 52 mg·m^-2·d^-1 ,连续给药 5 d,药物在体内无蓄积,安全性好。     

LC-MS 法测定Beagle 犬血浆中苦参碱及其药代动力学

目的: 建立Beagle 犬血浆中苦参碱的LC-MS测定法, 测定其药物动力学及绝对生物利用度。方法: 采用Lichrospher C18 柱, 250 mm×4.6 mm(ID),5 μm, 柱温:25 ℃;流动相:10 mmol·L^-1醋酸胺水溶液∶甲醇(25 ∶75), 流速:1 ml·min^-1 。电喷雾离子化(ESI) 方式, 采用选择性离子检测, 检测离子为正离子, 苦参碱的离子是[M+H] +, m/z 249.2 。结果: 苦参碱在2～5 000 μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9975), 最低检出限达0.3 μg·L^-1。日内和日间误差均小于4.5 %, 方法回收率大于96.6 %;药-时数据符合二室模型, C_max 为3821±705 μg·L^-1, T_max为0.4±0.1 h, T_1/2β为11.2±2.1 h,AUC_0→∞为7446±1456 μg·h·L^-1, 绝对生物利用度为(60.1±19.0) %。结论: 该法灵敏、快速、简单, 专属性强, 苦参碱在Beagle 犬体内有较高的绝对生物利用度。     

刺五加叶皂苷对心肌ATP 敏感性钾通道的作用

目的: 研究刺五加叶皂苷(ASS) 对心肌线粒体ATP 敏感性钾通道(mito K_ATP) 和细胞膜ATP 敏感性钾通道(sarcol K_ATP) 的作用, 探讨ASS 对缺血心肌保护作用的机制。方法: 用酶解法获取兔心室肌细胞, 激光扫描共聚焦显微镜观察ASS 对mito K_ATP 的作用, 全细胞膜片钳技术观察ASS 对sarcol K_ATP的作用。结果: 对照组观察10 min 线粒体荧光强度无明显变化。ASS 30、100 和300 mg·L^-1组均可见用药后线粒体荧光强度明显增加, 分别增加(14.8±3.6) %、(30.4±4.3) % 和(38.4±5.7) %。3 μmol·L^-1格列本脲不影响线粒体荧光强度, 但可以阻断ASS 对线粒体荧光强度的作用。而对照组、ASS 10、100 和300 μmol·L^-1组的I_K-ATP 峰值无明显差异。结论: ASS 对mito K_ATP 有开放作用, 而对sarcolK_ATP没有作用。ASS 通过开放mito K_ATP 产生心肌保护作用。     

替米沙坦片血药浓度的HPLC测定方法及其在健康人体的药动学研究

目的: 建立高效液相色谱法测定人血浆中替米沙坦的药物浓度,并研究其在健康人体内的药动学3方法: 采用高效液相色谱-焚光检测法,色谱柱为 Hypersil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液（45:55,pH 5.8);流速为1.0 ml·min^-1;激发波长和发射波长分别为305 nm和365 nm;进样量20 μl;内标物为α-萘酚。结果: 替米沙坦在2~1 024 μg·L^-1范围内线性良好（r=0.9999),回收率,日间、日内差均符合生物样品分析要求。10名健康受试者口服替米沙坦片80 mg后的药动学结果表明,其体内过程符合二房室开放模型,主要药动学参数如下:C_max为0.98±0.44 mg·L^-1;T_max为 0.83±0.45 h; t_1/2为 1.67±1.26 h; t_1/2β为26.00±14.43 h;t_1/2kd为 0.53±0.86h;AUC_0-l为 3.66±2.10 mg·h ^-1; AUC_0-∞为 3.98±2.40 mg·h ^-1·L ^-1。 结论: 此方法便捷,准确,灵敏,适于替米沙坦血药浓度测定和药动学研究,本试验所得药动学参数可为临床合理用药提供理论依据。     

单硝酸异山梨酯对尼索地平在大鼠体内药代动力学的影响

目的: 考察单硝酸异山梨酯对尼索地平在大鼠体内药代动力学的影响。方法: 12只健康雄性SD大鼠随机分成2组(分别为单独和联合给药组),用LC-MS/MS法测定血浆中尼索地平的浓度。结果: 大鼠单独给予尼索地平和联合给予单硝酸异山梨酯后,尼索地平主要药动学参数如下:C_max分别为(8.67±3.97) μg/L 和(9.21±5.02) μg/L,AUC_0t分别为(19.6±9.9) μg·h·L^-1和(25.7±13.7) μg·h·L^-1,t_1/2分别为(2.26±0.66) h 和(3.17±1.41) h,AUC_0∞分别为(23.7±9.7) μg·h·L^-1和(32.4±12.3) μg·h·L^-1。统计学分析显示,单独用药与联合用药组药动学参数无统计学差异(P＞0.05)。结论: 单硝酸异山梨酯不影响尼索地平在大鼠体内药动学过程,为临床安全有效地联用单硝酸异山梨酯和尼索地平提供了实验依据。     

Caco-2 细胞对人参皂苷Rg3 的摄取及代谢研究

目的:研究Caco-2 细胞对人参皂苷Rg3 的摄取、代谢及其动力学变化。方法:采用液相色谱质谱联用(HPLC-MS) 检测方法测定细胞中Rg3 及其代谢产物Rh2 药物浓度, 考察时间、pH 值、温度、药物浓度及抑制剂对Rg3 摄取速率及代谢物产量的影响。结果:Rg3在Caco-2细胞上的摄取是时间及浓度依赖性的, 其被动转运系数K_d 为0.07 nmol·h^-1 ·mg^-1prot;最大摄取速率V_max 为3.32 nmol·h^-1·mg^-1 prot;Km是16.31 μmol·L^-1 。加入代谢抑制剂叠氮化钠及2, 4-二硝基酚时摄取速率明显降低(与对照组相比P <0.01) 。结论:Caco-2 细胞模型适用于人参皂苷的吸收机制研究;Rg3 在肠道中的代谢为其生物利用度低的原因之一。     

利鲁唑片在健康男性人体内生物等效性研究

目的: 建立利鲁唑片生物浓度的固相萃取后HPLC-UV 检测方法, 研究其在健康男性人体内药代动力学和相对生物利用度。方法: 20 名健康男性志愿者单剂量随机交叉口服150 mg 利鲁唑片剂和进口参比制剂后于不同时间点静脉取血, 血浆经固相萃取, 甲醇洗脱吹干后用少量甲醇溶解后, 采用高效液相色谱-紫外检测器, 应用内标法计算利鲁唑浓度。结果: 利鲁唑片与参比制剂的主要药动学参数C_max 分别为930 ±321 和798 ±306 μg·L^-1, t_max 分别为0. 8 ±0. 5 和1. 2 ±0. 7 h, AUC_{0 ～ t} 分别为3361 ±890和3301 ±886 μg·h^-1·L^-1,AUC_{0 ～ ∞}分别为3661 ±886和3614 ±885 μg·h^-1·L^-1, t_1/2 分别为8. 2 ±2. 8 和8. 1 ±2. 6 h 。AUC_{0 ～ t} 和C_max 的90 %置信区间为:96. 11 %～ 107. 77 %和101. 6 % ±135. 9 %。AUC_{0～ t} 相对生物利用度为102. 8 %±15. 5 %。结论: 国产利鲁唑片剂和进口片两种制剂生物等效。     

三羟基异黄酮和17-β 雌二醇对自由基缩血管效应的影响

目的: 研究自由基引发血管收缩的机制, 并通过血管静息张力的变化探讨三羟基异黄酮和17-β雌二醇对自由基缩血管效应的影响。方法: 制备猪冠状动脉血管环, 固定于恒温肌槽内, 待平衡后, 加入各种药物观察血管张力的变化。结果: 内皮完整的血管环在O₂^·-作用下产生明显的收缩, 去除内皮后无明显反应。1 μmol·L^-1三羟基异黄酮对O₂^·-引发血管收缩有明显的抑制作用(P <0.01, n=16),1 μmol·L^-117-β 雌二醇无明显作用。H₂O₂ 使去内皮血管环产生明显的收缩作用, 对内皮完整的血管环缩血管效应不明显, 30 μmol·L^-1三羟基异黄酮可明显抑制H₂O₂ 的缩血管作用。结论: 三羟基异黄酮可明显抑制O₂^·-和H₂O₂ 的缩血管效应, 其作用明显强于17-β 雌二醇。     

异甘草素脂质体的制备及其对宫颈癌细胞体外增殖的抑制作用

目的: 研究异甘草素（ISL)脂质体对宫颈癌细胞体外增技的影响。方法: 采用超声波薄膜分散法制备ISL脂质体;葡聚糖凝肢层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;离心加速试验考察其稳定性;活细胞计数法测定生长曲线;MTT法测定细胞增殖。结果: ISL脂质体的平均粒径为233.1 nm,跨距为0.74,包封率为（70.8±2.5) %,稳定性好;ISL脂质体（5~80μmol·L^-1)浓度依赖性地抑制宫颈癌细胞HeLa和SiHa细胞增殖,并呈时间依赖性,于d3达高峰,其抑制率最高分别为83.44%和96.14%;浓度依赖性(5~80 μmol·L^-1)抑制 HeLa 和SiHa 增殖,ICW分别为 34.24 和 29.82 μmol·L^-1 (ISL的 IC₅₀分别为 75.39 和 69.33 μmol·L^-1) 结论: 该制备工艺与处方可行,命制备的ISL脂质体对人宫颈癌细胞体外增殖有明显的抑制作用,且作用明显强于ISL。     

口服非那甾胺片和非那甾胺胶囊的人体生物等效性研究

目的: 研究非那甾胺片剂和胶囊在健康志愿者体内的生物等效性。方法: 24 名健康男性志愿者随机三交叉给药, 分别单剂量口服15 mg 试验药非那甾胺片剂、胶囊及非那甾胺片剂对照药, 采用WatersOasis?HLB 固相萃取小柱提取, 反相高效液相色谱法测定血药浓度, 计算药代动力学参数及相对生物利用度。结果: 口服15 mg 试验药非那甾胺片剂和胶囊及片剂对照药的主要药代动力学参数T1 2ke分别为4.38±0.90、4.29±0.78 和4.32±0.86 h;T_max 分别为3.04±0.88、2.98±0.89 和2.59±0.86 h, C_max 分别为117.57±19.15、118.59±20.23和124.53±19.77 μg·L^-1;AUC0-18分别为897.57±185.03、871.57±139.25 和837.59±149.05 μg·h·L^-1;AUC_0-∞分别为970.04±211.83、931.51 +151.07 和896.41±164.92 μg·h·L^-1。结论: 试验药非那甾胺片和胶囊与对照药非那甾胺片剂具有生物等效性, 相对生物利用度分别为(107.27±9.86) %和(105.06±12.10) %。     

HPLC-MS法测定Beagle犬血浆中氧化苦参碱及其药代动力学

目的: 建立Beagle犬血浆中氧化苦参碱的LC-MS测定法,测定它的绝对生物利用度。方法: Beagle犬6只,随机分为2组,采用单剂量双周期自身交叉设计,分别给犬单剂量静脉注射或灌胃氧化苦参碱,用LC-MS法测定给药后的血浆中药物浓度。结果: 氧化苦参碱在2～5000μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9990),最低检出限达0.6μg·L^-1,日内和日间误差均小于4.2 %,方法回收率大于96.7 %;氧化苦参碱的药-时数据符合二室模型,C_max为2.42±0.97μg·L^-1,T_max为1.0±0.3 h,T_1/2β为5.54±1.58h,AUC_0→∝为6.12±1.08μg·L^-1·h^-1,绝对生物利用度为(19.4±9.01)%。结论: 该法灵敏、简单,专属性强;氧化苦参碱在Beagle犬体内绝对生物利用度较低。     

氧氟沙星缓释片单次、多次给药人体药代动力学和生物等效性研究

目的: 研究氧氟沙星缓释片单次、多次给药的人体药代动力学特征,并与氧氟沙星片比较其缓释特征与生物等效性。方法: 单次给药20例健康成年男性受试者随机分组,自身双周期交叉对照,单次口服药物 400 mg;多次给药18例健康成年男性受试者随机分组,自身双周期交叉对照,多次口服药物(参比制剂 400 mg/2次/d×5 d,受试制剂 400 mg/次/d×5 d)。通过反相HPLC法测定血浆氧氟沙星浓度,采用非房室模型计算药代动力学参数,并进行统计分析。结果: 单次给药参比制剂与受试制剂的C_max分别为(5382±1558)、(3419±1034)μg/L;T_max分别为(1.7±0.6)、(4.2±1.8) h;t_1/2分别为(8.2±1.0)、(7.6±1.8) h;MRT分别为(8.6±0.9)、(10.3±1.4) h;AUC_0-t分别为(33764±5297)、(31280±4412) μg·L^-1·h;AUC_0→∞分别为(34643±5356)、(32642±4257)μg·L^-1·h;F_rel为(97.9±12.4)%。方差分析显示,C_max、T_max、MRT各参数受试制剂与参比制剂差异具有统计学意义;t_1/2、AUC_0-t、AUC_0→∞各参数受试制剂与参比制剂差异无统计学意义。等效性检验显示,受试制剂与参比制剂90%可信限AUC_0-t为 89.0%~97.0%;AUC_0→∞为 91.4%~97.8%。多次给药参比制剂与受试制剂的C_max分别为(3732±1502)、(3564±982) μg/L;C_min分别为(750±193)、(438±89) μg/L;T_max分别为(1.5±0.5)、(3.7±1.7) h;AUC_SS分别为(32689±4786)、(33591±7929) μg·L^-1·h;C_av分别为(1362±199)、(1405±337) μg/L;DF分别为(216.1±76.5)、(221.5±33.9)%;F_rel为(102.9±22.5)%。方差分析显示,C_max、C_av、AUC_SS、DF受试制剂与参比制剂差异均无统计学意义。等效性检验显示,90%可信限C_max为 80.8% ~114.6%;AUC_SS为 89.3%~111.9%;C_av为 89.5%~112.4%;DF为 93.7%~122.4%。结论: 受试制剂氧氟沙星缓释片相对于参比制剂氧氟沙星片,单次给药具有缓释动力学特征及吸收程度生物等效,多次给药达稳态时具有生物等效性。     

高效液相-质谱联用法(HPLC-MS) 测定灯盏乙素血药浓度及其临床药代动力学研究

目的:研究灯盏花素片在中国人体内的药代动力学。方法:20 名健康志愿者单剂量口服120 mg灯盏花素片, 用高效液相-质谱联用法测定血浆中灯盏乙素总苷元。结果:本实验建立的血药浓度测定方法, 血浆中杂质不干扰样品的测定, 线性范围为0.0126～3.24 mg°L^-1;日内和日间精密度均小于12.0%。20 名健康受试者单剂量口服灯盏花素片(120 mg) 后, 主要药代动力学参数:T_max=7.0±2.3 h、C_max=0.9±0.5 mg°L^-1、AUC_0-tn=5.6±1.6mg°h°L^-1、AUC_0-∞=5.8±1.6 mg°h°L^-1、MRT_0-tn=8.0±1.1 h、MRT_0-∞=8.6±1.4 h。结论:建立的LC-MS 法适用于灯盏乙素人体药代动力学研究。灯盏花素片口服药代动力学特点是达峰时间较长, 约占受试者总人数45% 的药时曲线有双峰现象。