几种抗类风湿性关节炎药物对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道的表达影响及作用

目的:观察几种抗类风湿性关节炎(RA)药物对佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨中的酸敏感离子通道(ASICs)表达的影响, 探讨抗RA药物对关节软骨的保护作用。方法:将大鼠随机分成正常组、AA模型组、阿司匹林(50 mg/kg)组、地塞米松(0.2 mg/kg)组、雷公藤多苷(50 mg/kg)组和左旋咪唑(10 mg/kg)组。弗氏完全佐剂(CFA)致炎后第10天起,AA大鼠出现继发性炎症, 此时地塞米松组腹腔注射地塞米松, 其它用药组分别灌胃相应的受试药物, 正常组与模型组灌胃等容量的无菌注射用水, 连续7d。实验结束后, 光学显微镜观察关节病理变化;用半定量RT-PCR和Western blotting分析常用药物对AA大鼠关节软骨细胞中ASICs表达的影响;用半定量RT-PCR方法分析常用药物对AA大鼠关节软骨中的蛋白聚糖体(aggregate proteoglycan, aggrecan)表达的影响;免疫组织化学技术检测常用药物对AA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原蛋白合成的影响。结果:经过治疗后, 各用药组能明显抑制AA大鼠的继发性足肿胀。阿司匹林能显著抑制AA大鼠关节软骨细胞ASICs的表达, 其它用药组对ASICs无明显抑制作用。各用药组能明显升高AA大鼠关节软骨细胞基质成分Ⅱ型胶原和aggrecan表达量, 其中阿司匹林作用显著。结论:阿司匹林可能通过抑制ASICs的表达而抑制AA大鼠关节软骨的破坏。     

鬼针草总黄酮对急性炎症的保护作用及可能机制研究

目的: 研究鬼针草总黄酮(TFB)对急性炎症的保护作用与可能机制。方法: 二甲苯诱导急性小鼠耳肿胀,检测耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量;氟氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性炎症,检测足肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8含量,HE染色观察炎症关节病理学变化,免疫组织化学法检测关节软骨组织ASIC1a蛋白。结果: 小鼠急性耳肿胀和AA大鼠原发性炎症中,模型组动物血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8含量均明显升高,TFB(100、200 mg/kg) 灌胃给药能降低小鼠耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量,TFB(67、133 mg/kg)可以升高AA大鼠血清IL-2的含量。TFB灌胃给药可以使AA大鼠关节炎性细胞减少,改善病理变化。在AA大鼠原发性炎症中模型组大鼠关节软骨组织ASIC1a表达明显升高,TFB(67、133 mg/kg)组ASIC1a的表达明显降低。相关性分析结果显示,AA大鼠原发性炎症中ASIC1a与血清TNF-α、IL-1、IL-8含量呈正相关。结论: TFB对急性炎症具有保护作用,其抗炎机制可能与调节炎症介质释放有关。     

脱氢表雄酮对大鼠骨关节炎影响的实验研究

目的:;研究脱氢表雄酮(DHEA)对大鼠实验性骨关节炎(OA)的影响。方法: 40 只大鼠随机分4组:正常对照组、模型对照组、DHEA 大、小剂量组。除正常对照组外,其余3组右膝木瓜蛋白酶关节腔注射法建立OA 模型。然后DHEA 大、小剂量组两组右膝分别关节腔注射50 μmol· L^-1 和100μmol·L^-1 的DHEA 溶液150 μl,正常对照组、模型对照组两组右膝均注入生理盐水150 μl,每周2 次,注射5周。6周后处死大鼠,大体形态学、组织学、生化及免疫组化的方法评价关节软骨情况。结果: 手术显微镜下观察,见DHEA 大、小剂量组两组软骨损害均较模型对照组明显减轻。DHEA 大、小剂量组Mankin's评分、关节腔冲洗液一氧化氮含量、滑膜丙二醛含量及关节软骨基质金属蛋白酶,1和9的表达均较模型对照、组显著降低, DHEA 大剂量组上述指标均较DHEA 小剂量组显著降低。且两组关节腔冲洗液和血清超氧化物歧化酶活性均较模型对照组显著升高, DHEA 大剂量组上述指标升高均较DHEA小剂量组更明显。结论: DHEA 对OA 软骨有保护作用,且存在剂量依赖性,保护机制可能是抑制关节软骨基质金属蛋白酶表达、减少一氧化氮释放和增强抗氧化作用。     

胞外酸化对体外培养大鼠关节软骨细胞增殖与凋亡及组织蛋白酶K mRNA表达的影响

目的: 探讨不同胞外pH环境对体外培养的大鼠关节软骨细胞增殖、凋亡的影响,以及大鼠关节软骨细胞中组织蛋白酶K的表达与胞外酸化的关系。方法: Ⅱ型胶原酶消化法从大鼠关节软骨中分离软骨细胞;细胞传代培养后分为4组分别在pH7.4、pH6.5、pH6.0、pH5.5不同的胞外酸化环境下培养3 h,MTT法检测软骨细胞活力,Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态,Annexin-V/PI双染法检测软骨细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR检测组织蛋白酶K基因的表达。结果: 与pH7.4 组比较其他各组软骨细胞增殖均受到抑制,其中pH5.5、pH6.0与pH7.4相比差异有重要的统计学意义(P<0.01),pH5.5和pH6.0组可见较多的凋亡细胞,且流式细胞仪检测的凋亡率明显高于pH7.4组(P<0.01);组织蛋白酶K的表达与酸性程度成正相关。结论: 胞外酸化环境下能明显抑制体外培养软骨细胞增殖、促进软骨细胞凋亡,并且酸性环境能增加组织蛋白酶K的表达,这为类风湿关节炎中关节软骨的破坏发生机制提供了实验依据。     

日月丹胶囊对大鼠心血管药效学的影响

目的: 探讨日月丹胶囊对心血管药效学的影响。方法: 采用高胆固醇大鼠模型, 观察日月丹胶囊灌胃 7 d 后对大鼠血清胆固醇、 甘油三酯等影响; 采用大鼠尾容积法, 观测日月丹胶囊灌胃给药 7 d后大鼠血压的改变; 拉颈处死大鼠, 分离动静脉, 接通导管, 观察给药前后洛氏液下滴的滴数;采用小鼠灌胃法测定日月丹胶囊的最大耐受量。结果: 日月丹胶囊高、低剂量组的血清胆固醇与 NS 组比较, 有非常显著性差异(P <0.001); 甘油三酯和高密度脂蛋白与NS 组比有显著性差异(P <0.05); 给药后的大鼠血压与 NS 组比较呈显著性差异(P <0.01)。 结论: 日月丹胶囊具有降血压、降血清胆固醇、甘油三酯等作用。     

血管紧张素受体阻滞剂对自发性高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2表达的影响

目的: 研究自发性高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE₂) 蛋白表达水平及血管紧张素Ⅱ-Ⅰ型受体阻滞剂厄贝沙坦对ACE₂表达的影响, 以了解高血压的病理改变, 探讨血管紧张素受体阻滞剂治疗高血压又一可能机制。方法: 20 只14 周龄雄性自发性高血压大鼠随机分为自发性高血压大鼠(SHR) 组(n =10) 和厄贝沙坦组(n =10) 。厄贝沙坦组每只大鼠以厄贝沙坦50 mg·kg^-1·d^-1灌胃, 给药时间12 周。同时取14 周龄雄性京都种Wistar 大鼠为正常对照(WKY) 组(n =10) 。利用免疫组化和逆转录聚合酶链反应检测各组大鼠肾脏ACE₂ 表达。结果: 与WKY 组比较, SHR 组ACE₂ 表达显著减少(0.72 ±0.11 vs 1.11 ±0.15); 与SHR 组比较, 厄贝沙坦组经12 周治疗后, ACE₂ 表达明显提高(1.03 ±0.13 vs 0.72 ±0.11) 。结论: 高血压大鼠肾脏ACE₂表达减少, 血管紧张素Ⅱ-Ⅰ 型受体阻滞剂对高血压大鼠肾脏ACE₂ 的表达有上调作用。此作用可能是血管紧张素受体阻滞除阻滞血管紧张素受体以外的另一间接调节肾素-血管紧张素系统的途径。     

辛伐他汀对肾性高血压心肌纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的: 探究辛伐他汀(simvastatin) 对肾血管性高血压心肌纤维化及结缔组织生长因子(CTGF) 表达的影响。方法: 建立二肾一夹肾血管性高血压(2K1C-RH) 大鼠模型, 将实验大鼠随机分为3 组:假手术组、高血压组、辛伐他汀治疗组。术后4 周末,开始以辛伐他汀(5 mg·kg^-1·d^-1) 灌胃, 共8 周。测量大鼠收缩压(SBP) 、心肌总胶原容积分数、心肌胶原浓度以及CTGF 的表达。结果: 与假手术组相比,高血压组的收缩压、心肌总胶原容积分数、心肌胶原浓度显著增加(P<0. 01), CTGF 表达上调(P<0. 01), 辛伐他汀抑制2K1C-RH 大鼠心肌纤维化的发展和心肌组织中CTGF 的表达(P<0. 05) 。结论: 辛伐他汀能抑制高血压心肌纤维化, 可能与下调CTGF 的表达有关。     

2型糖尿病大鼠胃肠手术模型的建立

目的: 利用糖尿病大鼠建立手术治疗糖尿病的实验动物模型。方法: SPF级SD大鼠60只,所有动物给予8周的高脂高糖饮食,随后予以腹腔注射链脲佐菌素 (40 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型。造模成功一周后行手术,选取24只随机分为2组,分别为十二指肠空肠旁路手术组(DJB,n=12)、Roux-en-y旁路手术组(RYGB,n=12)。结果: 术后大鼠的总生存率达到83.3%,术后第8周,两组大鼠均存活10只。结论: 胃肠道手术的2型糖尿病大鼠模型是可行的,可用于长期观察及检测研究,有助于临床评估相关手术的远期效果。     

替硝唑口腔贴膜对实验性大鼠牙周炎的治疗作用及其对口腔粘膜刺激性研究

目的: 观察替硝唑口腔贴膜(TM)对实验性大鼠牙周炎的治疗作用及其对大鼠口腔粘膜的刺激性。方法: 用丝线缝扎大鼠上颌右侧第一磨牙、肌注醋酸强的松龙以及饲喂高糖水软饲料的方法造成实验性大鼠牙周炎模型, 将TM 贴敷于病变牙周部位,观察其对实验性牙周炎的治疗作用(TM 0.075 、0.175 、0.375 mg/只, 每日1 次, 连续7 d), 观察TM对正常大鼠口腔粘膜的刺激性。每次给予TM1.5 mg·cm^-2 (0.5 cm ×0.5 cm), 每日1 次, 连续7 d 。结果: TM 0.075 、0.175 mg 只对大鼠的口腔牙周软组织炎症有改善作用, 其疗效与阳性组(灌胃给药替硝唑100 mg·kg^-1)相似, TM 0.375 mg/只可使牙周软组织炎症明显减轻, 其疗效优于阳性组。对于牙周袋的形成及牙槽骨的破坏, TM 均无明显改善作用。对大鼠口腔粘膜无明显刺激作用。结论: 替硝唑口腔贴膜对实验性大鼠牙周炎有较好的治疗作用, 并且无粘膜刺激性。     

缬沙坦对自发性高血压大鼠心肌抑癌基因PTEN 表达的影响

目的: 观察缬沙坦对自发性高血压大鼠(SHR) 心肌肥厚的影响, 以及对肿瘤抑制基因PTEN表达的影响。方法: 取20 只12 周龄自发性高血压大鼠, 随机分为2 组, 每组10 只:缬沙坦干预组, 给予缬沙坦30 mg·kg^-1·d^-1 溶于饮水灌胃治疗;SHR阳性对照组给予正常饮水。另有10 只同龄同源雄性正常血压Wistar-kyoto 大鼠(WKY 组) 作为正常对照组。实验周期8 周, 测量血压、左室重量 体重(LVW/BW), 应用免疫组化方法检测各组大鼠左心室心肌PTEN 的表达。结果: SHR 阳性对照组血压、LVW/BW 均高于正常对照组, 但低于缬沙坦组, SHR阳性对照组PTEN 的表达明显低于正常对照组, 而缬沙坦组PTEN 的表达显著高于SHR 阳性对照组。结论: 缬沙坦能抑制自发性高血压大鼠心肌肥厚, 并能提高PTEN 的表达, 提示PTEN 可能在心肌肥厚发展过程中起了一定的作用。     

L-精氨酸对应激性大鼠血压的影响1

目的 研究L-精氨酸(L-ARG)对应激性大鼠血压(BP)的影响。方法 给SD 大鼠的饮水中添加L-ARG,并给予间断性足底电刺激15 d,隔日监测尾动脉BP 1 次,观察其尾动脉BP 的变化情况和血浆一氧化氮(NO)浓度变化。并与单纯应激组和正常对照组比较。结果 单纯应激组在d 9 、d 11 、d 13 、d15,BP 升高,与正常对照组相比,差异有显著的统计学意义(P <0.05或P <0.01);血中NO 的浓度低于正常对照组(P <0.05)。L-ARG+应激组隔日测得BP 与对照组相比,其差异无统计学意义,d 15 BP 低于正常对照组(P <0.05),BP 呈下降趋势,NO 明显升高(P <0.01)。结论 L-ARG 有阻抑应激性大鼠BP 升高的作用。     

阿司匹林对卡托普利治疗充血性心力衰竭的影响

目的 观察阿司匹林对卡托普利治疗充血性心力衰竭的影响。 方法 将74 例CHF 患者按入院前是否服用阿司匹林分为2 组, 均给予卡托普利12.5 mg 口服, tid, 并逐渐加量为25 mg, tid, 连服28 d。 结果 未用阿司匹林组显效率为46.7 %, 总有效率为70 %, 与曾用阿司匹林组相比差异显著(P <0.05);患者心率明显下降, 优于曾用阿司匹林组(P<0.05);心脏收缩功能参数LVEF、FS 以及舒张功能参数E/A 明显增加(P <0.01), 且较曾用阿司匹林组为优(P <0.05)。 结论 曾经应用阿司匹林的时间越长, 卡托普利治疗CHF 的效果越差。     

内皮素受体阻断剂 CPU0213 改善糖尿病大鼠心肌病由抑制NADPH氧化酶所介导

目的: 研究糖尿病大鼠心肌病中由激活的NADPH氧化酶导致的损害,可由内皮素受体拮抗剂CPU0213逆转。方法: SD大鼠一次i.p.链脲佐菌素60 mg/kg造成大鼠糖尿病模型,治疗组在后4周给予CPU0213(100 mg/kg, p.o .)和氨基胍(100 mg/kg, p.o.)治疗,连续4周。结果: CPU0213与氨基胍降低血糖效应不明显,但可改善心肌肥厚、降低心肌内皮素-1(ET-1) 和氧化应激水平。CPU0213和氨基胍明显抑制高糖温孵的心肌细胞NADPH氧化酶p22phox和p67phox亚基的mRNA和蛋白过表达。结论: 内皮素受体拮抗剂CPU0213和氨基胍改善糖尿病大鼠心肌病,由抑制心肌中NADPH氧化酶过表达所介导。     

羟基脲对雄性大鼠的生殖毒性

目的: 观察羟基脲(HU) 对雄性大鼠的生殖毒性。方法: 雄性大鼠分别腹腔注射 HU ×100、200 和400 mg·kg^-1,连续 10 d。末次给药后分别于 d 9、d23 处死动物 。结果: 停药 d 9时,200、400 mg·kg^-1 组不活动精子增加明显(P<0.05 或 P<0.01);停药d 23 时,各给药组睾丸脏/体比都明显下降(P<0.05 或 P<0.01);400 mg·kg^-1 组附睾脏/体比下降明显(P<0.05),并且仍然有大量不活动精子(P<0.01);200、400 mg·kg^-1组精子计数明显减少(P<0.01);随给药浓度增加,各组精子畸形数量增加(P<0.01) 。结论: 雄性大鼠连续 10 d 腹腔注射羟基脲100 mg·kg-1 以上,对生殖系统产生明显毒性。     

前列地尔注射液对百草枯中毒患者肺损伤的影响

目的: 观察前列地尔注射液对百草枯中毒患者炎症介质和肺损伤的影响,为临床治疗提供参考。方法: 30例急性百草枯中毒患者随机分为常规治疗组(对照组)和常规治疗+前列地尔注射液组(试验组),每组15例。前列地尔注射液用法:10 μg 加入 100 mL 生理盐水(NS)静脉滴注,1次/d,连用 7 d。分别于入院当天及入院后 7 d 测定患者血浆IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)浓度,行动脉血气分析和胸部X线检查,并随访生存情况。结果: 与对照组比较,入院后 7 d 试验组患者IL-6、IL-8、MMP-9浓度降低,急性肺损伤(ALI)及全身炎症反应综合症发生率降低(P<0.05);两组患者病死率差异无统计学意义(P>0.05)。结论: 前列地尔注射液可减轻百草枯中毒患者炎症反应和肺损伤。     

葛根素对庆大霉素致大鼠肾毒性的保护作用

目的: 研究葛根素(Puerarin, Pue)对庆大霉素大鼠肾毒性的保护作用。方法: 雄性SD大鼠给予溶媒或葛根素(50 mg·kg^-1·d^-1)7 d 后,再联合给予 0.9%氯化钠注射液或庆大霉素 140 mg/kg (i.p.)14 d,测定大鼠体重,血清尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)含量,计算肌酐清除率(CCr),测定肾组织中丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量和超氧化物歧化酶(SOD)及内皮一氧化氮合酶(eNOS)活性;HE染色观察肾脏病理改变。结果: 与正常对照组比较,庆大霉素组可致大鼠体重、CCr、NO和 SOD活性下降,血清BUN和SCr及肾组织MDA含量升高,肾脏病理改变明显。给予葛根素明显减轻上述改变。结论: 葛根素有效拮抗庆大霉素所致的大鼠肾损害,可能通过其抗氧化作用及提高NO水平来发挥作用。     

蝎毒结肠靶向小球对幼鼠慢性内脏痛的抑制作用

目的: 研究蝎毒结肠靶向小球对幼鼠慢性内脏痛的抑制作用。方法: 选用新生SD大鼠,出生后8~14 d 内,每天固定时间给予一次 60 mm Hg 结直肠扩张刺激,建立慢性内脏痛模型,对照大鼠除了不行结直肠扩张外,其他情况同模型大鼠。实验分组:对照组、对照空白小球组、对照蝎毒小球组、模型组、模型空白小球组、模型蝎毒小球低剂量组、模型蝎毒小球中剂量组、模型蝎毒小球高剂量组。大鼠第28天开始胃肠给药,连续给予蝎毒靶向制剂 14 d 后,采用腹外斜肌放电来评估肠道痛觉的敏感性;进而采用离体脑片场电位的记录方法,观察慢性内脏痛幼鼠海马CAl区场电位LTP的变化。结果: 模型幼鼠腹外斜肌放电明显增强,服用蝎毒靶向小球后,腹外斜肌放电幅值显著减少(P<0.05);记录离体海马场电位LTP显示,模型幼鼠场电位LTP较对照幼鼠的幅值显著增加(P<0.05),同时蝎毒结肠靶向小球可显著降低模型幼鼠海马场电位LTP的幅值(P<0.05),而对对照幼鼠的作用无统计学差异(P>0.05)。结论: 蝎毒结肠靶向小球可抑制幼鼠慢性内脏痛觉敏感性。     

内皮素受体拮抗剂CPU0213对异丙肾上腺素心肌病SERCA2a表达的改善作用

目的 研究异丙肾上腺素心肌病模型心肌细胞肌浆网钙ATP 酶(sarco-endoplasmic reticulumATPase 2a, SERCA2a) 表达的改变, 以及新型内皮素受体拮抗剂CPU0213的治疗作用。方法 雄性SD大鼠皮下给予异丙肾上腺素(2 mg·kg^-1·d^-1)10 d, 治疗组动物在第6 到第10 天皮下给予CPU0213 (30 mg·kg^-1·d^-1)。各组动物颈动脉插管记录心功能指标:左心室收缩压(LVSP), 左心室舒张末期压(LVEDP), 和左心室压力变化最大速率(±dp dtmax)。左心室心肌组织SERCA2a 的mRNA 及蛋白表达分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 和蛋白免疫印迹法(Western blotting) 测定。结果 异丙肾上腺素引起左心室收缩和舒张功能明显下降, 同时SERCA2a 的mRNA 及蛋白表达均显著下调(P<0.05)。CPU0213 显著提高SERCA2a 表达(P<0.05), 明显改善心功能(P<0.05)。结论 CPU0213 可通过逆转肌浆网钙调控蛋白SERCA2a 的表达下调, 使异丙肾上腺素引起的心功能下降得以恢复。本实验证明SERCA2a是β 受体过度激活引发心衰过程中的重要靶点。内皮素受体介导了β 受体过度激活状态下SERCA2a的表达下调, 是内皮素受体拮抗剂治疗心衰的重要依据之一。