当归挥发油对人肺腺癌GLC-82细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨当归挥发油对人肺腺癌GLC-82细胞增殖及凋亡的作用。方法: MTT比色法检测当归挥发油对GLC-82细胞的细胞毒作用;流式细胞术检测GLC-82细胞凋亡;吖啶橙/溴化乙锭（AO/BE）双荧光染色法观察GLC 82细胞凋亡。结果: 当归挥发油在浓度6.25～200 μg/mL范围内对GLC-82细胞的增殖具有浓度依赖性抑制作用,对GLC-82细胞的IC50为113.03 μg/mL。流式细胞术检测结果表明,当归挥发油可诱导GLC-82细胞凋亡、坏死,且细胞凋亡、坏死率随药物浓度增高而升高。AO/BE双荧光染色法结果显示,用药组随着药物浓度的升高,细胞结构固缩加重,凋亡、坏死细胞增多。结论: 当归挥发油具有诱导GLC-82细胞凋亡的作用。     

当归挥发油联合卡铂对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨当归挥发油与卡铂联用对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法: MTT比色法检测两药单用及联用对A549细胞的体外杀伤活性;用流式细胞术检测A549细胞凋亡;AO/BE双荧光染色法观察A549细胞凋亡。结果: 当归挥发油单独应用及与卡铂合用对A549细胞的增殖均具有浓度依赖性抑制作用,两药联用IC50较单用IC50下降,说明当归挥发油对卡铂抑制A549细胞增殖的作用具协同效应。流式细胞术检测结果表明,当归挥发油单用及与卡铂合用均可诱导A549细胞凋亡、坏死,两药合用后细胞凋亡、坏死率显著升高。AO/BE双荧光染色法结果显示,联合用药组细胞凋亡、坏死率上升。结论: 当归挥发油与卡铂具有协同诱导A549细胞凋亡的作用。     

黄芪总提物对大鼠肝星状细胞增殖及产生胶原的影响

目的 研究黄芪总提物(TEA) 对体外肝星状细胞增殖和产生胶原的影响。方法 采用IV 型胶原酶灌流分离大鼠肝星状细胞进行原代培养, 用CCl₄急性损伤的大鼠肝枯否细胞条件培养基(KCCM)刺激肝星状细胞, 用³H-TdR 和³H-Proline 的掺入法分别检测肝星状细胞的增殖和胶原的产生。结果 TEA (5 ~ 40 mg·L^-1) 可明显降低由KCCM 刺激的肝星状细胞的增殖和胶原的产生。结论 TEA对体外激活的肝星状细胞的增殖和产生胶原有明显抑制作用, 该作用可能是TEA 抗肝纤维化的机理之一。     

苯妥英钠对鼠脑缺血再灌注时血浆细胞因子及内皮素的影响

目的 探讨苯妥英钠对脑缺血再灌注后TNFα、IL-Ⅰβ 和ET₁的影响。方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型, 用放射免疫方法检测脑缺血再灌注大鼠血浆TNFα、IL-Ⅰβ、ET₁的变化, 以及苯妥英钠对TNFα、IL-Ⅰβ、ET₁ 含量的干预作用。结果 缺血再灌组与假手术组相比, 血浆TNFα、IL-Ⅰβ、ET₁ 含量明显增加, 应用苯妥英钠各剂量组TNFα、IL-Ⅰβ、ET₁水平均降低。结论 TNFα、IL-Ⅰβ、ET1 参与了局灶性脑缺血再灌注损伤的病理过程, 苯妥英钠通过降低TNFα、IL-Ⅰβ、ET₁ 的含量能发挥一定的脑保护作用。     

丹皮酚对FSL-1与IL-4共刺激诱导树突状细胞成熟及细胞因子表达的影响

目的: 研究牡丹皮提取物丹皮酚对TLR2配体FSL-1刺激诱导慢性前炎因子释放的分子机制,为天然药物治疗慢性皮炎提供新的思路。方法: 将小鼠髓源性树突状细胞（DCs）分成5组,对照组、FSL-1刺激组、丹皮酚低、中、高剂量干预组（25、50、100 μg/mL）,所有组均给予10 ng/mL rmIL-4环境培养,ELISA法检测树突状细胞培养上清液中IL-10、IL-12的含量,流式细胞术检测树突状细胞表面MHC-II、CD40和CD86分子表达的水平。结果: 各组树突状细胞表面分子表达水平：刺激组与对照组相比,树突状细胞表面MHC- II、CD40和CD86表达量明显增加（P<0.05）。丹皮酚干预组与刺激组相比,DCs表面MHC- II、CD40和CD86表达量均降低,且高、中剂量组具有统计学差异 （P<0.05）。细胞因子分泌水平：刺激组与对照组相比,抗炎性细胞因子IL-10的水平明显降低（P<0.05）,而前炎细胞因子IL-12的水平明显升高（P<0.05）;丹皮酚干预组与FSL-1刺激组相比,各个干预组的IL-10的分泌水平显著上升（P<0.05）,丹皮酚干预组中IL-12的分泌水平均有下降,但仅高、中剂量组具有统计学差异（P<0.05）。结论: TLR2配体FSL-1可以和IL-4共刺激DCs,促进DCs活化并成熟,促进前炎性因子IL-12释放,抑制IL-10等抗炎细胞因子分泌,诱导CD4+T细胞向Th1分化,导致了Th1极化状态,诱导慢性皮肤炎症;而天然药物丹皮酚可抑制TLR2配体介导TLR2通路活化DCs这一过程,具有抑制皮肤慢性炎症的潜力。     

IL-10 与可溶性鸡Ⅱ型胶原对实验性关节炎的联合治疗作用

目的:考察重组人白细胞介素-10(rhIL-10) 对可溶性鸡Ⅱ型胶原(SCC Ⅱ) 治疗大鼠佐剂性关节炎(AA) 疗效的影响。方法:通过测量足肿胀度、体重、胸腺与脾脏系数, 观察不同部位淋巴细胞ConA 增殖反应并检测腹腔巨噬细胞(PMΦ) 与滑膜组织细胞(SMCs) 产生IL-1 的水平。结果:与SCC Ⅱ(0.03 mg·kg^-1·d^-1, ig) 或IL-10(1, 2 μg·d^-1, sc) 单独治疗比较, 二者联合治疗大鼠AA, 明显改善上述观察指标, 同时使SCC Ⅱ的口服耐受诱导期缩短, 增强了治疗效果。结论:IL-10 能提高SCC Ⅱ治疗大鼠AA 的治疗效果。     

负载MAGE-A3抗原的树突状细胞与细胞因子诱导杀伤细胞共培养对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响

目的：探究负载黑色素瘤相关抗原基因A3（MAGE-A3）的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响。方法：采集人外周血分离单个核细胞,利用细胞因子分别诱导生成DC和CIK;MAGE-A3孵育DC后与CIK共培养,流式细胞仪检测DC-CIK、MAGE-A3-DC-CIK的表型;流式细胞仪分选子宫内膜癌细胞系Ishikawa的CD133+干细胞,以子宫内膜癌干细胞作为靶细胞,分别以CIK、DC-CIK及MAGE-A3-DC-CIK作为效应细胞,MTT法检测效靶比为10∶1、20∶1、40∶1的细胞杀伤活性,ELISA法检测联合培养细胞上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17水平,Annexin V-FITC/PI双染法检测子宫内膜癌干细胞凋亡;建立子宫内膜癌干细胞移植瘤裸鼠模型,尾静脉注射DC-CIK或MAGE-A3-DC-CIK,观察裸鼠肿瘤生长情况,每隔2 d测量瘤体大小,21 d后取肿瘤组织,电子天平称重,HE染色观察肿瘤组织病理形态学变化,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内Ki-67表达。结果：分离获得细胞表面CD80、CD86、HLA-DR表达分别达到88%、86%和90%的DC;MAGE-A3-DC-CIK组细胞表面CD8+CD3+、CD56+CD3+比例均高于DC-CIK组（P<0.01）;经磁珠分选后获得CD133+细胞比例高达90.23%的子宫内膜癌干细胞;与CIK组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组在不同效靶比下对子宫内膜癌干细胞的杀伤能力升高,细胞上清中IFN-γ、IL-2、IL-12及IL-17的分泌水平升高,培养液上清处理的子宫内膜癌干细胞凋亡率增加,差异均具有统计学意义（P<0.01）;同时,与对照组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组移植瘤裸鼠的肿瘤体积小,肿瘤重量轻,肿瘤组织内细胞稀疏,Ki-67阳性细胞率减小,差异均具有统计学意义（P<0.01）。 结论：负载MAGE-A3的DC与CIK联合培养能促进CIK成熟,提高对子宫内膜癌干细胞的杀伤性,并抑制移植瘤裸鼠的恶性进展。     

乙醇诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对ICAM-1蛋白表达影响的研究

目的: 研究乙醇体外诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡,及对细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达的影响。方法: 以不同浓度乙醇(50、100和 200 mmol/L)作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞 24 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定各组细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法检测ICAM-1蛋白表达。结果: 乙醇能抑制内皮细胞活力,促进细胞凋亡,增加ICAM-1表达,并呈浓度依赖性。结论: 乙醇能诱导内皮细胞损伤,其机制可能与促进细胞凋亡、影响ICAM-1蛋白表达有关。     

5-氨基水杨酸治疗结肠炎的抗氧化作用及对细胞因子表达的影响

目的: 探讨5-氨基水杨酸(5-ASA) 灌肠治疗对三硝基苯磺酸(TNBS) 诱导大鼠结肠炎的抗氧化作用及对细胞因子表达的影响。方法: 建立 TNBS 结肠炎模型,给予 5-ASA 灌肠治疗,同时设正常对照组和模型组 。于治疗后 1、2 周,评价结肠大体 、组织学损伤及髓过氧化物酶(MPO) 活性,检测超氧化物歧化酶(SOD) 活性 、丙二醛(MDA) 水平,逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR) 检测结肠组织白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA 表达水平 。结果: 5-ASA 灌肠治疗能明显降低结肠炎大鼠的大体、组织学评分及MPO 活性(P<0.05),升高SOD 活性(P<0.05),降低 MDA 水平(P<0.05),降低 IL-1β和TNF-α表达水平(P<0.05) 。结论: 5-ASA 灌肠治疗TNBS 诱导的大鼠结肠炎疗效显著,其机制与抗氧化作用及抑制 IL-1β和 TNF-α的表达有关 。     

重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对家兔纤溶和凝血系统活性的影响

目的: 观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法: 采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果: Ret (3.75、7.50、15.0 MIU·kg^-1)可明显降低纤溶酶原含量,使血浆纤维蛋白降解产物转呈阳性反应,缩短优球蛋白溶解时间,同时延长血浆凝血酶时间,凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。结论: Ret 可促进血液纤溶系统活性和抑制凝血系统活性。     

乌司他丁对心肺脑复苏后血细胞因子与脑超微结构的影响

目的: 探讨酶抑制剂乌司他丁(ulinastatin for injection, UTI) 对心肺脑复苏后肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 、白细胞介素-6(IL-6) 、白细胞介素-10(IL-10) 和脑超微结构的影响。方法: 将24 只成年健康普通级SD 大鼠, 随机分成对照组、复苏组和乌司他丁组, 每组8 只。对照组仅行气管切开术, 不夹闭气管, 不造成心跳呼吸骤停;复苏组与乌司他丁组建立心肺脑复苏模型, 乌司他丁组在心肺脑复苏时加用单次UTI 10⁶ U·Kg^-1。对照组在气管切开即刻、0. 5 、2 、4 、6 h 采集血标本, 复苏组与乌司他丁组分别在气管切开即刻、复苏成功后0. 5 、2 、4 、6 h 采集血标本, 以放免法测定血清中TNF-α、IL-6 、IL-10 的水平。实验结束时每组随机取2 只动物快速断头取皮层脑组织观察脑超微结构的变化。结果: 对照组中TNF-α、IL-6 、IL-10 基本平稳, 各时间点间无显著变化(P >0. 05) 。复苏组复苏后TNF-α、IL-6 明显上升, IL-10明显下降(P<0. 01 或P<0. 05) 。乌司他丁组TNF-α、IL-6 、IL-10 复苏后各时间点与气管切开即刻比较均无显著性差异(P >0. 05), TNF-α在复苏后0. 5 、2 、4 h 与复苏组同时间点比明显下降(P<0. 05), IL-10 在复苏后0. 5 、6 h 与复苏组同时间点比明显升高(P<0. 05) 。脑组织超微结构改变:乌司他丁组较复苏组明显减轻。结论: 复苏过程合用UTI 可以抑制TNF-α、IL-6 的释放, 增加IL-10 的释放, 减轻脑组织损伤, UTI 可能通过干预这些炎性细胞因子对心肺脑复苏后组织器官起到一定的保护作用。     

重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bcl-2及p5表达的关系

目的 探讨重组人白血病抑制因子(rh-LIF) 诱导HL-60 细胞凋亡的作用及其可能机制。 方法 不同剂量(10 ~ 4 000 U·ml^-1) 的rh-LIF 作用HL-60 细胞3 d 后, 用流式细胞仪观察分析细胞周期变化并检测细胞凋亡率, 用TUNEL 法检测原位细胞凋亡情况;分别用免疫组化法和原位杂交法检测rh-LIF 作用2、4、6 d 后P53 蛋白及p53 mRNA、bcl-2 mRNA 表达水平的改变。 结果 rh-LIF (10 ~ 4 000 U·ml^-1) 作用d 3, 细胞凋亡率较对照组显著增加, 其中以1 000 U·ml^-1组的作用最强;rh-LIF (800 U·ml^-1) 作用2 ~ 6 d,P53 蛋白和p53 mRNA 表达也同步增高,而bcl-2 mRNA 表达显著降低(P <0.01)。 结论 rh-LIF 能诱导HL-60 细胞凋亡, 该作用与P53 蛋白表达增加和bcl-2 表达降低有关。     

重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36) 免疫原性的实验研究

目的 观察重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36) [rhGLP-1(7-36)] 对小猎兔犬的免疫原性。方法 健康小猎兔犬随机分为rhGLP-1(7-36) 高、中、低剂量组(200 、100 、50μg kg) 和生理盐水对照组,每组6 只, 雌雄各半。皮下注射给药, 每天1 次,每周6 次, 连续9 个月。采用酶联免疫吸附试验(ELISA) 和碱性磷酸酶免疫斑点试验检测犬血清中的抗体。结果 连续给药3 、9 个月及恢复期血清均未发现抗rhGLP-1(7-36) 抗体。结论 长期给予rhGLP-1(7-36) 对小猎兔犬无免疫原性。     

重组人干扰素alfa2b氧驱雾化吸入佐治毛细支气管炎疗效及安全性观察

目的: 评价重组人干扰素alfa2b氧驱雾化吸入佐治毛细支气管炎的有效性及安全性。方法: 将86例毛细支气管炎患儿分成对照组及观察组,每组43例。两组一般治疗相同,观察组加用重组人干扰素alfa2b氧驱雾化吸入。疗程结束后比较两组治疗总有效率、临床症状体征改善及住院时间、不良反应及血常规和生化指标。结果:观察组患儿总有效率（95.35%）明显高于对照组（83.72%）（P<0.05）;观察组临床症状、体征持续时间及住院天数均小于对照组（P<0.05）;在血常规、血生化指标及不良反应发生方面,两组患儿差异不明显（P>0.05）。结论: 重组人干扰素α2b氧驱雾化吸入佐治毛细支气管炎能提高临床有效率,缩短住院时间,安全性较好。     

快速凝固粉末冶金Mg_(80)Cu_(10)Y_(10)合金的组织与力学性能

采用快速凝固粉末冶金技术制备热挤压Mg_(80)Cu_(10)Y_(10)合金棒材,研究了快速凝固Mg_(80)Cu_(10)Y_(10)合金薄带及热挤压后合金的相结构,并对热处理工艺对合金棒材组织结构及力学性能的影响进行了分析.研究表明,采用单辊快速凝固法在辊速为1800 r/min下制备的Mg_(80)Cu_(10)Y_(10)合金薄带为完全非晶态;在热挤压过程中Mg_(80)Cu_(10)Y_(10)合金中有Mg_2Cu和Mg晶体相析出,其显微硬度比薄带有所提高,这与合金中细小Mg_2Cu颗粒的弥散析出有关;在450 ℃保温4 h后的热挤压Mg_(80)Cu_(10)Y_(10)合金中没有新相析出;随着热处理温度的升高或保温时间的延长,由于Mg_2Cu颗粒出现重溶及聚集长大现象,使得热挤压Mg_(80)Cu_(10)Y_(10)合金的显微硬度表现出逐渐下降的变化趋势.     

重组抑瘤素 M 抑制肿瘤细胞增殖转移的研究

目的: 考察重组表达的抑瘤素 M (oncostatin M,OSM) 对肿瘤细胞增殖转移的抑制能力 。方法: 在大肠杆菌中重组表达了人抑瘤素 M,并通过 MTT检测实验、软琼脂克隆形成抑制实验 、粘附抑制实验、细胞移动能分析实验和浸润杯实验来考察重组hOSM 对高转移人肺腺癌细胞 95-D 增殖和侵袭转移过程的抑制能力。结果: 重组 hOSM 在上述体外模型中能以较低浓度有效抑制 95-D 肿瘤细胞的增殖和转移 。结论: 原核表达的人抑瘤素 M 在对肺癌的临床治疗中具有潜在的应用价值。     

Cu-ZnO(10)复合材料的制备及物理性能

采用真空烧结和氮气气氛保护烧结制备了Cu-ZnO(10)复合材料,测定了其密度、硬度、抗弯强度及电阻率,采用SEM和金相显微技术分析了材料的显微组织,并将所制得的Cu-ZnO(10)复合材料的性能与银氧化物触头材料进行对比。结果表明:由于在氮气气氛下于960℃烧结时,烧结进程不彻底,ZnO挥发带较窄及ZnO相在基体Cu内形成了网络分布,使其所制备试样的抗弯强度低于真空气氛烧结试样的;在所制备的Cu-ZnO(10)材料中,Cu和ZnO两相间存在明显的界面,产生相互扩散,且两相结合良好;在真空气氛下960℃烧结(保温时间1 h)的Cu-ZnO(10)复合材料的综合性能最好,是制备Cu-ZnO(10)复合材料的较好工艺,所制得的Cu-ZnO(10)的相对密度大于98%,电阻率小于2.70μΩ.cm,硬度大于670 MPa,与银氧化物触头材料的物理性能相当。     

Ni元素对非晶合金Mg_(65)Cu_(25)Gd_(10)在NaCl溶液中腐蚀行为的影响

采用析氢腐蚀实验比较了非晶合金Mg65Cu25Gd10和Mg65Cu20Ni5Gd10在1%NaCl溶液中腐蚀性能。利用电化学测试技术和场发射扫描电子显微镜(FESEM)对两非晶合金在NaCl溶液中的腐蚀行为进行了研究。析氢腐蚀实验表明,Ni的加入大大提高了非晶合金Mg65Cu25Gd10抗蚀性能,极化曲线测试结果也表明Mg65Cu20Ni5Gd10非晶合金的腐蚀电流远远小于Mg65Cu25Gd10非晶合金。EIS测试表明,电化学阻抗谱测试结果显示Mg65Cu20Ni5Gd10非晶合金电荷转移电阻高于Mg65Cu25Gd10非晶合金。腐蚀产物形貌观察表明,Ni的加入使非晶合金Mg65Cu20Ni5Gd10腐蚀表面膜更为致密。结合各测试结果,探讨了Ni的加入提高镁基非晶合金耐蚀性机理。