当归挥发油对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨当归挥发油对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法: 采用改良线栓法阻断大鼠大脑中动脉建立脑缺血模型,到达再灌注时限后进行神经功能缺损评分;检测脑梗死体积比、脑含水量及脑血管通透性;血清NO、NOS含量;以及SOD和GSH-Px活性。结果: 当归挥发油可有效改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损;降低脑梗死体积比、脑血管通透性和脑含水量;降低血清 NO、NOS含量; 增强SOD和GSH-Px活性。结论: 当归挥发油对脑缺血再灌注损伤有显著保护作用,其机制可能与提高脑组织抗氧化能力有关。     

JNK在缺血后处理减轻再灌注损伤肺细胞凋亡中的作用

目的: 探讨C-Jun氨基末端激酶(JNK)在缺血后处理(IPO)减轻缺血/再灌注损伤大鼠肺细胞凋亡中的作用。方法: 雄性SD大鼠随机分成5组(n＝8),即对照组(C组)、肺缺血/再灌注组(I/R组)、肺缺血/再灌注+缺血后处理组(IPO组)、缺血后处理+溶剂对照组(PPCES溶液)(P组)、缺血后处理+SP600125组(SP组)。分别于再灌注 2 h 颈动脉取血、留取左肺组织,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO),检测肺组织湿/干重比(W/D)和总肺含水量(TLW);光电镜观察肺组织形态学结构改变,并进行肺组织损伤定量评估(IQA);原位末端标记法(TUNEL)检测肺细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI)。结果: 与C组相比,I/R组血清SOD活性显著降低,MDA含量、MPO活力显著升高(P均<0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著升高(P<0.05 或P<0.01),光镜电镜下肺组织结构发生明显损伤;IPO组、P组、SP组与I/R组相比,MDA含量、MPO活力显著降低,SOD活性升高(P<0.05 或P<0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著降低(P<0.05 或P<0.01),光镜电镜下肺组织结构损伤情况有所改善;P组与IPO组比较各项指标均无明显差异(P均>0.05);SP组与IPO组相比,MDA含量、MPO活力显著降低,SOD活性升高(P<0.05 或P<0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著降低(P<0.05或P<0.01),光镜电镜下肺组织结构未见明显损伤。结论: I/R导致大鼠肺组织过度氧化应激,激活JNK,肺内中性粒细胞聚集,导致肺组织结构严重破坏,细胞大量凋亡;IPO可以减轻氧化应激,抑制JNK通路的激活,从而改善其结构破坏和细胞凋亡。     

地高辛抗体对大鼠再灌注心肌一氧化氮合酶同工酶表达的影响

目的:观察心肌缺血再灌注(myocardialischemiareperfusion,MIR)时大鼠心肌组织、血清NO水平及一氧化氮合酶(NOS)同工酶蛋白表达的变化和内洋地黄素特异性抗体对MIR时心肌NO系统损伤的保护作用。方法:采用左冠状动脉前降支结扎30min,复灌45min建立在体大鼠MIR模型,Sprauge-Dawley大鼠随机分成7组,每组10只:假手术组,MIR模型组,生理盐水组,维拉帕米组,小、中、高剂量地高辛抗血清组(9、18、36mg/kg)。各组于再灌注45min后立即取左室心尖部缺血区心肌并断尾取血,检测心肌匀浆和静脉血中NO含量,心肌匀浆中的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平,免疫组织化学SABC法检测心肌组织eNOS、iNOS;光镜下观察心肌组织形态学变化。结果:MIR时心肌组织NO水平明显降低,但血清中NO水平无明显变化;eNOS表达明显减少,iNOS表达明显增加,心肌组织结构发生明显损伤;中、高剂量地高辛抗血清能有效降低心肌组织iNOS表达,恢复心肌细胞eNOS活性,提高心肌组织和血液中的NO水平,减轻MIR导致的心肌组织结构损伤。结论:内洋地黄素特异性抗体对MIR造成的心肌NO系统损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能通过拮抗内洋地黄素,调节心肌NOS同工酶的表达紊乱而实现。     

牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机理。方法 采用在体大鼠冠脉结扎后再通的方法,观察牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注后心肌梗塞的范围,血清和心肌中SOD活性、MDA和NO含量的影响。结果 牛磺酸可明显减少大鼠心肌缺血再灌后的心肌梗塞范围(P<0.05,0.01),提高大鼠心肌缺血再灌注后血清和心肌中的SOD活性(P<0.01),降低心肌和血清中MDA和NO含量(P<0.05,0.01)。结论 牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,可能与其提高血清和心肌组织中SOD 活性、降低MDA和NO含量有关。     

匹诺塞林对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织急性损伤的神经保护作用

目的: 探讨并确证匹诺塞林对脑缺血再灌注急性损伤的神经保护作用,进一步为匹诺塞林治疗缺血性脑卒中的临床应用提供依据。方法: SD大鼠50只,随机均分为假手术组、模型组、匹诺塞林1 mg/kg 组、匹诺塞林 3 mg/kg 组、匹诺塞林 10 mg/kg 组,其中模型组及匹诺塞林各给药组采用大脑中动脉阻塞法（middle cerebral artery occlusion,MCAO）建立脑缺血再灌注模型,分别与大脑中动脉阻塞2 h再灌注同时给药,6 h后取血并断头取脑,制作病理切片。HE染色观察额顶叶皮层（缺血半暗带）和纹状体病理变化,尼氏染色观察海马CA1区形态变化。酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清神经元特异性烯醇化酶（neuronal specific enolase,NSE）及S100-β蛋白水平。结果: 匹诺塞林能够改善大鼠急性局灶性脑缺血再灌注的脑组织皮层、纹状体和海马神经元的形态,降低血清中NSE和S100 β蛋白的水平(P<0.05 或P<0.01)。结论: 匹诺塞林能减轻缺血再灌注造成的脑组织急性损伤,具有神经保护作用。     

滁菊总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨滁菊总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法: 将48只SD大鼠随机分为6组,假手术组、模型组、滁菊总黄酮组（40、80和160 mg/kg）、尼莫地平组,每组8只,腹腔注射给药。采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉,制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h,再灌注24 h,进行神经行为评分、脑组织含水量测定、脑梗死体积测定、脑组织丙二醛（MDA）含量测定。结果: 40、80和160 mg/kg滁菊总黄酮可降低大鼠脑组织含水量、减小脑梗死体积、降低脑组织MDA含量（P<0.05或P<0.01）;160 mg/kg的滁菊总黄酮可以降低大鼠的神经行为评分（P<0.01）。结论:滁菊总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,可能与其抗氧化活性有关。     

降纤酶对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 探讨降纤酶对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法 肾血管型高血压大鼠(RHR)70只,随机分为降纤酶组、对照组和伪手术组,按Longa氏方法改良复制成可再灌注的大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2h 后恢复灌注。降纤酶组经股静脉给予降纤酶10U·kg^-1体重,对照组给予等量的生理盐水。脑片行TTC及HE染色,观察两组在不同时间点的梗死灶的大小、脑微血管损害的表现及并发出血情况。结果 降纤酶组的梗死灶的体积较对照组明显缩小,脑微血管损害减轻,镜下出血灶减少。结论 降纤酶具有保护脑缺血再灌注损伤的作用。     

腺苷A1受体介导异丙酚预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的缺血耐受

目的: 观察腺苷A1受体是否介导异丙酚预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的缺血耐受。方法: SD大鼠随机分为3组：对照组、异丙酚组、溶剂组（n=6）,采用高效液相色谱法（HPLC）检测各组脑皮质区腺苷浓度。另一批SD大鼠随机分成A：模型组（MCAO模型）,B：腺苷A1受体拮抗剂（DPCPX）组,C：异丙酚组,D：溶剂组（脂肪乳剂组）,E：异丙酚+DPCPX组,F：异丙酚+拮抗剂溶剂组（DMSO）（n=6）。结果: 与对照组比较,异丙酚组脑皮质区腺苷浓度明显升高（P<0.05）。与C组比较,A、D、E组大鼠行为学评分和脑梗死体积均明显增加（P<0.05,P<0.05,P<0.05）,B、F组比较无差异。结论: 异丙酚预处理对脑缺血再灌注损伤的缺血耐受作用可能部分由腺苷A1受体介导。     

肾上腺髓质素对新生大鼠缺氧缺血再灌注性脑损伤的保护作用

目的:观察外源性肾上腺髓质素(adrenomedullin, AM) 对新生大鼠缺氧缺血再灌注性脑损伤(hypoxic-ischenmia reperfusion brain damage, HIRBD) 的保护作用。方法:40 只7 日龄SD 新生大鼠随机分为正常对照组、缺氧缺血再灌注(HIR) 组、AM 干预组(缺氧缺血后即刻0、 6、 12 h分别给于AM 腹腔注射, 1. 0 mg/kg), 每组8 只, 于术后48 h 处死。取耳间线前2 mm 水平做冠状位脑组织切片, 观察脑组织病理学变化, 同时检测脑组织匀浆一氧化氮合酶(NOS)、 谷胱甘肽(GSH)、 髓过氧化物酶(MPO) 的含量。结果:HIR、 AM 12 h 干预组新生大鼠脑病理改变明显, AM 0、 6 h 干预组的脑病理改变明显减轻。AM 0、 6 h 干预组脑组织中结构型一氧化氮合酶(cNOS)、 GSH 的水平较HIR 组显著增高, 而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、 MPO 的水平较HIR 组显著降低。结论:缺氧缺血再灌注后0 ～ 6 h 予外源性AM 干预对新生大鼠HIRBD 有不同程度的保护作用, 这种作用与其增加体内抗氧化物质GSH 的活性、NO 的释放及抑制中性粒细胞对脑组织的浸润有关。     

五味子乙素通过抑制心肌细胞凋亡减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的：探究五味子乙素（schisandrin B, Sch B）对心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）大鼠的保护效果及作用机制。方法：选取40只SD大鼠，大鼠随机分为Control组、MIRI组、MIRI+30 mg/kg Sch B（MIRI+L-Sch B）组和MIRI+60 mg/kg Sch B（MIRI+H-Sch B）组，每组10只，Sch B灌胃处理7 d。随后采用左前降支结扎进行MIRI造模，Control组大鼠仅进行假手术。造模完成后，记录再灌注120 min后的大鼠心脏的射血分数（EF）、缩短分数（FS）、左心室内压最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室内压最大下降速率（－dp/dtmax）值。采集大鼠血清检测肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）活性。分离大鼠心肌缺血组织，检测组织髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物（GSH-PX）水平，TTC、HE and TUNEL染色实验分别观察心肌梗死面积、心肌组织病理形态学变化和心肌细胞凋亡情况，Western blot检测大鼠心肌组织中cleaved caspase 3、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2关联X（Bax）蛋白表达情况。结果：L-Sch B预处理后，MIRI大鼠的EF、FS、－dp/dtmax以及GSH-PX水平显著上升（P<0.05或P<0.01），CK-MB、LDH、cTnI活性以及MDA水平显著降低（P<0.05或P<0.01），心肌梗死面积显著减少（P<0.01），心肌组织损伤得到改善（P<0.01），心肌细胞凋亡减少（P<0.05、P<0.01），cleaved caspase 3/caspase 3、Bax蛋白表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P<0.05或P<0.01）；且MIRI+H-Sch B组大鼠+dp/dtmax值显著升高（P<0.05）、MPO水平显著降低（P<0.01），该结果具有剂量效应。 结论：Sch B预处理可减轻MIRI引起的大鼠心肌损伤，其作用机制通过抑制氧化应激反应，下调cleaved caspase 3、Bax蛋白表达和上调Bcl-2蛋白表达以抑制心肌细胞凋亡实现。     

黄体酮防治大鼠缺血再灌注脑损伤中神经功能缺失及细胞凋亡

目的: 探讨黄体酮(progesterone, PROG) 对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法: 采用SD 大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(transient middle cerebral artery occlusion,MCAO) 。将大鼠随机分为6 组:假手术组、ischmia/reperfusion (I/R) 组、溶剂(二甲基亚砜dimethyl sulfoxide, DMSO) 对照组、PROG 预防组、PROG 治疗组、PROG 预防并治疗组, 对各组动物脑缺血/再灌注后神经功能缺陷进行计分, 并应用细胞死亡原位末端标记(insitu end labeling, ISEL) 法研究脑组织细胞凋亡情况。结果: (1) 缺血2 h 再灌注24 h 后神经功能缺陷计分:假手术组为0 分, I R 组为1. 38±0. 92, DMSO 组为1. 0±0. 53, 预防组为0. 35±0. 51, 治疗组为0. 62±0. 52, 防治组为0. 25±0. 46 。(2) 高倍视野下凋亡细胞数:假手术组为1. 88±0. 25, I R 组为41. 38±3. 85, DMSO 组为38. 13±5. 69, 预防组为22. 88±2. 70, 治疗组为25. 63±2. 93, 防治组为20. 88±2. 30 。以上指标各药物处理组(预防组、治疗组及防治组) 与I R 组、DMSO 对照组之间差异具有统计学意义(P<0. 05) 。结论: PROG 可减少局灶性缺血再灌注脑损伤动物模型神经功能缺失的发生, 减轻局灶性缺血再灌流脑损伤, 减少大鼠缺血再灌注后脑细胞凋亡。     

四氢生物蝶呤对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用

目的:探讨四氢生物蝶呤(BH₄) 对肾缺血再灌注损伤(IR) 模型的作用及其作用机制。方法:复制大鼠肾缺血再灌注模型, 手术前1 h 喂饲BH₄, 动态检测其对肾组织NO 含量、cNOS 和iNOS 活性的影响, 并通过肾功能、MPO、MDA 的变化来评价BH₄ 对肾IR 模型的作用。结果:BH₄ 能够升高再灌注早期cNOS 活性, 增加内皮源性NO 含量, 减轻炎症反应,减弱再灌注后期对iNOS 的诱导作用。结论:BH₄ 可改善再灌注初期cNOS 活性, 保护肾功能。     

人urotensinⅡ对大鼠心肌缺血缺氧性损伤的保护作用机制

目的: 探讨人urotensinⅡ(hUⅡ)抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法: 在大鼠冠状动脉左前降支结扎再灌注模型上,观察心电图变化,测定心肌梗死体积及心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible NO synthesis, iNOS) mRNA表达。 结果: 0.47、1.4和4.2 μg/kg hUⅡ可明显抑制缺血再灌注损伤大鼠心电图ST段抬高和心肌梗死体积;4.2 μg/kg hUⅡ显著地改善冠状动脉结扎再灌注大鼠心肌细胞超微结构的变化,并增强大鼠心肌组织中iNOS mRNA表达;urotensinⅡ受体（UT）拮抗剂urantide 10 nmol/kg可明显地拮抗1.4和4.2 μg/kg hUII对缺血再灌注大鼠心电图ST段抬高和心肌梗死的抑制作用。结论: HUII抗大鼠心肌缺血性损伤作用可能与激动UT及促进NO合成有关。     

黄体酮防治大鼠缺血再灌注脑损伤中细胞凋亡及p53蛋白的变化

目的: 探讨黄体酮对缺血再灌注损伤脑的保护机制。方法: 采用SD 大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(transient middle cerebral artery occlusion,MCAO),将大鼠随机分为6 组:假手术组、缺血再灌注组、二甲基亚砜溶剂(dimethyl sulfoxide, DMSO) 对照组、黄体酮(progesterone, PROG) 预防组、PROG 治疗组、PROG 预防治疗组, 应用免疫组织化学和细胞死亡原位末端标记(Insitu end labeling, ISEL) 法研究脑组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白p53 的表达情况。结果: 高倍视野下p53 蛋白阳性细胞数, 各药物处理组凋亡细胞数与缺血再灌注组和对照组之间差异有显著的统计学意义(P <0.05)。结论: PROG 可减轻局灶性缺血再灌流脑损伤, 减少大鼠脑缺血再灌注后的脑细胞凋亡。抑制脑神经细胞中p53 蛋白表达可能是其发挥保护作用的分子机制之一。     

氨氯地平对高胆固醇大鼠心肌缺血再灌注时一氧化氮合酶的影响

目的: 探讨高胆固醇血症大鼠心肌缺血 再灌注损伤时氨氯地平对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在冠脉血管内皮表达的影响。方法: 雄性Wistar 大鼠分4 组:单纯高胆固醇血症组;氨氯地平组;氨氯地平+N-甲基亚硝基左旋精氨酸甲酯组;氨氯地平+假手术组。大鼠经高胆固醇喂养6 周后,开胸结扎左冠状动脉,缺血30 min 后,行再灌注20 min、2 h。分别用免疫组织化学ABC 法检测冠脉血管内皮eNOS 和iNOS 的表达水平。结果: 缺血前,氨氯地平可显著降低冠脉血管内皮iNOS 表达(P<0.01)。缺血30 min,高胆固醇血症组eNOS、iNOS 表达明显减少(P<0.01),氨氯地平组eNOS 表达上调(P<0.01),iNOS 下调;再灌注20 min 时,高胆固醇血症组冠脉血管内皮表达iNOS 增多,氨氯地平组eNOS、iNOS 表达明显下调;再灌注2 h 时,氨氯地平组NO 水平及eNOS、iNOS表达较高胆固醇血症组轻度降低。各时相点LNAME均可部分阻断氨氯地平对eNOS、iNOS 的效应。结论: 在高胆固醇血症时、缺血期及再灌注早期,氨氯地平可调节eNOS、iNOS 表达,减少心肌缺血再灌注损伤。     

川芎嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 观察川芎嗪对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机理。方法 采用大鼠冠脉结扎30 min后再通20 min 造成心肌缺血再灌模型。大鼠随机分对照组、缺血组、模型组(缺血再灌组)和川芎嗪保护组。观测心肌细胞膜和线粒体中过氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH·PX)、Ca²⁺-ATP酶和K⁺, Na⁺-ATP 酶活力, MDA及心肌钙含量。结果 川芎嗪保护组心肌细胞膜SOD、GSH·PX、Ca²⁺-ATP 酶和Na⁺, K⁺-ATP酶活性较缺血再灌组均有显著性升高(P＜0.05 或P ＜0.01), 丙二醛(MDA)和心肌钙含量却呈显著性降低。线粒体中SOD和GSH·PX 活力也呈显著性升高(P ＜0.05), MDA 却为显著性降低。结论 川芎嗪对大鼠缺血再灌注损伤心肌有确切保护作用, 其机理是通过提高对氧自由基的清除及抑制脂质过氧化。     

黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌后炎症反应的影响

目的: 探讨黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌后炎症反应的影响。方法: 采用四血管阻塞法, 复制大鼠全脑缺血再灌注模型;观察黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌后外周血白细胞和中性粒细胞计数、脑组织皮质和海马骨髓过氧化物酶(MPO) 活性的影响;并对脑组织皮质做病理学检查。结果: 与假手术组相比, 模型组大鼠全脑缺血再灌注后外周血白细胞和中性粒细胞计数、脑组织皮质和海马MPO 活性均明显升高;与模型组相比, 黄芪提取物(20、40、80mg·kg^-1) 均可降低大鼠全脑缺血再灌注后升高的外周血白细胞和中性粒细胞计数、降低脑组织升高的皮质和海马MPO 活性;改善脑组织皮质的缺血性改变。结论: 黄芪提取物对大鼠全脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用, 其作用机制可能与其抗炎作用有关。     

羟丁酸钠在大鼠海马脑片缺氧复氧损伤中的保护作用机制

目的 研究羟丁酸钠(SO) 在大鼠海马脑片缺氧 复氧(H R) 损伤中的保护作用, 揭示SO 在缺血性脑损伤中的保护作用机制。方法 采用大鼠海马脑片H R 损伤模型。设正常对照组, H R组, SO 1 、10 、100 μmol/L 组, NCS-382 100 μmol/L +SO 100 μmol/L (NCS-382 + SO) 组、NCS-356100 μmol/L (NCS-356) 组。测定脑片孵育液中乳酸脱氢酶(LDH) 释放率, γ-氨基丁酸(GABA) 、谷氨酸(Glu) 含量;脑片进行TTC 染色计算组织损伤百分率;HE 染色观察组织病理形态学变化, 流式细胞仪测定细胞内钙;酶组织化学法检测一氧化氮合酶(NOS) 的表达。结果 SO 明显降低H R 海马脑片LDH 释放率(P<0.01), 提高TTC 染色的A490值, 降低组织损伤百分率(P<0.01), 升高GABA Glu 比值(P<0.01), 减轻H R 所致的组织病理损伤。H R 组脑片细胞内钙荧光强度和NOS阳性神经元明显高于正常对照组(P<0.01) ;SO 100 μmol/L 组、NCS-356 组细胞内钙荧光强度较H R 组显著减弱(P<0.01),NOS 阳性神经元的数目明显减少(P<0.01)。用γ-羟基丁酸(GHB) 受体选择性阻断剂NCS-382 后再使用SO, 细胞内钙荧光强度、NOS 阳性神经元的数目均接近H R组。结论 SO 对大鼠海马脑片H R 损伤有明显的保护作用, 其机制可能与升高GABA Glu 比值, 激动GHB 受体抑制细胞内钙的增高及NOS 的表达有关。