应用固定化金属亲和层析纯化His6融合甲状旁腺激素相关蛋白

应用原核细胞高效表达载体在大肠杆菌表达了N端带 6个组氨酸的重组人PTHrP。利用其对金属鳌合层析介质的亲合性 ,采用含盐咪唑梯度洗脱 ,一步纯化即可得到纯度大于 90 %且具有生物学活性的重组PTHrP ,并进一步制备了抗PTHrP单克隆抗体。应用His6纯化标签的固定化金属亲和层析 (IMAC) ,极大地方便了目的蛋白的纯化 ,为进一步研究PTHrP的生物学特性及其在临床诊断治疗中的应用奠定了基础。     

金属螯合亲和层析介质及应用研究的进展

金属螯合亲和层析具有螯合介质制备简单，吸附容量大，选择性及通用性较好，易于再生，成本低等优点，是分离纯化蛋白质等生物工程产品最有效的技术之一。本文综述了金属螯合亲和层析介质及最新应用方面的进展。     

金属螯合亲和层析在纯化重组类人胶原蛋白中的应用

研究了应用金属螯合亲和层析法纯化重组类人胶原蛋白的条件。分别考察了不同金属离子、平衡缓冲液pH值及两种洗脱方法对纯化结果的影响。结果表明,用锌离子螯合介质,pH7.5磷酸盐缓冲液平衡,上样后用100mmol·L-1氯化铵洗脱纯化效果最佳。纯化后重组类人胶原蛋白的纯度达98%,回收率为85.4%,纯化倍数为3.4。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与N端序列分析结果均证明所得纯品为重组类人胶原蛋白。     

壳聚糖涂层亲和层析在超氧化物歧化酶纯化中的应用

1前言亲和层析是蛋白质纯化中分离效率最高的技术之一。亲和配基有多种形式如单机、底物、活性染料、金属离子等。固定化金属离子亲和层析（Immobilizedmetalionaffinitychromatog’“PhyIMAC）是Porath在1975年首先研究的一种高效分离技术［‘3。IMAC和普通的亲和层析相比,具有一些优点,如亲和配基Cu’”、Zn’“价廉;可在高盐浓度下操作;稳定,容易再生。Sulkowke曾用IMAC技术分离纯化干扰素,一步可纯化产品几十倍【“,收率达90％。目前IMAC介质制备是先在软基质SePharose或SePhadex上用化学交联法弓卜螫合剂IDA（Imino…     

无水体系中环氧氯丙烷活化琼脂糖凝胶制备高载量固定化金属亲和层析介质

在以二甲基亚砜为溶剂的无水体系中,利用环氧氯丙烷对琼脂糖凝胶Sepharose 6 Fast Flow进行活化,并偶联亚氨基二乙酸和Cu2+制备了固定化金属亲和层析介质. 结果表明,该体系中环氧氯丙烷对琼脂糖凝胶的活化效率大幅度提高,在40%(j)环氧氯丙烷、0.02 g/mL NaOH及50℃、反应时间4 h的优化条件下,环氧基活化密度最高达165 mmol/mL,较目前报道的最高值提高50%以上. 最终所制介质的Cu2+螯合密度为128.3 mmol/mL,对BSA的平衡吸附容量达2.05 mmol/L. 以0.5 mol/L咪唑为洗脱剂,被吸附的BSA洗脱率可达90%以上.     

应用反向亲和层析纯化基因工程产品

本文以ｒＩＬ6的纯化为例进行实验。用超声破碎的方法提取出菌体蛋白粗提物和非相关包涵体杂质蛋白(ｒＩＬ2包涵体),进而用常规免疫法制备兔抗菌体蛋白和包涵体杂质蛋白抗血清。从抗血清中用亲和层析法分离出抗菌体蛋白和包涵体杂质蛋白的特异ＩｇＧ,然后偶联ＣＮＢｒ激活的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ4Ｂ,制成抗菌体蛋白ＩｇＧ和抗包涵体杂质蛋白ＩｇＧ的亲和层析柱,即反向亲和柱Ⅰ和反向亲和柱Ⅱ。将反向柱Ⅰ和反相柱Ⅱ分别用01ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓＨＣ1(ｐＨ80)平衡,用8ｍｏｌ/Ｌ尿素溶液溶解包涵体,稀释复性后经过反向柱Ⅰ纯化,ｒＩＬ6含量达到79%…     

混合模式色谱介质的制备及其在蛋白分离纯化中的应用

随着生物制药技术的迅速发展,生物制品的制备规模和质量要求的提高对下游分离纯化工艺提出了新的要求.如何通过分离纯化手段快速获得目标产物并进一步降低成本是现代生物分离技术研究的热点问题.混合模式色谱技术是一种高效的分离纯化方法,一般兼有多种作用模式,并且其蛋白结合量高、选择性好、洗脱条件温和、具有耐盐吸附等多种特性,可减少...     

介质截留法固定化微生物技术在污水处理中的应用

介质截留法是新兴的用于污水处理的固定化微生物方法之一。由于其具有高度的微生物活性、易于固液分离、可工业化操作、适于难降解有毒物质的处理等优点,在生物污水处理领域得到了较快的发展。介绍了介质截留法的研究现状,分析比较了该法使用的典型载体及其应用状况,总结了该法的优劣性和适用范围,并对该法在污水处理领域的发展做了展望。     

金属有机骨架在生物分子固定化中的应用研究进展

金属有机骨架(MOFs)是由金属离子簇与有机配体组成的三维复合结构,具有比表面积大、种类多、负载量大、结构稳定等特征,其多孔结构能够维持生物分子构型、增强生物稳定性、提高生物分子负载效率。生物或药物分子通过表面固定、扩散固定或封装固定负载在MOFs表面或内部,MOFs能够通过调节金属离子簇与有机配体设计出具有不同孔隙率、不同孔径的生物亲和性多孔骨架结构。对近年来MOFs在酶固定化、细胞固定化、核酸固定化、药物固定化方面的应用研究进展进行了综述,为生物分子固定载体材料的研究提供了新的方向与理论支持。     

植酸在金属防护中的应用进展

植酸是一种新型金属多齿螯合剂,可在金属表面形成一层致密的单分子有机保护膜,从而防止金属的腐蚀。介绍了植酸在金属防腐、磷化和钝化等工艺中的应用。     

金属有机框架固定化酶及其在环境中的应用

固定化酶克服了游离酶易失活、稳定性差、难以回收利用的缺点,扩大了酶的实际应用范围。近年来,由于金属有机框架（metal-organic frameworks,MOFs）独特的性质,如比表面积大、孔隙率高、孔径可调节、开放的金属位点和多样的结构组成等,其作为固定化酶的新型载体成为研究热点。本文综述了近年来MOFs固定化酶的研究进展,其中重点讨论了酶在MOFs上的固定化方法（从头合成和后合成）和机理（载体包埋、表面吸附、共价连接和孔道扩散）,并且分析了不同合成方法的优势和局限性,如从头合成可以选择孔径小于目标酶尺寸的MOFs,但要求MOFs的合成条件温和;后合成可以选择合成条件苛刻的MOFs,但固定化过程相对复杂。此外,还对MOFs固定化酶在环境污染物检测和去除方面的应用进展进行了总结。最后对MOFs固定化酶在环境领域的应用研究和面临的挑战进行了展望,提出应关注MOFs固定化酶中MOFs和酶对污染物的协同作用以及MOFs固定化酶的可控制备。     

介孔二氧化硅载体在酶蛋白固定化中的应用

介孔二氧化硅材料因制备简单、生物相容性良好、比表面积和孔径可控、表面修饰基团多样等特点,被广泛应用于酶蛋白的固定化.主要综述了介孔二氧化硅对水解酶、氧化还原酶等酶蛋白的固定化效果及其影响固定化效果的因素,展望了介孔二氧化硅在酶蛋白固定化中的应用前景及存在的挑战,为介孔二氧化硅更好地应用于固定化酶制剂的制备奠定基础.     

固定化胰蛋白酶制备条件的优化及其在纯化抑肽酶中的应用

目的优化固定化胰蛋白酶的制备条件,并探讨固定化胰蛋白酶在纯化抑肽酶中的应用。方法以介孔分子筛SBA-15作为载体,戊二醛作为交联剂,对胰蛋白酶进行固定化,并对固定化条件进行优化。将优化条件制备的固定化胰蛋白酶作为亲和吸附剂,对抑肽酶进行分离纯化。结果固定化胰蛋白酶制备的最适条件为:戊二醛浓度0.8%,加酶量3.0mg,反应温度35℃,反应时间3h。以此条件制备的固定化胰蛋白酶活力可达15.6U/mg。以此酶作为亲和吸附剂纯化抑肽酶,纯化倍数可达420倍以上,活性回收率超过80%。结论优化了固定化胰蛋白酶的制备条件,以此酶作为亲和吸附剂用于抑肽酶的分离纯化,效果较好。     

壳聚糖微珠亲和层析介质的制备及其初步应用

目的制备壳聚糖(CTS)微珠亲和层析介质,并进行初步应用。方法采用多种化学方法对CTS的表面基团进行改造,使其活化。用此改性CTS进行羊抗人IgG及小牛血清纤维连接蛋白(FN)的纯化。结果此改性的CTS微珠粒径在40￣160μm之间,每克可溶胀至4ml。活化的CTS对人丙种球蛋白的吸附量为15￣25mg/gCTS,对明胶的吸附量为5.8￣6.5mg/gCTS。采用此方法纯化的羊抗人IgG及FN与Sepharose4B法纯化效果一致。结论已制备的壳聚糖微珠亲和层析介质,其性质稳定且价格较低,是一种可以广泛应用的亲和层析介质。     

量子化学在金属配合物中的应用进展

量子化学的发展经历了价键理论、分子轨道理论和密度泛函理论等的发展,并最终产生了量子化学Gunssian程序。金属配合物在工业、医药和生物学等方面的应用日益广泛,而量子化学理论与方法为其研究提供了有力的计算工具。文章综述了量子化学在研究金属配合物分子结构、稳定性、分子磁性、分子轨道等方面的应用及其研究进展。     

金属燃料在固体推进剂中的应用进展

综述了硼粉、铝粉、镁粉和合金粉等金属燃烧剂在固体推进剂中的应用状况,展望了其在固体推进剂中的应用前景。认为在固体推进剂中添加一定量的金属燃料来提高推进剂的能量有着很大的发展潜力。     

固定化细胞技术应用进展

固定化细胞较游离细胞具有良好的环境耐受性,使其在工业生产及环境保护等领域具有广泛的应用前景。介绍了固定化技术在环境治理、食品发酵、能源开发以及药物制备等领域的最新应用进展。     

大孔吸附树脂在中药纯化中的应用进展

大孔树脂具备选择性吸附特点,能够从中药提取液中分离精制有效成分或有效部位,是一种纯化中药有效成分的有效方法。该技术的推广应用,将有利于解决单味中药及复方提取液中提取、分离与纯化中长期以来存在的诸多问题,显著加快中药产业现代化的进程。本文综述了近年来大孔吸附树脂技术在中药有效成分黄酮类、生物碱类、皂苷类、酚酸类成分、多糖类等化合物成分及在中药复方纯化过程中的应用进展,为进一步的研究提供参考依据。     

萃取精馏在ODS替代品纯化工艺中的应用进展

介绍了萃取精馏技术在HFC-32、HFC-134a、HFC-152a、HFC-125、HFC-245fa等ODS替代品纯化中的应用进展。     

基质金属蛋白酶在癌症治疗中的应用进展

基质金属蛋白酶是一类高度保守的锌离子依赖的内肽酶,其在细胞外基质的降解中发挥着重要的作用。相关研究表明基质金属蛋白酶参与多种病理过程,尤其是肿瘤的转移和侵袭过程。肿瘤组织中过度表达的基质金属蛋白酶可以作为治疗靶点用于癌症治疗。本文综述了基质金属蛋白酶的结构功能及其在癌症治疗方面的研究进展。