两种不同来源桦褐孔菌多糖免疫活性的比较

利用水溶醇沉法分别从桦褐孔菌子实体和发酵产物中分离提取多糖,并采用两种免疫调节测定方法研究其免疫调节活性。所有桦褐孔菌子实体和发酵产物胞外乙醇沉淀多糖,除蛋白后多糖以及桦褐孔菌发酵产物胞内乙醇沉淀多糖,对NO的清除和人的外周血单个核细胞(hPBMCs)的增殖具有很强的活性,多糖含量和蛋白含量有明显的不同,桦褐孔菌发酵产物胞外多糖和胞内多糖具有较高的多糖含量和较低的蛋白含量,并且其对NO的清除活性和hPBMCs的增殖活性相对天然的桦褐孔菌子实体多糖弱。结果表明,桦褐孔菌多糖具有免疫调节活性。     

桦褐孔菌子实体多酚的抗氧化活性

桦褐孔菌在生长过程中,子实体产生大量的生物活性多酚。为了对桦褐孔菌子实体多酚的抗氧化活性进行研究,采用有机溶剂甲醇提取桦褐孔菌子实体中的多酚,通过萃取将子实体多酚分为乙酸乙酯层和正丁醇层,并利用Sephadex LH-20柱色谱对乙酸乙酯层和正丁醇层多酚进行分离得到不同的分段组分,测定每一组分的多酚、黄酮含量及抗氧化活性。结果表明:在桦褐孔菌子实体多酚乙酸乙酯层分段组分中,SF3有着最高的多酚与黄酮含量;在子实体多酚正丁醇层柱色谱分段组分中,SF2有着最高的多酚含量,SF3有着最高黄酮含量。桦褐孔菌子实体多酚乙酸乙酯层和正丁醇层柱色谱分段组分都是SF3呈现最高的抗氧化活性,黄酮含量与抗氧化活性之间存在很强的正相关性。研究桦褐孔菌子实体多酚的抗氧化活性可为后续多酚组分的分离鉴定奠定基础。     

肉桂提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过高效液相色谱分析水解产物中的对-硝基酚,对肉桂不同溶剂提取物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外评价,并与阳性对照药Acarbose进行比较。结果表明,肉桂正丁醇提取物的抑制活性最高,其IC50为83.10μg/mL,远小于阳性对照Acarbose(IC50=1 028.99μg/mL)。肉桂其他溶剂提取物均有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性。对正丁醇部位的α-葡萄糖苷酶抑制动力学研究的结果表明,其作用类型为反竞争性抑制(Ki=53.75μg/mL)。     

TritonX-100对液体深层发酵桦褐孔菌产活性多糖的影响

探讨表面活性剂TritonX-100对桦褐孔菌液体深层发酵产活性多糖的影响,利用醇沉法得到胞外多糖和胞内多糖,通过测定菌丝体量和胞内外多糖产量,明确TritonX-100对多糖的促进作用。进一步探讨TritonX-100的最佳添加时间及浓度,得出在第0d添加0.1%TritonX-100,促进效果最显著。多糖的DPPH自由基清除率测定结果表明,TritonX-100也促进桦褐孔菌多糖的抗氧化活性。通过对多糖化学成分以及单糖组成的分析,证明多糖中的糖、蛋白含量及单糖的组成与DPPH自由基清除率具有一定关联性。以上结果为进一步深入研究桦褐孔菌多糖奠定理论基础,从而建立一种桦褐孔菌发酵多糖的高产、高活性的液体深层发酵制备技术。     

耐酸性α-淀粉酶酶促反应动力学研究

在耐酸性α-淀粉酶产生菌发酵条件优化基础上,进一步研究了耐酸性α-淀粉酶酶促反应动力学,确立了酶促反应最适合pH范围为3.0-5.0,pH4.5最佳。反应进程曲线表明在一定浓度范围内,产物浓度随底物浓度的增加而增加,当底物浓度过大时,存在底物抑制。M-M动力学研究表明该酶Km为6.04881 g/l,葡萄糖对酶促反应有抑制且为竞争性抑制。     

知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及性质研究

研究了从知母中提取分离α-葡萄糖苷酶抑制剂.将水提物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,测定了各部分的酶抑制活性,并对活性最强部分进行了酶抑制的动力学研究.结果表明：抑制剂HGI热稳定性好,pH适应范围广,表现为一种既能快速结合,又能产生较强抑制效果的竞争性抑制类型,Ki=3.86 mg/L.     

桦褐孔菌胞外多糖级份的化学性质和抗氧化活性研究

研究桦褐孔茵发酵胞外多糖的抗氧化活性。采用液体深层发酵培养桦褐孔菌,利用水溶醇沉法从发酵液中分离提取胞外多糖EPS,中性蛋白酶＋Sevage试剂法对EPS去除蛋白分离得到多糖DEPS。DEPS经DEAE-52阴离子交换色谱和SephadexG-200凝胶色谱柱层析后得到三个多糖级份,其中,具有较高蛋白质和甘露糖含量以及具有较低分子量的级份DEPS2和DEPS3的抗氧化活性较好。表明桦褐孔菌胞外多糖的抗氧化活性与其蛋白质、甘露糖含量及分子量有关。     

何首乌对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

目前已经发现许多中药具有高效抑制α-葡萄糖苷酶活性成分,能有效的治疗糖尿病。通过测定30种中药水提物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,发现何首乌抑制活性最强。本文报道对何首乌抑制成分的分离与鉴定实验。经sephadex G-100凝胶过滤分离纯化,初步鉴定何首乌的抑制剂为多糖类物质,相对分子质量约为4.79×104。双倒数曲线表明,何首乌抑制剂对α-葡萄糖苷酶的作用属于非竞争性抑制。     

何首乌对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

目前已经发现许多中药具有高效抑制α-葡萄糖苷酶活性成分,能有效的治疗糖尿病。通过测定30种中药水提物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,发现何首乌抑制活性最强。本文报道对何首乌抑制成分的分离与鉴定实验。经sephadex G-100凝胶过滤分离纯化,初步鉴定何首乌的抑制剂为多糖类物质,相对分子质量约为4.79×104。双倒数曲线表明,何首乌抑制剂对α-葡萄糖苷酶的作用属于非竞争性抑制。     

12味药食两用中药抑制α-葡萄糖苷酶作用研究

选择对糖尿病有治疗作用的12味药食两用中药,经正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、水5种溶剂系统提取获得60个提取部位,以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过高效液相色谱分析水解产物中的对-硝基酚,进行α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外筛选.结果表明,12味药食两用中药各提取部位均表现出不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活...     

34种中药对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

测定34种中药水提物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果显示，药液浓度为50mg／mL时，巴戟天、牛膝、黄精、白芍、何首乌、五味子、川芎、虎杖、穿山龙对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率达50％以上。进一步研究发现五味子、川芎和虎杖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较强。虎杖抑制α-葡萄糖苷酶活性的IC50约为27．5mg／mL，属非竞争性抑制。     

液体深层发酵桦褐孔菌对不同来源木质纤维素的降解

桦褐孔菌作为白腐真菌的一种,能够降解木质纤维素,通过往桦褐孔菌液体深层发酵培养基中分别添加甘蔗渣、稻秆、麦秆、花生壳这4种不同来源的木质纤维素,研究在液体深层发酵条件下,桦褐孔菌对4种木质纤维素中的木质素、纤维素、半纤维素成分的降解规律.结果表明,桦褐孔菌对稻秆、麦秆、甘蔗渣、花生壳中木质素的降解率分别是74.8％,73.2％,58.5％,70.2％;对半纤维素的降解率分别是48.3％,71.6％,49.1％,67.6％;对纤维素的降解率分别是61.7％,48.9％,49.0％,66.2％.本次实验极好地印证了桦褐孔菌能够有效降解木质纤维素的特点,为今后大规模利用桦褐孔菌降解一些废弃木质纤维素奠定了基础,减少了秸秆类物质直接焚烧对环境造成的破坏,为充分利用木质纤维素资源提供了新的思路.     

12味药食两用中药抑制α-葡萄糖苷酶作用研究

选择对糖尿病有治疗作用的12味药食两用中药,经正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、水5种溶剂系统提取获得60个提取部位,以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过高效液相色谱分析水解产物中的对-硝基酚,进行α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外筛选。结果表明,12味药食两用中药各提取部位均表现出不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,且抑制活性普遍高于常用降糖药物Acarbose。丁香和肉桂的所有提取部位均表现出较高的抑制活性;榧子的甲醇提取部位及丁香和肉桂的水提取部位活性显著,抑制率在95%以上。筛选工作为药食两用中药资源的开发利用提供了重要的活性数据参考。     

常见花茶多酚提取物对α-淀粉酶的抑制作用

以17种市售花茶为原料,采用水提法和醇提法制备花茶提取液,研究了总多酚得率及其对淀粉酶活性的抑制作用。结果表明:不同种类花茶提取液之间的总多酚得率和抑制α-淀粉酶活性有明显的差异;相同种类花茶不同溶剂提取液之间的总多酚得率和抑制α-淀粉酶活性有明显的差异,其中金莲花在两种溶剂提取液中的总多酚得率皆为最高,千日红在水提液中总多酚得率最低,茉莉花在醇提液中总多酚得率最低。水提液对α-淀粉酶抑制率没有显著的相关性,但花茶醇提取液对α-淀粉酶抑制率有极显著的相关性。     

桦褐孔菌醇提物的萃取分离及其抗氧化活性研究

采用不同极性有机溶剂对桦褐孔菌乙醇粗提取物进行液·液萃取,将粗提物划分为3个不同极性部位(乙酸乙酯相、正丁醇相、水相);选用总还原力、DPPH自由基清除率、FRAP法及β胡萝卜素褪色法对粗提物和萃取物进行抗氧化活性评价.结果表明:桦褐孔菌具有较好的抗氧化活性,乙酸乙酯相的总还原力、FRAP值、DPPH自由基清除率显著高fBHT和其他部位(户相似文献   

超声波对液体α-淀粉酶酶学活性的影响

采用碘-淀粉比色法研究超声波对液体α-淀粉酶相对活性的影响,探讨超声波功率、超声时间、酶液的pH值、超声后静置时间、温度等参数与液体α-淀粉酶相对活性之间的关系,得出了液体α-淀粉酶酶学活性较佳的处理工艺条件,并将其应用于纯棉靛蓝牛仔布的退浆处理.结果表明:适当的超声波处理能提高液体α-淀粉酶酶学活性,超声波联合淀粉酶处理比仅用淀粉酶对牛仔布退浆处理的退浆率提高了约10.2%.     

pH值和表面活性剂对桦褐孔菌降解甘蔗渣效率的影响

为了提高桦褐孔菌(Inonotus obliquus)液体发酵选择性降解甘蔗渣木质素的效率,采用两因素多水平的方法进行正交实验,并通过正交实验确定发酵条件参数,对不同发酵时间处理后的甘蔗渣进行糖化水解,分析pH值和表面活性剂(Tween-80)对桦褐孔菌降解甘蔗渣的影响.结果表明:当pH值为6.0,Tween-80添加...     

桦褐孔菌子实体多酚的分离及抗氧化性的研究

桦褐孔菌子实体中含有大量的活性多酚,为了对多酚进行有效分离,采用甲醇、乙醇和水作为提取溶剂,通过测定多酚含量和DPPH自由基清除率来比较不同溶剂的提取效率,并运用Sephadex LH-20柱色谱对多酚提取液进行分离。结果表明:在60℃条件下,以甲醇为溶剂并结合超声破碎得到的提取液中多酚含量和DPPH自由基清除率最高,同时Sephadex LH-20柱色谱对乙酸乙酯层和正丁醇层多酚实现了有效初步分离,并得出多酚的组成与抗氧化活性紧密关联。多酚的初步分离为进一步深入研究多酚组分提供了基础。     

新型耐酸性α-淀粉酶液态发酵条件的研究

通过基因工程技术导入了产生耐酸性α-淀粉酶和糖化酶的多考贝融合基因而获得的白曲酶基因工程菌株TR12作为试验菌株，分别在摇瓶条件下和2L通气发酵罐上进行耐酸性α-淀粉酶的液态发酵工艺条件的试验研究。正交试验结果表明，优化摇瓶发酵培养基配方A3B3C2D1，即玉米粉4％，玉米浆1.5％，黄豆粉2％，麸皮4％，摇瓶产酶活力81.69u/mL，2L发酵罐的产酶活力达到了83.6u/mL的水平。     

液体发酵桦褐孔菌三萜类成分抑制肿瘤细胞活性研究

探究桦褐孔菌液体深层发酵所得菌丝体中三萜类成分的抗肿瘤活性。采用高效液相色谱法鉴定桦褐孔菌液体深层发酵产物中含有5种已知具有肿瘤细胞生长抑制活性的三萜类成分,采用MTT比色法分析三萜类成分对卵巢癌细胞ES2、SKOV3和肺癌细胞A549和PC9的生长活性的影响,通过细胞周期和细胞凋亡实验研究三萜类成分对卵巢癌细胞和肺癌细胞增殖的影响。结果表明:经过三萜类成分处理3d和6d的肿瘤细胞生长活性均被明显抑制,对卵巢癌细胞ES2抑制的IC50分别为21.1μg/mL和17.6μg/mL,对SKOV3抑制的IC50值分别为33.8μg/mL和10.9μg/mL;对肺癌细胞PC9抑制的IC50分别为21.4μg/mL和19.7μg/mL、对A549抑制的IC50值分别为28.5μg/mL和23.5μg/mL。细胞周期实验结果表明三萜类成分对ES2、A549、PC9、SKOV3的阻滞可能发生在G0/G1期,在16.0μg/mL的三萜类成分处理下,PC9、A549、ES2、SKOV3处在G1期的细胞比例与对照组中各细胞G1期的占比分别提高32.3%、45.7%、10.9%、6.2%,S期的细胞数降低19.1%、57.3%、23.1%、17.5%。细胞凋亡结果表明,经过药物处理2d后,三萜类成分能够有效的诱导卵巢癌细胞ES2、SKOV3和肺癌细胞A549和PC9的细胞凋亡,进一步验证桦褐孔菌三萜类成分具有肿瘤抑制活性。