利福霉素B氧化生成利福霉素O的工艺研究

对利福霉素B氧化生成利福霉素O的反应体系和操作条件进行了实验研究。通过实验研究发现,NaNO2为适宜的氧化剂,反应介质为甲醇和pH4.62醋酸盐缓冲液的混合体系,适宜反应温度10℃,反应时间1h。在适宜反应条件下,产物收率达到80%,而纯度达到92%以上。     

利福霉素嗯嗪稳定性的研究

研究考察了利福平合成反应中间体——利福霉素嗯嗪在不同温度下的稳定性，确定了环合反应的温度及时间。考察了浓缩过程中嗯嗪的稳定性，确定了利福平合成工艺的浓缩过程温度为85℃、时间应少于100min。     

利福霉素单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的建立

目的制备利福霉素单克隆抗体,并建立利福霉素竞争ELISA检测方法。方法通过利福霉素与载体蛋白(BSA、OVA)偶联,制备免疫原和检测抗原,用杂交瘤技术制备单克隆抗体,建立利福霉素竞争ELISA检测方法。结果筛选出5株能稳定分泌抗利福霉素单抗的杂交瘤细胞株,均分泌IgG抗体,其中2H1、5H5、3F12和2C8株的轻链是κ链,3A2株的轻链是λ链;5株单抗为同一位阻群;在碱性条件下较稳定。建立的利福霉素竞争ELISA检测法灵敏度为6ng/ml,与利福平无交叉反应,稳定性良好。结论已成功制备了利福霉素单克隆抗体,并建立了利福霉素竞争ELISA检测法。     

利福霉素噁嗪稳定性的研究

研究考察了利福平合成反应中间体———利福霉素嗪在不同温度下的稳定性,确定了环合反应的温度及时间。考察了浓缩过程中嗪的稳定性,确定了利福平合成工艺的浓缩过程温度为85°C、时间应少于100min。     

利福昔明合成工艺的研究

以利福霉素S和2-氨基-4-甲基吡啶为原料,二氯甲烷为溶剂,碘为催化剂,亚硫酸钠为还原剂,合成一种新药利福昔明。结果表明,优化工艺条件为：利福霉素S与催化剂碘的摩尔比为3∶1,2-氨基-4-甲基吡啶与利福霉素S的摩尔比为2.5∶1,反应温度为30℃,反应时间为24 h。在该优化条件下,产品的产率达85.2%。     

非均相氧化法制备利福霉素S

利福霉素S(简称S)是合成利福平的主要原料,可通过氧化利福霉素SV(简称SV)制得。针对S生产工艺中副反应多、反应介质产生设备腐蚀等问题,开发了以有机溶剂/水的非均相体系代替传统水基体系的氧化新工艺。选定乙酸丁酯/水两相体系为反应溶剂,通过分析比较5种氧化剂的氧化效果及作用机理,确定NaClO为非均相反应体系的氧化剂。并考察了NaClO浓度、NaClO与SV物质的量比、温度、反应时间及pH对反应传质过程及氧化效果的影响。结果表明:在c(NaClO)=0.3206mol/L、NaClO与SV物质的量比为1.4∶1.0、反应温度30℃、反应时间12 min、pH=12.3时,利福霉素S粗品收率及选择性最高,分别为89.02%、92.42%。与相同条件下的传统工艺相比,收率及选择性分别提高3.61%、6.74%,并且空时收率由原工艺的16.75g/(L?h)增加至139.60 g/(L?h)。     

利福昔明合成工艺的研究

以利福霉素S和2-氨基-4-甲基吡啶为原料,二氯甲烷为溶剂,碘为催化剂,亚硫酸钠为还原剂,合成一种新药利福昔明。结果表明,优化工艺条件为:利福霉素S与催化剂碘的摩尔比为3∶1,2-氨基-4-甲基吡啶与利福霉素S的摩尔比为2.5∶1,反应温度为30℃,反应时间为24 h。在该优化条件下,产品的产率达85.2%。     

利福霉素S的固液相平衡和溶解热力学

在288.15—323.15 K温度范围内,采用静态法测定了利福霉素S在5种纯有机溶剂(乙醇、异丙醇、正丁醇、乙酸乙酯和乙酸丁酯)中的溶解度,结果显示:利福霉素S在5种溶剂中的溶解度均随温度的升高而增大。使用修正Apelblat方程对溶解度的实验值进行了关联,并采用X射线衍射仪测定利福霉素S的晶型。在范特霍夫方程的基础上,对溶解过程中相关的热力学参数进行了估算,所得的溶解焓和吉布斯自由能均为正值,从而说明该过程是吸热的,而当溶液饱和后继续溶解是需要吸收能量的;并且分析了溶解过程中不同溶剂条件下焓与熵的贡献率。为制得纯度更高的利福霉素S,整体优化利福平合成工艺提供了理论指导。     

利福霉素发酵温度的过程控制

阐述在利福霉素发酵过程中,利用串级调节的方式对发酵温度进行控制,使发酵罐温度更有效地保持在抗生素合成的最适范围,从而提高了利福霉素的发酵单位、大大增加了抗生素的产量。     

体系pH值对利福霉素恶嗪环合反应的影响

基于利福平合成反应中间体利福霉素恶嗪的环合反应机制,考察反应体系的pH值对利福霉素恶嗪纯度的影响,以及调节反应体现的pH值对环合反应的温度、时间、合成利福霉素恶嗪和终产品利福平纯度和收率的影响,确定环合反应体系最佳pH值范围在5-7范围时,可以使环合反应的温度从60℃降低到55℃,反应时间由2 h缩短到1.5 h,并可以抑制副反应的发生,提高利福霉素恶嗪和终产品利福平的纯度和收率。     

Biotransformation of rifamycin B to rifamycin S using immobilised whole cells of Humicola spp. in a fluidised bed reactor

The biotransformation of rifamycin B to rifamycin S using immobilised whole cells of a Humicola sp. in a fluidised bed reactor exhibited a linear relationship between loading of the immobilised whole cells and conversion, in both batch and continuous operations; the conversion of rifamycin B was higher in batch than continuous operation for a given residence time. The immobilised whole cells were obtained by copolymerisation of the acetone-dried cells with acrylamide. They showed maximum activity at pH 7.8 and 50°C. It was found that aeration effects on the reaction in continuous operation were different from those in batch operation for the same residence time. In batch operation, the conversion of rifamycin B to rifamycin S increased with increased rate of aeration and reached a constant maximum value at aeration rates above 20.8 vvm. In continuous operation, the steady state conversion reached a maximum value in the range of aeration rate between 5.8 and 12.5 vvm; beyond this range the steady state conversion decreased steadily owing to cell leakage. The half life for the operational stability at 40°C was about 13 h.     

丁醇母液回收利福平工艺的研究

利福平又称利福霉素SV或甲哌利福霉素,是半合成的抗结核病抗生素,具有广谱抗菌作用,临床上多与其他抗结核药物合并使用,疗效显著,对结核分枝杆菌、革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌都有抑菌或杀菌作用,主要用于耐药结核植菌和耐药金葡菌的感染,亦用于抗麻风病治疗。粗品利福平母液中含较高含量的利福平,本文以溶酶萃取法回收母液中的利福平,选取合理、有效的溶剂确定最佳的回收工艺路线,以提高产品的收率,并解决环保问题。     

利福霉素SV钠盐药渣制取粗蛋白的工艺研究

对利福平生产中利福霉素SV钠盐药渣的流体类型、传质、传热等物化性质及制取蛋白饲料的可行性进行了研究。确定了用该药渣制取粗蛋白的工艺流程，考察了铝系、铁系、钙系及无机高分子水处理剂对药渣的处理效果。结果表明，采用钙系机械脱水率可达64％以上，干燥后可制得含39％的粗蛋白，年产1000t干基产品，年利润约为40万元。     

控制抗生素发酵液中的溶解氧

阐述在利福霉素发酵过程中控制溶解氧的必要性。及其在不同的发酵时期 ,怎样来控制溶解氧 ,以便提高利福霉素的发酵水平