叶生小皮伞不同发酵产物对硝酸甘油诱导偏头痛大鼠的抗炎、镇痛作用

为研究叶生小皮伞(Marasmius epiphyllus)不同发酵产物对偏头痛大鼠的抗炎、镇痛的作用,本研究采用硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛模型,观察大鼠行为学变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和多巴胺(dopamine,DA)及血清中一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的含量。结果表明,造模后,大鼠双耳发红,搔头次数频繁;与模型组比较,阳性药组和叶生小皮伞发酵物各给药组均可显著(P<0.05)提高脑组织中5-HT、NE和DA水平;除叶生小皮伞固体发酵物水提物WESF低剂量组、菌丝体水提物WEM低剂量组外,叶生小皮伞各给药组大鼠血清中NO水平均显著降低(P<0.05,P<0.001);除叶生小皮伞菌丝体水提物WEM低剂量组、发酵液LFP低剂量组外,叶生小皮伞各给药组大鼠血清中炎症因子IL-6水平显著降低(P<0.05);除发酵液LFP高剂量组外,叶生小皮伞各给药组大鼠血清中炎症因子IL-1β水平显著降低(P<0.05,P<0.001)。因此,叶生小皮伞发酵产物可调节血管收缩及神经递质分泌,对偏头痛大鼠具有良好的抗炎、镇痛作用。     

百合水提物对对氯苯丙氨酸失眠模型大鼠睡眠改善作用研究

目的 研究不同剂量的百合水提取物对对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠睡眠作用的影响。方法 大鼠腹腔注射PCPA混悬液制备大鼠失眠模型。将造模成功大鼠随机分为模型对照组、百合水提物组-低、百合水提物组-中、百合水提物组-高,另设空白对照组。百合水提物组-低 (100 mg/kg.d)、百合水提物组-中(200 mg/kg.d)、百合水提物组-高(300 mg/kg.d)大鼠连续 7 d 给予相应浓度药液,模型对照组和空白对照组连续 7 d 给予生理盐水灌胃。给药期间,观察大鼠一般状态;给药结束后,观察大鼠体质量变化、睡眠潜伏期、总睡眠时间,同时评价不同脑组织中五羟色胺、5-羟基吲哚乙酸、多巴胺含量的变化。结果 百合水提物各剂量组的大鼠在给药期间的一般状态均优于模型组,体质量增加情况也与正常对照组无显著差异;百合水提物中、高剂量组的睡眠潜伏期与模型组相比显著缩短(P＜0.05),百合水提物各剂量组的睡眠时间与模型组相比显著延长(P＜0.05);与模型对照组比较,各给药组大鼠不同脑组织中的5-HT含量显著升高(P < 0.05,P < 0.01),百合水提物中、高剂量组大鼠不同脑组织中的5-HIAA 含量显著升高(P < 0.05,P < 0.01),同时上述２个给药组大鼠的下丘脑、中缝核中的DA含量显著降低(P < 0.05),海马中仅百合水提物高剂量组的DA含量与对照组相比显著降低(P < 0.05)。结论 百合水提物具有改善PCPA失眠模型大鼠睡眠情况的作用。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中酸枣仁皂苷A含量及其药动学研究

建立高效液相色谱-质谱串联(HPLC-MS/MS)法检测大鼠血浆中酸枣仁皂苷A的含量,并应用于药动学研究。大鼠静注(4 mg/kg)或灌胃(20 mg/kg)给药,不同时间取血,血浆样品经处理后,采用HPLC-MS/MS法测定酸枣仁皂苷A含量,色谱柱为Waters YMCTM ODS-AQ S-5 120A(2.0×100 mm)分析柱,以电喷雾离子化串联质谱(ESI)及多反应监测扫描模式(MRM)进行检测,流动相为甲醇-水(0.1%甲酸)=50∶50,流速为0.3 m L/min,柱温为30℃,根据测定结果求算药物的药动学参数。酸枣仁皂苷A在40 ng/m L~4 000 ng/m L的浓度范围内线性关系良好(r2=0.999 1),各浓度水平的精密度及稳定性的RSD均小于15%,提取回收率均大于85%。大鼠注射给药后主要药动学参数分别为Ke0.28/h,t1/22.55 h,AUC0→t2 839.89 h·ng/m L,AUC0→∞3 201.51 h·ng/m L,灌胃给药后主要药动学参数分别为Ke0.51/h,t1/21.35 h,AUC0→t206.02 h·ng/m L,AUC0→∞211.13 h·ng/m L。经计算,酸枣仁皂苷A在大鼠体内的生物利用度为1.32%。本试验所建立的检测方法快速简便、精密度好、灵敏度高及稳定性好,适用于酸枣仁皂苷A在大鼠体内血药浓度测定及药代动力学的研究。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的叶酸浓度及其药动学研究

目的大鼠灌胃给予叶酸溶液后,建立其在血浆中浓度的定量方法,并用于药动学研究。方法大鼠血浆采用蛋白沉淀法进行预处理,以格列本脲为内标,采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)检测大鼠血浆中叶酸的浓度。色谱分离采用Thermo Accucore C_(18)色谱柱,流动相为乙腈和0.1%甲酸-水,梯度洗脱。MS采集选用ESI正离子及多反应监测模式。结果叶酸在10～1000 ng/ml范围内线性关系良好。方法的回收率在80.0%～95.4%范围内;批内和批间的准确度为92.7%～111.4%,批内和批间精密度为2.6%～8.3%。药动学结果显示大鼠灌胃给药后叶酸在1 h左右达到最大浓度,C_(max)和暴露量随剂量的增加而增大,但和剂量并不成线性相关。结论该方法重现性好,分析时间短,能满足大鼠血浆中叶酸浓度的检测要求,并符合2015年版中国药典对生物样品分析的要求;     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中丹参酮ⅡA磺酸钠及其毒代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆中丹参酮ⅡA磺酸钠浓度的LC-MS/MS方法,并用于毒代动力学研究。方法 30只大鼠随机分为低[10mg/(kg·d)~(-1)]、中[20mg/(kg·d)~(-1)]、高[40mg/(kg·d)~(-1)]剂量组,每组10只,雌雄各半。静脉推注给药,一日1次,连续28天。分别于D1、D28的给药前及给药后0.083,0.25,0.5,1,2,4,8,12h采集血样;用蛋白沉淀法处理血浆,采用Agilent1260-6430三重四极杆串联质谱仪测定浓度,离子化方式为电喷雾-负离子,监测方式为MRM,监测离子:丹参酮ⅡA磺酸钠:m/z 373.07→357,色谱柱:Inertsil ODS-SP色谱柱,流动相:乙腈-水,梯度洗脱。结果丹参酮ⅡA磺酸钠血药浓度线性范围为100～10000 ng/ml(r=0.9932),定量限为100 ng/ml,批内和批间准确度与精密度良好,准确度93.3%～105.6%,精密度RSD≤9.3%,专属性良好。注射用丹参酮ⅡA磺酸钠连续28天给药后在大鼠体内未见性别差异及明显药物蓄积现象。结论该法重现性好、灵敏度高、简单快速,适用于大鼠血浆中丹参酮ⅡA磺酸钠的含量测定及毒代动力学研究。     

复方甲巯咪唑软膏在大鼠体内的药动学研究

目的建立大鼠血清及甲状腺组织中甲巯咪唑(methimazole)的高效液相色谱(HPLC)测试方法及液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测试方法,并用于研究复方甲巯咪唑软膏在大鼠体内的药动学性质。方法将240只Wistar大鼠按体重随机分成4组:复方甲巯咪唑软膏高、中、低剂量(分别为25,9,1.5 mg/kg,按甲巯咪唑含量计)组及单方甲巯咪唑软膏(9 mg/kg)组。分别于颈部皮肤涂抹给药后不同时间点取血清与甲状腺组织(n=6)。采用HPLC与LC-MS/MS两种方法测定大鼠血清与甲状腺组织中的甲巯咪唑浓度,DAS2.1.1软件统计药动学参数。结果大鼠单次颈部涂抹复方甲巯咪唑软膏高、中、低剂量及单方甲巯咪唑软膏后甲巯咪唑血清AUC_(0-12h)分别为38.24±7.12,10.37±3.10,0.25±0.07,15.32±4.96 mg/(L·h);C_(max)分别为9.50±1.43,2.88±0.43,0.07±0.01,3.78±0.36mg/L。大鼠单次颈部涂抹复方甲巯咪唑软膏高、中、低剂量及单方甲巯咪唑软膏后甲巯咪唑在甲状腺组织中的AUC_(0-12h)分别为221.91±42.74,117.17±25.22,75.23±12.75,139.28±35.31 ng/(mg·h);C_(max)分别为63.29±9.60,32.34±10.20,20.71±6.09,42.33±10.71 ng/mg。结论甲巯咪唑在大鼠体内呈现线性动力学特征。相同剂量下,复方制剂与单方制剂靶部位暴露水平接近,复方制剂中氢化可的松对甲巯咪唑的药动学特征影响小,两者可配伍协同发挥药效。     

基于UPLC-Q-Exactive-MS/MS的藜麦皂苷提取物及入血成分分析

运用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道离子阱联用质谱(UPLC-Q-Exactive-MS/MS)对藜麦皂苷提取物的主要化学成分及大鼠口服入血成分进行分析鉴定。采用Hypersil Gold VANQUISH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为甲酸水-甲酸乙腈梯度洗脱,柱温30℃,分析时间35 min,流速0.3 mL·min^-1。采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子源,Full ms/dd-ms²模式检测。结果显示方法的回收率、基质效应、精密度和稳定性等均符合生物样品的测定要求。在藜麦皂苷提取物中共鉴定到15种皂苷,按苷元构型分为齐墩果酸型皂苷3种,常春藤型皂苷5种,商陆酸型皂苷6种,Serjanic acid型皂苷1种。选用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,以175.5 mg·kg^-1灌胃给予藜麦皂苷提取物,于给药后0、0.5、1、2、4 h下,眼眶取血,大鼠血浆以盐酸丁螺环酮为内标,用甲醇沉淀蛋白,离心,微孔滤膜过滤后进样分析。结果显示在入血成分中共...     

大鼠血浆中桑色素的浓度测定及其药动学研究

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中桑色素的含量,并对其在大鼠体内的药动学特征进行研究。方法以芫花素为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Thermo Hypersil GOLD-C_(18)(50 mm×4.6 mm,3μm)色谱柱进行梯度洗脱,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),进样量2μl,柱温40℃,流速0.5 ml/min。质谱采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式,以多反应监测模式(MRM)检测。桑色素和内标的定量离子对分别为m/z 300.9→151.2和283.1→268.2。结果桑色素的浓度在1.01～504.2 ng/ml范围内线性良好(r2≥0.99);定量下限为1.01 ng/ml;精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性均符合生物样品的分析要求。结论本方法可满足大鼠血浆中桑色素的测定及药动学研究的要求。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠体内凤仙萜四醇苷B血药浓度及其药动学研究

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆样品中凤仙萜四醇苷B浓度的方法,并进行药动学研究。方法取6只大鼠,尾静脉单剂量注射凤仙萜四醇苷B 1.0 mg/kg,分别于给药前和给药后2,5,20,40,60,90,120,180 min眼眶隐静脉丛采血,采用LC-MS/MS测定其血药浓度,并采用DAS计算药动学参数。结果凤仙萜四醇苷B在大鼠体内的主要药动学参数t_(1/2z)为0.518±0.114 h,C_(2min)为159.11±9.17 ng/m L,AUC0-t为142.86±23.53 ng·h/m L。结论本方法选择性好、灵敏度好、准确度高,可为下一步该化合物临床前药动学研究提供方法学依据。     

高效液相测定虾青素的含量

建立虾青素的含量及有关物质的反相高效液相色谱测定方法。采用Discovery-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-丙酮-水(76∶15∶9)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为482nm,柱温为30℃。在所选定的液相色谱条件下,有关物质与主药分离良好,虾青素在636μg/mL范围内线性良好,检出灵敏度为11ng/mL,平均回收率为100%,RSD为0.29%。     

玉米大豆复合肽体内ACE抑制活性研究

为了考察玉米大豆复合肽的体内抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性,采用自发性高血压鼠(SHR)为模型,进行了一次性给药和长期给药动物试验,并以卡托普利(Captopril)作为阳性对照,采用尾袖法测定SHR的血压变化.结果表明:一次性给药后,中(50 mg/kg·bw)、高剂量(100 mg/kg·bw)玉米大豆复合肽(CSP)组的降血压作用可一直持续3 h,血压值降低达显著水平(P<0.05);长期试验中,每日给予CSP,12 d后开始,与模型组SHR比较,中剂量组(25 mg/kg·bw)和高剂量组(50 mg/kg·bw)的SHR血压值均明显降低(P<0.05～P<0.01);高剂量(50 mg/kg·bw)给肽组的降血压效果略好于Captopril组,并对正常大鼠的血压无影响;CSP对大鼠有增加体重的作用.因此CSP对SHR具有良好的短期和长期降血压作用,并对正常血压大鼠无影响;CSP同时是大鼠良好的营养剂.     

HPLC-MS/MS测定阿齐沙坦在大鼠血浆中的浓度及其药动学研究

目的灌胃给予大鼠1,3,9 mg/kg阿齐沙坦后,建立其在血浆中浓度的定量方法,研究其体内暴露量与剂量的相关性。方法采用蛋白沉淀法处理大鼠血浆样本,以缬沙坦为内标,采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)检测大鼠血浆中阿齐沙坦的含量。色谱分离采用Thermo Accucore C_(18)色谱柱,流动相采用乙腈和0.1%甲酸-水,梯度洗脱。MS采集选用ESI正离子及多反应监测(MRM)模式。18只SD大鼠随机分成3组,分别灌胃给予1,3,9 mg/kg阿齐沙坦,均于不同时间点采集全血。采用Phoenix Build 8.1.0.3530非房室模型计算药动学参数。结果阿齐沙坦在20～20 000 ng/ml范围内线性关系良好。方法的回收率在98.2%～106.0%范围内;批内和批间的准确度RE为-13.3%～8.4%,批内和批间精密度RSD为2.9%～16.3%。大鼠灌胃给予1,3,9 mg/kg阿齐沙坦后C_(max)和AUC_(0-t)分别为2686,7298,27 999 ng/ml和22 246,55 460,186 446 h·ng/ml。结论该方法操作简单,分析时间短,能满足阿齐沙坦在大鼠血浆中浓度的检测要求。药动学结果显示大鼠灌胃给予1～9 mg/kg的阿齐沙坦后其C_(max)和AUC_(0-t)随剂量的增加基本成比例增加。     

恩诺沙星注射液在猪体内残留消除规律研究

目的研究恩诺沙星注射液在猪体内的残留消除规律。方法本实验采用30头约50 kg重长白猪,随机分为2组,给药组25头,对照组5头。给药组用药量为每次2.5mg恩诺沙星/kg,每日1次,连用3d(1个疗程),使用1个疗程,对照组不给任何抗菌药物,与给药组同环境饲养。在最后一次给药6 h、24 h(1 d)、72 h(3 d)、120 h(5 d)、168 h(7 d)时采集肉、肝、肾、脂肪样本,经液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)测定组织中的恩诺沙星及其代谢物环丙沙星残留量之和,并利用WT1.4软件计算休药期。结果恩诺沙星注射液在猪肉中的休药期为3.17 d;在肾脏中的休药期为3.75 d;在肝脏中的休药期为8.18 d;在脂肪总的休药期为4.09 d。结论为保证兽药使用安全、食品安全和消费者健康,推荐恩诺沙星注射液在猪体内的休药期为9 d。     

双柱在线净化系统快速检测动植物油脂中的苯并(a)芘

该文建立了双色谱柱在线净化-超高速液相色谱仪联用检测动植物油脂(猪油、花生油、茶籽油、大豆油、调和油)中苯并(a)芘方法。采用正己烷-异丙醇溶液提取试样中苯并(a)芘,提取液过滤后进样,利用试验组建的双色谱柱系统进行在线净化,第一根色谱柱为分离、富集柱,采用Kromasil反C₁₈(4. 6 mm×150 mm,5μm)柱;第二根色谱柱负责进一步分离苯并(a)芘,采用Chrom Spher pi(80 mm×3. 0 mm,5μm)色谱柱。试验结果表明,样品中苯并(a)芘含量在1. 0～20. 0 ng/mL,与峰面积呈良好线性关系,相关系数r²为0. 999 6,检出限为0. 08μg/kg,在1. 00、5. 00、10. 00μg/kg加标水平下,加标回收率为82. 0%～91. 6%,相对标准偏差为1. 89%～4. 29%。该方法可用于常见动植物油脂等易受苯并(a)芘污染的样品的快速检测。     

HPLC-ELSD法测定新疆药桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量

该研究采用高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定新疆药桑叶中1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)的含量,色谱柱为Waters XBridgeTM HILIC(2.1 mm×100 mm, 5 μm),乙腈-水(85∶15, V/V)为流动相,流速0.2 mL/min。结果表明,1-DNJ在1.2～12.0 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,平均回收率为98.25%,相对标准偏差(RSD)为1.16%。该方法快捷简便、结果可靠,可用于药桑叶中1-脱氧野尻霉素含量的分析检测。     

蚕沙中叶黄素和β-胡萝卜素的含量测定及提取条件优化

目的 建立同时测定蚕沙中叶黄素、β-胡萝卜素含量的方法,并优化其提取条件.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),全程避光操作.色谱柱为Agilent 5 TC-C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-乙腈(B)-二氯甲烷(C)-水(D)为流动相,梯度洗脱,切换检测波长(442,450 nm),...     

成瘾剂量下烟碱对大鼠的毒性损伤

为研究成瘾剂量下烟碱对大鼠的毒性作用,采用皮下注射方式和条件位置偏好(CPP)装置构建了SD大鼠的烟碱依赖模型,考察了成瘾初期和持续期SD大鼠对烟碱依赖的变化,并对烟碱成瘾大鼠血常规、血生化等生理指标以及各器官的病理学改变进行了研究。结果表明:(1)采用0.2 mg/kg给药剂量,在第5次给药周期后,大鼠形成了稳定的烟碱依赖,在持续给药的过程中大鼠对烟碱的依赖程度呈现先升高后与成瘾初期持平的趋势。(2)烟碱能引起大鼠炎症相关指标嗜酸性粒细胞百分率(EOS)表达量下调,以及肝脏损伤相关指标γ-谷氨酰转肽酶(GGT)及总胆红素(TBIL)的上调;(3)烟碱暴露在一定程度上能引起大鼠的肾脏和肝脏轻度水肿;肺部有较明显病理症状,且以炎症为主。因此,成瘾剂量(0.2 mg/kg)暴露下烟碱会对大鼠产生轻度的毒性,对肺部、肝脏及免疫系统造成一定的毒性损伤。     

加速溶剂萃取-高效液相色谱法同时测定婴幼儿纺织品中的13种荧光增白剂

建立了同时测定婴幼儿纺织品中13种荧光增白剂(FWAs)的加速溶剂萃取-高效液相色谱(ASE-HPLC)方法.样品用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)-水(体积比6:4)混合溶液提取,120℃静态萃取5 min,冲洗体积60％,循环3次.采用Agilent Eclipse XDB-C18(250.0 mm×4.6 mm×5...     

参精运动保健饮料对运动性疲劳大鼠的影响

目的:研究参精运动保健饮料对运动性疲劳的影响,探讨其抗疲劳机制。方法:采用力竭游泳运动疲劳模型,将50只大鼠随机分为空白对照组、运动疲劳组,参精运动保健饮料10.0、5.0、2.5 mL/kg 3个剂量组,每天灌胃给药。运动疲劳组和给药组给药后0.5 h进行力竭游泳训练,连续14 d。取血清测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿素氮(BUN)含量;取下丘脑测5-羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱(Ach)、多巴胺(DA)和γ-氨基丁酸(GABA)含量;取腓肠肌测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌糖原(MG)。结果:与运动疲劳组比较,参精运动保健饮料能明显降低CK、LDH活性、减少BUN浓度(P0.05或P0.01);能明显降低下丘脑5-HT和GABA含量,增加Ach、DA含量(P0.05或P0.01);能明显降低腓肠肌MDA含量、增加SOD、MG含量(P0.05或P0.01)。结论:参精运动保健饮料可能通过调节中枢系统、增加能量储备、提高代谢能力、清除自由基等多种途径发挥消除运动性疲劳作用。     

HPLC-PDA测定不同产地、不同部位明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的含量

目的 建立一种明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的快速检测方法,测定不同产地、不同部位明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的含量.方法 采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA),硅胶色谱柱Thermo NO.30005-254630(4.6 mm×250 mm,5μm),0.1％甲酸溶液(A)-甲醇(B),梯度...