应用代谢工程超量生产1,6—二磷酸果糖

在代谢工程理论的指导下判断了ＦＤＰ合成途径中的结合和刚性结点，并用化学因子调节代谢流量的分配以超量生产ＦＤＰ。实验发现，ＦＤＰ成途径中Ｇ６Ｐ、ＦＤＰ和ＰＥＰ分支点为主要结点，其中ＰＥＰ结点为刚性结点。     

固定化黑曲霉生产柠檬酸的研究

将黑曲霉(Aspergillus niger)菌丝体及孢子联合包埋在海藻酸钙凝胶中,用于生产柠檬酸。确定了包埋固定化的最佳条件:海藻酸钠浓度2.0～2.5%,氯化钙浓度5.0～10.0%。确定了固定化微生物摇瓶发酵生产柠檬酸的条件为:蔗糖12%,发酵液初始pH 值3.0,培养温度35℃等。对固定化微生物半连续发酵生产柠檬酸进行了初步探索。     

重组大肠杆菌生产hEGF发酵条件的研究

在摇瓶条件下,研究了发酵条件对重组大肠杆菌JLU菌株hEGF表达的影响．研究表明,最适的发酵条件是温度在32℃、pH6．6～7．3、初始葡萄浓度5g／L、装液量30mL／250mL三角瓶,并发现在发酵培养基中用0．5g／L甘油代替5g／L葡萄糖作为发酵碳源会进一步提高hEGF的表达水平,提高幅度可达15．5％．     

利用稻米发酵生产柠檬酸工艺的研究

以稻米为原料生产柠檬酸，是以我国南方长期积压的早稻米为原料，采用天津工微所选育的黑曲霉菌种ＴＤ－０１６８，经过深化层工艺而实现的。本项研究从实验室摇瓶小试到中试，及１２０ｍ＾３发酵罐生产，均取得了成功，其发酵总指标均达到和超过原有著干工艺，其生产指标为：产酸率１４％，转化率９５％，发酵周期７０ｈ。     

重组大肠杆菌生产人表皮生长因子的发酵条件

通过质粒转化实验,获得了较好的产hEGF重组菌,对重组菌发酵进行优化,获得最佳初始糖质量浓度为5g/L、蛋白胨20g/L、酵母抽提物10g/L、（NH4）2HPO43．5g／L、Amp100mg/L;最佳接种时间为种子液生长到5－6h,即菌体OD值在1．0－2．0;诱导剂最佳添加时间为8h,即菌体OD值在8．0左右,通过流加发酵进行高密度培养,可使重组菌的hEGF的产率达102mg/L,比优化前提高了近30％。     

大肠杆菌中乙醇合成途径的构建

采用PCR技术扩增了运动发酵单孢菌Zymomonas mobilis的两个产乙醇的关键酶基因pdc和adhⅡ，分别克隆到载体pUC19和pUC18中，形成重组质粒pUC19::pdc和pUC18:adh，从中分离出两基因并串联到经Eco RI酶切的pUC18中，转化大肠杆菌E.coli DH5a获得重组质粒pPA。携带pPA的重组菌Pp a被证明具有丙酮酸脱羧酶酶活且提高了乙醇脱氢酶酶活。通过代谢工程在Escerichia coli中成功地构建了乙醇合成途径。     

以苹果渣为原料固态发酵生产柠檬酸的研究

本文对以苹果渣为原料固态发酵生产柠檬酸的若干技术问题进行了研究。在单因素试验的基础上，通过正交试验得出了产柠檬酸的最佳工艺条件，最高产柠檬酸量为７８克／千克果渣．     

薯干原料深层发酵柠檬酸生产中污染菌的分离与防治

本文结合生产实践对薯干原料深层发酵生产柠檬酸工艺中的污染菌的分离与防治．进行了实验研究。     

重组大肠杆菌生产人血管抑素的发酵条件

对重组人血管抑素表达菌株pQE32-AGN的生长及产物表达规律进行了探索，确定了最佳发酵条件．培养温度为37℃，初始pH7．0，OD600为0．8～1．0时开始诱导，诱导持续时间为6h，诱导剂浓度为0．1mmol／L，最终目的产物达到菌体总蛋白的35％，rhAGN的表达量达到560mg／L．     

MgCl2对黑曲霉柠檬酸发酵影响

黑曲霉柠檬酸发酵培养基中添加０．０８－０．１５ｍｇ／Ｌ的ＭｇＣｌ２,对菌体浓度没显著性影响,但可使柠檬酸产率提高４％－７％,发酵旺盛期断氧３０ｍｉｎ的实验结果与正常发酵结果对照表明,添加０．１ｍｇ／Ｌ ＭｇＣｌ２的摇瓶产酸率下降１６．２％;空白对照摇瓶产酸率则下降５６．８％,通过对柠檬酸合成酶「ＥＢ４．１．３．７」酶活测定及活体染色计数,我们认为,断氧条件下,０．１ｍｇ／Ｌ ＭｇＣｌ２使黑曲霉存活     

柠檬酸发酵废水的循环再利用

利用柠檬酸发酵废水，添加适量营养盐生产饲料酵母，摇床培养１６ｈ，干酵母产量可达１１．８ｇ／Ｌ（绝干计）。进一步研究了提取单细胞蛋白后的二次废水代替部分自来水与经预处理的二次废水代替部分自来水与经预处理的二次废水作为柠檬酸发酵配料用水的工艺参数。研究结果表明发酵产酸率与对照组比较基本一致，发酵用水可循环利用。     

培养基组份对柠檬酸木薯液化清液发酵的影响研究

通过50L发酵罐试验,研究了培养基组份:初糖浓度、玉米蛋白粉添加量、(NH4)2S04添加量对柠檬酸发酵的影响。研究结果表明:发酵时间60h,最佳培养基构成:20%的初糖浓度,250g玉米蛋白粉,0.5%的(NH4)2S04。发酵最终产酸19.1%,糖酸转化率为95.5%。     

A.niger2363—2^#产柠檬酸影响因素的研究

以选出的A.niger2363—2~#为柠檬酸发酵用试验菌,研究了糖源、糖浓度、氮源、氮浓度、培养初始pH值、培养温度,培养基灭菌前与后调pH值等因素对其产酸的影响,并确定了其最佳培养条件。实验发现培养基灭菌后调pH值优于灭菌前调。     

从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸的方法

总结了国内外从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸的主要方法,并详细阐述了萃取法、离子交换吸附法、电渗析法和膜法分离的原理、研究进展、优缺点及应用概况.     

重组大肠杆菌生产谷胱甘肽合成酶系的摇瓶发酵条件

研究了重组大肠杆菌E.coli II-1摇瓶发酵生产谷胱甘肽合成酶系的工艺条件,确定了E.coli II-1的最适产酶条件,最佳发酵培养基组成（ g/L)为：葡萄糖10,蛋白胨5,酵母膏2．5,K2HPO4．3H2O 4．0,KH2PO4 1．0,FeCl3 0.2 ,MnCl2.01,CoCl2.01,CaCl20.1,ZnCl2 0.02,H3BO3 0.01,NaMoO4 0.01,NaCl1.0,Na2SeO3 0.02,发酵起始PH7．2,灭菌后加入无菌氨苄青霉素至100ug/mL,每个三角瓶装液量为100毫升,培养前期的温度控制在37度,后期将温度降为35度,拥护档转速200r/min,发酵周期16h,在此条件下,重组大肠杆菌E.coliII-1的谷胱甘肽合成酶系的活性为862．3U／L。     

从柠檬酸发酵废液中开发糖化酶制剂的初探

对柠檬酸发酵废液开发糖化酶制剂进行了初步探索。实验表明,获得了的菌粉具有较高糖化力,最适作用温度为６０℃,最适ＰＨ值为４．６,菌粉酶活达４５００单／克干菌体。可用于酒精生产,对降低柠檬酸生产的污染负荷和成本具有实际意义。     

高左旋多巴合成活性的重组大肠杆菌培养条件优化

对重组大肠杆菌进行培养条件的研究,得到细胞合成L－DOPA最佳培养条件为：L－tyro-sine0.2%,KH2PO4 0.2%,MgSO4.7H2O 0.1%,FeSO4.7H2O 0.001%,ZnSo4 0.001,磷 酸吡哆醛0．005％,牛肉膏0．5％,蛋白胨2％,DL－Alaninie0.1,温度37度,PH值7．0,培养时间16h,摇瓶转速150r/min。