非蛋白氮对单细胞蛋白生产菌株生长影响的研究

主要研究了非蛋白氮对选育的山芋淀粉渣单细胞蛋白生产菌株生长的影响。采用选育的扣囊拟内孢霉 K991株、产朊假丝酵母 C986株、绿色木霉 T995株混合发酵山芋渣生产单细胞蛋白 ,结果表明适宜的非蛋白氮可有效促进不同发酵方式中菌株的生长。尿素添加量在质量分数为 2 .5 %时对扣囊拟内孢霉 K991单菌株生长有利 (7.7× 1 0 8个 /g) ,在质量分数 2 %对产朊假丝酵母 C986单菌株生长较好 (1 .2× 1 0 7个 /g)。多菌株混菌发酵好于单菌株发酵 ,尿素或硫酸铵添加量均在质量分数为 2 .0 % ,产朊假丝酵母 C986菌数和产品蛋白含量较高 ,分别为 7.0× 1 0 7个 /g和 2 5 .82 %。     

用大豆乳清废水生产单细胞蛋白

根据大豆乳清废水特性,直接发酵热带假丝酵母、产朊假丝酵母、白假丝酵母、皱褶假丝酵母、白地霉、蓝莓酵母、核酸酵母、酒精酵母等8种酵母菌,其中产朊假丝酵母的产量最大。对产朊假丝酵母利用大豆乳清废水培养条件进行优化,确定了装液量为20%、接种量5%、培养温度28℃、培养时间22h为适宜条件,优化后其菌体干重产量达到3.26g/L,粗蛋白量为36.1%(菌干重),单细胞蛋白产量达到1.18g/L。乳清废水中COD和BOD5去除率分别达到67.6%和63.2%。     

一株降解棉酚的酵母菌培养特征及发酵效果分析

通过比较不同酵母茵在以醋酸棉酚为唯一碳源的固体培养基上的生长状况,筛选出一株在醋酸棉酚培养基中生长较好的产朊假丝酵母1087。酵母茵生长曲线测定结果表明,产朊假丝酵母1087在以醋酸棉酚为唯一碳源的液体培养基中,37℃、170r／min摇床条件下培养20h总菌数达到最大值。以产朊假丝酵母1087为接种剂,以棉粕和红薯渣等为主要原料的固体发酵试验,结果表明,发酵后的样品粗蛋白含量提高了37．4％,棉酚含量下降了55．6％。     

一株产酯酵母的鉴定及发酵性能研究

从食品样品中分离到一株产酯酵母菌株5-1Y,进行形态观察、26S r DNA D1/D2区域序列比对分析,鉴定其为酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).对其进行糖发酵试验、凝聚性试验和发酵力试验,结果表明:该菌株能利用葡萄糖、蔗糖和果糖,不能利用乳糖、麦芽糖和D-木糖;该菌株凝聚性弱,发酵速度快;用12°Brix的麦芽汁培养基于28℃对该菌进行10 d的培养后,测得其表观发酵度为48.33%,真正发酵度为56.67%,发酵率为32.34%.同时,试验还进一步考察了初始p H、温度、培养基的酒精度等对不同条件下培养了3 d的该酵母的生长和产酯量的影响.     

酵母菌处理大米淀粉废水的工艺研究

研究了利用不同酵母菌株处理大米淀粉废水的效果,以及温度、pH、摇床转速对废水处理的影响。结果表明:利用产朊假丝酵母1087处理大米淀粉废水效果最佳。在不灭菌条件下,酵母菌接种量为5%、培养温度30℃、转速160 r/min的情况下,培养24 h后,大米淀粉废水pH从初始4.0上升至8.15,COD从6 250 mg/L降为3 087 mg/L,COD去除率为50.5%。产朊假丝酵母1087在大米淀粉废水中连续传代5次均能保持稳定。     

南极假丝酵母诱变育种及产脂肪酶条件优化

通过紫外诱变、硫酸二乙酯诱变及复合诱变,对南极假丝酵母菌种进行了选育,筛选出一株高产菌株UDAan-1,其酶活达到42.7 U.mL-1,为原始菌株的1.8倍。在摇瓶条件下对发酵培养温度、初始pH值等南极假丝酵母诱变菌株产酶工艺参数进行了优化。最终确定了各发酵工艺参数:培养温度26℃,初始pH值6.5,发酵用菌种培养20h,接种量6%(体积分数),摇床转速200 r.min-1,250 mL摇瓶装液量50 mL,表面活性剂选用0.1%吐温-80(体积分数)。     

白假丝酵母的形态及理化鉴定

在实验室里对白假丝酵母进行分离培养,并且通过形态特征,生理特征对其进行初步的鉴定。鉴定结果显示:糖发酵实验中白假丝酵母发酵葡萄糖产酸产气,不发酵蔗糖;碳源同化实验中显示白假丝酵母对碳源化合物均有同化作用。     

大豆乳清废水发酵生产单细胞蛋白的酵母

为回收大豆乳清废水中的生物质资源,以白地霉(G.candidum link)、产朊假丝酵母(C.utilis)、热带假丝酵母(C.tropicalis)、解脂假丝酵母解脂变种(C.lipolytica var.lipolytica)和扣囊复膜孢酵母(S.fibuligera)5种常见的工业酵母菌,通过摇瓶发酵,进行大豆乳清废水的单细胞蛋白(SCP)生产试验研究.结果表明,被试5种酵母菌均能在大豆乳清废水中快速增殖,适宜的接种量为0.3～0.4 g/L;在废水COD质量浓度11150 mg/L、初始pH6.2、25℃、180 r/min等条件下发酵12 h,C.lipolytica var.lipolytica的细胞产量最高,可达2.35 g/L,对废水COD的去除率可达48.3%;在对数期生长期,S.fibuligera的细胞增殖速率、收获SCP的蛋白质含量和蛋白质产量分别为0.36 g/(L.h)、39.7%和0.88 g/L,居于被试5种酵母之首.C.lipolytica var.lipolytica和S.fibuligera是处理大豆乳清废水并回收SCP的最适酵母.     

一株适宜于Kefir发酵的优良酵母菌的筛选与鉴定

为制备开菲尔(Kefir)新型发酵剂,发掘一株产气适中、耐受性高、使发酵乳具有沙口感且风味独特的酵母菌,利用YPD培养基从甜瓜曲中分离纯化出4株产香酵母菌,分别编号为TN₁、N2、Z2、HX。通过耐酸、耐酒精及耐高温试验对4株酵母菌进行初筛、复筛,使用固相微萃取-气质联用色谱(SPME-GC-MS)对其中两株发酵乳香气物质成分进行主成分分析,并将最终得到的菌株进行分子生物学鉴定。结果表明：4株酵母菌中TN₁、N2耐受性高,生长迅速,发酵性能较佳;TN₁发酵牛奶产生的香气物质种类最多,典型味物质的含量适中,产生的香气更佳,更适合后续Kefir酸乳的开发;结合TN₁菌株的分子生物学分析结果,该菌株与NRRL Y-12632菌株同源性为100%,将TN₁鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。研究结果为开发Kefir发酵乳发酵剂奠定了基础。     

海参肠道中高产胞外多糖酵母的筛选及发酵条件

从大连海域的海参肠道中筛选得到一株产胞外多糖较高的酵母菌HS-J9,经形态学和26SrDNA序列分析,初步鉴定为季也蒙假丝酵母(Meyerozyma guilliermondii),GenBank检索号为KF668241。采用苯酚-硫酸法和响应面法对该高产菌株进行胞外多糖测定及发酵条件优化。通过单因素试验确定了pH、接菌量和发酵时间3个主要因素对发酵产糖量的影响,根据Box-Behnken中心组合设计原理确定显著性因子的最佳水平,并以胞外多糖产量为响应值进行回归分析。结果表明,当pH为6.6、接菌量4%、发酵时间41.3h时,HS-J9的胞外产糖量最大,为0.762 mg/mL,比优化前的产胞外多糖量(0.616mg/mL)提高了23.67%。     

高强度产甘油假丝酵母突变株的选育及其发酵性状

以一株产甘油假丝酵母为出发菌株，采用化学诱变，通过玉米浆和外加无机磷组成的磷质量浓度为340mg/L的磷源选择培养基，得到了一株发酵时间较原菌株缩短了8h左右，产甘油能力（甘油产量约为140g/L，甘油转化率为56％）和原菌株相似的突变株，并研究了突变株的发酵性状。     

双重筛选产甘油假丝酵母营养缺陷型菌株及其发酵性能

运用化学诱变的手段,以亚硝基胍为诱变剂,以产甘油假丝酵母ＷＬ２００２－５为出发菌株,诱变获得２７株尿嘧啶缺陷型突变株,并对所获菌株进行了传代稳定性和稳定性试验,其中１＃、２２＃、２３＃、２５＃、２６＃菌株稳定性优良,适宜作为进行酵母转化的带有遗传标记的工具菌株,同时从所获突变株中选出两株进行生长特性的研究和发酵性能的检测,研究表明,缺陷型菌株的生长速度明显慢于亲株,但 产甘油的性状并没有较大的改变     

同化沉淀能力强的酵母菌Y—9601株生物学特征鉴定及其应用

对从土壤中筛选到的酵母菌Ｙ－９６０１株进行了形态培养特征及生长特性的研究。该菌株以多边芽殖方式进行无性繁殖,形成子囊孢子。在无维生素培养基上生长。同化和发酵葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、１／３棉子糖,不同化乳糖及硝酸钾。同化淀粉、纤维二糖及Ｄ－木糖能力强,对淀粉具有较强的酒精发酵能力,鉴定为酵母属糖化酵母种,其最适生长温度为３０～３４℃,最适生长ｐＨ值为５．０～６．０,在麦芽汁中液体培养倍增时间为     

产甘油假丝酵母酸性磷酸酯酶突变株的选育及其性质研究

运用化学诱变法从高产甘油的工业生产菌株－产甘油假丝酵母ＷＬ２００２－５筛选获得两类酸性磷酸酯酶突变株。一类为阻遏型酸性磷酸酯酶缺失突变株；另一类为对磷调节不敏感的部分去阻遏调节突变株，并研究了它们的发酵性能。     

混合酵母菌株酒精发酵过程对葡萄糖和果糖利用的差异性研究

研究了酿酒酵母GJ2008和酿酒酵母GGSF16不同接种比例(V/V)在酒精发酵过程中葡萄糖和果糖利用的差异性,为蔗汁木薯粉酒精发酵提供研究基础.以等质量浓度的葡萄糖与果糖(总糖220 g/L)混合进行酒精发酵,调节酿酒酵母GJ2008与GGSF16不同接种比例(10∶0,8∶2,6∶4,4∶6,2∶8,0∶10,以初始酵母数为4.0×10~7CFU/mL)进行酒精发酵,测定发酵过程中总糖﹑葡萄糖﹑果糖﹑乙醇的变化,采用曲线下面积法和糖代谢一半与代谢完全所需时间法对两种糖利用差异性进行分析.结果表明:果糖的利用速率小于葡萄糖的利用速率,随着酵母菌株GGSF16接种量的增加,葡萄糖利用速率加快,整个发酵过程中,混合酵母菌株对果糖代谢的影响程度高于其对葡萄糖的影响程度;两种酵母菌株的接种比例对乙醇产量无明显影响;相比较之下,0∶10组总糖发酵效率和耗糖发酵效率均较高;因此,酿酒酵母GJ2008和GGSF16最佳接种比例为0∶10(V/V).     

用啤酒废水培养产朊假丝酵母的研究

本文对用啤酒废水培养产朊假丝酵母Ｎｏ１４２２进行了研究。通过正交实验寻得培养该菌的最佳条件为：培养温度３２℃，ＰＨ４．６、Ｃ／Ｎ为９。培养后啤酒废水ＣＯＤ去除率为６８％、干菌蛋白质含量为６６．４４％。含高浓度有机物的啤酒废水适于培养产朊假丝酵母Ｎｏ１４２２生产单细胞蛋白。     

混菌发酵竹笋壳产单细胞蛋白培养基及发酵条件的研究

为提高生物质利用率,探索新型饲料资源,采用Plackett-Burman设计对影响黑曲霉、产朊假丝酵母混合发酵竹笋壳产SCP的培养基组分进行评估.结果表明:影响发酵粗蛋白产量的关键因素有麦麸、尿素、初始含水量、温度、时间和接种量.在此基础上,采用响应曲面法分别对发酵培养基组成和发酵条件进行优化,获得最佳发酵方案（以100 g干物质计）为:竹笋壳粉78 g、葡萄糖1 g、麦麸20.3 g、NaNO₃ 0.3 g、KH₂PO₄ 0.15 g、MgSO₄·7H₂O 0.2 g、FeSO₄·7H₂O0.001 g,初始含水量为68 mL,pH自然;黑曲霉接种量（W/W）为12%,单菌发酵温度为28℃,培养48 h后以36%（V/W）接种量接入产朊假丝酵母,31℃下混合发酵56 h.验证试验表明,粗蛋白最大含量为12.85%,与预测值12.80%较接近,比优化前提高52.6%.     

康宁木霉固态发酵中药渣制备蛋白饲料

考察了营养源和其它条件对康宁木霉固态发酵中药渣的影响,采用正交实验优化了发酵条件,同时在单菌种发酵的基础上,对康宁木霉和产朊假丝酵母混合发酵进行了初步探索.研究结果表明,利用康宁木霉固态发酵中药渣生产蛋白饲料是可行的;在优化发酵条件下,即氮源添加量为30 mg硫酸铵/g干药渣、初始pH 4.0、固液比1∶2、发酵时间4 d,中药渣中真蛋白含量由11.12%提高至17.80%,粗纤维含量由29.14%降低至17.50%.     

Biodegradation of Ammonia Nitrogen Using a Novel Candida sp. Strain N6 Immobilization

固定化假丝酵母菌株N6降解氨氮的研究

王 凯^1,2，孙亚文¹，李斯琪¹，张瑛洁¹，程喜全¹，马 军²

（1. 哈尔滨工业大学(威海)， 海洋科学与技术学院，山东 威海 264209；

2. 哈尔滨工业大学 市政与环境工程学院，哈尔滨 150090）

创新点说明：

发现一株假丝酵母菌株，具有较高的氨氮降解能力，采用固定化技术，将其固定化后用于模拟生活污水的处理效果仍然显著，表明将该菌固定化后具有较高的应用价值。

研究目的：

将高氨氮处理效率的菌株N6固定化，以期通过固定化的形式将其应用于废水处理中。

研究方法：

从山东威海金海湾排污口分离出一株假丝酵母菌，该菌株具有较高的氨氮处理效率。采用包埋固定化技术将N6固定，考察了固定化N6的氨氮降解能力以及稳定性，通过单因素以及正交试验确定了固定化材料以及最佳固定化条件。利用SBR反应器探究固定化N6的应用情况。

研究结果：

1）当固定化材料PVA, SA, CaCl2的浓度分别为9%, 1.5%, 2%时最适合N6固定化，在此条件下，固定化N6的氨氮去除率达到了97.97%。

2）稳定性测试表明固定化N6具有很强的稳定性，固定化小球在测试条件下未出现破碎现象。

3）固定化N6的最佳固定化条件为：固定化24h，N6接种量3%，pH 8。

4） 固定化N6在SBR反应器中表现出非常好的氨氮降解能力，去除率稳定在95%-99%。

5）在固定化N6的应用过程中，最适添加量为15%。

结论：

固定化高效菌株用于废水处理具有广阔的前景。高氨氮处理效率的假丝酵母N6固定化后氨氮降解能力仍然较强。固定化N6具有潜在的应用价值，将固定化N6应用到SBR中，具有较高且稳定的氨氮去除率。

关键词：氨氮废水；固定化；假丝酵母菌属；脱氮效率

     

产木糖醇菌株的筛选及发酵条件优化

从玉米芯中筛选到1株高效转化D-木糖为木糖醇的酵母菌株e。经形态学鉴定及26S rDNA D1/D2区序列分析,将菌株e鉴定为Trichosporon coremiiforme(丝孢酵母)。采用单因素及正交试验优化设计研究了发酵法生产木糖醇的工艺,结果表明:酵母菌株e发酵法生产木糖醇的工艺参数为:碳源质量浓度为40g/l,氮源质量浓度为6g/l,起始pH为7,接种量为6%。