聚硫堇修饰的一次性酶传感器检测 辛硫磷农药残留

目的研制一种用于蔬菜中有机磷农药残留快速检测的电化学酶传感器。方法通过循环伏安法将电子媒介体硫堇电聚合在丝网印刷电极上作为电子传递体,用壳聚糖凝胶将乙酰胆碱酯酶固定于聚硫堇电极表面,制成一种新型的有机磷农药生物传感器。结果在有机磷农药辛硫磷浓度为0.01~500μg/m L范围内,酶电极抑制率(%)与辛硫磷的浓度(c)的对数呈良好的线性关系,相关系数为0.9886,检出限以抑制率10%的农药浓度计算为0.006μg/m L。结论研制出成本低廉,使用方便,具有响应快、灵敏度高的有机磷农药生物传感器,可应用于果蔬中有机磷农药的快速检测。     

固定化小麦酯酶生物传感器的制备及应用

将固定化酶膜与精密酸度计的玻璃电极连接制备出了生物传感电极探头,并对两种常见的有机磷农药乐果和敌百虫进行测试,结果:乐果浓度在1×10-8～1×10-3mol/L内与小麦酯酶的抑制率呈线性关系,回归方程为y=13.02x+118.7,相关系数为0.995,最低检出限(LDC)为1.7×10-9mol/L;敌百虫浓度在1×10-8～1×10-3mol/L内与小麦酯酶的抑制率呈线性关系,回归方程为y=13.08x+112.7,相关系数为0.997,LDC为1.1×10-8mol/L。以国家标准方法测得结果为对照,进行实际样品检测,检测方程得出的结果回收率为真实值的87.9%～92.3%,而生物敏感膜重复使用20次以内其酶活保存率为初始酶活的90%左右。因此,此传感器可以应用于现场有机磷农药的实验检测等。     

基于脂质体反应器的酶纳米生物传感器在敌敌畏快速检测中的应用

采用脂质体技术制备乙酰胆碱酯酶的微反应器,并以微反应器、壳聚糖和二氧化硅为基质,构建以多层纳米酶膜修饰电极为核心的有机磷农药残留快速检测酶电化学生物传感器。结果表明,酶脂质体微反应器平均粒径为（7.26±0.75）μm;修饰电极多层酶膜的最佳层数为6 个双层;以敌敌畏作为有机磷农药模型,分别在其浓度为0.25～1.75 μmol/L和2.00～10.00 μmol/L线性范围内,传感器的峰电流值与乙酰胆碱酯酶抑制率呈现出良好的线性关系,回归方程分别为I=28.58C＋5.35和I=2.38C＋51.25;最低检出限为（0.72±0.065）μg/L（信噪比为3）;此新型酶纳米生物传感器具有良好的灵敏度、重复性和选择性。     

基于功能化多壁碳纳米管的乙酰胆碱酯酶生物传感器制备

将功能化多壁碳纳米管(FCNTs)结合壳聚糖(CHIT)和戊二醛(GTA)导电聚合物形成凝胶溶胶,将该凝胶溶胶悬滴在玻碳电极(GCE)表面制得FCNTs-CHIT-GTA/GCE电极,结合自制的乙酰胆碱酶膜生成一种反应灵敏、快速、稳定、用于检测有机磷农药的电流型生物传感器。结果表明：该传感器具有出峰电位低、峰流值高、电子传递速率高、阻抗值小等优点,在研究不同浓度敌敌畏对酶抑制率的关系时,得到的关系曲线线性良好,最低检出限为20ng/L。该传感器适用于有机磷农药残留跟踪检测。     

黑豆酯酶检测氧乐果残留条件的优化

目的研究以氧乐果为代表的有机磷农药残留检测条件。方法以黑豆酯酶为酶源,a-乙酸萘酯为底物,采用酶抑制法,考察黑豆酯酶稀释倍数、显色时间、反应温度3个因素对黑豆酯酶活力测定的影响。然后通过3因素3水平响应面法优化黑豆酯酶活力的测定条件,并确定氧乐果对黑豆酯酶的最佳抑制时间和检测的灵敏度。结果当黑豆酯酶稀释倍数为18,显色反应时间为10 min,反应温度为41℃时,黑豆酯酶活力测定的吸光度值达到0.811。氧乐果抑制黑豆酯酶的最佳时间是4 min。绘制氧乐果对黑豆酯酶的标准曲线,得到最低检测限为0.1μg/mL。结论本研究获得了以黑豆酯酶抑制法检测氧乐果残留的最佳条件,其检测限低于有机磷农药氧乐果残留检测的最低限值要求(0.2μg/mL)。因此,以黑豆酯酶为酶源的酶抑制法可以作为有机磷农药氧乐果残留快速检测的一种有效手段。     

气相色谱法检测蔬菜中7种有机磷农药残留

利用气相色谱法检测蔬菜中敌敌畏、甲胺磷、乐果等7种有机磷农药残留量。结果表明:7种有机磷农药在0.05μg/m L~10μg/m L浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.986~0.999。标准品浓度为1.0μg/m L时的加标回收率为71%~86%,RSD在5.8%~16.0%范围之间。标准品浓度为5.0μg/m L时的加标回收率为92%~96%,RSD在1.4%~5.0%范围内。气相色谱法可以满足检测蔬菜中有机磷农药残留的要求。     

基于多孔碳球修饰硼掺杂金刚石电极的甲基对硫磷检测

目的研究甲基对硫磷检测的快速检测方法。方法 用多孔碳球材料修饰硼掺杂金刚石(BDD)电极,将乙酰胆碱酯酶(ACh E)固定在修饰电极表面制得酶传感器,用于甲基对硫磷的检测。对所制备的酶传感器进行电化学表征,对实验参数进行优化。结果 底物氯化乙酰胆碱的产物在ACh E/BDD电极和ACh E/多孔碳球/BDD电极上的氧化峰电流分别为0.4930μA和1.102μA,峰电流提高了123.53%。在ACh E/多孔碳球/BDD电极上,建立抑制率与甲基对硫磷浓度的负对数的对应关系,在浓度范围10-10~10-7g/L内呈良好的线性关系,线性方程为Y=-13.20297X+148.375,相关系数R2为0.9985。按抑制率为10%计算检出限为3.02×10-12g/L。对实际样品黄瓜汁进行检测,样品回收率为92.60%~102.00%。结论 此方法简单、快速、灵敏度高,适合用于实际样品中的甲基对硫磷残留分析。     

检测牛奶中过氧化氢的电化学酶传感器的研制

构建一种基于聚硫堇的丝网印刷电化学酶传感器,用于牛奶中过氧化氢的检测。将硫堇电聚合在丝网印刷碳电极上,用壳聚糖二氧化硅溶胶凝胶包埋辣根过氧化酶并固定于聚硫堇电极表面,制成新型过氧化氢生物传感器。结果显示：在牛奶标液中加入不同浓度的过氧化氢后,该酶传感器的响应电流与过氧化氢浓度在3×10-5～1.5×10-3mol/L范围内呈良好的线性关系(R＝0.9964),最低检出限为1.675×10-5mol/L。该传感器应用于牛奶中过氧化氢的检测与国标碘量法基本一致,其加样回收率范围为85.6%～89.4%。该酶传感器灵敏快速(15min)、制作方便、样品处理简单,有望用于牛奶中过氧化氢的快速检测。     

气相色谱法分析土壤中的氧乐果、辛硫磷和乙基对硫磷农药残留

本文采用索氏提取法-气相色谱-火焰光度检测器定量分析土壤中的氧乐果、辛硫磷和乙基对硫磷农药残留。氧乐果、辛硫磷和乙基对硫磷在浓度范围0.02-4.0μg/mL内线性关系良好,相关系数均大于0.995;方法检出限为0.006、0.004和0.005μg/kg;方法重复性RSD分别为2.79%、3.16%和2.82%;加标回收率范围在85.4%-95.6%。实验证明,此方法快速、准确、简单,适用于土壤中有机磷农药的检测。     

新型乙酰胆碱酯酶生物传感器快速检测敌敌畏

以氮掺杂碳球修饰玻碳电极(N-Cs/GCE)为工作电极,采用交联法固定氯化乙酰胆碱酯酶(ACh E),制备了ACh E/N-Cs/GCE传感器,对有机磷农药敌敌畏进行检测分析。结果表明:在(6.5×10~(-11)~6.5×10~(-6))g/L范围内,敌敌畏抑制率与其浓度负对数呈良好的线性关系,线性方程为Y(%)=62.488-5.149X(X为敌敌畏浓度负对数),R~2=0.993,相关性较好。按抑制率10%计算,检出限为6.46×10~(-11) g/L。用该方法对苹果皮中敌敌畏进行检测,回收率在89.32%~93.55%范围内,回收效果较好,准确度较高,具有较强的实用价值。     

基于电沉积壳聚糖-碳酸钙-纳米金的有机磷农药生物传感器

目的 制备基于壳聚糖-碳酸钙-纳米金复合膜固定乙酰胆碱酯酶的新型电化学传感器。方法 一步电沉积壳聚糖、碳酸钙和纳米金修饰到玻碳电极, 由于电沉积过程有气泡产生, 使沉积到电极上的碳酸钙微粒形成了三维多孔的结构, 利于酶比较分散的固定在电极表面, 提高检测效率; 同时纳米金的引入不仅增大了电极比表面积, 而且促进电子的快速传递, 放大了检测信号。结果 将制备的生物传感器用来检测有机磷农药乐果, 检测限为2.5 pg/mL, 检测时间只需要7 min。结论 该生物传感器检测法实现了对有机磷农药快速、超灵敏的检测。     

基于多孔碳球修饰硼掺杂金刚石电极的 甲基对硫磷检测

目的 研究甲基对硫磷检测的快速检测方法。方法 用多孔碳球材料修饰硼掺杂金刚石(BDD)电极,将乙酰胆碱酯酶（AChE）固定在修饰电极表面制得酶传感器,用于甲基对硫磷的检测。对所制备的酶传感器进行电化学表征,对实验参数进行优化。结果 底物氯化乙酰胆碱的产物在AChE/BDD电极和AChE/多孔碳球/BDD电极上的氧化峰电流分别为0.4930μA和1.102μA,峰电流提高了123.53%。在AChE/多孔碳球/BDD电极上,建立抑制率与甲基对硫磷浓度的负对数的对应关系,在浓度范围10-10~10-7g/L内呈良好的线性关系,线性方程为A(%)=-13.20297x 148.375(%),相关系数R2为0.9985。按抑制率为10%计算检出限为3.02×10-12 g/L。对实际样品黄瓜汁进行检测,样品回收率为92.60%~102.00%。结论 此方法简单、快速、灵敏度高,适合用于实际样品中的甲基对硫磷残留分析。     

MWNTs/AChE新型生物传感器的制备及其在氧化乐果快速检测中的应用(英文)

采用层层自组装技术制备(壳聚糖/多壁碳纳米管/乙酰胆碱酯酶)多层膜,用以构建新型有机磷农药残留检测电流型生物传感器。利用扫描电子显微镜获得多层酶膜的显微结构,利用电化学工作站对新型生物传感器的性能进行测量。结果表明:生物传感器的多层酶膜的最适制备层数为5层;以氧化乐果作为有机磷农药模型,在0.25～1.50μmol/L和1.75～10.00μmol/L的氧化乐果浓度区间内,响应电流与抑制率呈现良好的线性关系,最低检出限达到10nmol/L;新型生物传感器具有良好的重现性和稳定性。     

不同干燥方式对菊花中6种有机磷农药 残留量的影响

目的研究不同干燥方法对菊花中氧乐果、敌敌畏、甲基对硫磷、甲拌磷、内吸磷、对硫磷6种有机磷农药残留量的影响。方法将污染农药的鲜菊花分别进行蒸3 min阴干、50℃烘干、阴干和晾干处理,采用乙腈提取有机磷农药并经Carb/PSA双层固相萃取柱净化,通过气相色谱仪(配FPD检测器)测定有机磷农药残留量。结果 6种有机磷农药在0.01~0.08μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数r0.997,回收率在78.5%~94.3%之间,相对标准偏差RSD为1.7%~5.9%,检出限为0.53~1.16μg/kg。3种干燥的菊花中均未检测到6种有机磷农药。结论蒸3 min阴干、50℃烘干和阴干3种干燥方法均显著降低菊花有机磷农药残留量。     

电沉积法构建AChE/COD@AuNPs共固定化酶生物传感器差分脉冲伏安法快速检测有机磷农药

有机磷农药残留危害环境和人类健康。本文采用电沉积法将乙酰胆碱酯酶(AChE)与胆碱氧化酶(COD)固定化,共修饰于裸金电极表面,构建新型固定化酶生物传感器。通过电子显微镜对固定化酶形貌进行表征,结果表明：当固定化酶生物传感器上,乙酰胆碱酯酶与乙酰胆碱氧化酶的共修饰层数为2层,修饰圈数为35圈,在氯化乙酰胆碱浓度为2 mmol/L,pH 7.8的检测体系中,该生物传感器能够识别有机磷农药信号,且检测性能尚佳。传感器在有机磷农药质量浓度为10^-9～10-7mg/L时电流响应良好,工作曲线方程为y=0.0468x+1.2124(R²=0.9985),最低检出限1.15×10^-11 mg/L(S/N=3)。本研究为现场快速检测有机磷农药提供了新的研究方法。     

基于新型乙酰胆碱酯酶传感器的有机磷农药检测

制备了空心碳球—离子液体1-丁基-3-甲基咪唑磷钨酸盐(HCS-[Bmim]3PW12O40)修饰玻碳(GC)电极,采用交联法将乙酰胆碱酯酶(ACh E)固定在修饰电极表面,获得ACh E/HCS-[Bmim]3PW12O40/GC传感器。在最优条件下,用该传感器对有机磷农药久效磷、克百威标准品分别进行检测,久效磷的线性范围为8.00×10-10~8.00×10-6g/L,克百威的线性范围是1.00×10-10~1.00×10-7g/L。按抑制率10%计算,久效磷和克百威的检出限分别为7.58×10-11g/L和6.76×10-11g/L。所制备的ACh E/HCS-[Bmim]3PW12O40/GC传感器灵敏度高和稳定性好,为有机磷农药的分析提供了一种有前景的工具。     

化学发光生物传感器法测定食品中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留

目的 构建一种用于检测食品中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留的高灵敏度生物传感器, 建立一种用于测定食品中两类农药残留的新方法。方法 以固定化乙酰胆碱酯酶(AChE)为识别元件与底物碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)特异性反应, 采用微流控芯片与化学发光仪作为检测元件, 以鲁米诺与铁氰化钾作为化学发光体系, 通过流动注射分析法来检测农药残留。结果 当有机磷类农药辛硫磷、敌敌畏、乐果浓度范围分别在0.1~10、0.08~10、0.8~15 μg/mL时, 相关系数分别为0.9923、0.9903、0.9904, 检出限分别为0.047、0.054、0.388 μg/mL; 当氨基甲酸酯类农药克百威、西维因、灭多威浓度分别在0.08~15、0.1~10、0.1~10 μg/mL时, 相关系数分别为0.9926、0.9972、0.9944, 检出限分别为0.049、0.051、0.080 μg/mL。传感器性能评价实验结果显示, 在最佳条件下对辛硫磷、敌敌畏、乐果、克百威、西维因、灭多威分别测定6次, 结果RSD值均小于7%, 精密度较好; 以碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)为底物, 连续通入鲁米诺与铁氰化钾化学发光体系6次, 所得RSD值小于8%, 稳定性较好; 将实验制备的固定化AchE储存于pH值为8.0的磷酸盐缓冲溶液中, 每隔10 d测一次化学发光峰值, 结果显示两个月内相对活力下降为23%, 保存时间较长; 将传感器用于测定包菜、苹果样品中的农残, 添加回收率在90%~99%之间, 显示精密度较好, 可用于测定食品中的农药残留量。结论 此生物传感器性能良好, 适用于测定食品中的有机磷与氨基甲酸酯类农残。     

基于硫代胆碱调控SERS基底检测茶叶中痕量氧乐果

以维多利亚蓝B(victoria blue B,VBB)为探针分子,利用表面增强拉曼散射(surface enhanced Raman scattering,SERS)结合酶催化反应构建氧乐果快速检测方法。结果表明,在水浴温度为37℃,将乙酰胆碱酯酶活化15 min,再进行酶催化反应15 min,反应后静置10 min,滴加金纳米溶胶后再静置15 min,在检测体系中乙酰胆碱酯酶、碘化乙酰硫代胆碱、金纳米溶胶、VBB的浓度分别为5μg/mL、5μmol/L、0.195μg/mL、0.25μmol/L条件下,建立的检测体系在1 614 cm^-1处的SERS吸收峰值△I与3.5 ng/L～403.5 ng/L的氧乐果浓度呈良好的线性关系,相关系数为R2=0.995 8,检出限为1.90×10-4ng/L。当常见离子和农药在体系中共存时,对氧乐果的测定不产生干扰,说明体系稳定性良好。加标回收率为99.02%,相对标准偏差为1.17%。     

GC-FPD法检测甘蓝蔬菜中的马拉硫磷、氧乐果和治螟磷残留

目的:建立一种固相萃取-气相色谱法检测甘蓝蔬菜中的马拉硫磷、氧乐果和治螟磷残留的分析方法。方法:用乙腈进行提取甘蓝样品,固相萃取柱净化,气相色谱火焰光度检测器(FPD)进行定性定量分析。结果:马拉硫磷、氧乐果和治螟磷在0.02～2.0μg/mL浓度范围内线性良好,相关系数(r2)均大于0.995。3种有机磷农药在低、中、高不同浓度的加标回收率均在81.2～100.6%。检出限如下:马拉硫磷:0.013mg/kg,氧乐果:0.010mg/kg,治螟磷:0.005mg/kg。精密度测试结果的相对标准偏差均在1.96～4.21%之间。结论:该方法操作简单,精密度高、准确度好,适用于甘蓝中多种有机磷农药残留的分析测定。     

拟除虫菊酯类农药多残留的IC-ELISA检测方法研究

为检测样品中拟除虫菊酯类农药多残留,以间苯氧基苯甲酸(PBA)为半抗原,用活性酯法将PBA与牛白蛋白(BSA)偶联,制备多克隆抗体,并建立间接竞争酶联免疫吸附测定法。用方阵滴定确定包被抗原的最适工作浓度为5.0μg/mL,抗体最佳浓度为10.0μg/mL,该方法的最低检测限为0.301μg/mL,在0.1～200μg/mL工作浓度范围内,标准曲线表现良好的线性关系。