枸杞多糖对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞凋亡的影响

目的：研究枸杞多糖（lycium barbarum polysaccharides, LBP）对顺铂（cis-dichlorodiamineplatinum, CDDP）诱导小鼠睾丸支持细胞（TM4）凋亡的影响并探讨其可能机制。方法：体外培养TM4细胞,四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测LBP对CDDP诱导TM4细胞生存率的影响,Western blot检测LBP对CDDP诱导TM4细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果：与Control组相比,CDDP组TM4细胞凋亡显著增加,细胞内抑凋亡基因Bcl-2表达量显著降低,促凋亡基因Bax表达量及Caspase-3表达量显著升高;与CDDP组相比,CDDP+LBP组TM4细胞凋亡显著减少,细胞内抑凋亡基因Bcl-2表达量显著升高,促凋亡基因Bax表达量及Caspase-3表达量显著降低。 结论：LBP作用于CDDP诱导的TM4细胞,能够通过增强细胞内Bcl-2的表达,抑制Bax及Caspase-3的表达来阻抑因CDDP诱导的TM4细胞凋亡,进而减轻CDDP对TM4细胞造成的损伤。     

丹皮酚对FSL-1与IL-4共刺激诱导树突状细胞成熟及细胞因子表达的影响

目的: 研究牡丹皮提取物丹皮酚对TLR2配体FSL-1刺激诱导慢性前炎因子释放的分子机制,为天然药物治疗慢性皮炎提供新的思路。方法: 将小鼠髓源性树突状细胞（DCs）分成5组,对照组、FSL-1刺激组、丹皮酚低、中、高剂量干预组（25、50、100 μg/mL）,所有组均给予10 ng/mL rmIL-4环境培养,ELISA法检测树突状细胞培养上清液中IL-10、IL-12的含量,流式细胞术检测树突状细胞表面MHC-II、CD40和CD86分子表达的水平。结果: 各组树突状细胞表面分子表达水平：刺激组与对照组相比,树突状细胞表面MHC- II、CD40和CD86表达量明显增加（P<0.05）。丹皮酚干预组与刺激组相比,DCs表面MHC- II、CD40和CD86表达量均降低,且高、中剂量组具有统计学差异 （P<0.05）。细胞因子分泌水平：刺激组与对照组相比,抗炎性细胞因子IL-10的水平明显降低（P<0.05）,而前炎细胞因子IL-12的水平明显升高（P<0.05）;丹皮酚干预组与FSL-1刺激组相比,各个干预组的IL-10的分泌水平显著上升（P<0.05）,丹皮酚干预组中IL-12的分泌水平均有下降,但仅高、中剂量组具有统计学差异（P<0.05）。结论: TLR2配体FSL-1可以和IL-4共刺激DCs,促进DCs活化并成熟,促进前炎性因子IL-12释放,抑制IL-10等抗炎细胞因子分泌,诱导CD4+T细胞向Th1分化,导致了Th1极化状态,诱导慢性皮肤炎症;而天然药物丹皮酚可抑制TLR2配体介导TLR2通路活化DCs这一过程,具有抑制皮肤慢性炎症的潜力。     

砒石对哮喘小鼠白三烯B4 及5-脂氧合酶基因表达的影响

目的: 探讨白三烯B4 (LTB4) 水平、5-脂氧合酶(5-LO) 基因表达在小鼠哮喘发病中的作用以及砒石(arsenolite, As) 对哮喘的治疗作用与LTB4 水平及5-LO 基因表达的关系。方法: 建立小鼠卵蛋白哮喘模型, 灌胃给予砒石等药, 用ELISA 的方法检测支气管肺泡灌洗液(BALF) LTB4 含量;用RT-PCR 的方法检测肺组织中5-LO mRNA 表达的变化。结果: 哮喘小鼠BALF 中LTB4 水平、肺组织5-LO 基因表达水平较正常对照组显著升高。4 种剂量的砒石均可抑制哮喘小鼠BALF 中LTB4 的水平, 均能降低哮喘小鼠5-LO mRNA 表达的量。其中砒石5.00 mg·kg^-1 剂量的效果优于砒石0.625 mg·kg^-1剂量的效果。结论: LTB4 在气道中的高水平, 5-LO 基因表达的上调在OVA 致敏小鼠的哮喘发病中起重要作用。砒石可显著降低哮喘小鼠BALF 中LTB4 水平, 抑制哮喘小鼠肺组织中5-LO 基因的表达, 从而表现出抗哮喘的活性。     

砒石对哮喘小鼠胞质型磷脂酶A2基因表达及白三烯C4的影响

目的: 探讨胞质型磷脂酶A₂ (cPLA₂) mRNA 表达、白三烯C4 (TLC₄) 在哮喘发病中的作用及其相互关系, 以及砒石对哮喘的治疗作用。方法: 建立小鼠卵蛋白哮喘模型, 砒石灌胃给药, 用逆转录聚合酶链反应方法检测肺组织中cPLA₂ mRNA 表达;ELISA 方法检测支气管肺泡灌洗液(BALF) 中LTC₄ 含量;微量滴定法测定BALF 中PLA₂ 活性。应用新航YP200型压力换能器及Medlab 生物信号采集系统检测小鼠肺功能P_max 和T_呼 /T_总。结果: 哮喘小鼠肺组织cPLA₂ 基因表达水平、BALF 中PLA₂ 活性、LTC₄ 水平均较对照组显著升高。0.625 、1.25 、2.50 及5.00mg·kg^-1剂量的砒石可下调哮喘小鼠cPLA₂mRNA 表达, 抑制哮喘小鼠BALF 中PLA₂ 活性和降低LTC₄水平, 改善哮喘小鼠肺功能。结论: 支气管肺组织中cPLA₂ 基因表达上调、PLA₂ 活性和LTC₄ 水平增高在卵蛋白(OVA) 致敏小鼠哮喘发病中起着重要作用。砒石可显著抑制哮喘小鼠肺组织中cPLA₂ 基因的表达, 降低哮喘小鼠PLA₂ 活性和降低LTC₄ 水平,改善哮喘小鼠肺功能, 具有抗哮喘活性。     

川芎嗪对脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞间粘附因子-1 表达的影响

目的:探讨川芎嗪对脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞间粘附因子-1 表达的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞, 经脂多糖诱导后, 分别应用噻唑蓝(MTT) 比色法和流式细胞术检测细胞增殖抑制率和细胞周期的变化, 应用免疫细胞化学法检测细胞表面细胞间粘附因子-1 的表达。结果:川芎嗪呈剂量依赖性的抑制系膜细胞的增殖,并阻止细胞由G₀/G₁ 期进入S 期;使系膜细胞间粘附因子-1 的表达水平明显减少。结论:川芎嗪能抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖和降低细胞间粘附因子-1 表达水平。     

特异性p38蛋白激酶抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Thl/Th2类细胞因子变化的影响

目的: 探讨特异性p38蛋白激酶（P38MAPK)抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Thl/Th2类细胞因子（IFN-y/IL-4)变化的影响。方法: BALB/c小鼠30只随机分成3组:正常对照组、哮喘模型组和SB203580干预组。采用酶联免疫吸附法（ELISA)检测支气管肺泡灌洗液（BALF)中IL4和IFN-7含量,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果: 与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4水平升高而IFN-7水平降低(F < 0.01);与哮喘模型组比较,SB203580干预组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4水平明显降低,IFN-7水平明显上升（P < 0.01),肺组织病理学改变显著减轻。结论: SB203580能抑制哮喘小鼠的气道炎症反应,纠正IFN-y/IL-4平衡的失调。     

硫酸化茯苓多糖对帕金森模型鼠脑组织抗氧化能力的影响

目的: 考察硫酸化茯苓多糖（SP）对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森小鼠脑组织抗氧化能力的影响。方法: MPTP注射ICR小鼠制备帕金森病（PD）模型。将ICR小鼠随机分为5组：对照组、MPTP组和SP治疗组（50,100,150 mg/kg）,腹腔注射给药。紫外分光光度法检测小鼠纹状体中超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、乳酸脱氢酶（LDH）的活性和抗超氧阴离子活力以及过氧化氢（H₂O₂）、丙二醛（MDA）的含量,HE染色观察小鼠脑组织形态学变化。结果: 与模型组相比,在一定浓度范围内,SP治疗组小鼠纹状体GSH-Px、SOD、CAT、LDH活性及抗超氧阴离子活力有不同程度的升高, H₂O₂和MDA含量有不同程度的下降;海马区神经元排列密集有序,细胞间隙减小,神经元细胞形态结构有不同程度的恢复。结论: SP对MPTP诱导的神经元损伤具有神经保护作用,其潜在机制可能是提高脑组织抗氧化能力,减轻氧化应激反应。     

负载MAGE-A3抗原的树突状细胞与细胞因子诱导杀伤细胞共培养对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响

目的：探究负载黑色素瘤相关抗原基因A3（MAGE-A3）的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响。方法：采集人外周血分离单个核细胞,利用细胞因子分别诱导生成DC和CIK;MAGE-A3孵育DC后与CIK共培养,流式细胞仪检测DC-CIK、MAGE-A3-DC-CIK的表型;流式细胞仪分选子宫内膜癌细胞系Ishikawa的CD133+干细胞,以子宫内膜癌干细胞作为靶细胞,分别以CIK、DC-CIK及MAGE-A3-DC-CIK作为效应细胞,MTT法检测效靶比为10∶1、20∶1、40∶1的细胞杀伤活性,ELISA法检测联合培养细胞上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17水平,Annexin V-FITC/PI双染法检测子宫内膜癌干细胞凋亡;建立子宫内膜癌干细胞移植瘤裸鼠模型,尾静脉注射DC-CIK或MAGE-A3-DC-CIK,观察裸鼠肿瘤生长情况,每隔2 d测量瘤体大小,21 d后取肿瘤组织,电子天平称重,HE染色观察肿瘤组织病理形态学变化,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内Ki-67表达。结果：分离获得细胞表面CD80、CD86、HLA-DR表达分别达到88%、86%和90%的DC;MAGE-A3-DC-CIK组细胞表面CD8+CD3+、CD56+CD3+比例均高于DC-CIK组（P<0.01）;经磁珠分选后获得CD133+细胞比例高达90.23%的子宫内膜癌干细胞;与CIK组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组在不同效靶比下对子宫内膜癌干细胞的杀伤能力升高,细胞上清中IFN-γ、IL-2、IL-12及IL-17的分泌水平升高,培养液上清处理的子宫内膜癌干细胞凋亡率增加,差异均具有统计学意义（P<0.01）;同时,与对照组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组移植瘤裸鼠的肿瘤体积小,肿瘤重量轻,肿瘤组织内细胞稀疏,Ki-67阳性细胞率减小,差异均具有统计学意义（P<0.01）。 结论：负载MAGE-A3的DC与CIK联合培养能促进CIK成熟,提高对子宫内膜癌干细胞的杀伤性,并抑制移植瘤裸鼠的恶性进展。     

乙醇诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对ICAM-1蛋白表达影响的研究

目的: 研究乙醇体外诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡,及对细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达的影响。方法: 以不同浓度乙醇(50、100和 200 mmol/L)作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞 24 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定各组细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法检测ICAM-1蛋白表达。结果: 乙醇能抑制内皮细胞活力,促进细胞凋亡,增加ICAM-1表达,并呈浓度依赖性。结论: 乙醇能诱导内皮细胞损伤,其机制可能与促进细胞凋亡、影响ICAM-1蛋白表达有关。     

地塞米松对顺铂诱导的HepG2细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响

目的: 探讨地塞米松对顺铂诱导HepG2细胞凋亡的影响,并观察Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。方法: HepG2细胞与顺铂及不同浓度的地塞米松共培养,RT-PCR检测Bcl-2、Caspase-3的mRNA表达,Western blot检测Bcl-2、Caspase-3蛋白表达,流式细胞术(FACS)检测各组HepG2细胞的凋亡情况。结果: 随着地塞米松浓度的增加,HepG2细胞中Bcl-2蛋白表达量升高,Caspase-3蛋白表达量下降。同时细胞凋亡率降低。结论: 地塞米松部分通过Bcl-2途径抑制肝癌细胞的凋亡,而Caspase-3又在调控细胞凋亡中起重要作用。     

生长相关癌基因α在大鼠哮喘中的表达意义及地塞米松对其的影响

目的: 观察大鼠哮喘生长相关癌基因α(GROα)蛋白的表达水平及地塞米松对其的影响,探讨GROα和中性粒细胞(PMN)的相关性。方法: 采用大鼠哮喘模型,随机分成哮喘组、正常对照组、地塞米松治疗组,分离纯化血PMN,免疫组化法测定支气管腔和血PMN中GROα蛋白的表达水平,计数肺组织PMN数目。结果: 哮喘组(0.138±0.009,OD值)和地塞米松治疗组(0.105±0.012,OD值)支气管腔的GROa蛋白的平均吸光度值均显著高于正常对照组(0.077±0.010,OD值)(P<0.01),地塞米松治疗组GROa蛋白的平均吸光度值显著低于哮喘组(P<0.01)。哮喘组(0.211±0.017,OD值)和地塞米松治疗组(0.128±0.012,OD值)血PMN的GROα蛋白的平均吸光度值均显著高于正常对照组(0.081±0.008,OD值)(P<0.01),地塞米松治疗组GROα蛋白的平均吸光度值显著低于哮喘组(P<0.01)。三组PMN计数两两比较差异均存在显著统计学意义,正常对照组(7±2)<哮喘组(26士6)<地塞米松治疗组(202±30)(P<0.05或P<0.01)。GROα蛋白的表达水平与肺组织PMN计数在哮喘组和正常对照组中呈显著正相关(n=19,r=0.865,K0.01)。结论: 哮喘时支气管腔和PMN的GROa蛋白的表达水平及肺组织PMN计数增加,它们参与了哮喘发病的炎症过程;地塞米松部分通过抑制GROa蛋白的表达从而减轻气道炎症,但能加剧PMN在肺组织中聚集;GROa蛋白可能与PMN在肺组织中聚集密切相关。     

三氧化二砷对小鼠过敏性哮喘的治疗作用及机制

目的:研究三氧化二砷对小鼠过敏性哮喘的治疗作用及对脾T 细胞周期和Bcl-2 基因表达的影响。方法:用卵蛋白建立小鼠过敏性哮喘模型, 收集肺泡灌洗液(BALF), 直接计算白细胞总数和分类,双缩脲法检测总蛋白含量, 应用Medlab 生物信号采集系统软件检测小鼠肺功能, 流式细胞术和免疫荧光法检测脾及BALF 中T 细胞数、T 细胞周期和Bcl-2 基因表达的变化。结果:三氧化二砷可使BALF 中总蛋白含量下降, 白细胞总数减少, 嗜酸细胞和淋巴细胞减少, 改善哮喘小鼠肺功能;使脾及BALF 中T细胞数降低;在1.15 mg·kg^-1 的剂量时可诱导脾T细胞凋亡, 在4.60 mg·kg^-1 的剂量时抑制其活化增殖;可下调脾T 细胞Bcl-2 基因表达。结论:三氧化二砷有平喘作用, 其作用机制可能与其调节T 细胞的激活与凋亡, 下调Bcl-2 基因表达有关。     

吉祥草中甾体皂苷RCE-4对人宫颈癌Caski细胞Ras/Erk和p16/cyclinD1/CDK4通路的影响

目的: 研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclinD1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法: 体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测p16、cyclinD1和CDK4 mRNA表达水平;Western blot检测Ras/Erk信号通路总蛋白和磷酸化蛋白表达水平。 结果: RCE-4呈剂量依赖性抑制Caski细胞增殖,其作用24 h的IC50值为12.33 μmol/L;升高G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例;抑制Ras、p-Raf、p-Mek1/2和p-Erk1/2蛋白表达,降低p-Raf/Raf、p-Mek1/2/Mek1/2和p-Erk1/2/Erk1/2比值,上调p16的mRNA表达,下调cyclinD1和CDK4的mRNA表达。 结论: RCE-4可抑制Caski细胞的增殖,诱导细胞在G0/G1期阻滞,其诱导作用与其抑制Ras/Erk和p16/cyclinD1/CDK4信号通路激活有关。     

MMP-9/TIMP-1 在哮喘气道重塑中的作用及抗-RANTES 抗体的干预作用

目的:通过抗-RANTES 抗体对细胞外基质(ECM) 代谢相关因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP-1) 表达的影响, 探讨抗-RANTES 抗体对哮喘气道重塑的干预机制。方法:雄性Wistar 大鼠36 只, 随机分为3组:生理盐水对照组(对照组)、卵蛋白致敏及激发的哮喘组(哮喘组)、抗-RANTES 抗体干预组(干预组) 。肺组织切片用免疫组化法标记MMP-9、TIMP-1, 并用图像分析MMP-9、TIMP-1 表达水平,用ELISA 方法测定RANTES 。结果:哮喘组肺组织中MMP-9、TIMP-1 表达水平明显高于对照组(P<0.05), MMP-9/TIMP-1 比值下降, RANTES 与MMP-9/TIMP-1 呈负相关;抗-RANTES 抗体干预后MMP-9、TIMP-1 明显下降(P<0.05), MMP-9/TIMP-1 逐渐恢复, 与对照组比较无统计学差异(P<0.05);干预组气道炎症等病理学变化较哮喘组明显减轻, 临床症状明显改善。结论:抗-RANTES抗体可调节哮喘大鼠肺组织MMP-9/TIMP-1 比例的平衡, 干预细胞外基质重塑, 延缓哮喘气道重塑的发生。     

Formation and characterization of copper tetrakis (4-cumylphenoxy) phthalocyanine:perylene solar cells

Perylene-based bulk heterojunction solar cells with copper tetrakis (4-cumylphenoxy) phthalocyanine (Tc-CuPc) and heterojunction solar cells with copper phthalocyanine (CuPc) were produced and characterized. A device based on CuPc and perylene provided better efficiency, fill factor, short-circuit current and open-circuit voltage compared to those of a device based on Tc-CuPc and perylene. The Tc-CuPc:perylene structure was examined by transmission electron microscopy, which indicated mixtured microstructure. Energy levels of the molecules were calculated and discussed.     

黄芩苷体外调控乳腺癌细胞表达TIMP2的实验研究

目的: 探讨黄芩苷对Bcap-37 细胞生长及TIMP2 表达的影响。方法: 体外细胞培养、MTT 法测定不同浓度黄芩苷对Bcap-37 细胞生长曲线的影响, RT-PCR 、Western blot 方法研究不同浓度黄芩苷对Bcap-37 细胞TIMP2 的影响。结果: 黄芩苷对Bcap-37 细胞的生长抑制呈浓度依赖关系;黄芩苷对Bcap-37 细胞TIMP2 在mRNA 水平、蛋白水平呈浓度依赖关系, 小剂量上调, 高剂量下调。结论: 黄芩苷对人乳腺癌Bcap-37 细胞生长有抑制作用, 可能与肿瘤细胞TIMP2 的下调有关。     

NIDDM 大鼠骨骼肌组织GLUT 4 mRNA表达及其与胰岛素分泌关系的实验研究

目的 观察非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)大鼠骨骼肌葡萄糖转运体4(glucose transporter 4,GLUT4)mRNA 表达及其与胰岛素分泌的关系。方法 制备NIDDM大鼠模型,用Northern blot方法测定骨骼肌组织中GLUT4mRNA表达量;放射免疫法测定血清胰岛素含量;免疫组化法观察胰岛胰岛素阳性β细胞。结果 NIDDM大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达显著低下,仅为对照组的45%(P<0.01);其空腹基础胰岛素水平正常,但葡萄糖耐量试验胰岛素水平较对照组明显降低,2 h 胰岛素分泌有延迟现象;免疫组化实验NIDDM大鼠胰岛体积减少一半以上,胰岛素阳性β细胞数量明显减少。结论 NIDDM大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达量低下,该反应与体内胰岛素分泌水平呈现一定的正相关性。;