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应用纯化的Bt1杀虫晶体蛋白质作为标准蛋白和免疫抗原 ,通过抗体 抗原 酶标抗体反应 ,建立了间接酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,以快速检测转基因抗虫玉米中的Bt1表达蛋白 .用建立的ELISA法对 4种进口玉米实物样品进行了测定 ,实验结果得到了免疫印迹分析的验证 ,并与进口试剂盒方法的定量分析结果相一致 相似文献
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转基因食品及其检测技术的发展现状 总被引:1,自引:0,他引:1
概述了转基因食品的国内外发展现状,以及各国对转基因食品的不同管理模式。还着重介绍了转基因食品检测技术的基本方法、发展方向以及所面临的一些问题。 相似文献
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食品中转基因成分的检测 总被引:24,自引:1,他引:23
为了满足转基因食品标记的需要,首先必须检测鉴定食品中外缘基因或其基因产物的有无。本文简单介绍了外缘基因的结构和常见的检测方法,重点介绍了一种比较有效的检控技术-PCR。 相似文献
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利用PCR技术,对转基因大豆中CaMV35S启动子、NOS终止子、CP4-EPSPS和大豆凝集素基因进行了定性检测,并且以大豆凝集素基因为内置标准检测了CaMV35S启动子。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳对PCR扩增产物进行分析,并对两种电泳进行了比较。聚丙烯酰胺凝胶电泳有利于提高定性PCR筛选方法的准确性。 相似文献
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转基因食品的定量PCR检测方法 总被引:6,自引:0,他引:6
近年来转基因食品定性检测方法发展迅速,然而目前转基因成分(GMO)的准确定量检测在国际贸易中日趋重要.我们这里介绍三种定量检测方法半定量PCR法,定量竞争PCR(QC-PCR)法和实时定量PCR法.半定量PCR法比较简单,但结果不是很精确.定量竞争PCR的特点是含有内部标准子.近来开展的实验室合作研究表明,与定性PCR法相比,定量竞争PCR降低了实验室之间的误差.而实时定量PCR法可在提取DNA后3h内,测出每克起始样品的总DNA量及2pg转基因成分的量,但这套PCR系统目前价格昂贵. 相似文献
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本文对转基因稻米及其加工食品进行了针对标记基因bar、CaMV35S启动子和Nos终止子DNA序列的PCR检测.结果表明,改良SDS法适于提取转基因稻米以及经过蒸煮、微波膨化加工后稻米食品中的DNA并能够满足PCR检测的需要.食品加工使稻米基因组DNA降解为较小的片段,但不影响PCR检测效果,PCR技术能够检测稻米加工食品中的转基因成分. 相似文献
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痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
采用半巢式PCR技术建立了食品中痕量及微量转基因大米成分的检测方法。根据大米内源SPS基因以及转基因大米Bt63含有的外源Cry1A(b)/Cry1A(c)融合基因和Btc基因,分别设计了6对普通与半巢式PCR引物。扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测灵敏度,普通PCR扩增灵敏度为1ng/μl左右,半巢式PCR扩增灵敏度达到10-3~10-4ng/μl,半巢式PCR比普通PCR方法提高了103~104倍;在质量百分比的检测灵敏度方面,普通PCR方法扩增灵敏度在0.1%~1%之间,半巢式PCR方法的检测灵敏度能够达到0.001%~0.01%,半巢式PCR比普通PCR方法要提高10倍以上。在实际样品的检测中,速冻汤圆、婴儿米粉及芝士小圆饼等食品经普通PCR扩增,其内源SPS基因条带模糊或未扩增到,进一步采用半巢式PCR扩增后,能够得到清晰明亮的特异性条带。所有样品均未扩增到外源Cry1A(b)/Cry1A(c)和Btc基因。 相似文献
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以大豆内源基因 (Lectin)、筛选基因 3 5S启动子 (Cauliflowermosaicvirus 3 5S ,CaMV3 5S)、Nos终止子 (Nopalinesynthase,Nos)和外源基因 (5 enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthase ,Ep sps)为检测对象 ,通过对PCR扩增体系中各引物终浓度及PCR扩增过程中退火温度的探讨 ,研究了不同引物终浓度配比及退火温度对转基因大豆多重PCR检测的影响 ,建立了大豆加工食品中转基因成分多重PCR检测体系。结果表明 ,当各组引物的终浓度分别为 1 0、2 0、2 0、3 0 μmol/L即引物终浓度配比为 1∶2∶2∶3 ,退火温度为 5 5 4℃时 ,所建立的多重PCR检测方法能够有效地检测出大豆中的转基因成分 ,具有特异性好 ,简便 ,快速 ,准确等优点。 相似文献
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转基因植物食品的检测策略 总被引:15,自引:0,他引:15
近年来 ,随着越来越多的转基因植物被批准商业化生产 ,由此衍生而来的转基因食品数量也迅速增加 ,引起了社会各界对转基因食品的广泛关注。为了消除消费者对转基因食品安全性的疑虑 ,保证转基因植物的健康发展 ,包括我国政府在内的世界上许多国家针对转基因食品的研究开发制定了严格的管理条例 ,转基因食品的标识制度是其中重要的一条。建立准确可靠的转基因食品鉴别技术是贯彻转基因食品标识制度的基础。本文在对转基因食品与传统食品的差异进行详细分析的基础上 ,讨论了鉴别转基因食品的一般策略 ,并对利用PCR技术鉴别转基因食品的基本原理及技术要点作了简要介绍 相似文献
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采用SYBR Green实时荧光定量PCR技术,建立了食品中大豆转基因成分的定量检测方法。通过设计特异引物,扩增内源参照基因lectin和转基因靶基因CP4EPSPS,建立两种基因的拷贝数-CT标准曲线,根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量,并且通过熔解曲线分析扩增反应特异性。结果表明,lectin和CP4EPSPS基因标准曲线线性关系好,R2值分别为0.9984和0.9953,方法的回收率为95%~110%,检测限为0.01%。本检测方法具有快速、灵敏、准确、特异、高通量等优点,可以作为食品中大豆转基因成分的定量检测方法。 相似文献
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