大米免疫活性肽水解用酶的筛选

研究Neutrase、Acalase 2.4 L、Papain、Pepsin、Trypsin、Flavourzyme、Acid protease、Protamex与Bromelain 9种蛋白酶水解大米蛋白的进程特性,考察9种蛋白酶水解物的免疫活性。结果表明,胰脏蛋白酶Trypsin可作为制备大米免疫活性肽的最适水解酶,Trypsin酶解物对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的增值指数(stimulating index,SI)为1.597(1 000μg/m L);其酶解物中相对分子质量1 000的组分比例最高,达到74.11%。     

大米肽中压离子交换色谱分离及其免疫活性评价

为进一步提高经过DA201-C型大孔吸附树脂脱盐、40%乙醇梯度洗脱的大米免疫活性肽RPHs-A3组分的纯度和免疫活性,采用中压离子交换色谱对其进行进一步分离纯化,并对分离得到组分的免疫活性进行了评价。结果表明,采用WorkBeads 40Q强阴离子交换树脂、2.6cm×40cm色谱柱对RPHs-A3组分进行分离的最佳条件为:上样浓度30mg/mL,上样量5 mL,起始缓冲液A为pH 9.0的0.01mol/L Tris-HCl,洗脱缓冲液B为含1 mol/L NaCl的pH 9.0、0.01 mol/L Tris-HCl,上样、洗脱流速分别为1,10mL/min。共收集到5个组分,其中RPHs-A3-B3组分在MTT试验和小鼠巨噬细胞脂多糖(LPS)炎症模型中皆表现出较高免疫活性,对RAW264.7细胞具有显著增殖作用,其SI值为1.315;且对炎症模型中细胞内NO释放量具有显著抑制作用(P0.05),抑制率为8.28%。采用中压离子交换色谱能有效地对RPHs-A3组分进行分离纯化,使SI值从1.273提高到1.315,且对细胞内NO释放量具有显著抑制作用。     

大米蛋白肽的制备与ACE抑制活性分析

通过优化大米蛋白的单酶酶解与双酶酶解工艺,确定了采用碱性蛋白酶加蛋白酶B复合酶解制备大米蛋白肽的工艺.蛋白回收率高达43.9％,制备的大米蛋白肽感官评价高、苦味低、分子质量小.对比市售的大豆蛋白肽、鱼胶原蛋白肽,3种蛋白肽的水分含量、蛋白质含量、脂肪含量基本接近.大米蛋白肽与大豆蛋白肽中分子质量<2000 Da的总比例...     

食源性生物活性肽的免疫功能研究进展

食源性生物活性肽通过调控体内信号转导通路并影响细胞因子的表达来发挥免疫调节功能。文章综述了多种食源性蛋白质水解物和生物活性肽对细胞、动物及人体的免疫调节作用,阐述了食源性免疫活性肽的作用机制,并对其应用前景进行展望。     

富硒大米肽体内抗氧化活性研究

目的:比较普通大米肽、富硒大米肽和硒代蛋氨酸的体内抗氧化活性。方法:将60只老龄（12月龄）雄性昆明小鼠和10只少龄（1月龄）雄性昆明小鼠分成7组（每组10只）:老龄模型组（M组）、少龄对照组（YC组）、普通大米肽组（400 mg/kg·bw,Ⅰ组）、富硒大米肽组（400 mg/kg·bw,Ⅱ组）、硒代蛋氨酸组（2.5μg/kg·bw,Ⅲ组）、富硒大米肽+硒代蛋氨酸组（200 mg/kg·bw+1.225μg/kg·bw,Ⅳ组）和白藜芦醇组（10 mg/kg.bw,PC组）,其中富硒大米肽组、硒代蛋氨酸组以及富硒大米肽+硒代蛋氨酸组中的硒含量一致,连续灌胃30 d。结果显示:与M组相比,YC组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、PC组小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性极显著提高（p<0.01）;YC组、Ⅰ组、Ⅳ组的还原型谷胱甘肽（GSH）含量显著增加（p<0.05）,Ⅱ组和PC组GSH含量极显著增加（p<0.01）;YC组、Ⅱ组、PC组的过氧化氢酶（CAT）活性显著增加（p<0.05）;Ⅲ组、Ⅳ组的肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性显著提高（p<0.05）,Ⅱ组的GSH-Px活性极显著增加（p<0.01）;Ⅱ组、Ⅳ组、PC组的T-AOC显著增加（p<0.05）;YC组、Ⅱ组的丙二醛（MDA）显著减少（p<0.05）,PC组的MDA极显著减少（p<0.01）;YC组、PC组的GSH显著增加（p<0.05）,Ⅱ组的GSH极显著增加（p<0.01）,以及胸腺、脾脏指数等指标均有不同程度地改善。其中所有指标以富硒大米肽组效果最好,抗氧化活性显著高于同剂量的普通大米肽,大多数指标也显著优于同等硒含量的硒代蛋氨酸组。结论:富硒大米肽中的硒与肽对增强抗氧化能力有一定的增效作用。      

食源性免疫活性肽的筛选策略及作用机制研究进展

文章综述了目前国内外对食源性免疫活性肽的筛选策略,强调计算科学在筛选中的应用前景。通过探讨食源性免疫活性肽作用的分子机理及其研究现状,提出了未来的研究新思路:结合多组学、生物信息学、细胞试验及动物试验,深入探讨食源性免疫活性肽作用的分子机理。     

大米活性肽的抗氧化作用及其对HUVEC细胞增殖的影响

本试验测定了大米活性肽(RBP)对自由基的体外清除能力,观察和分析了大米活性肽处理前后对氧化损伤的血管内皮细胞形态及增殖的影响。结果表明:RBP对DPPH·、·OH的清除能力较高,分别可达46.76%和68.23%。MTT检测结果显示:RBP对照组与正常对照组HUVEC细胞增殖能力相当,说明RBP对正常HUVEC无明显影响。而RBP保护组细胞增殖能力显著高于H_2O_2氧化损伤组,在培养48 h后高出损伤组48.5%。光镜及荧光显微镜观察结果显示:RBP保护组细胞形态相较氧化损伤组更趋于扁平铺展,形态规则、完整,且贴壁细胞形态与正常对照组相似,说明大米活性肽对H_2O_2损伤的HUVEC有一定的保护作用。这一结果将为以大米活性肽为原料的功能性食品的开发提供有益提示和理论基础。     

免疫活性肽的研究进展与展望

近年来，乳蛋白来源的生物活性肽方面的研究进展迅速，日益引起人们的重视并日趋成为乳品领域研究的焦点。到目前为止，已经发现了几十种具有不同生理功能的活性肽，免疫活性肽就是其中研究较多的一类生物活性肽，它能够增强人体的免疫功能，对人体特别是对新生儿正常生理功能发挥着不可替代的功能，它的开发利用和进一步深入研究具有重要意义。     

大米活性肽功能效应研究方法及其应用前景

大米活性肽以其抗氧化、降血压、促免疫等生物特性,成为研究与开发的热点。文中简述了大米活性肽的功能效应,并对其生物检定、免疫学等研究方法逐一概述,最后对存在问题和研究开发前景进行了探讨和展望。     

食源性免疫活性肽的研究进展

食源性免疫活性肽具有无毒、低过敏性、高安全性等优点,食物源蛋白质来源广,易于取材,而免疫活性肽在人类营养健康和疾病调节中发挥着不可替代的作用,随着科学技术的发展,食源性免疫活性肽的价值日益引起世界各国学者广泛关注,食源性免疫活性肽已被逐步应用到新型功能性食品研发及临床治疗中。本文在分析食源性免疫活性肽与临床及生活应用关系的基础上,从选择食物源蛋白质和制备方法及条件两方面,按照植物源免疫活性肽、动物源免疫活性肽、微生物源免疫活性肽、酶解法制备以及微生物发酵法制备等五个方面,综述了食源性免疫活性肽的研究现状,并对食源性免疫活性肽的研究趋势进行了展望。     

大米抗氧化活性肽的研究进展

自由基能够引起机体衰老、肿瘤等一系列疾病的发生,大米抗氧化活性肽具有清除羟自由基、清除超氧阴离子自由基、抑制脂肪氧合酶活力和抑制脂质过氧化链式反应等功效。综述了大米抗氧化活性肽的原料选择、制备方法和发展前景等近年来的研究概况。     

大米活性肽研究进展

在我国,稻米除用作主食外,也作为发酵与酿造等工业原料,在米淀粉、味精、色素和酿造等加工产生残渣中富含米蛋白,但目前尚未能得到充分利用而污染环境;稻米蛋白是生产活性肽优质资源之一,活性肽以种类丰富、功能明显、使用安全等特点而成为研究与开发热点。该文综述以稻米蛋白为来源活性肽的研究进展及其开发前景。     

乳蛋白源免疫活性肽研究进展

国内外研究表明乳蛋白中存在大量的免疫活性肤.乳蛋白酶解是目前获得免疫活性肽的主要手段.对乳蛋白来源的免疫活性肽的种类、结构及其功能进行详细的论述.     

免疫活性肽的酶法制备及其活性机制研究进展

越来越多的亚健康人群需要提高免疫力,免疫活性肽作为安全无副作用的免疫调节剂,在食品与药品等领域已显出其独特的优势,研究高纯度免疫活性肽的高效制备方法与免疫活性机制具有重要意义。文章对免疫活性肽的酶法制备、分离纯化和活性机制的研究进展进行综述,以期为肽类免疫调节剂的研究与开发提供理论参考。     

猪骨免疫活性肽的分离纯化

为了从猪骨中分离纯化出免疫活性肽,使用超滤、sephadex G-25凝胶层析、SP-sephadex C-25离子交换层析等手段对鲜猪骨的Alcalase碱性蛋白酶的酶解液进行分离纯化,采用MTT法测定各分离产物对小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示:猪骨酶解液经超滤分离获得的分子质量小于2 ku的组分对小鼠脾淋巴细胞增殖率最高;对分子质量小于2 ku的组分采用凝胶过滤层析,对层析后活性最高的组分再进行离子交换层析,最终得到的组分质量浓度为100μg/m L时,对小鼠脾淋巴细胞的增殖率为114.30%。     

食源性蛋白中免疫活性肽的研究进展

食物源免疫活性肽是从食源性蛋白水解物中获得的对人体免疫系统具有调节作用的肽段,常来源于酪蛋白、乳铁蛋白、鱼贝类蛋白、小麦蛋白、大米蛋白及大豆蛋白等食源性蛋白。到目前为止,国内外的研究者已对食物源免疫活性肽的结构、作用机制做了大量研究,并将其应用于动物实验或临床研究,取得了显著效果。因而,本文对食源性免疫活性肽的结构和机理进行了综述。     

大米活性肽对H2O2诱导HUVEC氧化损伤的保护作用研究

观察和分析了RBP处理前后对氧化损伤的HUVEC细胞生长、凋亡及超微结构的影响。MTT检测结果显示:RBP保护组与正常对照组生长状况相似、生长趋势相同、增殖能力相当。HE染色结果显示:RBP保护组细胞形态与正常对照组细胞形态相似,整体完整性较好,细胞形态及分布规则,细胞数较多,与损伤组比较保护作用明显;细胞凋亡流式检测结果显示:损伤组凋亡率为93.7%,RBP保护组的细胞存活率占72.6%,比H2O2损伤组细胞存活率高出66.6%,保护作用明显;扫描电镜结果显示:RBP保护组细胞损伤程度降低,完整性较好,胞间连接紧密,说明RBP对氧化损伤的HUVEC细胞有很好的保护作用。RBP在体外对H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤有一定的保护作用。     

大米球蛋白铜离子结合肽的鉴定及其螯合活性分析

为分析大米球蛋白与金属元素的结合特性,通过分级提取方法得到4 种大米蛋白,并测定其金属元素含量。选取大米球蛋白经胃蛋白酶酶解,酶解液通过超滤方式进行纯化。将获得的水解液进行质谱检测,并通过软件分析得到23 条多肽序列,分子质量在725～1 409 Da之间。结合已报道的相关研究,分析得到多肽序列QGWSSSSE和YYGGEGSSSEQGY具有潜在金属螯合活性。通过人工合成这两条多肽序列,并选择乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA）、柠檬酸和金属硫蛋白作为参照物,比较它们与Cu2＋的螯合活性。结果发现YYGGEGSSSEQGY螯合Cu2＋效果比QGWSSSSE好,与Cu2＋螯合的IC20为5.40 mmol/L,并且在低浓度范围与柠檬酸相当,比EDTA和金属硫蛋白差。进一步分析,这两条多肽与其他金属离子之间螯合活性发现,其与Fe2＋结合更强。通过氨基酸分析,连续丝氨酸SS、SSS和SSSS可能与铜的螯合活性相关。     

发酵芝麻粕小肽体内抗氧化和免疫活性

研究从发酵芝麻粕中提取分离出的小肽体内抗氧化和免疫活性。将56 只4 周龄健康昆明小鼠随机分成7 组,分别灌胃生理盐水,低、中、高3 个剂量的小肽（三肽和四肽）,连续灌胃28 d后取血,测定肝脏、脾脏、胸腺系数,血清中丙二醛含量,肝匀浆中的丙二醛含量、超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶的活性,脾脏中T淋巴细胞CD3＋、CD4＋和CD8＋数量。灌胃发酵芝麻粕三肽和四肽后,血清和肝脏中丙二醛含量显著下降（P＜0.05）,肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高（P＜0.05）,四肽高剂量组小鼠的CD4＋/CD8＋值显著升高（P＜0.05）。结果表明发酵芝麻粕三肽和四肽均具有体内抗氧化能力,四肽在本实验设定中的高剂量条件下能在一定程度上增强机体的免疫活性。     

大米蛋白抗氧化肽的活性以及组成鉴定研究

采用碱性蛋白酶酶解大米蛋白制备大米蛋白抗氧化肽。研究表明大米蛋白酶解产物具有螯合金属铁离子、清除H2O2、羟自由基、DPPH自由基、抑制亚油酸自然氧化的作用。通过应用高解析离子淌度质谱（HD-MS）分析鉴定米蛋白抗氧化肽的序列主要为Met-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-His（376.68u）,Leu-Ala-Gly-Pro-Lys-Phe-Ala-Leu（408.75u）和Met-Pro-Arg-His-Asp-Pro-Gln（440.70u）。