几种化妆品舒缓功效评价方法的应用研究

通为评价化妆品的舒缓功效，为化妆品功效宣称提供科学依据，采用LPS诱导巨噬细胞模型、SDS刺激斑马鱼胚胎模型和人体功效评价等测试方法对2款精华水进行比对测试，结果显示，采用LPS诱导巨噬细胞方法，2款精华水对NO释放的抑制率分别为85.87%和84.57%，对IL-6的下调率分别为44.18%和38.76%，与阴性对照组相比具有显著性差异（p<0.01）；采用SDS刺激斑马鱼胚胎模型，2款精华水组的斑马鱼胚胎平均翻滚次数分别下降51.85%和76.54%，与刺激组相比显著下降（p<0.05）；人体功效评价结果显示，连续使用测试样品28天，2款精华水对受试者皮肤角质层含水量提升分别为55.56%和39.61%，泛红均值分别下降4.75%和6.68%，且与使用前相比具有显著性（p<0.01）。研究表明LPS诱导巨噬细胞模型、SDS刺激斑马鱼胚胎模型和人体功效评价等测试方法是可行的，均可作为化妆品舒缓功效评价的方法之一。     

一种毛叶杯轴花叶提取物的体外抗氧化和舒缓功效研究

探究了一种毛叶杯轴花（Tambourissa trichophylla）叶提取物的活性成分、抗氧化能力和舒缓功效。通过福林酚法对其总酚含量进行测定，并通过DPPH自由基清除实验对其抗氧化能力进行测试，采用透明质酸酶活性抑制实验及通过脂多糖（LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞（RAW264.7）产生的一氧化氮（NO）、白细胞介素6(IL-6)的表达量来评价其舒缓功效。结果显示，毛叶杯轴花叶提取物总酚含量高达54%；在浓度为25μg/mL时，DPPH自由基清除率达到81.18%；在浓度为5 mg/mL时，透明质酸酶抑制率达到69.04%；在浓度为0.05 mg/mL时，对LPS诱导RAW246.7细胞产生的NO和IL-6抑制率分别为15.70%、76.57%。以上说明，毛叶杯轴花叶提取物活性成分含量高，具有较强的抗氧化和舒缓功效，在化妆品的开发与应用中具有重要价值。     

透明质酸锌的护肤功效研究

以不同分子量透明质酸锌为研究对象,通过斑马鱼保湿、皮脂腺细胞SZ95的脂滴检测、5α还原酶抑制作用、成纤维细胞增殖、Ⅰ型胶原蛋白含量检测、巨噬细胞的炎症因子抑制试验,对其体外保湿、控油、紧致、舒缓功效进行了研究。结果显示0.5%中分子透明质酸锌可以抑制斑马鱼因高渗透压引起的失水,具有显著的保湿功效;大分子透明质酸锌可以通过抑制5α还原酶达到控油功效,中分子、小分子透明质酸锌可以通过抑制脂滴合成、抑制5α还原酶达到控油功效;小分子透明质酸锌有良好的促进成纤维细胞增殖作用,促进作用呈现剂量依赖性,中分子透明质酸锌在质量浓度为125,12.5和1.25μg/mL时,均可显著促进Collagen I的生成;大分子、中分子、小分子透明质酸锌在质量浓度为25,125μg/mL时均可显著抑制炎症因子IL-1α,TNF-α,PGE 2的表达。实验结果表明,透明质酸锌具有良好的保湿、控油、紧致、舒缓的功效。     

补充生物活性肽QRPR对巨噬细胞RAW264.7抵御脂多糖刺激的作用

目的研究补充生物活性肽QRPR(Gln-Arg-Pro-AH)对巨噬细胞RAW264.7抵御脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激的作用。方法用不同浓度的LPS刺激RAW264.7细胞不同时间,ELISA法测定细胞培养上清中细胞因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的浓度,确定LPS刺激RAW264.7细胞的最适浓度和时间,建立RAW264.7细胞抵御LPS刺激模型。采用ELISA法测定QRPR肽对RAW264.7细胞抵御LPS刺激时IL-6和TNF-α表达量的影响。MTS法检测QRPR肽对RAW264.7细胞的毒性作用。结果100 ng/m L LPS诱导16 h为刺激RAW264.7细胞验证QRPR肽调节作用的最佳浓度和时间。QRPR肽可以抑制RAW264.7细胞受LPS刺激后IL-6和TNF-α的产生,QRPR肽浓度为250μmol/L时,其降低LPS刺激产生IL-6和TNF-α的能力最强。QRPR肽本身对RAW264.7细胞的生长既无促进作用,也无毒性和抑制作用。结论补充活性肽QRPR对巨噬细胞RAW264.7抵御LPS刺激具有积极的调节作用。     

绿豆肽对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

目的探讨绿豆肽对RAW264. 7巨噬细胞的免疫调节作用。方法在体外培养的RAW264. 7巨噬细胞中,分别加入10、100、200和400μg/mL的绿豆肽,检测RAW264. 7巨噬细胞的增殖能力、吞噬能力、SOD酶活力、NO含量和细胞因子分泌量,同时检测绿豆肽对经脂多糖(lipo-polysaccharide,LPS)诱导的RAW264. 7巨噬细胞中细胞因子分泌和LC3、p62蛋白表达水平的影响。结果与空白对照组比较,不同浓度绿豆肽组RAW264. 7巨噬细胞的增殖率及吞噬率显著提高(P 0. 05),400和200μg/mL组的SOD酶活力、NO含量及分泌TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著升高(P 0. 05)。各浓度绿豆肽均可显著抑制LPS诱导RAW264. 7巨噬细胞的TNF-α、IL-1β和IL-6分泌量(P 0. 05),浓度为400μg/mL时,上述细胞因子的分泌量与空白对照组差异无统计学意义(P 0. 05)。不同浓度绿豆肽均可降低LPS诱导RAW264. 7巨噬细胞胞内LC3的含量,上调p62蛋白的表达量。结论绿豆肽可激活巨噬细胞、增加自身代谢酶活力、释放细胞因子,通过抗炎作用及抑制细胞自噬,从而提高宿主细胞的免疫功能。     

81种药用植物提取物影响小鼠巨噬细胞RAW264.7活化的研究

目的通过对81种药用植物提取物影响巨噬细胞活化的研究,获得相关活性数据,为后续研究开发和利用提供试验数据和物质基础。方法将提取物样品作用于RAW264.7细胞一定时间后,用ELISA法测定细胞分泌的TNF-α,以判断样品对细胞是否有活化作用;将LPS和81种提取物样品作用于RAW264.7细胞一定时间后,用ELISA法测定细胞分泌的TNF-α,以判断样品是否对LPS诱导的细胞活化有抑制作用。结果对81种药用植物提取物的研究结果表明,有34种植物提取物样品能够使RAW264.7细胞TNF-α表达上调,使其增加TNF-α的分泌;有2种植物提取物样品能够使LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α表达下调,使其减少TNF-α的分泌。结论通过对81种药用植物提取物的筛选研究表明,既有对巨噬细胞有活化作用的样品,也有能够抑制LPS诱导的巨噬细胞活化的样品,为进一步的研究,提供了相关活性数据和物质基础。     

亮菌甲素衍生物的设计、合成及抗炎活性研究

以亮菌甲素为先导化合物,对5位羟基进行结构修饰,设计并合成了一系列亮菌甲素衍生物。以3, 5-二羟基苯甲醇和2-乙氧亚甲基乙酰乙酸乙酯为起始原料,经环合、取代、氧化反应合成了15个亮菌甲素衍生物8a～8h,10a～10g。所有化合物结构经¹H NMR、¹³C NMR和ESI-MS确证,并测定了所有化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌TNF-α和IL-6的抑制作用。实验结果表明,所有目标化合物对TNF-α和IL-6具有一定的抑制作用。化合物10f的抑制活性最强,且强于先导化合物亮菌甲素。     

木蝴蝶提取物护肤相关活性研究

研究中药材木蝴蝶提取物的护肤相关功效，采用60%乙醇水加热回流提取结合D101大孔树脂精制得到木蝴蝶提取物，通过DPPH自由基清除实验、B16F10细胞黑色素生成实验、Raw264.7细胞抗炎实验、HaCat细胞UVB光保护实验研究木蝴蝶提取物的相关活性。体外实验结果表明，木蝴蝶提取物具有清除DPPH自由基的能力，IC₅₀为38μg/mL，可以显著降低B16F10细胞黑色素的产生，降低LPS诱导的NO、IL-6和TNF-α分泌水平，减少UVB辐照对HaCat角质形成细胞的损伤。木蝴蝶提取物具有作为天然护肤品功效原料的潜力，在抗衰、美白、舒缓、防晒等方面均有产业化开发价值。     

一种用于化妆品原料筛选的人原代角质细胞炎症模型的建立和应用

通过系统性地研究脂多糖（LPS）对人原代角质细胞的细胞活性、IL-1α、IL-8及ROS等与皮肤炎症密切相关指标的影响,开发了一种基于人原代角质细胞的皮肤炎症模型。结果显示,0.01～100μg/mL LPS对人原代角质细胞活性没有较大影响,100μg/mL LPS能同时诱导人原代角质细胞产生大量IL-1α和IL-8,0.01μg/mL LPS能诱导产生大量ROS。因此,建立了对不同炎症指标使用LPS进行差异化诱导的人原代角质细胞皮肤炎症模型,同时用此模型对样品OSM2021041301进行检测,发现样品OSM2021041301能显著抑制LPS诱导升高的IL-1α、IL-8水平,而对LPS诱导升高的ROS水平有较弱的抑制作用,说明此样品对LPS及其类似物诱导的IL-1α、IL-8及ROS升高而引起的炎症具有一定的抗炎作用。     

无患子水提液的微生物发酵纯化及无患子乳酸杆菌发酵液抗痤疮功效

无患子（Sapindus mukorossi Gaertn）提取液常作为一种天然活性原料添加到洗护产品中,为推进无患子提取液在日化行业的应用,采用微生物发酵法对无患子水提液纯化,以耗糖量和皂苷纯度为指标,筛选出植物乳酸杆菌（Lactobacillus plantarum）作为发酵菌株,制得了无患子乳酸杆菌发酵液（SF）。从皮脂、炎症和致病菌的过度繁殖3个方面,研究了SF的抗痤疮功效。结果显示,质量浓度为20 μg/mL的SF对SZ95细胞脂质合成率降低了26.4%;对脂多糖（LPS）诱导的RAW 264.7细胞的一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和活性氧（ROS） 分别降低了52.3%、57.5%、56.2%和35.9% ;采用二倍稀释法测定了SF对痤疮丙酸杆菌、糠秕马拉色菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌质量浓度（MIC）别为3.125、12.5和6.25 g/L;人体功效评价结果显示,受试者面部痤疮情况显著改善。     

竹叶发酵液的美白、增强皮肤屏障和抗炎护肤功效研究

为研究竹叶发酵液(FBL)的护肤功效，选取角质形成细胞(HaCaT)和黑色素瘤细胞(B16)作为细胞模型，利用细胞计数试剂(CCK-8)评估竹叶发酵液的细胞毒性；并通过检测黑色素含量、十二烷基硫酸钠(SLS)损伤模型下丝聚蛋白和炎症因子的基因表达，分别考察FBL的美白、增强皮肤屏障和抗炎的护肤功效。结果表明，FBL对上述细胞均没有毒性，同时能够显著降低B16细胞内黑色素的含量(显著性p<0.001)，并能促进丝聚蛋白的基因表达(p<0.001)、抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的基因表达(p<0.001,p<0.01)。因此，FBL具有潜在的护肤功效。     

脂多糖诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的活化凋亡作用

目的探讨脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞活化凋亡的作用。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,分别用0.5、1.0、2.5μg/mlLPS刺激RAW264.7细胞24h,一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞培养上清中NO水平;用1.0μg/mlLPS分别刺激细胞3d和6d,台盼蓝拒染法检测细胞增殖情况;用1.0μg/mlLPS刺激细胞6d,流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡情况。结果经LPS刺激后24h,RAW264.7细胞培养上清中NO含量明显增加,且具有剂量依赖性;LPS刺激3d和6d后,细胞的增殖均受到抑制,且呈时间依赖性;LPS刺激6d时,细胞周期被阻滞在S期,并出现明显的凋亡。结论LPS具有诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞活化凋亡的作用。     

茶皂素的脱色及控油功效研究

以色泽较深的市售茶皂素为原料,采用H₂O₂氧化脱色法,基于H₂O₂用量、pH值、脱色温度/时间优化,茶皂素溶液脱色率可达91%,并发现脱色后茶皂素起泡/稳泡性能提升、细胞毒性显著下降。采用人永生化皮脂腺细胞（SZ95）模型研究了脱色后茶皂素抑制皮脂分泌的功效。结果显示,茶皂素（4μg/mL）对SZ95细胞脂质合成的抑制率达24.87%;对于油酸/亚油酸刺激条件下的SZ95细胞脂质合成的抑制率达14.96%,且显著抑制了刺激条件下SZ95细胞促炎性细胞因子IL-8表达（抑制率为29.01%）,表明茶皂素不仅能够显著抑制正常及刺激条件下SZ95细胞脂质合成,并且可抑制皮脂可能诱导的细胞炎症反应,有助于维护皮脂腺代谢平衡。进一步对含有2.5%茶皂素的产品进行了人体功效评价,结果显示使用该产品后6 h内志愿者皮肤水分含量和经皮失水无明显变化,而皮脂分泌量显著降低,表明含茶皂素产品可在不影响皮肤水分含量和屏障功能的前提下实现有效控油。本研究不仅有助于推动茶皂素在洗护产品中的实际应用,还发掘了茶皂素的控油新功效...     

一种天然复合活性物的抗炎功效及其机制研究

以依克多因、羟基积雪草甙、姜黄挥发油、姜黄素组成的天然复合活性物(Natural Compound Active,NC)为研究对象,通过体外细胞及体内动物试验对其抗炎功效及其机制进行研究.结果显示,在LPS诱导的巨噬细胞炎症模型上,NC有效降低NO含量.进一步通过TPA诱导耳肿胀模型测试,NC有效降低由TPA诱导的耳肿...     

美洲大蠊酶解液冻干粉多糖含量测定及药理活性研究

研究了美洲大蠊酶解液冻干粉(LPEHPA)多糖含量及对多种肿瘤细胞株增殖的抑制作用、对非洲绿猴肾细胞株的抗氧化作用以及对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞的抗炎作用。采用水提酶解法提取美洲大蠊的有效成分,通过苯酚硫酸法测定多糖含量,MTT法测定其对Bel-7402、A549、M231及MCF-7四种不同的肿瘤细胞株的抑制率;建立过氧化氢诱导的氧化损伤模型,MTT法观察药物介入后的细胞存活率;酶联免疫法检测细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6的浓度。结果 LPEHPA中多糖含量为4.72%;对四种肿瘤细胞最高抑制率分别为65.02%、76.05%、62.92%和65.10%;LPEHPA对非洲绿猴肾细胞株(Vero)有明显保护作用,浓度为1 mg·mL-1时,与对照组相比细胞存活率提升了37.52%;脂多糖诱导炎症后,与模型组相比,加药组TNF-α、IL-6浓度显著减少,与空白组相比具有显著性差异。通过对LPEHPA药理活性结果分析,LPEHPA在机体可承受毒性范围内,具有良好的抗肿瘤、抗氧化及抗炎活性。     

推拿滚法治疗白兔股四头肌损伤模型的效果观察

目的：分析应用推拿滚法干预股四头肌损伤白兔对其血清炎症因子表达水平的影响。方法：健康成年新西兰大白兔30只,雌雄各半,随机分为健康组、模型组、干预组,每组10只,健康组实验动物不做任何处理,作为正常对照;模型组和干预组实验动物用自制重力铅锤打击兔右后肢股四头肌肌腹中段,建立股四头肌损伤模型;干预组于造模后第8天开始,用推拿手法对白兔进行局部滚法治疗,模型组不进行后续操作。干预结束后取3组实验动物血清样本,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中白介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮（NO）和C-反应蛋白（CRP）含量的统计学差异。结果：与健康组比较,模型组和干预组股四头肌损伤白兔血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NO和CRP水平显著升高（P <0.05）;推拿滚法干预结束后,与模型组相比,干预组的股四头肌损伤白兔血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NO和CRP水平显著下降但仍较健康组升高（P <0.05）。结论：推拿滚法能通过调节IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NO和CRP炎性细胞因子的表达...     

一种天然植物组方的舒缓修护功效

为了测试一种天然植物组方的舒缓、修护功效,采用UVB紫外光诱导HaCaT细胞产生炎症因子,将不同质量分数的天然植物组方与其进行共培养,测试组方的抗炎效果;通过人体测试,对受试者使用前后皮肤的红斑指数、黑素指数、经皮失水率进行测试。结果显示,制备的天然植物组方具有较好的抗炎作用,对于TNF-α、IL-1α、IL-6均具有明显的抑制作用;使用13天后,受试者皮肤红斑指数、黑素指数、经皮失水率较使用前皆有改善,差异有统计学意义（P <0.05）。13天的试验期间未出现任何皮肤不良反应,表明其具有良好的安全性,适用于敏感性皮肤人群。     

依克多因与羟基积雪草甙组合物舒缓功效评价

利用斑马鱼技术研究依克多因和羟基积雪草甙组合物的舒缓功效，其方法：对斑马鱼进行十二烷基磺酸钠（SLS）暴露诱导斑马鱼皮肤炎症的发生导致中性粒细胞发生免疫应答，向皮肤表面增殖和迁移，建立舒缓功效评价模型。在炎症模型中，中性粒细胞的数量与皮肤炎症反应程度成正相关，炎症的消退会伴随着炎症部位中性粒细胞数目的减少。本文通过计算受试物对斑马鱼中性粒细胞的抑制率，进而评价受试物对炎症的舒缓功效。结果显示：依克多因和羟基积雪草甙组合配比在设定质量浓度下能够抑制斑马鱼炎症皮肤表面中性粒细胞的聚集，具有舒缓功效。结果表明，依克多因和羟基积雪草甙组合配比在设定质量浓度下具有舒缓功效，为其在化妆品配方开发中提供理论依据。     

阻断IFN-β改善脂多糖所致T淋巴细胞增殖抑制的实验研究

目的：探究细胞因子在脂多糖所致脓毒症T淋巴细胞免疫抑制中的作用。方法：以革兰阴性细菌成分脂多糖诱导脓毒症T淋巴细胞免疫抑制,采用流式细胞分析检测对照组和模型组树突状细胞的细胞因子白介素-1α(IL-1α)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)、干扰素-α(IFN-α)、IFN-β的表达情况。然后分别阻断树突状细胞的细胞因子进行混合淋巴细胞共培养实验,采用Brd U细胞增殖检测试剂盒检测阻断后T淋巴细胞的免疫增殖抑制的逆转情况。结果：与对照组相比,模型组树突状细胞的细胞因子IL-1α、IL-6、TNF-α、TGF-β、IFN-β阳性百分比显著升高,IL-10、IFN-α阳性百分比无统计学差异。阻断细胞因子后,与模型组相比,αIFN-β+模型组T淋巴细胞增殖反应显著升高。结论：脂多糖所致脓毒症过程中树突状细胞的细胞因子IL-1α、IL-6和TNF-α表达上调可能参与促炎反应过程。细胞因子IFN-β表达上调可能参与淋巴细胞凋亡的免疫抑制过程。阻断IFN-β可改善脂多糖诱导的脓毒症T淋巴细胞增殖抑制现象。     

姜黄素乳液的工艺优化及其抗炎活性研究

以姜黄素为原料,通过高压均质工艺获得姜黄素乳液。以乳液粒径为评价指标,优化工艺参数,并测定姜黄素乳液在光照、温度条件下的稳定性,进一步测试姜黄素乳液对体外脂多糖LPS诱导细胞模型及体内TPA诱导动物模型的抗炎活性及其对炎症因子表达的调控作用。结果表明,姜黄素乳液高压均质工艺条件为60 MPa、35℃、均质处理1 h,循环6次,所制备的姜黄素乳液粒径为(200±50)nm,姜黄素含量为5%,姜黄素乳液及其化妆品配方在光照、60℃条件下稳定性良好;姜黄素乳液浓度为1～50μg/m L对LPS诱导的产生的NO有显著的抑制作用,涂抹剂量为0.4mg/ear的姜黄素乳液对TPA诱导的小鼠耳肿胀抑制率达57%以上,其可能是通过抑制炎症反应过程中的关键性细胞因子IL-6、TNF-α的分泌和释放从而发挥抗炎作用。