蛭弧菌消除海产品中潜在致病性弧菌的研究

噬菌蛭弧菌具有裂解病原菌的特殊功效,可以用作生物净化因子。本实验从海洋环境中分离到4株Bh04系列蛭弧菌(Bh04-4,Bh04-41a,Bh04-A+和Bh04-1f)。以41株弧菌为蛭弧菌的宿主菌,本文研究了蛭弧菌对海产品中常见弧菌的裂解消除能力,以探索其对由弧菌所引起的食物中毒等流行性传染疾病的预防效果。实验结果表明,41株弧菌中共有36菌株可被4株蛭弧菌(Bh04-4,Bh04-41a,Bh04-A+和Bh04-1f)中的任一株所裂解,占总试验菌株的87.8%;对副溶血弧菌、非01非0139群霍乱弧菌、溶藻胶弧菌这三种常见致病弧菌的裂解率分别达88.9%、83.3%、81.8%。本研究结果揭示了蛭弧菌作为生物消除剂在由弧菌所引起的食物中毒等流行性传染疾病的防治方面有潜在应用价值。     

蛭弧菌对溶藻弧菌的消除作用研究

本实验研究了盐度(NaCl浓度,以下同),Ca2+和Mg2+)对海洋蛭弧菌5#-12和5#-sh06生长活性和裂解溶藻弧菌能力的影响,测定了两株蛭弧菌对11株致病性溶藻弧菌的裂解谱,同时研究了其对牡蛎养殖水体和肠道中溶藻弧菌的清除作用.结果表明,在1.0-3.5%的盐度范围内,蛭孤菌均能生长,最适盐度为3.0%;ca2+和Mg2+浓度为3mM时,5#-sh06具有最好的生长活性,而5#-12在Ca2+和Mg2+浓度为4mM时生长活性达到最强;Ca2+和Mg2+浓度为4 mM时,蛭弧菌5#-12和5#-sh06的裂解能力平均分别提高了11.8%和22.6%;5#-12和5#-sh06分别能裂解其中9株和10株溶藻弧菌,而两株蛭弧菌协同作用,能裂解全部11株溶藻弧菌;蛭弧菌能够有效降低牡蛎肠道和养殖水体中弧菌的数量,试验第7 d,实验组牡蛎肠道和养殖水体中弧菌浓度对数值比对照组分别低7.24和7.97.本研究结果揭示了蛭弧菌作为生物消除剂在控制和消除食源致病性溶藻弧菌等病原菌方面具有潜在的应用价值.     

蛭弧菌的分离鉴定及其对非O1霍乱弧菌的消除作用研究

从海洋环境中分离到2株蛭弧菌（A-1和A-2）,研究了其对6株不同来源非O1霍乱弧菌的消除作用,以探索其对由非O1霍乱弧菌所引起的腹泻疾病的预防效果。实验结果表明,在20～35℃温度条件下,蛭弧菌均有较好的裂解效果,30℃时裂解能力最强;在pH6.5～8.1条件下,蛭弧菌均有较好的裂解能力,pH为7.2时,达到最佳裂解效果;A-1能裂解其中5株非O1霍乱弧菌,A-2能裂解其中4株非O1霍乱弧菌,而2株蛭弧菌协同作用,能全部裂解6株非O1霍乱弧菌。本研究结果揭示了蛭弧菌作为生物消除剂在预防由非O1霍乱弧菌所引起的腹泻疾病方面具有潜在应用价值。      

超高压处理对牡蛎中副溶血性弧菌的消减作用研究

为探索有效的消减副溶血性弧菌（Vp）的超高压处理条件,利用CDC-1（临床分离株,血清型O3:K6）和CGMCC1.1997（标准菌株,血清型O1:K1）两种菌株,研究了不同Vp经超高压处理的消减变化情况;比较了CDC-1菌株接种到牡蛎体内与混合到牡蛎肉中的超高压处理的差异性。结果显示,超过200MPa的压力对两种Vp均有明显的消减作用,增大压力和延长处理时间可以提高超高压处理对Vp的消减作用;多重比较显示两种Vp对超高压的耐受力存在显著差异（p<0.05）,CDC-1较CGMCC1.1997有更强的超高压耐受力;超高压处理对两种接种方式Vp的消减效果存在显著差异（p<0.05）,接种到牡蛎体内的CDC-1菌株的耐受力高于混合在牡蛎肉中的CDC-1菌株;用300MPa处理10min或350MPa处理5min能有效的消减牡蛎中的Vp。      

蛭弧菌的分离鉴定及其对非O1霍乱弧菌的消除作用研究

从海洋环境中分离到2株蛭弧菌(A-1和A-2),研究了其对6株不同来源非O1霍乱弧菌的消除作用,以探索其对由非O1霍乱弧菌所引起的腹泻疾病的预防效果。实验结果表明,在20～35℃温度条件下,蛭弧菌均有较好的裂解效果,30℃时裂解能力最强;在pH6.5～8.1条件下,蛭弧菌均有较好的裂解能力,pH为7.2时,达到最佳裂解效果;A-1能裂解其中5株非O1霍乱弧菌,A-2能裂解其中4株非O1霍乱弧菌,而2株蛭弧菌协同作用,能全部裂解6株非O1霍乱弧菌。本研究结果揭示了蛭弧菌作为生物消除剂在预防由非O1霍乱弧菌所引起的腹泻疾病方面具有潜在应用价值。     

温暖月份零售带壳牡蛎中副溶血性弧菌的定量研究

为了解温暖月份零售带壳牡蛎中副溶血性弧菌 (VP)的污染情况 ,2 0 0 3年 4～ 8月在福建省福州和厦门两地共收集带壳牡蛎 113份 ,样品分别来自水产品批发市场 (18% ) ,零售市场 (4 6 % )和饭店 (36 % )。采用Vitek鉴定系统和最可能数法进行VP的定量分析。结果显示 ,带壳牡蛎中VP密度的几何均数为 6 0MPN 10 0g ,4 1 6 %的样品VP密度低于 30MPN 10 0g的最低检出限 ,仅厦门2个样品菌量超过 2 4 0 0 0MPN 10 0g。两个地区、不同采样点和不同月份之间样品VP密度的几何均数差别均有统计学意义 (P <0 0 1)。厦门样品污染菌量高于福州 ;批发市场样品菌量最高 ;5月份样品菌量最高 ,为 14 9MPN 10 0g ,而 6～ 8月样品菌量约为 4 0MPN 10 0g。零售环节带壳牡蛎VP的检出率较高。未来应加强对生食海产品中VP污染状况的监测。     

浙江省生食牡蛎中副溶血性弧菌的风险评估

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)作为浙江省食物中毒的重要病原菌,广泛分布于近海岸的海水、海底沉积物和贝类中。本文结合预测微生物学和微生物风险评估的方法,针对浙江省生食牡蛎中的副溶血性弧菌开展定量风险评估,包括危害识别、危害特征描述、暴露评估和风险特征描述等4个部分。将暴露评估分为捕获期和捕获后2个模块,推测因食用VP污染的生牡蛎而导致疾病发生的危险,并对各相关因素进行高级敏感性分析。结果表明,夏季牡蛎中的VP密度最高,达到2.28lgg-1;未采取缓解措施时春、夏、秋、冬四季因生食牡蛎引起的VP平均感染率分别为8.76×10-5g-1、2.30×10-3g-1、2.08×10-4g-1、2.53×10-7g-1;采用温和的热处理、冷冻处理和快速冷藏等3种缓解措施,其中温和的热处理效果最好,可以使危险性最高的夏季感染率降低4个数量级,其余两种措施效果相似,约下降2～3个数量级。     

副溶血弧菌快速检测技术研究进展

副溶血弧菌是一种重要的嗜盐性食源性致病菌,广泛存在于近海岸的海水、海底沉积物以及鱼虾、贝类等海洋生物中。在我国沿海地区,由副溶血弧菌引起的食物中毒已成为微生物中毒的首要因素。本文分别以副溶血弧菌菌体、核酸、蛋白质和代谢产物为检测对象,介绍了各种PCR技术、酶联免疫吸附技术和生物传感器技术等目前副溶血弧菌的热点快速检测技术,对各种技术进行了比较分析,并对未来的发展前景作了展望。      

霍乱弧菌噬菌体在消除海产品中相关弧菌的潜在应用研究

噬菌体具有裂解病菌的作用,可用作生物净化因子.本实验以霍乱弧菌为宿主菌,采用双层平板法从鲍鱼养殖环境中分离到5株霍乱弧茵噬菌体.以23株弧菌为宿主菌,本文研究了霍乱弧菌噬菌体对海产品中常见弧茵的裂解消除能力,同时针对宽裂解谱噬菌体进行包括热失活、pH稳定性、紫外照射、不同镁离子浓度、不同柠檬酸钠浓度等理化因素对其裂解能力的影响,以探索其裂解消除弧茵的最优条件.实验结果表明噬菌体在消除霍乱弧菌方面有潜在的应用价值,紫外照射、柠檬酸钠对噬菌体裂解有不同程度的抑制作用,温度和pH值对噬茵体裂解也有不同程度的影响,而适度的镁离子则有促进作用.     

蛭弧菌的分离及消除沙门氏菌的初步研究

蛭弧菌具有裂解病原菌的功效,可以用作生物净化因子.本实验从海洋环境中分离到1株蛭弧菌(BDK-1).利用蛭弧菌BDK-1进行消除鸡蛋表面的沙门氏菌的人工模拟实验,结果表明,蛭弧菌BDK-1在其浓度为104～1010PFU/mL时,可有效消除鸡蛋表面的沙门氏菌,显示了蛭弧菌在食品卫生安全应用方面的潜在价值.     

食品中五种致病性弧菌MPCR—DHPLc检测方法的建立

采用试剂盒法提取5种致病忭弧菌(霍乱弧卤、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌)的基因组DNA.分别合成5对特异性引物,对PCR反应体系进行优化后,建立了5种致病忭弧菌间的MPCR-DHPLC检测方法.二重PCR-DHPLC检测灵敏度可达到100CFU/ml.建立的MPCR-DHPLC方法在食品中弧菌的检测上具有很好的应用价值.     

牡蛎中产广谱细菌素芽孢杆菌的筛选及鉴定

以不同革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、植物乳杆菌)和革兰氏阴性菌(弗氏柠檬酸杆菌、副溶血性弧菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、福氏志贺氏菌)为指示菌,利用从福建霞浦海域牡蛎中分离的细菌为指标菌,筛选具有产广谱细菌素的细菌.其中,14株具有广谱抑制作用的细菌经形态特征和16s rDNA分析,初步鉴定均为芽孢杆菌属....     

阿特拉津在太平洋牡蛎体内的蓄积、分布与消除

采用半静态水质接触染毒法,将太平洋牡蛎分别暴露在阿特拉津质量浓度为10μg/L和100μg/L的海水中,研究阿特拉津在太平洋牡蛎体内的蓄积特征、组织分布和消除规律。结果表明,不同暴露质量浓度下,各组织中阿特拉津含量在3～7 d达到平衡,半衰期为0.20～0.32 d,生物富集系数为1.68～3.46 mL/g,鳃和内脏团是太平洋牡蛎的主要蓄积靶组织,而闭壳肌中阿特拉津含量最低。太平洋牡蛎对阿特拉津的消除能力随暴露质量浓度的增大而增强,各组织中阿特拉津的含量随净化时间呈指数下降,净化1 d后的消除率为90.1%～97.1%,其主要代谢途径推测为鳃的作用。     

Depuration and Relaying: A Review on Potential Removal of Norovirus from Oysters

Pollution of coastal waters can result in contamination of bivalve shellfish with human enteric viruses, including norovirus (NoV), and oysters are commonly implicated in outbreaks. Depuration is a postharvest treatment involving placement of shellfish in tanks of clean seawater to reduce contaminant levels; this review focuses on the efficacy of depuration in reducing NoV in oysters. There have been many NoV outbreaks from depurated oysters containing around 10³ genome copies/g oyster tissue, far exceeding the median infectious dose (ID50). Half of the published NoV reduction experiments showed no decrease in NoV during depuration, and in the remaining studies it took between 9 and 45.5 d for a 1‐log reduction—significantly longer than commercial depuration time frames. Surrogate viruses are more rapidly depurated than NoV; the mean number of days to reduce NoV by 1 log is 19, and 7.5 d for surrogates. Thus, surrogates do not appear to be suitable for assessing virological safety of depurated oysters; data on reduction of NoV infectivity during depuration would assist evaluations on surrogate viruses and the impact of methods used. The longer persistence of NoV highlights its special relationship with oysters, which involves the binding of NoV to histo‐blood group‐like ligands in various tissues. Given the persistence of NoV and on‐going outbreaks, depuration as currently performed appears ineffective in guaranteeing virologically safe oysters. Conversely, relaying oysters for 4 wk is more successful, with low NoV concentrations and no illnesses associated with products. The ineffectiveness of depuration emphasizes the need for coastal water quality to be improved to ensure oysters are safe to eat.     

Marine Pseudoalteromonas sp. Composes Most of the Bacterial Population Developed in Oysters (Tiostrea chilensis) Spoiled During Storage

ABSTRACT: To identify bacteria associated with spoilage in oysters, changes in both the load and composition of the bacterial community occurring in storage were followed. Oyster spoilage was accompanied by a 100-fold increase in the number of CFU. Molecular analysis revealed that a large proportion of the bacteria present in spoiled oysters possessed an intergenic 16S-23S rDNA spacer of approximately 400 bp. A spacer with the same size was also found in spoiled oysters of different origin and dates of harvest. The bacterial strains containing this spacer may constitute a common cause of the oyster spoilage. These strains were salt-dependent marine Pseudoalteromonas species and were probably present in oysters before harvest.     

Extension of Shelf-Life of Oysters by Pasteurization in Flexible Pouches

Combination of chlorination, packaging in flexible pouches, heating, cooling and cold storage could extend shelf-life of oysters from 2 wk to 3 months. Freshly shucked oysters were first blown (or washed) in aerated chlorinated water, drained and vacuum sealed in flexible pouches. Pouched oysters were heated in two successive water baths for appropriate thermal treatment. After cooling in ice water, the products were stored at 0.5°C. Sensory tests performed immediately after pasteurization indicated that the pasteurized oysters were similar to freshly shucked oysters. Both aerobic and facultatively anaerobic bacterial counts were drastically decreased after pasteurization. Chemical changes during treatment and storage were determined and are discussed.     

不同来源脂肪酶对乳制品风味的影响

为筛选高产低温脂肪酶的菌株,并对产酶条件进行优化,同时为脂肪酶的工业化开发提供生产资料。从黑龙江省漠河县土壤样品中筛选出一株产低温脂肪酶菌株,通过形态学鉴定、生理生化实验及分子生物学鉴定,确定该菌株为普城沙雷氏菌（Serratia plymuthica）。通过单因素实验,探究温度、pH、装液量、接种量、碳源、氮源、金属离子、诱导剂等不同因素对菌株产酶的影响,通过Plackett-Burman实验,爬坡试验及响应曲面设计,优化橄榄油、蛋白胨、装液量等因素的添加量。结果表明：该菌株最优产酶条件为20 ℃、pH7.5、装液量42 mL、接种量0.5%、20 g/L麦芽糖、14 g/L蛋白胨、0.5 g/L的MgSO₄·7H₂O及46 mL/L橄榄油。此优化条件下,脂肪酶活为98.05 U/mL,是优化前的5.85倍。酶学性质结果表明,该脂肪酶最适温度为30 ℃,属于低温脂肪酶,最适反应pH为7,Mg²⁺明显可以促进酶活。有机溶剂中甲醇和乙醇明显抑制了酶活性,而正己烷明显可以促进酶活性。该结论可为微生物资源开发利用,工业生产低温脂肪酶提供一定的理论依据及方法指导。