枣核多酚提取物对体外蛋白质非酶糖化的抑制作用

为发掘枣核多酚提取物新活性,拓宽其应用范围,采用牛血清白蛋白-葡萄糖非酶糖化反应体系,对超临界CO2萃取得到的枣核多酚提取物对体外蛋白质非酶糖化反应进程的影响进行了研究。结果表明,枣核多酚提取物对蛋白质非酶糖化反应中间产物Amadori和终产物AGEs的形成均具有较强的抑制作用并呈明显的量效关系;在实验条件下,枣核多酚提取物对蛋白质非酶糖化反应中间产物Amadori和终产物AGEs形成的最大抑制率分别可达83.83%和97.69%,IC50分别为18.79g/L和14.73g/L(折合成枣核质量浓度)。相关性分析表明,枣核提取物对蛋白质非酶糖化的抑制活性与其中的总酚含量呈极显著正相关关系,但不同萃取条件得到的枣核提取物的抑制活性与其中的总酚含量并不能完全一一对应,获得高提取率所需工艺条件与获得高活性提取物所需工艺条件可能不同。     

桑黄提取物对体外蛋白质非酶糖化的抑制作用

采用牛血清白蛋白-葡萄糖建立体外蛋白非酶糖化反应体系,考察温度、时间和葡萄糖浓度对糖化程度的影响。在37℃,牛血清白蛋白20 g/L,葡萄糖400 mmol/L,温育20天即可产生稳定可测的Amadori产物,温育40天可造成蛋白明显糖化,选定该体系考察桑黄提取物对体外蛋白质非酶糖化反应的抑制作用。结果显示,桑黄醇提物对Amadori产物和终产物AGEs的IC_(50)值分别为81×10~(-2) mg/m L和7.3×10~(-2)mg/m L,说明桑黄醇提物对蛋白质非酶糖化反应具有较强的抑制作用;桑黄水提物对Amadori产物抑制作用较弱,但能够有效抑制AGEs的生成,IC_(50)值为8.4×10~(-2) mg/m L,说明桑黄水提物也具有一定的抑制蛋白质非酶糖化作用。该研究结果表明桑黄醇提物和桑黄水提物都可以作为抗糖化物质进行开发应用。     

牛蒡多酚对荧光性晚期糖基化终产物形成的抑制作用

目的:晚期糖基化终产物(Advanced glycation end products,AGEs)是由还原糖的羰基和多肽、蛋白质等分子的自由氨基通过非酶反应形成的一系列复杂的化合物。多项研究发现,AGEs具有多种不可忽视的生理毒性。文章通过检测模拟食品热加工和人体环境模型中荧光性AGEs的生成情况,评价牛蒡多酚的抗糖化作用。方法:分别建立体外模拟食品热加工和人体环境形成AGEs的模型,采用荧光分析法测定2种模型中总荧光AGEs、特征荧光AGEs(戊糖素)以及蛋白质氧化产物双酪氨酸、犬尿氨酸生成量,对牛蒡多酚的抗糖化作用进行评价。结果:在食品热加工模型中,牛蒡多酚对总荧光AGEs生成的抑制率最高可达60.62%,对戊糖素生成的抑制率最高可达81.47%;同时,对蛋白质氧化产物双酪氨酸和犬尿氨酸的抑制率分别为57.36%和44.25%。在模拟人体环境形成AGEs模型中,牛蒡多酚对总荧光AGEs抑制率最高可达48.37%,对戊糖素生成的抑制率最高可达52.81%;对蛋白质氧化产物抑制率分别为双酪氨酸42.63%和犬尿氨酸30.72%。结论:在食品热加工和人体环境形成AGEs的模型中,牛蒡多酚均具有较好的抗糖化作用,可作为糖化反应抑制剂用于功能性食品添加剂或膳食补充剂。     

杨梅多酚对晚期糖基化终末产物的抑制作用

晚期糖基化末端产物(AGEs)是美拉德(Maillard)反应的产物之一,是蛋白质游离氨基与还原糖羰基反应形成的一类复杂物质的总称。较多研究表明植物多酚能够很好地抑制AGEs的形成。为了探究杨梅多酚抑制AGEs形成的能力并探讨其抑制机理,建立牛血清蛋白(BSA)-葡萄糖(Glucose)生成AGEs模拟反应体系。以纯度69.24%(DW)的杨梅多酚提取物(BP)为抑制剂,测定反应体系中荧光性AGEs和甲基乙二醛的变化,以及蛋白质羰基、巯基含量变化,·OH诱导生成的AGEs的变化。研究结果表明:杨梅多酚在BSA-Glucose模拟反应体系中对荧光性AGEs具有较强的抑制作用,且效果优于氨基胍和维生素E(P0.05),与茶多酚相当;杨梅多酚浓度越高对AGEs的抑制作用越强(P0.05),当其质量浓度为100μg/mL时,对荧光性AGEs的抑制率达97.6%。基于模拟体系中重要中间体甲基乙二醛的变化,蛋白质羰基和巯基含量的变化初步明确杨梅多酚对AGEs形成的抑制途径,即杨梅多酚通过清除模拟体系中的羟自由基、甲基乙二醛中间体,以及保护蛋白质巯基,抑制蛋白羰基化,减少蛋白质交联来阻断AGEs的形成。     

8种别样茶对AGEs抑制能力的筛选及其抑制机制探究

目的:本研究通过检测非酶糖基化终末产物（advanced glycation end-products,AGEs）生成量评价8种别样茶的糖基化抑制能力,并探究抑制效果较好的别样茶对AGEs生成各阶段的抑制作用机制。方法:本研究首先对8种别样茶水提液中总黄酮含量进行检测,接着通过构建体外蛋白质非酶糖基化模型实验检测了8种别样茶抑制AGEs生成的能力,最后择优测定其对糖基化早期产物果糖胺、中期产物活性羰基化合物以及蛋白质交联的抑制能力,从而探究其对非酶糖基化反应的抑制机制。结果:大叶苦丁茶（Ilex latifolia Thunb）和甜茶（Rubus suavissimus S. Lee）对AGEs的抑制效果在8种别样茶中较为突出,50 μg/mL时AGEs抑制率分别达到了76.31%±0.87%和81.75%±0.41%;大叶苦丁茶和甜茶主要通过抑制糖基化早期、中期产物的生成量来减少AGEs的产生。其中,500 μg/mL甜茶对果糖胺抑制率最高（59.12%）,蛋白质交联抑制率最高（81.41%）,5000 μg/mL大叶苦丁茶对活性羰基化合物抑制率最高（94.24%）。结论:大叶苦丁茶及甜茶可以作为抑制糖基化反应的功能食品,本研究可为具有抑制AGEs产生功效原料的综合开发利用提供一定的理论依据。     

响应面法优化石榴瓤多酚的提取工艺及抗糖基化活性分析

探讨应用响应面法优化石榴瓤多酚提取的最佳工艺条件,并测定其体外抗糖基化活性。以石榴瓤多酚得率为考察指标,料液比、乙醇体积分数和超声时间为影响因素,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken Design(BBD)试验设计优化石榴瓤多酚的最佳提取工艺条件,并通过建立牛血清白蛋白(BSA)-果糖模拟反应体系和BSA-丙酮醛模拟反应体系,评价石榴瓤多酚对非酶糖基化终末产物(AGEs)的抑制作用。结果表明,当料液比1:17(g/mL)、乙醇体积分数63.5%、超声时间37 min时,石榴瓤多酚得率达15.81%,与模型预测结果接近。在浓度0.375～36μg/mL内,石榴瓤多酚与对AGEs的抑制作用之间呈一定的正相关关系,在浓度为36μg/mL时,对BSA-果糖模型中AGEs的生成抑制率达到56.1%,抑制作用的IC_(50)=27.807μg/mL,对BSA-丙酮醛模型中AGEs的生成抑制率达到52.2%,抑制作用的IC_(50)=30.363μg/mL。该方法提取石榴瓤多酚可行、可靠,产物具有较好的抗糖基化活性。     

麦麸阿魏酸糖酯对体外蛋白质非酶糖基化反应的影响

研究从小麦麸皮中提取的阿魏酸糖酯(FGs)对体外蛋白质非酶糖基化反应(NEG)的影响。将牛血清白蛋白和葡萄糖在体外共同孵育,建立蛋白质NEG体外体系;不同浓度的FGs分别与反应体系共孵育,以荧光分光光度法测定FGs对蛋白质非酶糖基化反应产物(AGEs)生成的影响;此外,采用铁氰化钾法检测FGs的总还原能力。结果显示,FGs呈剂量依赖方式抑制AGEs的形成,对蛋白质NEG抑制的IC50为0.0382 mmol/L;铁氰化钾法检测FGs的总还原能力,还原铁离子的IC50为0.0310 mmol/L,低于对照VC的0.042 0 mmol/L。FGs抑制蛋白质的非酶糖基化,可能与其强还原能力有关。     

发酵乳杆菌对灭菌豆浆中晚期糖化终末产物形成的影响

豆浆含有优质蛋白质、必需脂肪酸和大量维生素,其经过巴氏杀菌或超高温处理会促进还原糖和蛋白质之间的糖基化反应,产生糖基化产物和晚期糖化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）,进而对人类健康造成威胁。为提高豆浆的品质,该文利用发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）发酵豆浆,探究发酵乳杆菌对灭菌豆浆AGEs 含量的影响。结果表明,经L.fermentum 发酵灭菌后的豆浆,荧光强度降低12%～17%。发酵豆浆可减少羰基化对蛋白二级结构的破坏,α-螺旋转变成β-折叠和无规卷曲。同时,发酵使灭菌豆浆的异黄酮含量从274.43μg/mL提升至351.83μg/mL;发酵乳杆菌发酵豆浆与豆浆相比,可显著提高抗氧化活性。综上所述,乳酸菌可抑制食品加工过程中AGEs 的形成。     

HPLC法测定乳制品中的结合型羟甲基糠醛

5-羟甲基糠醛来源于食品的热处理加工过程,分游离型和结合型两种。通过对Amadori产物水解和还原糖异构化可获得该化合物,它可作为一种评估食品中蛋白质发生质量损伤程度的有效标志物。采用三氯乙酸沉淀法对婴幼儿配方食品进行蛋白质沉淀,通过对获得的Amadori产物酸水解,最终测定发生于美拉德反应过程中的羟甲基糠醛含量。结果表明:Amadori产物水解的最优条件为:草酸浓度1.07 mol/L;22.22 mL草酸/g蛋白质;水解240 min。该方法的检出限为0.045μg/mL,变异系数为7.9%,回收率为92.2%。通过对市售样品分析发现,蛋白质质量热损伤程度不同的乳制品中B-HMF差别较显著。     

糖基化终末产物抑制剂对糖尿病并发症的影响研究进展

蛋白质非酶糖基化是指蛋白质等大分子中的游离氨基,与还原糖经过一系列反应形成稳定的非酶糖基化终末产物(Advanced Glycation End products,AGEs)的过程。体内过多积累的AGEs改变蛋白质的理化性质和生理功能,诱导促炎介质的表达并引起氧化应激,引起细胞损伤,进而导致糖尿病及其并发症等一系列疾病的产生。阻断AGEs的形成有望成为改善糖尿病慢性并发症的新途径。天然产物AGEs抑制剂,作为改善糖尿病及糖尿病综合征的重要物质,近年来成为了备受关注的研究对象。文章旨在总结AGEs在糖尿病并发症中的重要作用,对目前已有的AGEs抑制剂和裂解剂的研究进展进行综述。重点论述天然AGEs抑制剂的研究进展,以期为寻找具有良好应用前景的天然药物和保健品提供线索。     

Inhibitory effects of guava (Psidium guajava L.) leaf extracts and its active compounds on the glycation process of protein

Hyperglycaemia causes increased protein glycation and the formation of early glycation products and advanced glycation end products (AGEs) which are major factors responsible for the complications of diabetes. This study investigated the ability of guava leaf and compounds to inhibit glycation process in an albumin/glucose model system and compared the potency of these extracts with Polyphenon 60 which is a commercial polyphenol product extracted from green tea and with the standard antiglycation agent, aminoguanidine. The results showed that the inhibitory effects of guava leaf extracts on the formation of α-dicarbonyl compounds were over 95% at 50 μg/ml. Phenolic compounds present, namely gallic acid, catechin and quercetin exhibited over 80% inhibitory effects, but ferulic acid showed no activity. The guava leaf extracts also showed strong inhibitory effects on the production of Amadori products and AGEs from albumin in the presence of glucose. The phenolic compounds also showed strong inhibitory effects on the glycation of albumin, especially quercetin exhibited over 95% inhibitory effects at 100 μg/ml. According to the results obtained, guava leaf extracts are potent antiglycation agents, which can be of great value in the preventive glycation-associated complications in diabetes.     

甲鱼抗氧化肽对非酶糖基化反应及其终产物的抑制作用

建立体外非酶糖基化蛋白质-还原糖模拟反应体系的基础上,探究甲鱼抗氧化肽对非酶糖基化反应的抑制率(NEG)和晚期糖基化终末产物(AGEs)抑制率的影响.结果表明:甲鱼抗氧化肽能够抑制非酶糖基化反应和晚期糖基化终产物的产生,具有剂量依赖性.当甲鱼抗氧化肽处理蛋白质-还原糖体系21 d时,1.00 mg/mL甲鱼抗氧化肽对N...     

马来酸酐改性茶多酚对非酶糖基化的抑制作用

食品加工过程中所涉及的高温处理常会引发非酶糖基化反应,导致一些有害成分的产生,因此加工过程中应尽量避免这一现象。本研究用马来酸酐作为改性剂,制备马来酸酐改性茶多酚（maleic anhydride modified tea polyphenols,MA-TP）,采用紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法和荧光光谱法等研究改性茶多酚（tea polyphenols,TP）的抗氧化能力和对高温下非酶糖基化反应的抑制作用。结果表明：虽然MA-TP对2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸阳离子自由基清除能力较TP显著降低（P＜0.05）,但能有效抑制非酶糖基化反应。MA-TP在赖氨酸-果糖非酶糖基化反应体系中对前体物质的形成和褐变程度的抑制作用较TP明显增强。MA-TP对二羰基化合物乙二醛、甲基乙二醛以及总体荧光性糖基化终产物的最高抑制率分别为82.95%、40.33%和70.25%,抑制效果显著优于TP和阳性对照氨基胍（P＜0.05）,其对3-脱氧葡萄糖醛酮的最高抑制率为45.01%,在反应中后期抑制效果显著优于TP（P＜0.05）;MA-TP对戊糖素的最高抑制率为88.43%,其抑制效果与TP无明显差异,但显著优于阳性对照氨基胍（P＜0.05）。综上,研究可为以改性TP作为非酶糖基化抑制剂在食品领域的应用提供理论参考。     

荞麦壳提取物有效组分的分离及体外抗糖尿病活性

目的:研究荞麦壳提取物经大孔树脂分离纯化后各组分的体外活性。方法:荞麦壳提取物(buckwheat hull extract,BHE)、一次纯化后获得的精制物(purified buckwheat hull extract,PBHE)、二次纯化后分为的5个组分(BHE-M1、BHE-M2、BHE-M3、BHE-M4、BHE-M5)分别用于测定α-葡萄糖苷酶活力和蛋白质糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)抑制率。结果:BHE一次纯化后荞麦壳总黄酮含量从30.8 g/100 g升高到65.3 g/100 g,二次纯化后BHE-M4组分总黄酮含量最高,为89.2 g/100 g。当质量浓度为1.000 mg/m L时各组分的α-葡萄糖苷酶活力抑制率分别为16.03%(BHE)、24.39%(PBHE)、18.04%(BHE-M2)、25.46%(BHE-M3)、28.23%(BHE-M4)、26.24%(BHE-M5),显著高于阳性对照组阿拉伯糖;抗AGEs活性实验结果显示,在葡萄糖-牛血清白蛋白、果糖-牛血清白蛋白体系中除BHE-M1组分外,其余组分活性均高于阳性对照胺基胍,其中BHE-M4组分活性最高;BHE-M4组分的高效液相色谱-质谱联用分析结果显示,BHE-M4中含有的黄酮类化合物可能为山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷或山奈酚-3-O-β-D-半乳糖苷、牡荆素、芦丁、异槲皮苷或金丝桃苷、槲皮苷。结论:荞麦壳提取物经纯化后高黄酮组分的α-葡萄糖苷酶抑制活性以及抗AGEs活性最高,即荞麦壳黄酮是荞麦壳抗糖尿病活性的主要组成成分。     

苹果皮提取物的多酚组成及益生活性

苹果皮是生产苹果酱、果汁和其他产品的副产品,为探究其益生活性,该研究首先利用φ=80%丙酮作为溶剂得到苹果皮提取物（Apple Peel Extract,APE）,并采用高效液相色谱法对提取物的多酚组分进行分析。再通过体外益生菌厌氧发酵,跟踪测定24 h期间的生物量、pH值和多酚组分的变化。苹果皮提取物一共鉴定到13种多酚类物质,主要组分为根皮苷515.54 mg/100 g、金丝桃苷530.06 mg/100 g和槲皮苷459.04 mg/100 g。与空白组相比,APE显著促进了长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌四种益生菌的增殖,其发酵液的pH值维持在3.66~4.00,降低了42.86%~47.71%。在发酵过程中,根皮苷分别被消耗了93.36%、89.21%、86.31%和0.41%。结果表明,苹果皮提取物拥有丰富的多酚单体组成,是一种潜在可利用的益生元,可以调节肠道益生菌生长及代谢,具有较高的益生活性。     

褐藻多酚对晚期糖基化终产物的抑制作用研究

目的 研究褐藻多酚对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)生成的抑制作用及其机制.方法 建立牛血清蛋白与葡萄糖体外模拟体系及食品热加工鱼肉肠模型,以不同浓度褐藻多酚为抑制剂,研究其对AGEs生成的抑制作用;通过分析模拟体系中赖氨酸和葡萄糖含量、蛋白质巯基水平及葡萄糖...     

响应曲面分析法优化苹果渣中多酚类物质的果胶酶辅助提取工艺

研究了响应面分析法对苹果渣中多酚类物质的果胶酶辅助提取工艺。以总多酚、咖啡酸提取量为评价指标,在单因素实验基础上根据中心组合实验设计原理,采用3因素5水平的响应曲面分析法对提取工艺进行了优化。通过响应曲面实验及回归分析得出最佳工艺条件为：果胶酶,基质比O．11、反应温度38．00℃、反应时间12．53h。在此条件下,预测总多酚和咖啡酸提取量分别为11．32gGAE／kg和173．87mg／kg。经验证,总多酚和咖啡酸提取量分别达到11．08gGAE／kg和170．03mg／kg。另外,相对于对照组的6．78gGAE／kg和13．14mg／kg分别提高1．6倍和12．9倍。表明由响应曲面法获得的二次模型方程能较好地预测实验结果及优化条件：果胶酶辅助提取工艺稳定合理、准确可靠,是提取苹果渣中总多酚、咖啡酸的可行方法。     

Inhibitory effect of onion extract on polyphenol oxidase and enzymatic browning of taro (Colocasia antiquorum var. esculenta)

The inhibitory effect of onion extract on polyphenol oxidase and enzymatic browning of taro was investigated. The polyphenol oxidase from taro was strongly inhibited by various reducing agents, such as l-ascorbic acid, l-cysteine, dithiothreitol, glutathione and sodium pyrosulfite. The enzyme was also inhibited by addition of onion extract. Regardless of substrates used, the addition of heated onion extract at 100 °C for 10 min, gave a stronger inhibitory effect on taro polyphenol oxidase activity than did fresh unheated extrtact. The inhibitory effect of onion extract was dependent on heating temperature and time. The addition of glucose, glycine, or both to the onion extract, during heating, stimulated the inhibitory effect of the onion extract, suggesting that non-enzymatic browning products, produced during heating, might be responsible for the stronger inhibitory action of the heated onion extract.     

大蒜中γ-谷氨酰半胱氨酸衍生物对食品加工中晚期糖基化终产物的抑制作用

目的:比较大蒜中提取的γ-谷氨酰半胱氨酸衍生物γ-谷氨酰-甲基-半胱氨酸(γ-glutamyl-methyl-cysteine,γ-GMC)、γ-谷氨酰-丙基-半胱氨酸(γ-glutamyl-propyl-cysteine,γ-GPC)及人工合成的γ-谷氨酰-丁基-半胱氨酸(γ-glutamyl-butyl-cysteine,γ-GBC)对食品加工中产生的晚期糖基化终产物(advanced glycation end-products,AGEs)的抑制作用。方法:在加入抑制剂条件下,通过紫外-可见吸光光度法检测反应初产物乙二醛、果糖胺生成量的变化;运用荧光法检测戊糖素和荧光性AGEs在反应过程中生成量的变化;采用高效液相色谱法检测终产物羧甲基赖氨酸(carboxymethyl lysine,CML)生成量的变化。结果:γ-GMC和γ-GPC对早中期反应产物抑制效果较好,而γ-GBC对末期产物抑制效果明显,3种抑制剂对于抑制荧光性产物效果相似。结论:3种半胱氨酸衍生物均可抑制晚期糖基化反应,因其取代基不同而对糖基化反应产物抑制效果不同,但对荧光性交联产物抑制能力类似。