蒙古干酪中产细菌素戊糖片球菌的筛选及其细菌素理化特性研究

利用打孔法从蒙古农户自制干酪样品中分离得到1株具有抑菌活性的乳酸菌C-2-1。在排除有机酸、过氧化氢的影响后,通过酶敏感性实验确定此抑菌物质为蛋白质类物质,即细菌素。经16S rDNA序列同源性分析鉴定其为戊糖片球菌。以单核细胞增生李斯特菌ATCC19114为指示菌,当戊糖片球菌C-2-1生长到稳定期22~26 h时,达到最大抑菌活性5 120 AU/mL;细菌素C-2-1对多种革兰氏阳性菌有较强的抑制作用,对供试的革兰氏阴性菌和酵母菌无明显抑制作用;对指示菌单增李斯特菌的作用方式为杀菌;在60~90℃及pH=2.0~9.0条件下抑菌活性稳定;对SDS、吐温-20、吐温-80、尿素、NaCl、EDTA不敏感;对其产生菌细胞表面无吸附性;通过Tricine-SDS-PAGE确定其分子质量在5.8~7.8 kDa。从蒙古干酪中筛选出的戊糖片球菌所产的细菌素C-2-1具有良好的热、酸稳定性,具有作为乳制品生物防腐剂的潜在应用价值。     

产细菌素的戊糖片球菌的筛选及其细菌素的理化性质研究

从牛肉丸中分离筛选到1株具有抑菌活性的乳酸菌菌株N463,对单核细胞增生李斯特菌ATCC54003的生长具有良好的抑制作用.16S rDNA序列同源性分析鉴定乳酸菌N463为戊糖片球菌.在排除有机酸、过氧化氢的干扰后,确定该抑菌物质为蛋白类物质,即细菌素,命名为细菌素N463.理化性质研究表明细菌素N463具有较好的热...     

新疆酸马奶中乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性及分子量确定

首先时分离自新疆酸马奶中的乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性进行研究,通过酶敏感性实验,确定乳酸片球05-8所产抑菌物质为细菌素,该细菌素在100℃ 90 min和121℃ 10 min具有较好的热稳定性,同时在pH值为2～8的范围内有抑菌活性.当细菌生长到稳定期时,达到最大产量1 280 AU,最佳收获期为13 h.以单核细胞增生李斯特氏菌为指示菌,确定其对细菌的作用方式为杀死细菌.此外,还能抑制戊糖片球菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌La4、短乳杆菌AS1.12等革兰氏阳性菌.然后通过Tricine-SDS-PAGE活性抑菌实验测定此细菌素的分子量在14.4 ku以下,初步确定细菌素05-8为Ⅱa类细菌素.     

风干肠中戊糖片球菌所产细菌素L5-6的理化特性研究

目的:对从风干肠中筛选的戊糖片球菌所产细茵素L5-6的理化特性进行系统研究,为开发安全高效的食品生物防腐剂奠定理论基础.方法:采用管碟法做抑菌试验,利用N-羟甲基甲基甘氨酸-SDS-PAGE电泳确定细茵素的相对分子质量.结果:抑菌物质L5-6时胰蛋白酶、蛋白酶K、链霉蛋白酶E敏感,证明此押菌物质为细菌素;细菌素L5-6在100℃30 min,pH 2～10的条件下具有极强的抑菌活性;当戊糖片球菌生长到稳定期且pH为4.2时,达到最大抑菌活性2 560AU,确定其最佳收获时期为18 h;细菌素对单核细胞增生李斯特菌的作用方式为杀死细菌,能抑制金黄色葡萄球菌、植物乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种等革兰氏阳性菌以及大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌等革兰氏阴性菌;N-羟甲基甲基甘氨酸-SDS-PAGE电泳确定细菌素L5-6的相对分子质量约为4 kDa.结论:细菌素L5-6具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,抑菌谱广,可被人体内蛋白酶降解.细菌素L5-6在食品防腐保鲜领域具有应用前景.     

产细菌素乳酸菌的筛选与鉴定

从蒙古国风干牛肉中分离出28株乳酸菌,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和单核增生李斯特菌为指示菌检测28株乳酸菌的抑菌活性,其中菌株37X-3和菌株37X-13对3种指示菌的抑菌能力较强,且经胃蛋白酶和蛋白酶K处理后抑菌活性全部丧失,表明2株乳酸菌通过产细菌素的方式发挥抑菌作用。再经表型、生理生化和基因型鉴定,确定菌株37X-3为戊糖片球菌,菌株37X-13为乳酸片球菌。2种片球菌素在121 ℃,15 min,pH 2～6范围均能抑制3种指示菌的生长,且对单核增生李斯特菌抑菌作用最强。2种片球菌素抑菌谱广,不仅能抑制枯草芽孢杆菌、屎肠球菌等革兰氏阳性菌,还能抑制沙门氏菌、志贺氏菌等革兰氏阴性菌。     

产肠球菌素乳酸菌的筛选及其生物学性质研究

从自制传统发酵酸菜中分离出34株乳酸菌,通过滤纸片法,筛选出一株对大肠杆菌有明显抑制作用的菌株屎肠球菌BC-3。其代谢产物经过排酸、排除过氧化氢后仍有抑菌活性,经过蛋白酶处理后,活性丧失,表明其产生的抑菌活性物质为细菌素。进一步对屎肠球菌BC-3产生细菌素的条件及细菌素粗提物性质进行研究,表明在37℃下,培养20h,抑菌活性最高,抑菌圈直径达16.34mm。对其发酵粗提液生物学性质进行分析,结果为:肠球菌素E3具有很高的耐热性,p H2.0¹0.0都具有很好的抑菌活性,金属离子、有机溶剂处理后抑菌活性几乎不受影响。     

植物乳杆菌、戊糖片球菌对产肠毒素金黄色葡萄球菌生长的影响

研究食盐含量、pH值、温度对产肠毒素金黄色葡萄球菌的生长的影响,并主要研究植物乳杆菌和戊糖片球菌对产肠毒素和不产肠毒素金黄色葡萄球菌生长的影响以及之间的差别.结果表明:植物乳杆菌和戊糖片球菌均能抑制金黄色葡萄球菌的生长,植物乳杆菌的抑菌活性显著高于戊糖片球菌(P＜0.05),植物乳干菌和戊糖片球菌对不产肠毒素金黄色葡萄球菌的抑菌效果显著高于产肠毒素金黄色葡萄球菌(P＜0.05).     

产抗李斯特菌细菌素乳酸菌的筛选与鉴定

从51株肠球菌中筛选出2株具有抑制李斯特菌活性的肠球菌菌株:肠球菌KLDS6.0610和肠球菌KLDS6.0611。在排除有机酸和过氧化氢的干扰后,2株菌的无细胞发酵上清液对指示菌还有强烈的抑制作用。经蛋白酶K处理后,抑菌活性丧失,证明无细胞发酵上清液中含有蛋白性质的抑菌物质,即细菌素。经菌体形态和16SrDNA序列同源性分析鉴定2株肠球菌均为粪肠球菌。     

清酒乳杆菌ZJ220产细菌素的研究

从生鲜牛乳中分离获得1株能够产生抑菌活性物质的菌株,在排除有机酸、过氧化氢的干扰后,该菌发酵上清液仍有明显的抑菌活性。以蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶处理发胶上清液后其抑菌活性消失,试验表明该菌株产生的抑菌活性物质具有蛋白质性质,初步确定为一种细菌素。经生理生化和16S rDNA鉴定该菌为清酒乳杆菌,命名为Lactobacillus sakei ZJ220。细菌素经疏水洗脱、离子交换、凝胶过滤3步法得到纯化。经Tricine-SDS-PAGE分析该细菌素分子质量为6.0 ku。抑菌谱测定结果表明,该细菌素不仅能抑制革兰氏阳性菌,而且能抑制革兰氏阴性菌。经不同酸、热处理,该细茵素仍有较好的抑菌活性。     

乳酸菌细菌素对小鼠肠道菌群结构及代谢产物的影响

采用牛津杯双层平板法筛选得到2株具有抑菌能力的乳酸菌——乳酸片球菌CCFM 28和格氏乳杆菌JCM 11657。排除有机酸作用后,发酵上清液经过氧化氢酶与蛋白酶处理后仍具有抑菌能力,表明这2株菌的抑菌物质主要为细菌素,且实验结果表明CCFM 28的抑菌谱较JCM 11657更广泛。通过测定代时以及耐酸耐胆盐能力,从多株不产细菌素的乳酸片球菌和格氏乳杆菌中获得与CCFM 28和JCM 11657生物学性质最为接近的乳酸片球菌ZT-45与格氏乳杆菌JS-SZ-1-5。以5周龄C57BL/6雄性小鼠作为实验对象,研究2对产与不产细菌素的乳酸菌对宿主肠道菌群结构及代谢产物的影响。实验结果表明,乳酸菌是否产细菌素、所产细菌素的种类和/或抑菌谱的大小均可能会影响小鼠肠道菌群结构,但不影响短链脂肪酸含量的变化。     

金鲳鱼发酵菌株筛选及其生物学特性与风味形成评价

为了有效控制发酵鱼的品质及其保质期,从传统发酵金锠鱼中筛选适合作发酵剂的菌株。以过氧化氢酶阳性、耐盐性、抗菌性及不产生组胺为筛选指标,采用稀释分离法分离目标菌株,并对其生物学特性、发酵风味与口感进行评价。结果显示,从发酵金锠鱼中分离到的38株菌株中,筛选出的两株潜在发酵菌株（zh-b和zh-f）经形态鉴定与16S rRNA分析鉴定为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）和植物乳杆菌（Lactobacillus planta-ruma）,其最适温度分别为20与30 ℃,最适pH为5、6。两株菌对金黄色葡萄球菌与大肠标杆菌均具有抗菌活性,但植物乳杆菌抗菌活性更好,且产酸能力明显高于戊糖片球菌。电子鼻对发酵产物进行测定,发现戊糖片球菌产生的甲基类、硫化物、氮氧化合物、醇类或醛酮类和有机芳香硫化物响应值（64.10、57.98、44.75、40.22和19.93）高于植物乳杆菌（5.50、34.11、10.68、0和8.95）,是香气成分的主要贡献者。电子舌测定发现,两株菌均具有产生鲜味、鲜回味的能力,且戊糖片球菌的味值分别为14.32、6.64,明显高于植物乳杆菌产生鲜味、鲜回味（3.20、2.90）,但只有植物乳杆菌产生酸味。另外,两株菌也产生非常少量的苦味。研究为两株菌作为发酵剂用于规模化生产发酵金鲳鱼提供依据。     

产胞外多糖乳酸菌的筛选及抗氧化特性研究

以分离自贵州侗族、苗族传统发酵食品的36株乳酸菌为受试菌,筛选出8株高产胞外多糖（膜截留分子质量为8 000~14 000 u）的乳酸菌,分别为SR2-1（Pediococcus sp. F3S1）、SR2-2（Pediococcus pentosaceus NGRI 0304）、SR3-2（Pediococcus pentosaceus LB-WC）、SR8（Lactobacillus kimchi）、SR10-2（Pediococcus sp. 22-4）、SR12-1（Lactobacillus graminis）、H1（Staphylococcus sp. 3034O2）和XS2（Pediococcus pentosaceus GS17）,并对其胞外多糖进行体外抗氧化特性研究。结果显示,8株乳酸菌的胞外多糖均具有抗氧化活性,其中胞外多糖质量浓度为30 μg/mL时,乳酸菌SR2-2、SR8和SR12-1的胞外多糖对Fe2+的清除率分别为15.55%、12.41%、53.21%;胞外多糖质量浓度为40 μg/mL时,乳酸菌SR2-2、SR8和SR12-1的胞外多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH·）和NO2-的清除率分别达9.69%、11.93%、8.93%及5.73%、7.82%、3.82%。这三株乳酸菌显示出一定的抗氧化活性。     

低盐发酵香肠用优良菌株的分离筛选及鉴定

从10 种我国自然发酵制品中分离纯化得到52 株乳酸菌及56 株过氧化氢酶阳性球菌,首先通过菌株耐受性、发酵特性等指标对菌株进行初步筛选,然后利用抑菌特性和风味特性对菌株进行复筛,选择可能改善低盐发酵香肠安全性和风味的优良菌株,最终筛选得到3 株葡萄球菌Z9、L2和R2,以及4 株乳酸菌P6、P12、X和SN1-3。经由形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析对筛选得到的菌株进行鉴定,结果表明,葡萄球菌菌株Z9、L2为腐生葡萄球菌,R2为肉葡萄球菌;乳酸菌菌株P6、P12均为植物乳杆菌,X为干酪乳杆菌,SN1-3为戊糖片球菌。最后测定菌株的生长特性及产酸能力,研究菌株间的拮抗特性,最终筛选得到戊糖片球菌SN1-3与肉葡萄球菌R2作为制作发酵香肠的复配菌株。     

发酵香肠中分离纯化的三株乳酸菌产酸特性研究

为了研究从发酵香肠中分离纯化的3株乳酸菌粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)和肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)的产酸性能,对这3株菌在不同pH、温度、NaCl、NaNO2条件下的生长情况及产酸情况进行了测定。研究结果显示:这3株菌中,肠膜明串珠菌和戊糖片球菌的生长特性较好;粪肠球菌的生长特性虽不如肠膜明串珠菌和戊糖片球菌,但产酸能力最好,戊糖片球菌耐盐性最好、肠膜明串珠菌耐亚硝酸盐的特性最好;在不同温度和pH条件的测试中,肠膜明串珠菌的生长能力最好,粪肠球菌次之。这3株乳酸菌在发酵肉制品中均产生乳酸。总之,这3株菌均具有用于发酵制备乳酸的能力。     

Antifungal activity of Lactobacillus fermentum Te007, Pediococcus pentosaceus Te010, Lactobacillus pentosus G004, and L. paracasi D5 on selected foods

In the search for new preservatives from natural resources to replace or to reduce the use of chemical preservatives 4 strains of lactic acid bacteria (LAB) were selected to be evaluated for their antifungal activity on selected foods. The supernatants of the selected strains delayed the growth of fungi for 23 to 40 d at 4 °C and 5 to 6 d at 20 and 30 °C in tomato puree, 19 to 29 d at 4 °C and 6 to 12 d at 20 and 30 °C in processed cheese, and 27 to 30 d at 4 °C and 12 to 24 d at 20 and 30 °C in commercial bread. The shelf life of bread with added LAB cells or their supernatants were longer than normal bread. This study demonstrates that Lactobacillus fermentum Te007, Pediococcus pentosaceus Te010, L. pentosus G004, and L. paracasi D5 either the cells or their supernatants could be used as biopreservative in bakery products and other processed foods. PRACTICAL APPLICATION: The heat stability nature of the antifungal compounds produced by the LAB isolates offers a promising application of L. fermentum Te007, P. pentosaceus Te010, L. pentosus G004, and L. paracasi D5 as biopreservative in bakery products or other processed foods to replace or reduce the use of chemical preservatives.     

新疆地区驴乳源优良乳酸菌发酵剂的筛选及菌株益生特性

从新疆哈密地区的15个驴乳样品中分离筛选出38株疑似乳酸菌,其中7株菌具有明显凝乳特性.经16S rRNA基因测序鉴定为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)HL12-21、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)HL29-5、蒙氏肠球菌(Enterococcus mundt...     

海带酶解液的戊糖片球菌发酵及其产物的抗氧化性、抑菌性

为探讨海带及其发酵产物作为功能食品的可能性,用纤维素酶水解海带后,使用戊糖片球菌对酶解液进行发酵,并针对发酵过程中的pH值、总糖、还原糖、菌落数变化进行检测。利用ABTS＋·清除与铁还原能力实验测定海带酶解物及其发酵产物的抗氧化性;同时借助微量热方法,利用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌对比评价两者的抑菌性。结果表明：37 ℃静置培养下戊糖片球菌对海带酶解液的发酵在12 h基本结束,而发酵后海带酶解产物的抗氧化能力与抑菌能力分别提高了23.74%和100%。     

湘西传统酸鱼中乳酸菌的分离及特性研究

对从湘西传统酸鱼4个不同发酵阶段分离的196株乳酸菌种类进行了研究,分离出的乳酸菌主要包括植物乳杆菌、戊糖片球菌、食品乳杆菌、明串珠菌、肠球菌及干酪乳杆菌等,并且这些乳酸菌在发酵过程中呈现出一种动态的变化进程。同时对分离到的乳酸菌进行了一系列的生理生化试验;产酸速率实验,耐食盐、耐亚硝盐实验,耐酸及耐胆盐实验,氨基酸脱羧酶实验以及抑菌实验,选育出具有较好的发酵剂潜力的3株植物乳杆菌和1株戊糖片球菌。     

传统淡水鱼发酵制品中乳酸菌的分离筛选及发酵特性

为解决我国传统淡水鱼易腐败、鱼腥味重、利用率低及附加值低等问题,对我国传统淡水鱼发酵制品中的乳酸菌进行分离鉴定及特性研究。结果表明：通过生理生化、耐盐性、抑菌性、适宜生长温度、生长曲线及pH值变化等实验筛选出的7 株乳酸菌均适宜作为淡水鱼发酵制品的发酵剂;通过16S rRNA序列分析法,确定其中2 株为戊糖片球菌,余下5 株为植物乳杆菌。