地衣芽孢杆菌2709 蛋白酶分离纯化研究

对产自地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)2709 的碱性蛋白酶通过乙醇沉淀、盐析、DEAE 阴离子交换层析、凝胶层析4 步纯化,最终获得电泳纯的酶。以去酰胺度及酶比活力为指标,对碱性蛋白酶分离纯化条件进行优化。结果发现：提纯酶的比活力达61069U/mg,纯化倍数为38.7,活性回收率为19.3%,去酰胺度为20.9%。并研究该酶的基本酶学特性,结果发现：该酶最适作用pH 值为10.0,最适反应温度为50℃。40℃保温2h 后该酶保持80% 以上的活力,在pH8～11 之间有较高的pH 值稳定性。     

地衣芽孢杆菌2709高去酰胺活性碱性蛋白酶发酵条件及酶学性质的研究

就地衣芽孢杆菌2709发酵生产高去酰胺活性碱性蛋白酶的发酵条件进行了研究,以酶液对大豆蛋白的去酰胺度和肽键水解度为指标,对产酶条件进行优化,并研究了该酶的基本酶学特性;确定了培养基的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为黄豆饼粉,C/N在1:2～1:1范围时去酰胺度最高;最适摇瓶发酵条件为:种龄18h,接种量2%,装液量30mL/100mL,摇床转速140r/min,pH7.0,35℃,发酵50h;碱性蛋白酶最适作用pH为10.0,最适反应温度为50℃,60℃保温2h后仅存5.9%的活力,在pH8～11之间有较高的pH稳定性。      

地衣芽孢杆菌2709产碱性蛋白酶的发酵动力学研究

应用自动控制的微生物发酵罐分批发酵地衣芽孢杆菌（B.licheniformis）2709,通过获得的生长曲线、糖消耗曲线和产酶曲线探索其生长与代谢的基本规律。选择适宜动力学公式,通过分批发酵的一系列实验数据计算,获得参数K_S、μm、Y′_X/S、m_S、α和β的值,从而建立了能够描述地衣芽孢杆菌2709发酵过程的动力学模型。      

地衣芽孢杆菌2709产碱性蛋白酶的酵动力学研究

应用自动控制的微生物发酵罐分批发酵地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)2709,通过获得的生长曲线、糖消耗曲线和产酶曲线探索其生长与代谢的基本规律.选择适宜动力学公式,通过分批发酵的一系列实验数据计算,获得参数Ks、μm、Y'X/S、ms、α和β的值,从而建立了能够描述地衣芽孢杆菌2709发酵过程的动力学模型.     

地衣芽孢杆菌弹性蛋白酶纯化和性质研究

用地衣芽孢杆菌发酵液制备弹性蛋白酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀和Sephadex凝胶柱层析的方法分离纯化弹性蛋白酶,并对弹性蛋白酶的酶学性质进行研究。结果表明：弹性蛋白酶粗酶液经40%～70%饱和度的硫酸铵纯化后比活力提高到120U/mg,经凝胶柱层析纯化后比活力可达到292U/mg,纯化倍数为12.6,SDS-PAGE法证实弹性蛋白酶分子质量为29.5kD。对酶学性质的研究结果表明：弹性蛋白酶最适反应温度为55℃,最适反应pH值为7.4,以刚果红-弹性蛋白为底物,米氏常数Km为9.67mg/mL。低浓度金属离子Ca2+和K+对酶活力有促进作用,而Mg2+、Mn2+、Zn2+和Al3+对酶活力则有抑制作用。     

枯草芽孢杆菌HS18碱性蛋白酶分离纯化及其性质研究

从合浦珠母贝肠道中分离鉴定到酶菌株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HS18,将枯草芽孢杆菌HS18的发酵液,经过硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A-50柱层析、Sephadex G-100柱层析3步纯化后得到了单一的酶蛋白,回收率为11.4%;经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得酶蛋白分子量约为31ku;该蛋白酶最适反应温度为50℃,最适pH10.0;K+及Na+对酶有明显激活作用;丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂（PMSF）能强烈抑制酶活性。表明所纯化到的蛋白酶为丝氨酸碱性蛋白酶。      

一株地衣芽孢杆菌噬菌体的分离及其性质分析

从生产碱性蛋白酶的车间附近的下水道淤泥和后处理车间空气中分离得到了一株噬菌体。电镜观察表明该噬菌体有多面体的头部和细长的尾部组成,有着长尾病毒科噬菌体的形态特征。在供试菌种中,该噬菌体以地衣芽孢杆菌为宿主,对其生理特性研究发现,该噬菌体在pH 5-10之间有着很好的稳定性,在高温下有一定的稳定性,且金属离子可以促进其对宿主菌的侵染。根据实验结果绘制出噬菌体的一步生长曲线,可知感染宿主菌的潜伏期约为40 min,爆发期约为110 min。对噬菌体核酸性质的分析发现,其遗传物质为双链线状DNA,其分子量大约为36 kb。     

高地芽孢杆菌PY41碱性蛋白酶纯化

该文对高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis)PY41菌株的碱性蛋白酶进行了分离纯化,并对其酶学性质进行了研究。通过硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤层析和疏水层析得到纯化的碱性蛋白酶,经SDS–PAGE凝胶电泳检测得到该蛋白酶相对分子质量为29.5 kDa。     

地衣芽孢杆菌A 产碱性蛋白酶的研究

研究从经过60Co 照射的东海香参水解液中分离出的地衣芽孢杆菌A 产碱性蛋白酶的产率、分离纯化与生化特性。经硫酸铵沉淀、DEAE- Sepharose 离子交换层析和Sephadex G-75 凝胶层析分离纯化后,碱性蛋白酶产率为5.8%;经SDS- PAGE 电泳测得其分子质量为35kD。酶的最适反应温度为50℃,最适pH 值为11,热稳定性较好。该蛋白酶具有一定的耐氧化能力。     

地衣芽孢杆菌产碱性蛋白酶发酵条件优化

碱性蛋白酶是一类重要的工业用酶,广泛应用于洗涤、制革、酿造等行业,发挥着重要作用。为提高地衣芽孢杆菌的产酶活力,在单因素实验的基础上,采用3因素3水平的响应面分析法,以蛋白酶活力为响应值,对影响地衣芽孢杆菌20203产碱性蛋白酶的因素进行研究分析,得到了最佳发酵条件为:葡萄糖1.5%,豆粕6%,乳糖4%,磷酸铵1.2%,KCl 0.03%,CaCl2 0.07%,MgSO4 0.02%,吐温80 0.05%,初始pH9.0,培养温度37℃,摇瓶转速300r/min,5d后发酵液酶活为2382u/mL。通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法得到该蛋白酶的分子量为35ku。     

芽孢杆菌碱性蛋白酶的沉淀分离特性和酶学性质研究

土壤中筛选获得1株产碱性蛋白酶的芽孢杆菌.该蛋白酶发酵16 h达到产酶高峰,蛋白酶热稳定性较好,50℃条件下处理50 min,酶活性残留86% ,最适作用pH值7.7,丙酮、PEG等可有效沉淀蛋白酶,(NH4)2SO4在5℃、pH9.0条件下可沉淀分离蛋白酶,回收率达95%.     

2709碱性蛋白酶酶活测定的影响因素研究

目的研究福林法测定蛋白酶酶活时的影响因素。方法测定2709碱性蛋白酶酶活,对比分析了各种常见差异造成的影响。结果酪蛋白、滤纸的选择及样品稀释液配制时间对酶活测定影响较大,福林试剂、样品溶解方式等影响不明显,而酶活计算方法的不同也会带来差异。结论检测人员在检测前应明确采用的方法、试剂及计算方法。     

芽孢杆菌B15胞外蛋白酶和淀粉酶的酶学性质研究

为探索芽孢杆菌B15胞外蛋白酶和淀粉酶在饲用酶制剂方面的应用,试验对其产酶情况及胞外酶的酶学性质进行了研究。结果显示,该菌株产蛋白酶和淀粉酶的最高酶活性分别为(181.9±3.5)U/mL和(50.2±1.6)U/mL。蛋白酶和淀粉酶的最适作用温度范围分别为40℃～50℃和40℃～70℃,最适作用pH值为7和5～7。蛋白酶和淀粉酶经40℃～50℃热处理,以及在pH值为5～9的缓冲液中较稳定。蛋白酶被EDTA所抑制,属金属蛋白酶,金属离子(10mmol/L)Mg2+和K+对其有激活作用,Fe2+有抑制作用,而Fe2+对淀粉酶有一定的激活作用。     

胰酶和2709混合酶助浸水的研究

将胰酶和2 70 9混合酶应用于生皮浸水,研究其在相同温度、不同时间、不同pH值条件下的应用效果。测定了浸水后皮的含水量、浸水液中蛋白质含量和羟脯氨酸含量,并对浸水皮进行了感观评定。结果表明:胰酶和2 70 9混合酶作为黄牛盐湿皮浸水助剂,不仅可以缩短浸水时间,去除绝大部分污物和部分纤维间质、少量油脂,还可以减轻颈部皱纹,提高得革率,使浸水皮更柔软、丰满。通过探索性试验,确定了胰酶和2 70 9蛋白酶作为黄牛盐湿皮浸水助剂的使用条件为:常温,液比为3 ,pH值为9.5 ,胰酶和2 70 9蛋白酶各占5 0 % (以酶的使用量为0 .0 1 6%皮质量计) ,浸水时间为9h。     

Purification and Characterization of a Thermostable alpha-Amylase from Bacillus licheniformis

The heat stability of a bacterial α-amylase is important for industrial starch utilization. Although extensive studies have been done on heat stable α-amylase from various bacterial species little is known about the α-amylases of Bacillus licheniformis. In order to get better understanding of thermostable amylases produced by different strains of B. licheniformis and provide information how to utilize the enzyme in starch processing, studies on purification and characterization of a commercial heat stable bacterial α-amylase from B. licheniformis BLM 1777 are reported.