青海亚麻籽中木脂素含量测定及抗氧化活性分析

目的:为促进青海地区亚麻籽及其加工副产物的高值化利用.方法:以青海省20种不同产地、品种亚麻籽为原料,采用反相高效液相色谱法测定其木脂素开环异落叶松酚葡萄糖苷和开环异落叶松脂素含量,并以DPPH自由基和ABTS自由基清除能力评价其抗氧化活性.结果:青海省不同产地、品种的亚麻籽中木脂素含量差异显著(P＜0.05),开环异...     

蜂胶中具有抗氧化活性的木脂素

利用柱层析方法从蜂胶中分离得到了4种呋喃骈呋喃类木脂素，利用波谱学方法鉴定为芝麻脂素（sesamin）、yangambin、（＋）－松脂素[( )-pinoresinol]和（＋）－丁香脂素[( )-syringaresinol]，其中（＋）－松脂素和（＋）－丁香脂素为首次从蜂胶中得到。利用测定小鼠肝细胞微粒体脂质过氧化抑制作用的方法，检测了所得到的4种木脂素的抗氧化活性，其IC50值范围为9.0-14.0μg/ml。     

亚麻籽中木脂素的提取分离与结构鉴定

采用正交试验研究亚麻籽粕中提取木脂素的最佳工艺条件,利用柱层析法进行纯化,核磁共振法对所得木脂素进行结构鉴定.结果表明,木脂素提取的最佳工艺条件为:乙醇体积分数60%,料液比1:8,提取时间3 h,提取温度50℃.分离纯化得到的木脂素结构为开环异落叶松树脂酚二葡萄糖甙.     

绞股蓝中木脂素体外抗氧化及抑菌活性研究

干燥绞股蓝粉碎后用乙醇反复浸泡,合并浸泡液减压浓缩后多次反复用正相硅胶柱层析、反相硅胶(ODS-AQ)柱层析和凝胶LH-20柱层析进行分离,得3个纯化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并对其体外抗氧化和抑菌作用进行研究。结果表明：结构鉴定表明3个化合物均为木脂素类物质。化合物Ⅲ对DPPH自由基有较强清除作用,化合物Ⅰ的清除能力较弱,而化合物Ⅱ在实验浓度范围内没有显示出清除DPPH自由基作用;3种化合物对金属的螯合能力都比较弱;化合物Ⅱ对变异链球菌有一定的抑制作用,对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用,而对大肠杆菌和沙门氏菌显示较弱的抑制作用;化合物Ⅲ对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌仅显示出微弱的抑制作用,化合物Ⅰ也显示出与化合物Ⅲ相似的抑菌趋势,但作用更弱。     

溶剂法提取亚麻籽木脂素动力学模型的建立

采用70%的乙醇溶液在室温下从脱脂亚麻籽粉中提取木脂素。以Fick第一定律为基础建立了提取模型;利用不同试验条件下的试验结果采用最小二乘法对模型进行了求解,求得了模型中的待定常数;对建立的模型进行了实验验证,结果表明该模型具有误差小于7%的预测精度。     

溶剂法提取亚麻籽木脂素(SDG)工艺优化研究

研究了溶剂法提取亚麻籽中木脂素的工艺,确定了单因素试验的最佳溶剂系统为70%的乙醇,提取温度为室温,时间为24 h。以木脂素得率为指标,采用二次正交旋转回归试验对溶剂法提取亚麻籽木脂素提取工艺进行优化,求得了二次正交旋转回归方程,确定了影响溶剂法木脂素得率的各因素的主次顺序依次为:提取时间、提取温度、乙醇浓度。用统计寻优方法进行方案寻优,可得乙醇浓度为70%、提取时间为28 h、提取温度为40℃时,木脂素得率最高为9.25%。     

北五味子中总木脂素类成分的抗氧化及抗炎活性研究

对北五味子中总木脂素类成分进行纯化并研究其抗氧化和抗炎活性。利用大孔吸附树脂纯化五味子总木脂素,采用总抗氧化活性法、超氧阴离子自由基清除率法测定总木脂素类成分的抗氧化活性,应用酶联免疫吸附测试(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)和一氧化氮(NO)试剂盒考察五味子总木脂素类成分对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(Interleukinin-10,IL-10)、NO的影响。抗氧化活性研究方面,与同等浓度的VC对照品相比,北五味子总木脂素类成分的总抗氧化能力是维生素C(VC)的1/7左右,清除超氧阴离子自由基的强度是VC的1/6左右,说明其具有良好的抗氧化活性。抗炎活性研究方面,北五味子总木脂素类成分可显著促进小鼠巨噬细胞分泌IL-10,抑制TNF-α、NO,说明其具有良好的抗炎活性。北五味子总木脂素类成分具有良好的抗氧化能力和抗炎活性,为进一步研究及开发北五味子提供理论支持。     

樟叶木脂素的提取纯化及其抗氧化性、抗癌活性

为了优化樟叶木脂素超声波技术提取条件,探究其抗氧化性、抗肝癌活性,本文通过单因素实验考察各个因素对木脂素提取量的影响,利用响应面试验优化提取工艺并建立相应的数学模型。粗品经过浓缩、萃取、柱色谱等步骤进行分离纯化;紫外色谱、红外光谱、质谱、核磁共振等技术进行结构鉴定。利用高效液相谱（High Efficiency Liquid Chromatography, HPLC）外标法进行纯度鉴定;同时利用1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼（1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH）法,羟基自由基清除法研究其抗氧化性; MTS （3-（4, 5-dimethylthiazol-2-yl）-5-（3-carboxymethoxyphenyl）-2-（4-sulfophenyl）-2H-tetrazolium）法研究其对肝癌细胞（HepG2）和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的毒性作用。结果表明:樟叶木脂素的最优超声提取条件为浸提时间78 min,超声时间3 min,料液比1:22 g/mL,乙醇浓度60%,在此条件下樟树叶中木脂素提取量为45.31 mg/g;经过纯化和结构鉴定最终得到芝麻素和松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷,其纯度分别为94.84%和90.14%;抗氧化实验结果表明芝麻素,松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷具有较好的清除DPPH自由基、羟基自由基效果,其中松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷清除DPPH自由基的IC₅₀为0.31 mg/mL,清除羟基自由基的IC₅₀为0.71 mg/mL;芝麻素清除DPPH自由基的IC₅₀为0.55 mg/mL,清除羟基自由基的IC₅₀为0.94 mg/mL。细胞毒性试验发现芝麻素、松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷均对HepG2有抑制作用,且芝麻素对肝癌细胞（HepG2）、人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的作用大于松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷。综上可知响应面法可以用于樟叶木脂素的提取分离,且该提取物具有抗氧化和抗肝癌的功效。     

毛蚶水解产物抗氧化活性分析

通过正交试验得到中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的最佳水解条件,根据该条件制得毛蚶蛋白酶水解产物,检测三种酶的DH值及分析各水解产物的氨基酚成分,通过水解产物对DPPH等自由基清除率和还原力的检测,分析其抗氧化活性。结果表明:碱性蛋白酶水解能力最强,其酶解产物中拥有最多的可溶性肽,且体现出较强的抗氧化活性,是毛蚶抗氧化活性肽生产的最佳选择。     

南极磷虾蛋白水解产物超滤组分的抗氧化活性评价

目的 对南极磷虾(Euphausia superba)蛋白水解产物超滤组分进行系统的抗氧化活性评价。方法 利用胃蛋白酶和胰蛋白酶制备南极磷虾蛋白水解物(antioxidant hydrolysate of Euphausia superba protein, EPAH), 利用超滤技术制备抗氧化组分。以自由基清除实验、脂质过氧化抑制实验、体外DNA氧化损伤保护实验以及氧化损伤张氏肝细胞(Chang liver)模型进行抗氧化组分的活性研究。结果 利用超滤技术将EPAH按照分子量(molecular weight, MW)分为三个肽组分EPAH-I(MW<3.5 KDa)、EPAH-II(3.5 KDa5 KDa)。其中, EPAH-I显示出强的DPPH自由基和羟基自由基清除活性、脂质过氧化抑制作用和质粒DNA的氧化损伤保护作用以及对H2O2氧化损伤的张氏肝细胞显示出较强的保护作用。在5.0 mg/mL浓度下, EPAH-I可将氧化损伤张氏肝细胞(Chang liver)的活力由模型组的(49.51±4.18 )%显著提升至(70.58±4.52)% (P<0.05); 超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力分别提高至(176.34±10.92) U/mg prot和(35.83±2.55) U/mg prot, 活性氧自由基含量降至2.76±0.18%, 膜脂质氧化产物丙二醛的含量降至(5.75±0.16) nmol/mg prot。结论 本实验制备的南极磷虾抗氧化组分(EPAH-I)具有显著的生物活性, 可用于抗氧化相关功能产品的研发。     

响应面法优化超声波辅助亚麻木酚素提取工艺及抗氧化性研究

以亚麻籽为原料,对超声波辅助提取亚麻木酚素进行了研究。通过单因素试验,分别考察原料颗粒度、超声功率、液固比、超声温度和超声时间对亚麻木酚素得率的影响。并在单因素试验基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面法对超声波提取亚麻木酚素工艺进行优化,建立了二次多项式回归方程的预测模型。研究结果表明,超声波辅助提取亚麻木酚素的最佳工艺条件为:原料颗粒度60目,提取溶剂60%乙醇,超声功率400 W,液固比17:1,超声温度40℃,超声时间15 min,亚麻木酚素得率为7.18 mg/g。抗氧化活性研究表明,亚麻木酚素对DPPH、过氧化氢和超氧阴离子均有良好的清除能力,IC_(50)值分别为145 mg/L、75 mg/L和0.25 mg/L。     

鸡肉酶解物提高小鼠的抗疲劳及抗氧化活性

论文研究了鸡肉酶解物EP1和EP2的抗疲劳及抗氧化效果。以生理盐水及鸡肉匀浆[蛋白质剂量200 mg/(kg·bw·d)]作为对照组,以40 mg/(kg·bw·d)和200 mg/(kg·bw·d)两个剂量的鸡肉酶解物EP1和EP2对实验小鼠进行灌胃实验28 d后,测定小鼠的力竭游泳时间、游泳30 min后的血清尿素氮含量、血清乳酸含量及肝糖原含量,并分析了小鼠血清中SOD(超氧化物歧化酶)、GSH-Px.(谷胱甘肽过氧化物酶)和CAT(过氧化氢酶)等主要抗氧化酶的活性。结果显示,鸡肉酶解物能够有效延长小鼠的力竭游泳时间(SC组为766 s,而H-EP1组可达到2307 s);显著降低游泳30 min后小鼠的血清乳酸含量(SC组为10.06 mmol/L,H-EP1组和H-EP2均为6.66 mmol/L)及血清尿素氮含量(SC组为19.72 mmol/L,H-EP1组仅为13.34 mmol/L)),提高肝糖原含量(SC组为5.11 mg/g,H-EP2组可达到8.35 mg/g);显著提高游泳30 min后小鼠的血清中SOD(从89.08 U/mL提高到160.13 U/mL)、CAT(从0.25 U/mL U/m L提高到0.29 U/mL)和GSH-Px.(从257.36 U/mL提高到597.08 U/mL)等抗氧化酶的活性。研究结果提示,鸡肉酶解物EP1和EP2能够显著延长实验小鼠的力竭游泳时间,减少实验小鼠激烈运动时肝糖原的消耗和乳酸的产生与沉积,促进实验小鼠体内蛋白质的代谢及有效清除血清尿素氮,提高实验小鼠机体的血清SOD、CAT及GSH-Px.等抗氧化酶的活性,增强机体清除自由基的能力,改善小鼠的运动状况,确保小鼠在激烈运动状态下机体处于有氧运动模式,从而降低激烈运动后机体的疲劳程度,具有显著的抗疲劳和抗氧化效果。     

金华火腿副产品蛋白酶解物的功能特性与抗氧化活性研究

目的:研究以金华火腿副产品为原料制备的蛋白酶解物的功能特性与抗氧化活性.方法:分析金华火腿副产品蛋白酶解物在不同pH值条件下的乳化活性、乳化稳定性、起泡力以及泡沫稳定性;通过体外试验考察不同浓度的酶解物的自由基清除能力、还原力以及抑制脂质过氧化能力.结果:在体系pH9.0时,金华火腿副产品蛋白酶解物显示出较好的乳化与起泡性能.酶解物的抗氧化活性与其浓度有一定的相关性,当酶解物质量浓度为7.5 mg/mL时,超氧阴离子的清除效果最理想;当酶解物质量浓度为10 mg/mL时,DPPH自由基清除率为32%,还原力为0.79.与空白对照组相比,不同浓度的蛋白酶解物均能够抑制亚油酸的自氧化,且随着浓度的增加,抑制效果明显.结论:在碱性条件下,金华火腿副产品蛋白酶解物具有较好的功能特性.金华火腿副产品蛋白酶解物具有一定的体外抗氧化活性.     

酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰产物的分离纯化及其抗氧化活性研究

本文采用木瓜蛋白酶在pH 6.5的条件下对酪蛋白进行水解2 h,水解产物测得DPPH 35.89%±0.13%,超氧阴离子清除能力为21.39%±0.33%,还原能力为53.00%±2.00%。分别导入Tyr、Phe和Try对水解产物进行修饰,结果表明类蛋白反应时间为6 h时,三种产物的抗氧化性最高,其中Try修饰产物抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别46.84%±1.16%、34.10%±0.32%、70.00%±2%(p0.05)。随后,将Try修饰下的产物进行分离纯化,使用装有G-15葡聚糖凝胶的色谱柱,水为洗脱液,上样浓度为20 mg/mL,流速为0.5 mL/min,洗脱效果最佳,得到三个峰,分别测定其抗氧化性,结果表明峰二的抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别为58.46%±0.57%、38.42%±0.47%和80.00%±0.02%(p0.05)。将峰二产物通过液相色谱进一步分离鉴定,得到单一峰,证明蛋白纯化下的产物纯度较高。最后,得到了高纯度的抗氧化肽。     

丝胶蛋白酶解产物抗氧化活性的研究

本实验采用六种蛋白酶对丝胶蛋白进行酶解,并分析其酶解产物清除二苯代苦味酰基 (DPPH) 自由基能力.通过脂质过氧化体系、还原力、金属螯合能力评价其酶解4h酶解产物的抗氧化活性.结果表明:各种酶解产物都呈现一定的清除DPPH自由基的能力,其中以碱性蛋白酶最强 (p＜0.05);各种酶解产物都存在抑制脂质过氧化活性,与其他蛋白酶相比碱性蛋白酶的抑制活性显著的高于其他酶 (p＜0.05);各种蛋白酶解产物具有一定的还原力和金属螯合能力.这些结果表明:六种酶解产物都具有显著的抗氧化活性.     

合浦珠母贝肉酶解液中抗氧化肽的分离及活性研究

合浦珠母贝肉酶解液经膜分离后,采用葡聚糖凝胶G-25进行分离纯化,对分离组分的总抗氧化性、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力和在化妆品中的应用效果进行测定,结果表明:经分离得到10个有效组分F1-F10,其中F4组分的总抗氧化性最强,DPPH自由基清除能力44.1±0.3%,羟自由基清除率76.0±1.5%,将合浦珠母贝抗氧化肽(F4组分)添加到营养霜中,当添加量为1.0%时,抗氧化活性A700nm为1.599±0.004,能有效提高营养霜的抗氧化性,且营养霜的性状没有发生改变。该研究为合浦珠母贝肉抗氧化肽的结构和在化妆品中的应用研究奠定基础。     

棘胸蛙肌肉水解物的制备及抗氧化活性评价

以棘胸蛙腿部肌肉为研究材料,利用木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶两种酶,以成品率和水解度为指标,通过单因素结合响应面分析的方法优化棘胸蛙水解物的酶解工艺,同时对棘胸蛙水解物抗氧化能力进行研究。结果表明,棘胸蛙水解物经木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶的最佳酶解条件为：在各酶最适pH和温度的条件下,料液比为1:15(g/mL)、酶解时间4 h、加酶量为2%(m/m);该工艺条件下,棘胸蛙水解物的水解度分别为19.23%、23.51%,成品率分别为22.66%、15.32%,清除DPPH自由基的IC₅₀值分别为2.61、2.95mg/mL,清除ABTS⁺自由基的IC₅₀值分别为3.46、3.20 mg/mL,清除羟基自由基的IC₅₀值分别为8.20、9.23 mg/mL。综上,通过响应面法优化的棘胸蛙水解物酶解工艺方便可行,制备得到的水解物具有较强抗氧化活性,为棘胸蛙资源的开发提供了理论基础。     

蛋清蛋白酶解物的抗氧化、抗凝血酶活性及牛化特性的研究

研究了蛋清蛋白酶解物可能具有的抗氧化和抗凝血酶活性.水解用酶为Alcalase 2.4L碱性蛋白酶和Protease N蛋白酶;测定了4个水解度的酶解物(采用pH-stat法控制反应终点而得到)的抗氧化和抗凝血酶活性,分析了活性最高的酶解物的氨基酸组成和相对分子量分布.结果表明,Protease N蛋白酶的酶解物活性要高于Alcalase 酶解物,在水解度为15%时抗凝血酶活性最高;两种来源的、水解度为15%的酶解物的7种必需氨基酸质量分数分别达到了48.11%与45.80%,远高于天然蛋清的7种必需氨基酸质量分数35.65%,说明两种酶解物具有很高的营养价值.相对分子量分布显示两种酶解物(水解度为15%)的多肽组成相似,因此活性的差异可能是因水解酶种类不同而导致的产物多肽的氨基酸序列不同的缘故.     

蜂王浆水溶性蛋白及其酶解产物的抗氧化活性

本研究分别采用清除二苯基-2- 苦肼自由基(DPPH·),抑制亚油酸氧化和总抗氧化能力测定等方法,探讨蜂王浆水溶性蛋白及其酶解产物的抗氧化特性。结果表明,蜂王浆水溶性蛋白(WSPs)本身的抗氧化活性很弱,但酶解后抗氧化活性增强,其中胃蛋白酶和胰蛋白酶共同酶解产物(PT-WSPs)的抗氧化活性最强。对WSPs 及其酶解产物进行膜分离后发现,分子量小于3kD,尤其是小于1kD 的肽类物质其清除DPPH·、抑制亚油酸氧化及总抗氧化能力最强。