含盐流动相损坏色谱柱原因探讨

用高压液相色谱（HPLC）分析某种原料药的实验过程中,采用KH2PO4缓冲液（pH值6．5）和甲醇组成的流动相进行梯度洗脱时,连续损坏两根新的色谱柱。经柱外梯度洗脱模拟实验发现了原因：流动相pH值随着有机相在流动相中体积百分数的上升而上升,最终超过色谱柱允许的pH值上限而造成色谱柱的损坏;同时,当有机相的比例超过80％时,有磷酸盐晶体析出,堵塞色谱柱,这也是损坏色谱柱的另一原因。     

HPLC法测定注射用头孢西丁钠中有关物质

建立了高效液相色谱(HPLC)法测定注射用头孢西丁钠中有关物质的方法.采用苯基柱为色谱柱,以水(用甲酸调pH值至2.7)为流动相A,乙腈为流动相B,进行线性梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为235 nm.该方法专属性强、灵敏度高,可用于注射用头孢西丁钠中有关物质的测定.     

HPLC法测定棕榈酸帕利哌酮原料药中杂质

采用C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相A为0.01 mol/L乙酸铵溶液（pH值9.0）,流动相B为甲醇-乙腈（体积比10∶90）,梯度洗脱,柱温25℃,检测波长280 nm,建立了利用HPLC测定棕榈酸帕利哌酮原料药中杂质的方法。结果显示,主峰与相邻杂质及各已知杂质之间的分离度均大于1.5,杂质在各自的线性范围内线性关系良好（r> 0.990 0）。本方法专属性强,准确度高,可用于棕榈酸帕利哌酮原料药的质量控制。     

氨基酸中空纤维膜分配色谱模型

以色氨酸为例,考虑氨基酸解离和在中空纤维膜内扩散传质建立了氨基酸中空纤维膜分配色谱理论模型.该模型采用完全独立的模型参数,模拟结果与实验数据吻合较好,验证了模型的可靠性.理论计算表明流动相的pH值与局部氨基酸浓度密切相关;理论和实验结果表明,流动相离子强度对氨基酸的保留行为有很大影响,采用梯度洗脱的方式可以改善洗脱峰形,提高色谱柱的分离度.     

对C18反相色谱柱疏水塌陷修复方法的研究

C18反相色谱柱是目前高效液相检测中,最常用到的一种色谱柱类型,在实际使用中由于样品性质或操作的原因,色谱柱会受到一定的损害。通过对常见的流动相误使用纯水而造成的疏水塌陷做分析,得到比较有效处理此类问题的方法。研究结果表明:在初期疏水塌陷发生后,经过甲醇-水体系先高比例有机相后低比例有机相梯度冲洗可以使柱效明显恢复,可以作为一种有效的挽救色谱柱的方法。     

高效液相色谱法检测生物样本中苯肽胺酸的含量

[目的]建立高效液相色谱法定量分析大鼠血样和组织样本中苯肽胺酸的含量,为该药进一步研究提供参考依据。[方法]用高效液相色谱-紫外检测法对含有苯肽胺酸的空白样本进行检测并优化色谱条件使药物色谱峰与杂峰实现有效的分离。色谱柱为XB-NH_2柱,检测波长254 nm,柱温40℃,进样量10μL,流速1 mL/min,等度洗脱。血样和组织样本分别使用不同的流动相进行洗脱,血样洗脱的流动相中乙腈和水体积比为65∶35(水相含甲酸0.4%),动物组织样本洗脱的流动相中乙腈和水比例为80∶20(水相含甲酸0.2%)。按照设定的色谱条件进行精密度、重现性和稳定性的研究,再取空白血样和动物组织样本进行药物回收率的研究。[结果]日间及日内精密度RSD≤2%,重现性和稳定性RSD≤5%,所有样本回收率范围85.2%~97.5%。[结论]实验建立的高效液相色谱法检测生物样本中的苯肽胺酸稳定性和重现性均符合实验要求,可作为相关实验的参考方法。预试验结果显示,增加流动相的pH值和降低水相的pH值均能使保留时间延长。此外,研究结果显示pH值会对药物色谱峰的峰型有影响。     

凝胶渗透色谱法测定聚乙烯吡咯烷酮的相对分子质量及其分布

采用两根水溶性Shodex OHpak SB-806M HQ色谱柱串联作为色谱柱组,在传统型凝胶色谱仪上研究了流动相的离子强度、pH值和甲醇比例对聚乙烯吡咯烷酮(PVP)分离效果的影响.以0.1 mol/L LiNO3:甲醇=1:1(体积比)作为流动相,PEO/PEG为标样,结合普适校正方法测试了PVP K60、K85和K90的相对分子质量,研究了进样量对测试结果的影响.结果发现,增加流动相的离子强度和甲醇比例有利于减少PVP在色谱柱上的吸附,改善峰型,提升分离效果;流动相的pH值对PVP的分离影响很大,碱性条件(pH值=7.54、7.97)下,PVP容易被色谱柱吸附,分离效果很差,在中性和弱酸性条件下(pH值=6.78、3.49时)PVP分离效果较好.该方法具有良好的重复性,多次测试K60、K85、K90产品,重均相对分子质量相对标准偏差<5％,数均相对分子质量相对标准偏差<10％.     

RP—HPLC梯度洗脱法测定复方替米沙坦片的有关物质

目的：建立RP．HPLC梯度洗脱法测定复方替米沙坦片的有关物质。方法：使用Waters C18柱（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱,采用线性梯度洗脱;流动相A为乙腈,B为0.05mol／L磷酸二氢钾缓冲液（用磷酸调pH=4.0）;检测波长272nm;流速1．0mL／min;柱温：30℃。结果：复方替米沙坦片主成份蜂与各杂质峰分离良好,理论塔板数以氢氯噻嗪计大于3000,以替米沙坦计大于7000。结论：本方法灵敏高、专属强,可用于复方替米沙坦片有关物质及降解产物的检查。     

超高效液相色谱法测定德谷胰岛素含量

目的：建立测定德谷胰岛素含量的超高效液相色谱法。方法：色谱柱为Waters C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相A为0.1 mol/L硫酸钠溶液（pH值5.7）-乙腈（体积比90∶10）,流动相B为50%乙腈,梯度洗脱;流速为0.25 mL/min,检测波长为214 nm,柱温为40℃,进样量为2μL。结果：德谷胰岛素浓度在0.1～1.2 mg/mL时与峰面积线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD均小于1%,平均回收率为100.10%,回收率RSD为0.63%(n=9)。结论：该方法专属性强,精密度、稳定性、重复性、耐用性好,可用于德谷胰岛素的含量测定。     

梯度反相高效液相色谱法测定头孢西丁钠中的有关物质

采用PHenomenex-PHenyl色谱柱(250 mm×4.6 mm,4 μm);以水(用甲酸调pH至2.7)为流动相A,乙腈为流动相B,进行梯度洗脱;流速1.2 mL/min;紫外检测波长235 nm.本方法灵敏,准确,分离度良好,可用于头孢西丁钠中头孢西丁与未知杂质的检测.     

2，4-滴丁酯·扑草净·异丙草胺乳油的高效液相色谱分析

采用高效液相色谱法,以KromasilC-18（200X4．6mm,5μm）为固定相,以四氢呋喃＋水（磷酸调pH：3．3）=500＋500（V＋y）为流动相,流速1．0mL·min-1,检测波长270nm,柱温40℃,在同一色谱条件下同时测定2,4-滴丁酯·扑草净·异丙草胺乳油中的2,4-滴丁酯、扑草净和异丙草胺。2,4-滴丁酯变异系数为0．62％,平均回收率为99．64％;扑草净变异系数为0．68％,平均回收率为99．81％;异丙草胺变异系数为0．48％,平均回收率为100．04％。     

高效液相色谱测定氰乙酸的含量

采用高效液相色谱法以C18柱(phenom enonex C18色谱柱250mm×4.6mm,4μm)为色谱柱对样品中氰乙酸的含量进行定量分析。实验条件:流动相为0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液-甲醇(体积比90:10),用磷酸调溶液PH至2.0;检测波长228nm;流速1.0mL/min;进样量20uL。结果表明,本方法的线性相关性系数为0.9999,标准偏差为0.20,变异系数为0.21%,平均回收率为99.78%。     

HPLC测定美耐皿餐具中三聚氰胺的含量

建立了HPLC法测定美耐皿餐具中三聚氰胺的方法。采用C18柱,流动相为乙腈-10 mmol/L庚烷磺酸钠水溶液（冰醋酸调节pH至3.5）（15：85）,流速为1 mL·min^-1,检测波长240 nm,柱温为30℃。结果表明：三聚氰胺在5.0-37.2μg·mL^-1浓度范围内,线性方程Y=5541.2X-29.381（r=0.9999）,平均回收率为100.40％, RSD为0.43（n=9）。该方法快速准确、灵敏度高、重复性好。     

四氟苯甲酸反相高效液相色谱法分离条件的探索

研究了含氟有机酸的高效液相色谱分析方法,应用反相C18色谱柱,以15%甲醇/85%(20mmol/L KH2PO4缓冲溶液pH=2.3)为流动相,流速为1.0mL/min,紫外检测波长276nm。探索了流动相的选择,并考察了此方法的线性关系,回归方程及相对标准偏差,实验表明,在选定色谱条件下,此方法能较好地解决四氟苯甲酸的定量分析问题。     

HPLC测定丹黄祛瘀胶囊中延胡索乙素的含量

建立了丹黄祛瘀胶囊中延胡索乙素的含量测定方法。采用Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸(三乙胺调pH值至6.0)(60∶40),柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm。结果显示:延胡索乙素在0.0408～0.2448μg线性关系良好(r=0.9994);平均回收率为98.6%,and RSD=1.1%(n=6),该方法可用于丹黄祛瘀胶囊的质量控制。     

HPLC法检测耳聋左慈丸中马钱苷方法研究

目的：建立以HPLC法测定耳聋左慈丸中马钱苷的含量方法。方法：采用Agilent1100高效液相,以波长240nm,柱温20℃,流速1.0mL/min,进样量20uL;从色谱柱种类、流动相种类等方面来筛选马钱苷检测条件;从线性范围、回收率、精密度、重现性及稳定性等方面进行考察。结果：以Hypersil ODS C18柱（5um,250mm×4.60mm）色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液（12：88）为流动相检测效果良好。该方法在0.1272～3.18μg内线性关系良好（R2=0.9994）,进样精密度良好（RSD=0.4%,n=6）,进样重现性良好（RSD=0.5%,n=6）,准确度良好（平均回收率为99.6%,RSD=0.5%,n=6）,稳定良好（在27h内检测7次,RSD为0.7%,n=7）。结论：本法简便、准确可靠、专属性强,重现性好。     

水分对头孢地嗪钠中高分子聚合物含量的影响

采用凝胶色谱法,考察了不同含水量对头孢地嗪钠中高分子聚合物含量的影响。色谱柱为SephadexG-10,流动相A为0.02mol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH=7.0）;流动相B为超纯水;流速为1.0mL·min^-1;检测波长为254nm。头孢地嗪钠供试品溶液在10.536~34.461 mg·mL^-1范围内,溶液的浓度与高分子聚合物峰面积呈良好的线性关系（r=0.9986）。随着头孢地嗪钠含水量的增加,高分子聚合物的含量明显增加,研究证明水分是控制头孢地嗪钠高分子聚合物含量的关键因素。     

2-氯甲基-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶盐酸盐的高效液相色谱分析

用固定相为十八烷基硅烷键合硅胶的C18液相色谱柱,以PDA检测器对2-氯甲基-3,5-二甲基-4-甲氧基吡啶盐酸盐进行了高效液相色谱分离,选用乙腈与缓冲液（磷酸氢二钾与磷酸二氢钾质量比为1．36：013,pH=6．8）体积比45：55作为流动相,检测波长204mn。该法相对标准偏差1．38％,回收率达99．8％。     

HPLC法测定依折麦布中有关物质

建立依折麦布有关物质的测定方法。色谱柱采用十八烷基硅烷键合相硅胶为填充剂,流动相A为磷酸盐缓冲溶液（取磷酸二氢钠一水合物2.76 g,溶解于1 000 mL纯水中,用稀氢氧化钠溶液调节pH至5.0）-乙腈（80∶20）;流动相B为乙腈-水（85∶15）。检测波长230 nm,流速1.2 mL/min。各种破坏性样品的分离度符合规定。依折麦布的相关分离度均大于1.5,符合要求。本方法迅速,准确,灵敏度高,专属性强,可用于本品有关物质的测定。