利用激光微束穿刺法获得抗黄萎病转基因棉花的研究

通过激光微束穿刺法 ,将 β 1,3 葡聚糖酶及几丁质酶基因双价植物表达载体 pBLGC导入棉花幼胚。转化一代棉花幼苗用蘸根法进行抗黄萎病筛选 ,将存活的苗移入病圃进行了卡那霉素(Kan 1% )抗性测定。结果表明 ,在移栽的 2 9株幼苗中 ,有 9株表现出明显的Kan抗性 ,对 9株抗Kan植株进行了PCR检测 ,结果显示 ,其中 7株表现为阳性。病圃中的T1代转基因植株在经历了黄萎病发病高峰期后 ,7株PCR阳性植株表现明显抗病 ,并已正常开花结铃 ,其他T1代植株及对照植株全部因后期发病死亡。这初步证明外源基因已整合到棉花基因组中 ,且使转基因植株对黄萎病表现出一定的抗性。     

利用激光微束将外源基因导入高等植物细胞的研究

利用激光微束将外源基因导入高等植物细胞的研究我们建立了激光微束向植物细胞导入外源基因的试验程序，对各种经济作物和林木进行了外源基因导入的研究。所用植物材料为禾本科小麦幼胚、双子叶植物锦葵科棉花胚状体、豆科植物的百脉根子叶、兰科花卉兰花小圆珠茎、小本植...     

Nd:YAG激光微束切割大麦染色体及染色体片段的分离

以适当参数的ＮｄＹＡＧ激光微束切割大麦７Ｈ染色体后再利用微细玻璃针挑取了７ＨＳ端部片段并放入Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，建立了一种激光微束与玻璃针结合使用微切割、微分离植物染色体片段的方法，为今后植物染色体特定区域ＤＮＡ的微克隆技术提供了一种新的方法     

激光微束法将外源基因导入大肠杆菌的初步研究

本文将Ｎｄ＾３＋：ＹＡＧ三倍频调Ｑ激光微束系统用于质粒转化。以本实验室构建的耐药质粒作为导入基因，利用激光微束技术在大肠杆菌上打孔，通过高渗液的作用，在细胞内外形成渗透压压力差，将质粒成功地导入了大肠杆菌中，并获得了表达，取得了遗传性状稳定耐药菌株。     

用激光微束穿刺法将PAP cDNA导入油菜获得抗病毒转基因植株

采用激光微束穿刺法将损伤诱导型启动子控制之下的商陆抗病毒蛋白（PAP）CDNA导入了甘蓝型油菜（BrassicanapusL．）双低品种H165,经庆大霉素筛选,获得了抗性再生植株。PCR扩增检测及Southern杂交分析表明,PAPcDNA连同损伤诱导型启动子已稳定整合至受体基因组,转化效率为1．7％。攻毒实验表明,转基因油菜植株对供试病毒芜菁花叶叶（TuMV）具有较高抵抗能力。     

激光驾束制导炮弹导入方法研究

研究了通过设计火炮预置射角使激光驾束制导炮弹从最佳导入点进入波束并达到理想的导入过程的方法。以发射某激光驾束制导炮弹为例,计算了理想的火炮预置射角,并进行了仿真。结果表明,在该预置射角下制导炮弹可以快速、顺利的导入波束。     

激光微束穿刺法获得抗虫转基因油菜及其后代的研究

利用激光微束穿刺法将苏云金芽孢杆菌的毒蛋白 (δ endotoxin)基因导入了油菜 ,经聚合酶催化链式反应(PCR)和PCRSouthern杂交证明抗虫基因已导入油菜基因组中并能在T1 代得到遗传。对转基因植株进行了抗虫性测试 ,结果表明某些植株具有较好的抗虫性 ,并且这种抗虫性在T1 代仍能保持。实验结果表明抗虫基因已整合进油菜基因组并得到了稳定的遗传。     

激光微束转移外源基因的新探索

利用激光微束转移外源基因方面已获得初步结果。 为了改进激光微束导入法,使其扬长避短,在本次实验中我们把激光微束与显微注射结起来进行基因导入,不像从前那样把卵浸入基因溶液中,而是把激光微束与显微注射针分别地瞄准蚕卵。在激光微束穿孔之后,迅即滴注一定量的基因溶液。这需要一套把激光器与显微注射仪结合起来的装置。我们用此法已获得真正的卵色变异。所用蚕种3011B_4新2(红卵)及云纹皮斑(白卵)由中国蚕研所供给。提取3011B_4受精卵中的活性染色质,转入云纹皮斑的受精卵内,三天后可在白卵区内发现红卵。染色     

利用激光微束照射体外培养Hela细胞筛选叶绿素衍生物光敏剂

本文报导了将激光微束照射单细胞技术用于从蔬菜等植物中提取的一些叶素素衍生物(CPD)杀伤Hela肿瘤细胞的光动力效应的研究。实验结果为筛选出药效相似于HPD的CPD提供了依据。     

Ar~+激光微束照射及激光吖啶橙敏化对组织培养单个细胞的效应

激光具有光束平行、能量集中的优点,可以通过显微镜聚焦成微米甚至微米以下的光斑,导入单个细胞内发挥比显微手术刀更准确的作用,是研究细胞的新工具。用激光微束选择性地杀伤单个细胞或其中的细胞器,可以观察周围未损伤细胞的反应,显示受损细胞器的功能及其他细胞结构的代偿现象。激光微束照射的     

红宝石激光显微照射在细胞生物学中的应用

利用XJX-2型红宝石激光显微仪对模式组织和大豆胞株,小家鼠及免2-细胞期胚胎等动植物细胞进行了激光显微照射的生物学试验.在利用生物细胞天然发色团或进行活体染色的基础上,对供试的几种动植物细胞产生了有效的选择性损伤.     

激光微束显微切割植物染色体的研究

激光微束是六十年代激光技术问世后在生物学和医学领域中出现的一项新技术。该技术利用激光方向性好、光色单一和亮度高等独一无二的特点,把激光束通过光路系统引入显微镜并聚焦成很小的光点对细胞或细胞器进行精细的细胞或亚细胞水平的显微外科术。染色体是细胞核里一种极重要的结构。每一种真核生物都有一定数目的染色体;每条染色体上都有排列次序一定的基因。任何染色体数目的变化和染色体上基因排列次序的变化,都会引起生物遗传性的变异。激光微束遗传操作真核生物染色体是激光生物学中重要和活跃的研究课题。Berns等以两栖类和哺乳动物细胞为材料进行了激光显微照射染色体及其子细胞遗传分析的大量研究。梁宏等用氩离子激光显微切割长鼻(鼠菐)培养细胞有丝分裂染色体或使受照染色体区域DNA失活都取得了成功。Monajembashi和Cremer建立了用激光微束显微切割人淋巴细胞染色体的技术。本文报道用激光微束切割高等植物染色体的实验结果,其目的是建立起对农作物染色体进行激光遗传操作的有效技术方法。     

激光照射对中华大蟾蜍早期胚胎染色体的影响

用YAG倍频激光器对中华大蟾蜍四细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育,并对激光照射致畸的胚胎在尾芽期用压片法进行染色体分析。实验结果表明:激光照射后正常的胚胎其染色体无变化,激光照射致畸的胚胎其染色体有丢失和加倍等变化     

激光照射对中华大蟾蜍早期胚胎同工酶的影响

应用 YAG倍频激光器对中华大蟾蜍囊胚早期胚胎进行照射 ,对激光照射后发育正常和畸形蝌蚪用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳进行酯酶和乳酸脱氢酶同工酶分析。结果表明 :激光照射使酯酶活性升高 ,对乳酸脱氢酶无影响     

红外激光与微水束耦合对准工艺研究

红外激光与微水束耦合划切技术是激光划切应用的前沿领域,在硅晶圆、宝石、陶瓷等材料高精度切割方面具有优势,有效地减小了材料的热损伤和熔渣残留。红外激光束与微水束的耦合对准是研究的关键技术。为保证微水束光纤与激光光束耦合的效果,本文设计了高精度三维耦合对准调整结构,结构主要由准直聚焦光路系统、微孔CCD观测系统、二维微位移平台、耦合装置组成；研究了汇聚激光焦平面与微水束起始端(喷口元件)共面调整的关键工艺和激光光束与喷口元件对准的关键工艺；提出了借助屏幕十字线实现两次对准的工艺方法。经试验验证,微水束耦合激光长度稳定,质量良好,可实现对硅基衬底晶圆等材料的高效无损、高精密划切。     

激光照射对中华大蟾蜍早期胚胎发育的影响

应用ＹＡＧ倍频激光器对中华大蟾蜍受精卵、四细胞期胚胎、囊胚期胚胎分别进行照射。实验结果表明：用激光微束照射胚胎能产生各种畸形胚；激光对蟾蜍不同时期胚胎的影响不同；激光对胚胎发育能产生抑制作用；胚胎死亡率与所用激光微束能量密度密切相关。     

一种用于生物研究的光镊与激光微束系统

分析光镊与激光微束的性质和特点,研究两者相互配合、联合操作的技术及优势。在国内首次实现光镊与微束激光的耦合技术,这种全新的显微操作系统可对活体细胞进行全方位操作与微加工。