酶法提取刺五加干果花色苷工艺优化及其组成分析

目的 优化刺五加花色苷的提取条件,并对该花色苷的组成进行分析。方法 通过单因素实验研究酶的种类、液料比、酶添加量、酶解温度和酶解时间对提取液中花色苷含量的影响,利用响应面试验优化了刺五加果花色苷的提取工艺。并利用超高效液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱（UPLC-Triple-TOF/MS）对刺五加花色苷进行结构鉴定。结果 刺五加果花色苷提取的最佳工艺条件为：液料比18︰1 mL/g,果胶酶的添加量4.2‰,酶解温度55 ℃,酶解时间3.0 h,在此条件下刺五加果的花色苷含量达到6.00 mg/g。经过UPLC-Triple-TOF/MS分析其中主要花色苷为矢车菊素3-O-(2-O-β-D-吡喃木糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷。结论 利用果胶酶法来制备刺五加花色苷是可行的,所得刺五加花色苷为矢车菊素3-O-(2-O-β-D-吡喃木糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷。     

超声-微波协同萃取法提取油菜蜂花粉中黄酮类物质

采用超声-微波协同萃取法提取油菜蜂花粉中黄酮类物质,以总黄酮提取率为指标,研究分析乙醇体积分数、提取时间、料液比、微波功率4个因素对提取效果的影响,并利用正交实验优化提取工艺,确定最佳条件为乙醇体积分数90%,液料比(mL∶g)30∶1,微波功率260 W,提取时间180 s。此条件下,总黄酮提取率达3.36%。与热回流、超声法、微波法相比,超声-微波协同萃取法提取效率明显提高,同时具有节能,安全的优点。液质分析结果表明,超声-微波协同萃取得到的油菜蜂花粉黄酮类物质主要有4种,分别为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3,4'-双-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷。     

微波辅助酶法提取绞股蓝皂苷工艺优化

为改善传统水提法提取得率低的问题,研究微波辅助酶法提取绞股蓝皂苷工艺。采用响应面法筛选酶法提取中复合酶的最佳配比,确定了复合酶最佳配比为果胶酶-半纤维素酶-纤维素酶质量比为4∶5∶5,再利用单因素试验结合Box-Behnken设计法优化提取工艺。结果表明：影响微波辅助酶法提取绞股蓝皂苷主要因素为复合酶添加量、酶解温度、酶解时间、微波时间,优化得到的最佳工艺参数为复合酶添加量1.8%、酶解温度52 ℃、酶解时间2 h、微波时间4 min,此工艺条件下绞股蓝皂苷得率为7.88%。该提取方法与传统水提法相比,产品得率增加了68%,且提取温度较低,工艺可操作性强。     

酶法提取金樱子总黄酮的研究

对金樱子黄酮类化合物的酶法提取工艺进行了研究.采用单因素实验考察了纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶、复合酶(纤维素酶+果胶酶+β-葡聚糖酶+半纤维素酶+木瓜蛋白酶)对总黄酮提取率的影响及酶解温度,酶解液pH值,酶解时间和酶用量对总黄酮产量的影响,通过正交试验设计确定了酶法提取金樱子总黄酮的最佳提取工艺条件:酶解温度为50℃,酶解液初始pH=4.5,酶解时间为120min,酶的用量为0.35mg/mL的复合酶(纤维素酶+果胶酶+β-葡聚糖酶+半纤维素酶+木瓜蛋白酶).实验结果表明:在一定条件下,复合酶的酶解效果比单一酶好,纤维素酶酶解效果比果胶酶好,木瓜蛋白酶在单独使用时基本没有效果.根据正交实验确定的最佳酶提取工艺条件与传统的直接醇提取工艺相比,金樱子总黄酮产量提高了26.2%.     

黄精中甾体皂苷的分离与结构鉴定

从黄精的乙醇提取物的正丁醇萃取相中分离到3个甾体皂苷,经1H-NMR13C-NMR、135DEPT测定分析,鉴定出这3个化合物分别是薯蓣皂苷元-3-0-β-D-吡喃葡萄糖基(1-3)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]β-D-吡喃葡萄糖苷,薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃葡萄糖苷,薯蓣皂苷元-3-O-α-L-,吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃葡萄糖苷.其中皂苷I和Ⅲ在黄精中为首次报道.     

油菜蜂花粉中黄酮的分离纯化及结构鉴定

研究油菜蜂花粉黄酮的组成,采用乙醇提取,石油醚萃取脱脂和柱层析分离方法对油菜蜂花粉黄酮进行研究,得3个黄酮类化合物,经1 H-NMR、13 C-NMR,分别鉴定出3个黄酮类化合物化学结构为山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,与HPLC-MS检测结果一致。     

复合酶解法协同超声波法提取山楂中总黄酮的工艺条件优化

采用复合酶解法协同超声波法提取山楂中总黄酮。通过单因素和正交实验对工艺进行优化,优化后条件为:复合酶量(3%纤维素酶和4%果胶酶),酶解pH为6,酶解温度为60℃,酶解时间为1.5h,乙醇浓度为70%,料液比为1∶40g/mL,40℃超声提取30min。在此条件下的总黄酮提取量为85.5mg/g。相对超声波提取总黄酮提高了46.1%,比单纤维素酶酶解辅助超声波法提取总黄酮量提高了27.6%。      

复合酶解法协同超声波法提取山楂中总黄酮的工艺条件优化

采用复合酶解法协同超声波法提取山楂中总黄酮。通过单因素和正交实验对工艺进行优化,优化后条件为:复合酶量(3%纤维素酶和4%果胶酶),酶解pH为6,酶解温度为60℃,酶解时间为1.5h,乙醇浓度为70%,料液比为1∶40g/mL,40℃超声提取30min。在此条件下的总黄酮提取量为85.5mg/g。相对超声波提取总黄酮提高了46.1%,比单纤维素酶酶解辅助超声波法提取总黄酮量提高了27.6%。     

正交实验设计法优化超声复合酶提取甜茶苷工艺

采用正交设计法优化甜茶苷提取的工艺,在单因素的实验基础上选择料液比、乙醇浓度、超声功率和复合酶(纤维素酶∶果胶酶∶木瓜蛋白酶=1∶1∶1)酶解p H,每个因素选取3个水平,进行正交实验,根据正交设计的原理和分析方法,结果得出甜茶苷提取的最佳工艺条件:复合酶用量为2.6%,酶解p H4.0,甜茶粉末与乙醇的料液比为1∶20(w/v),乙醇浓度为40%(v∶v),超声功率50 W,在甜茶粉末过40目筛,用复合酶酶解30 min,温度45℃下,超声提取30 min,重复提取2次,甜茶苷的提取率可达66.4%±0.9%,含量是110.7 mg/g。      

黄精总皂苷提取工艺优化及其对α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性

以黄精总皂苷得率为评价指标,通过单因素试验对纤维素酶添加量、果胶酶添加量、料液比、酶解pH、酶解温度以及酶解时间进行研究,采用响应面对提取条件进行优化,并以阿卡波糖为阳性对照,探究不同浓度下黄精总皂苷的α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,最佳提取条件为:纤维素酶添加量0.4%、果胶酶添加量5.0%、料液比1:16 g/mL、酶解pH为5.0、酶解温度45℃、酶解时间2.0 h,总皂苷得率4.06%。当黄精总皂苷浓度为3.000 mg/mL时,其对α-葡萄糖苷酶最高抑制率可达74%,接近于阿卡波糖(0.5 mg/mL)的82%;当黄精总皂苷浓度为2.000 mg/mL时,其对α-淀粉酶最高抑制率可达82%,超过阿卡波糖(0.5 mg/mL)的80%。本研究使用的复合酶法提高了黄精总皂苷得率并证实了其具有一定的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性。     

藜麦种子皂苷不同提取方法的比较研究

目的:比较藜麦种子皂苷的不同提取方法,确定最佳提取条件。方法:采用超声提取法、甲醇回流法和乙醇回流法三种不同方法,在单因素实验的基础上,通过正交实验确定最佳的提取温度、提取时间、提取液浓度和料液比。结果:藜麦种子皂苷提取的最佳方法为超声提取法,最佳提取条件为在60℃温度,90%乙醇浓度,1∶15 g/m L的料液比条件下提取1 h,在此条件下皂苷含量为5.06 mg/g。结论:超声提取法适宜提取藜麦种子皂苷,该研究可为藜麦种子皂苷的提取开发利用提供理论依据和技术参考。      

番木瓜中皂苷类成分的研究

目的：研究番木瓜果肉的化学成分,寻找活性物质。方法：用85% 乙醇提取,大孔吸附树脂、ODS、MCI 柱层析进行分离,NMR 波谱法鉴定化合物的结构。结果：从番木瓜果肉乙醇提取物中分离到3 种化合物,分别为2β,3β - 二羟基- 乌苏酸(Ⅰ)、3-O- 葡萄糖- 甾苷(Ⅱ)、薯蓣皂苷元-3-O- β -D- 吡喃葡萄糖基(1 → 3)- β -D- 吡喃葡萄糖基(1 → 4)-[α -L- 吡喃鼠李糖基(1 → 2)]- β -D- 吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)。     

酶促法提取油菜籽皮中的原花青素研究

研究采用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶共同酶解油菜籽皮干粉提取原花青素。以原花青素提取质量比为指标,通过单因素试验,确定原花青素的最优提取工艺。结果表明酶促反应的最佳反应体系:纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶配比30∶7∶6,复合酶用量40U/g,酶解pH 5.0、酶解温度55℃、酶解时间120min。验证实验表明酶促法油菜籽皮原花青素的提取质量比为3.59mg/g,比普通溶剂法提取质量比提高了66.98%。采用酶促法可以较高程度地提高油菜籽皮原花青素的提取质量比。     

超声辅助复合酶法制备核桃油工艺研究

以核桃仁为原料,采用超声辅助复合酶(果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶)破壁,然后进行碱性蛋白酶酶解制备核桃油,对超声辅助酶解工艺条件及复合酶配比进行研究。结果表明:复合酶破壁的提油效果优于单一酶;最佳酶解破壁条件为超声功率90 W、复合酶添加量4%、酶解pH 4.5、酶解温度50℃、酶解时间40 min;在最佳的复合酶破壁条件下,利用混料试验对复合酶配比进行优化,确定最佳复合酶(果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶)配比为1∶1.46∶1.11,此时总油提取率最大,为89.73%。     

姬松茸抗氧化酶解液的制备

目的:研究制备姬松茸抗氧化酶解液的工艺条件,并分析酶解液的营养成分。方法:将木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶按m_{木瓜蛋白酶}∶m_纤维素酶∶m_果胶酶为3∶4∶4制备复合酶,酶解姬松茸子实体;采用响应面试验优化姬松茸酶解工艺。结果:复合酶水解姬松茸的最佳工艺为复合酶添加量0.5%,酶解pH 6.2,酶解温度49℃,酶解时间147 min,该条件下,当姬松茸酶解液质量浓度为2.0 mg/mL时,其对DPPH自由基的清除率为69.15%,表现出很强的抗氧化活性。酶解液中蛋白质含量为(1 013.83±25.11) mg/100 mL,粗脂肪含量为(150.17±1.21) mg/100 mL,总糖含量为(721.41±8.74) mg/100 mL,多糖含量为(138.83±1.66) mg/100 mL,游离氨基酸含量为(800.94±12.36)mg/100 mL,其中必需氨基酸占40.22%。结论:采用复合酶法制备的姬松茸酶解液具有较强的抗氧化活性和较高的营养价值,可开发为功能性食品。     

乙醇溶液体系酶解-微波辅助提取红菊苣总苷

以结球红菊苣为原料,研究乙醇溶液体系复合酶（纤维素酶和果胶酶）水解后微波辅助提取菊苣总苷的工艺条件。采用单因素及正交实验确定复合酶水解后微波提取总苷的最优工艺条件。最佳提取条件为:采用60%乙醇酶解体系,料液比1∶20（w∶v）,每克菊苣粉末加入2 mg纤维素酶和0.5 mg果胶酶,55℃水解40 min,再以80%乙醇作提取剂,料液比1∶35（w∶v）,70℃微波处理20 min,最终提取得率为6.27%,分别是不加酶提取工艺的1.33倍和水体系酶解-微波提取工艺的2.24倍。该工艺相比传统工艺提取效率高,更加快速和节能环保。      

响应面法优化复合酶解制取赤霞珠葡萄汁工艺

为了优化复合酶制取赤霞珠葡萄汁工艺,以赤霞珠葡萄为原料,利用果胶酶、纤维素酶和β-葡聚糖酶复合制取赤霞珠葡萄汁。通过单因素实验研究了复合酶添加量、复合酶配比、酶解时间对葡萄汁出汁率和花色苷含量的影响,结合Box-Behnken响应面法优化复合酶解葡萄汁工艺,同时用高效液相色谱法(HPLC)比较不同酶处理对葡萄汁中原花青素含量的影响。结果表明,最佳酶解工艺条件为:复合酶添加量0.66%、复合酶配比1∶1∶1、酶解时间6.3 h,在此工艺条件下,葡萄汁的出汁率为87.103%±0.471%,花色苷含量为(254.664±2.359) mg/L,复合酶处理葡萄汁的原花青素含量显著高于单一酶处理(p 0.05)。     

山药皂苷及其对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:从山药中分离得到水溶性皂苷,研究其抗心血管疾病功效。方法:利用水煮法提取、乙酸乙酯和正丁醇萃取、反相层析技术从山药中分离皂苷,用1H-NMR、13C-NMR、135DEPT、HMQC和HMBC等方法鉴定其结构。30只大鼠随机分成3组:对照组、缺氧/复氧(I/R)组和山药皂苷样品处理组。建立对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤模型,通过对比左室舒张期末压、左室发展压、左室内压上升的最大速率、左室内压下降的最大速率、心肌单向动作电位和乳酸脱氢酶的变化,研究该皂苷是否对大鼠离体缺血再灌注损伤的心脏具有保护作用。结果:从新鲜的山药根茎中得到(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾烷-5-烯-3β,22ξ-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷,该成分对大鼠离体缺血再灌注损伤的心脏具有显著的保护和修复作用。结论:该化合物为含有5个糖基的双糖链水溶性甾体皂苷,具有抗心血管疾病的功效。     

复合酶法提取麦冬总皂苷工艺条件的研究

以麦冬提取液中总皂苷的含量为指标，考察了利用果胶酶、并维素酶辅助提取麦冬皂苷的研究。采用单因素法和正交设计法对复合酶提取工艺条件进行优选，得到较理想的提取工艺条件：纤维素酶用量0．1％，果胶酶用量8％，酶解pH4．5，酶解温度50℃，提取时间2h，该条件下所得麦冬总皂苷含量为3．5762％o。此外，在实验中采用等吸收双波长法测定皂苷含量避免了多糖的干扰，得出较准确的结果。     

复合酶法提取长白楤木根总黄酮工艺优化及抗氧化活性研究

研究纤维素酶/果胶酶复合酶法提取长白楤木根中总黄酮的最佳工艺条件。以总黄酮得率为考察指标,通过Box-Behnken设计-响应面法,优化长白楤木根中总黄酮的提取工艺。结果表明,复合酶法提取长白楤木根总黄酮的最佳工艺为:复合酶添加量(质量分数为5%,纤维素酶∶果胶酶=1∶1)、提取时间为50 min、液料比为40∶1 (mL/g)、乙醇体积分数为50%。在此条件下长白楤木根总黄酮的提取量达到最大值为8.6±0.05 mg/g。当长白楤木根总黄酮浓度为0.15 mg/mL时,对DPPH·、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O~-_2·)清除能力较好,自由基清除率分别为96.3%、70.1%、44.1%,且清除自由基的能力比V_C更高。本研究得出了纤维素酶果胶酶复合酶法提取长白楤木根中总黄酮的最佳工艺条件,且提取出的长白楤木根总黄酮具有较强的体外抗氧化能力。