不同方法比较黄酮类化合物抗氧化性及其构效关系分析

通过三种化学抗氧化方法(DPPH、FRAP和ORAC法)以及细胞抗氧化方法(CAA法)对芹菜素、山奈酚、木犀草素、槲皮素4种黄酮甙元及它们的糖苷化合物抗氧化活性进行比较研究,结果表明DPPH和FRAP法基本一致,芹菜素、牡荆素和异牡荆素这类C环上无羟基且B环只有一个羟基的黄酮抗氧化性极低;在C环上的羟基相同时,B环有3',4'-邻二羟基的木犀草素和槲皮素的抗氧化活性显著高于仅含4'-OH的芹菜素和山奈酚;而ORAC法的结果与此相反。化学抗氧化测定结果均表明,当C环羟基被取代形成3-O-连黄酮苷时其抗氧化活性减小;而A环上6、8号位的氢被取代形成C-连黄酮苷时其抗氧化性反而会增加。CAA法结果显示,当C环无羟基时,B环只有一个4-OH的芹菜素及其黄酮苷无细胞抗氧化性,但B环有两个羟基的木犀草素及其糖苷却显示出较强的氧化性。与化学抗氧化性不同,A环上C-连黄酮苷的抗氧化性低于其苷元,而C环O-连糖苷的影响则较为复杂。     

6种5,7-二羟基黄酮对巨噬细胞M1极化的影响

目的:探究木犀草素、槲皮素、杨梅素、芹菜素、山柰酚及白杨素这6种黄酮对RAW264.7巨噬细胞极化的抑制活性及构效关系。方法:选择100 ng/mL脂多糖刺激RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型;利用噻唑蓝法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞表面蛋白CD274和CD38表达;Western blot检测炎性信号通路中相关蛋白的表达;定量聚合酶链式反应检测M1型巨噬细胞标记基因水平。结果:6种黄酮在20 μmol/L下均不影响细胞正常生长;6种黄酮对巨噬细胞CD274和CD38表达均有抑制作用,其中木犀草素、芹菜素和白杨素的抑制作用强于槲皮素、杨梅素和山柰酚;木犀草素对核因子κB信号通路激活的抑制活性强于芹菜素和槲皮素,而杨梅素、山柰酚和白杨素没有明显抑制效果;木犀草素、芹菜素和白杨素抑制iNOS mRNA表达的活性强于其他3种化合物,木犀草素、槲皮素和芹菜素抑制IL-1β及MCP1 mRNA表达的活性强于其他3种化合物。结论:C环上3位的羟基取代不利于黄酮类化合物抑制巨噬细胞M1极化的活性,而B环上3’、4’位羟基取代有利于增强其活性。     

米口袋抗食用油脂氧化活性及其成分研究

用1:2的氯仿:甲醇超声提取米口袋成分,并用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次进行萃取,利用Schaal烘箱法进行抗氧化实验,同时与合成抗氧化剂BHT进行对照。结果显示乙酸乙酯提取物(EAF)具有最高的抗氧化活性,其活性大于人工合成抗氧化剂BHT。利用硅胶,RP-18和SephadexLH-20对其进行活性追踪分离,得到3种纯的抗氧化成分。利用现代波谱技术对其化学结构进行了鉴定。结果显示为槲皮素-3-o-葡萄糖甙、芹菜素和4’,7-二羟基黄酮。抗氧化活性大小顺序为槲皮素-3-o-葡萄糖甙>芹菜素>4’,7-二羟基黄酮>EAF>BHT。含酚羟基化合物的抗氧化活性与其结构密切相关。活性大小主要取决于酚羟基的数目。     

北京市售30种蔬菜中类黄酮物质含量分析

目的测定北京地区30种蔬菜中5种类黄酮物质的含量。方法采用高效液相色谱法检测槲皮素、山奈酚、杨梅黄酮、木犀草素、芹菜配基类黄酮物质的含量,蔬菜样品均购自北京当地菜市场。结果30种蔬菜中全部检出了槲皮素,含量在2.1～85.9mg/kg鲜重,9种蔬菜检出杨梅黄酮,8种蔬菜检出芹菜配基,8种蔬菜检出木犀草素,仅在胡萝卜和西红柿中检出山奈酚。紫洋葱、白洋葱、胡萝卜、甜椒和苦瓜等蔬菜类黄酮含量较高。结论不同蔬菜类黄酮物质的组成和含量差别较大,槲皮素为蔬菜中主要的类黄酮物质。     

黄酮解离常数与活性氧清除效果的关系

在体外条件下,对9种常见黄酮(槲皮素、杨梅素、高良姜素、大豆苷元、染料木素、柚皮素、橙皮素、芹菜素、木犀草素)清除活性氧基团(过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子自由基(O2－ ·)、过氧亚硝基阴离子(ONOO－ ·))的效果和黄酮的解离常数进行研究。结果表明：黄酮醇类化合物清除这3种活性氧基团的能力最强,黄烷酮和异黄酮类清除能力不明显。黄酮的一级解离常数与其清除活力存在相关性,与其清除O2－ ·和 ONOO－ · 具有显著相关性。黄酮的一级解离常数值越低,其清除活性氧基团的能力越强。     

马齿苋功能因子的检测分析

对马齿苋有保健功效的总黄酮进行研究.采用常规提取与萃取法,柱层析方法分离并重结晶得单体,用化学鉴别与波谱相结合的方法确定结构.结果表明:从含总黄酮的乙酸乙酯部位分离到β-谷甾醇、芹菜素、山萘酚、木犀草素、槲皮素、尿囊素.芹菜素、山萘酚、木犀草素、槲皮素为首次从马齿苋分离得到.马齿苋有保健功效的总黄酮既有上述黄酮成分又有其它活性成分,但以黄酮成分为主.     

类黄酮化合物抑制NDM-1活性的构效关系

选择食物来源相对丰富且分子结构具有一定差异的3种类黄酮化合物(槲皮素、木犀草素、染料木黄酮),通过碘量法比较它们对新德里金属β内酰胺酶-1(NDM-1)的抑制活性。通过分子对接软件分析化合物对NDM-1的理论结合能力,建立类黄酮化合物抑制NDM-1活性的构效关系。碘量法分析结果表明,3种类黄酮化合物对NDM-1抑制活性差异表现为染料木黄酮木犀草素槲皮素,这一结果与分子对接理论分析结果一致。由此,3种化合物抑制NDM-1的构效关系为:B环处于C环3位(染料木黄酮),是抑制NDM-1的相对优势结构;而C环3位羟基(槲皮素)对抑制NDM-1活性具有一定削弱作用。     

大孔吸附树脂分离纯化杭白菊黄酮及其成分鉴定

目的:研究AB-8大孔吸附树脂分离纯化菊花总黄酮提取物工艺,并对其主要成分进行鉴定,为进一步研究其药理作用提供参考.方法:采用动态实验和静态实验考察AB-8大孔吸附树脂对菊花总黄酮的分离纯化效果和影响因素,运用LC-MS/MS鉴定菊花黄酮主要成分.结果:AB-8大孔吸附树脂可以有效地分离纯化粗提物中的菊花总黄酮成分.优化的纯化条件是上样量与柱体积之比约为1:10,30%乙醇洗脱,获得纯度为84.5%的产物.鉴定出黄酮中含有木犀草素-7-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素、芹菜素-7-葡萄糖苷.结论:AB-8大孔吸附树脂法可用于分离纯化菊花黄酮.其中含有菊花HPLC指纹图谱的主要成分.     

芹菜中黄酮类化合物及其生物活性研究进展

芹菜是一种常见的蔬菜,在我国分布广泛.通常含有多种黄酮类物质,包括芹菜素及其糖苷、槲皮素、山奈酚、木犀草素等.本文综述了芹菜中的总黄酮含量与品种,取样部位,生长期等因素的关系.在生物活性方面,芹菜黄酮具有抗氧化、抗癌、抵抗心血管疾病功效,在生殖系统方面有抑制雌激素和孕激素分泌等作用.     

甜叶菊花和叶中酚类成分分析及含量测定

以高效液相色谱-串联四极杆质谱分析仪,结合质谱分析及比对对照品或文献报道化合物的保留时间和质谱参数,在甜叶菊花和叶中鉴定了16种酚类化合物。建立一种利用高效液相色谱法测定甜叶菊中16种酚类化合物含量的方法,并对甜叶菊一新品种盛花期花和叶中酚类的含量进行测定。结果表明,甜叶菊花和叶中酚酸化合物以新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C为主,异绿原酸A含量最高,绿原酸含量次之;花和叶中类黄酮化合物主要为芦丁、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-木糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-阿拉伯糖苷、山奈酚-3-O-鼠李糖苷,槲皮素-3-O-鼠李糖苷含量最高;盛花期甜叶菊花和叶中酚类总量达（22.31±0.51）mg/g和（91.11±2.32）mg/g。     

牡丹籽壳中黄酮类化合物提取及组分分析

目的:探究牡丹籽壳中天然黄酮化合物(MDZK)的抗氧化性。方法:采用溶剂回流提取法对牡丹籽壳总黄酮进行提取，采用紫外—可见分光光度计法测定MDZK含量和抗氧化性能，并采用LC-MS法对提取的总黄酮进行组分分析。结果:当提取溶剂为70%乙醇，提取温度为70℃,料液比为1∶25 (g/mL),提取时间60 min时，MDZK得率最高为(10.54±0.13)%;当MDZK质量浓度为120μg/mL时，其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和OH自由基的最高清除率分别为58.54%,55.72%,49.07%,表明MDZK具有一定的抗氧化作用且效果良好；通过与数据库比对鉴定出20多种黄酮化合物及其衍生物，其中含量最多的为木犀草苷、圣草酚、山奈酚、芹菜素和新橙皮苷等。结论:牡丹籽壳中的黄酮化合物抗氧化活性良好，可作为抗氧化产品用于食品工业或医药等领域。     

花叶滇苦菜黄酮的大孔树脂纯化及其抗氧化活性研究

以花叶滇苦菜为原料，采用乙醇提取、静态吸附法筛选最适合花叶滇苦菜黄酮纯化的大孔树脂类型并优化纯化工艺。以颜色反应、薄层层析和紫外与红外扫描光谱鉴定黄酮类别。以DPPH自由基的清除率为评价指标，比较花叶滇苦菜黄酮纯化前后的抗氧化活性。结果表明，上样液p H3.0、浓度1.4 mg/mL、体积3 BV、40%乙醇为洗脱剂、洗脱体积4 BV、D101大孔树脂纯化后，黄酮纯度达56.02%，是纯化前的5.05倍。花叶滇苦菜黄酮类化合物中主要含有芦丁、木犀草素和槲皮素，极有可能含有芹菜素，共4类黄酮类化合物。纯化后花叶滇苦菜黄酮浓度小于0.3 mg/mL时，其对DPPH自由基清除率随其浓度的增大而增大，且高于二丁基羟基甲苯和维生素C;0.1 mg/m L浓度下其对DPPH自由基的清除率达86.64%，是纯化前的4.85倍。     

高效液相色谱-串联质谱法测定各生长期紫苏中酚类物质的含量

目的：建立一种简单、快速、准确的高效液相色谱-串联质谱法,同时分离与检测紫苏叶、茎和根中酚类化合物含量,探讨紫苏各部位酚类物质的累积规律,为确定紫苏各部位最佳采收时期提供依据。方法：对紫苏进行人工栽培,样品分期采集,采集后的样品经乙醇提取,采用高效液相色谱-串联质谱法进行分析,对影响色谱、质谱的重要参数进行优化,通过对照标准物质的保留时间及质谱分析,确定相应的化合物;通过标准曲线法定量,以其中13 种酚类化合物为主要参考指标,观察它们在各部位的动态含量变化。结果：鉴定出化合物：咖啡酸、咖啡酸-3-O-葡萄糖苷、迷迭香酸、迷迭香酸-3-O-葡萄糖苷、木犀草素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸、木犀草素-7-O-二葡萄糖苷酸、芹菜素、芹菜素-7-咖啡酰基葡萄糖苷、芹菜素-7-O-二葡萄糖苷、野黄岑素-7-O-二葡萄糖苷、迷迭香酸甲酯,以上化合物中酚酸及其糖苷化合物含量呈先降低,至结果期急剧上升达到最大,黄酮及其糖苷化合物含量则递增至结果期达到最大。其中鉴定出迷迭香酸和木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸分别在结果期达到最大,含量分别为21.41 mg/g和19.89 mg/g,结果期叶部位总酚类含量达到最大,含量为47.50 mg/g。结论：通过对紫苏各个部位不同采收时期黄酮、黄酮糖基化、酚酸的动态变化、总含量变化和部位成分分布的研究,对紫苏酚类资源的利用提供参考依据。     

天山茶茎黄酮苷元提取工艺优化及其生物活性

为了优化天山茶藨茎5种黄酮苷元（木犀草素、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、芹菜素）的酸水解提取工艺,评价其体外抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,本文利用UPLC-MS/MS法测定天山茶藨茎5种黄酮苷元的提取率,通过单因素实验和正交试验优化天山茶藨茎黄酮苷元酸水解提取工艺。利用DPPH、ABTS自由基清除实验测定天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元的抗氧化活性,并测定了其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,5种黄酮苷元的检出限、定量限分别在0.8~1.6、2.9~5.4 μg/L,在3.2~207.0 μg/L范围内具有良好的线性关系（R2≥ 0.9962）,方法的稳定性、精密度和重复性良好（RSD≤4.4%）。确定最佳酸水解提取工艺为:90%甲醇溶液（含5%盐酸）、提取温度:70℃、提取时间:100 min,该条件下,总黄酮苷元提取率为4.06 mg/g,RSD<5%,表明正交试验优化的提取条件稳定可行。天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元均具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化活性,其中甲醇盐酸提取物与5种黄酮苷元的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照阿卡波糖（IC₅₀:53.84±2.41 mg/L）,槲皮素对DPPH自由基的清除活性最好（IC₅₀:（2.94±0.18） mg/L）,木犀草素、山奈酚对ABTS自由基清除活性较好（IC₅₀分别为（5.34±0.10）、（5.55±0.17） mg/L）,它们的抗氧化活性高于阳性对照V_C。本研究建立的UPLC-MS/MS方法灵敏、精确、高效,可以对天山茶藨茎5种黄酮苷元化合物同时进行定量分析。优化的酸水解提取工艺能有效提高天山茶藨茎黄酮苷元的提取率。     

木犀草素与槲皮素抗氧化性能差异的电化学研究

黄酮醇的抗氧化活性通常显著强于与之对应的黄酮,而两者的分子结构仅在C环3-位上相差一个羟基。为了揭示黄酮醇3-OH增强抗氧化活性的反应机理,选取槲皮素和木犀草素,对两者的氧化过程进行循环伏安法和现场薄层长光程紫外可见光谱电化学测试。结果表明,两者在发生2e－/2H+反应氧化为对应的邻醌之后,只有槲皮素邻醌能够进一步转化为更稳定的单一共轭结构,带动失电子步骤的进行,从而增强了槲皮素的抗氧化活性。这个后行转化反应必须以3-位羟基的存在为前提。     

苦荞中抗氧化物质分子结构的波谱学分析

选择超声强化提取法提取苦荞黄酮,采用聚酰胺柱层析和制备薄层层析对苦荞黄酮提取液进行分离纯化,通过抗氧化活性比较,筛选出抗氧化活性最好的样品F3,运用高效液相色谱法、紫外光谱法、红外光谱法、液质联用法、核磁共振法,对样品F3进行结构分析,确定苦荞黄酮的主要成分为木犀草素.     

二子菊花饮抗氧化活性研究及其木犀草素和槲皮素含量测定

采用DPPH法、水杨酸法和邻苯三酚自氧化法研究二子菊花饮干膏对DPPH·、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O-2·)的清除作用,采用HPLC测定二子菊花饮中木犀草素和槲皮素的含量。结果显示二子菊花饮浸膏对DPPH·、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O-2·)的清除率的EC50值分别为47.16、12.37和88.57mg/m L,表明二子菊花饮水提物具有明显的抗氧化活性。HPLC分析显示木犀草素和槲皮素分别在0.171~0.857μg/m L和0.161~0.805μg/m L浓度范围呈良好的线性关系,回收率分别在95.75%~98.55%和95.22%~99.67%之间,在此条件下测得的二子菊花饮中木犀草素和槲皮素的含量分别为0.0758%和0.0673%,为其保健作用提供了依据。     

黄酮混合物体外抗氧化活性的相互作用

测定槲皮素、异槲皮素、杨梅素、山萘酚、儿茶素、表儿茶素、芹菜素、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷等9种黄酮类化合物及其两两混合物的体外抗氧化活性,以研究黄酮混合物的协同、拮抗与加合作用。以DPPH清除能力、羟基自由基清除能力、总抗氧化性、还原能力为评价指标。结果表明,含有较多B环羟基的黄酮类化合物更易发生拮抗作用,可通过调节黄酮单品的比例减小混合物的拮抗作用或是增强其协同作用,不同反应机理的评价指标所得结果不同。     

槐米抗食用油脂氧化活性及其成分研究

用1:2的氯仿:甲醇超声提取槐米成分,并用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次进行萃取,利用Schaal烘箱法进行抗氧化实验,同时与合成抗氧化剂BHT进行对照。结果显示正丁醇提取物(BF)具有最高的抗氧化活性,其活性大于人工合成抗氧化剂BHT。利用硅胶、RP-18和SephadexLH-20对其进行活性追踪分离,得到两种纯的抗氧化成分。利用现代波谱技术对其化学结构进行了鉴定,结果显示为槲皮素和芦丁。抗氧化活性大小顺序为槲皮素>芦丁>BF>BHT。含酚羟基化合物的抗氧化活性与其结构密切相关。活性大小主要取决于酚羟基的数目。     

超高效液相色谱-质谱联用技术解析黑果枸杞超临界CO_2萃取物中黄酮类天然产物结构

以青海柴达木黑枸杞为研究材料,对其超临界CO2萃取物,采用超高效液相色谱-质谱联用技术和PeakView色谱工作站拟合进行分析,并通过二级质谱解析和紫外光谱及质谱数据比对,阐明其中的黄酮组分及其结构。共鉴定出黑果枸杞果的超临界CO2萃取物中含有13种黄酮类化合物(7种黄酮醇苷元及黄酮醇苷,3种二氢黄酮醇苷元,2种黄酮苷元和1种二氢黄酮苷元),包括芦丁、槲皮素-3-β-葡萄糖醛酸苷、金丝桃苷即槲皮素-3-O-吡喃半乳糖苷、二氢槲皮素、二氢异鼠李素、二氢山柰酚、槲皮素、芹菜素、橙皮素、苜蓿素、山柰酚、异鼠李素和山柰素,其中橙皮素和苜蓿素在黑果枸杞成分研究中未被发现过。