苦荞麸皮微粉对Pb2+、Cd2+、Hg2+的吸附特性研究

目的：研究苦荞麸皮微粉对金属混合液中Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋的吸附能力。方法：苦荞麸经过超微粉碎处理得到苦荞微粉,观察金属混合液的初始浓度、模拟人体胃肠环境的pH条件、苦荞麸的粒径对苦荞微粉吸附金属混合液中Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋能力的影响。结果：当三种金属离子的初始浓度都为100mg／L时,苦荞微粉A（d（0,5）=79．777μm）对Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋的吸附量分别为0．356、2．872、12．755mg／g;在Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋初始浓度分别为10、100、50mg／L的金属混合液中,苦荞微粉A在pH7时对Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋的吸附量为0．176、3．371、1．882mg／g,是在pH2时的1．14、13．72、0．52倍;苦荞微粉C（d（0,5）=20．621μm）对Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋的吸附量为0．232、3．493、1．702mg／g,是粗粉的4．83、1．32、4．71倍。结论：苦荞微粉对Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋具有较好的吸附能力,包括物理吸附和化学吸附,各金属离子之间存在竞争作用;超微粉碎处理使苦荞麸对Pb^2＋、Cd^2＋、Hg^2＋的吸附能力增强。     

重组超氧化物歧化酶1/3杂合酶在大肠杆菌中表达的优化

目的获取活性高的重组SOD1／3杂合酶。方法用含pET—SOD1／3的工程菌诱导表达重组SOD1,3杂合酶,通过分析SDS—PAGE及SOD酶活性,考察诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、Cu^2＋、Zn^2＋浓度对重组酶表达量和活性的影响。结果正交试验表明,用lmmol／L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）在A600=1．2时诱导,Cu^2＋、Zn^2＋浓度分别为2．4mmol／L,诱导温度15℃,诱导时间12h,能获得高活性重组SOD1／3,其比活性为1681U／mg。结论培养温度和Cu^2＋、Zn^2＋浓度是优化表达的最主要因素。降低诱导温度有利于重组酶的可溶性表达,添加CU^2＋、Zn^2＋能促进重组酶活性提高。     

保健食品促进排铅模型小鼠饮水染铅剂量及检测指标的探讨

为探讨保健食品促进排铅作用动物模型饮水染毒的适宜剂量，给小鼠自由饮用Pb^2 浓度为163．9、546．2、l638．7mg／L的醋酸铅溶液30d，每周记录饮用量，周末称重，估算实际铅摄入剂量。实验末取血、肝、脑、肾、股骨，石墨炉原子吸收分光光度法测定全血和组织铅含量。结果显示，163．9、546．2、l638，7mg Pb^2 ／L剂量组小鼠实际铅摄入剂量分别为27．9、86．6、169．4mg／kg BW，546．2、1638．7mg Pb^2 ／L剂量组小鼠体重增长较对照组显著减少，食物利用率也明显降低；各剂量组小鼠全血、肝、肾、股骨铅及546．2、1638．7mg Pb^2 ／L剂量组小鼠脑铅含量显著升高。建议以546．2mg Pb^2 ／L作为保健食品促进排铅作用饮水染毒的造模剂量；除骨铅外，建议增测肾脏、脑组织内的铅、锌、铜含量及骨骼内的钙含量。     

大蒜多糖的粘度性质

用水提取、澄清、柱层析、喷雾干燥获得大蒜多糖；用乌氏粘度计测定不同浓度、不同温度下大蒜多糖的粘度，并研究了K^＋、Na^＋、Mg^2＋和Ca^2＋对大蒜多糖粘度的影响。结果：大蒜多糖的粘度随着浓度增大而增大，随着温度的升高而降低；不同电解质对其粘度的影响不同，影响程度Ca^2＋〉Mg^2＋〉Na^＋〉K^＋，K^＋基本对大蒜多糖粘度没有影响，随着Ca^2＋、Mg^2＋和Na^＋浓度增加，均使大蒜多糖粘度有不同程度的增加，但增加的程度不大。     

甘蓝过氧化物酶活性及其影响因素的研究

甘蓝POD的最适pH为5～6之间;在100℃的热烫温度下随着热烫时间的延长,POD酶活降低,而贮藏2d后酶活的再生量先增大后降低,在热处理时间为1min-1．5min时达到最大值;Na^＋和Ca^2＋显著抑制POD酶活力。因此,当热处理温度为100℃、加热2min,热处理液pH为8,ZnCl2质量浓度为100mg／L,CaCl2质量浓度为300mg／L时,可基本破坏甘蓝中的POD酶活,且甘蓝的质构和色泽较好。     

低温α-淀粉酶产生菌GS230发酵条件与酶学性质研究

对分离自连云港海域的低温α-淀粉酶产生菌Pseudoalteromonas sp．GS230进行了产酶条件的优化和酶学性质的研究。结果表明,该酶在0．4％可溶性淀粉、0．25％牛肉膏、1．5％蛋白胨以及5％接种量、培养32h产酶量达到最高。对低温仪．淀粉酶性质进行研究发现,该酶的最适作用温度和pH值分别是30℃和pH8．0、0℃时相对酶活达28％。对酶稳定性的研究发现,该酶对热敏感,30℃半衰期为1．5h,Ca^2＋可以提高酶的稳定性;在反应体系中添加5mmol／L Ca^2＋,30℃保温1．5h,残余酶活达93％。Na^＋K^＋、Ca^2＋等对酶有激活作用,而Pb^2＋、Cu^2＋、Fe^3＋等强烈抑制酶活性。     

康氏木霉木聚糖酶酶学性质的研究

对1株康氏木霉（Trichoderma Koningii）发酵产木聚糖酶的酶学性质进行了研究。结果表明：该木聚糖酶的最适反应温度为65℃，酶反应最适反应pH为6．0；该酶在20-60℃范围内能保持80％以上的酶活，在pH3．0-10．0的范围内能保持85％以上的酶活；金属离子Ba^2＋、Fd^2＋、Al^3＋，12mmol／L的Cu^2＋和Fe^3＋对木聚糖酶的活性有抑制作用，而Ca^2＋，Zn^2＋和4mmol／L Cu^2＋等金属离子对该酶反应则有促进作用。     

漆酶对直接湖蓝5B的脱色性能研究

针对漆酶对染料的独特降解机理，将漆酶用于双偶氮结构的直接湖蓝5B溶液的脱色，确定其最适反应条件，结果表明：漆酶对这类染料有明显的脱色作用．染料溶液在酶质量浓度3g／L、pH4．5、30℃、60min日寸有最佳的脱色效果；讨论了不同添加剂（例如酸根离子、金属离子、表面活性剂）对脱色的影响．结果表明：Cu^2＋对脱色有明显的促进作用，而Fe^2＋和各类表面活性剂对脱色有抑制作用．     

甘蓝过氧化物酶活性及其影响因素的研究

甘蓝POD的最适pH为5-6之间;在100℃的热烫温度下随着热烫时间的延长,POD酶活降低,而贮藏2d后酶活的再生量先增大后降低,在热处理时间为1－1．5min时达到最大值;Na^＋和Ca^2＋显著抑制POD酶活力。因此,当热处理温度为100℃加热2min,热处理液pH为8,ZnCl2浓度为100mg／L,CaCl2300mg／L时,可基本破坏甘蓝中的POD酶活,且甘蓝的质构和色泽较好。     

添加剂对酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解反应的影响

系统探讨了通过添加剂（β-环糊精、牛黄胆酸钠、6种表面活性剂、Ca^2＋、Mn^2＋）来调控Novozym435催化外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯水解反应的酶活性和对映体选择性。结果表明在所研究的10种添加剂中,Mn^2＋（浓度大于3mg/ml）和表面活性剂CTAB可提高该酶促反应速度却降低时映体选择性,牛黄胆酸钠与Ca^2＋（浓度大于2mg／ml）对该反应有负面影响,其余6种添加剂（β-环糊精、吐温40、吐温80、司盘60、司盘80、十二烷基磺酸钠）则无任何影响。     

米黑毛霉凝乳酶酶学性质研究

研究了米黑毛霉凝乳酶的最适温度、最适pH、热稳定性,探讨了金属离子对酶活力的影响,加酶量对酶反应的影响,测定了酶的蛋白水解活力和酶的K^m与V^m值。结果显示：酶的最适温度为70℃;最适pH6;酶液在65℃保温10min,酶活损失达96％;Na^＋和K^＋对酶稍有抑制作用,Fe^2＋对酶有促进作用,Cu^2＋对酶有强烈的抑制作用;减少酶的添加量,在规定时间内凝乳会导致凝乳酶酶活测定结果偏大;凝乳酶蛋白水解活力为1048U／g;Km为190．84g／L,Vmax=7．8678g／s。     

酸性β-甘露聚糖酶固态发酵工艺与粗酶性质

用宇佐美曲霉菌株（Aspergillus usamii YL-01-78）进行固态发酵生产酸性β-甘露聚糖酶,其曲盘发酵的最优工艺为：培养基最初料水比为1：1.4,起始pH自然,接种量10%（相对于干物料）,通过中间补水和翻曲,31℃培养72h,最高酶活可达3183IU/g干曲.对酶学性质初步研究显示：酶的最适反应温度和pH分别为70℃和3.5,低于60℃、pH5.0～8.0酶稳定,Ca^2＋、EDTA对酶有激活作用,Mn^2＋、Pb^2＋、Sn^2＋、Fe^3＋、Cu2^＋、Al^3＋、Fe^2＋对酶有一定的抑制作用.     

宏基因组文库新型β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及酶学性质分析

利用宏基因组文库方法,通过功能筛选法从文库中筛选到一个新型β-葡萄糖苷酶基因bgl2238（GenBank：KU320675.1）,对新基因进行生物信息学分析和原核表达,并研究其酶学性质。结果表明,该基因全长2238bp,可编码745个氨基酸,通过氨基酸序列分析,预测bgl2238蛋白分子质量为80.67kDa,pI值为4.95,是一种结构较稳定、疏水性高且无信号肽序列的酸性蛋白质;经同源性分析,发现其与来源于Bacteroides thetaiotaomicron的β-葡萄糖苷酶具有58%的相似性,属于GH3超家族和GH3C超家族酶。将重组质粒pET-32a（＋）-bgl2238转化入Escherichia coli BL2l（DE3）细胞进行异源表达,酶学性质测定结果显示,以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside,pNPG）为底物,β-葡萄糖苷酶bgl2238最适反应pH值和温度分别为6.10、44℃,此时该酶最大比活力达到29.1U/mg;且在4～50℃范围内,热处理β-葡萄糖苷酶bgl22384h后仍保留70%以上的酶活力,热稳定性较好;其动力学参数Vmax为576μmoL/（L·min）,Km为0.296mmol/L;不同浓度的K＋、Na＋、Fe2＋、Mg2＋、Mn2＋、Ca2＋、Co2＋和Ni2＋对酶活力均有较大促进作用,其中Fe2＋对bgl2238酶活力的促进作用最大,10mmol/LFe2＋使相对酶活力高达260%,而重金属离子Ag＋、Hg2＋及Cu2＋对酶活力有抑制作用。bgl2238具有良好的酶学性质,可以尝试应用于工业上纤维素降解的生产。     

一株酸性糖化酶的分离纯化及酶学性质研究

从土壤中筛选得到一株产酸性糖化酶的黑曲霉ASP-S21,粗酶液通过（NH4）2s04沉淀、Sepharose HP阴离子交换层析、SephacrylS-200层析柱分离纯化,SDS-PAGE电泳测定其分子量为120kDa。该酶最适作用温度为65℃;酶的最适反应pH值为4．0;在pH2．2-7．6之间,具有较好的酸稳定性;酶的Km值为0．94mg／mL,Vmax=142．43mol（Glu）／min-L。Cu2＋和Co2＋对酶活有较强的促进作用,10mM的Cu2镟酶活力提高到129％,Fe^3＋对酶催化活力抑制作用较强。该酶且具有部分降解生淀粉的能力,在pH4．0,50℃反应1h,生淀粉酶活力为0．39U,RDA值为4．57％。得到的黑曲霉ASP-S21酸性糖化酶,产生的糖化酶活力高、耐酸稳定性好,酶争陛质符合淀粉糖化工业化过程中对酶的要求,具有良好的研究前景。     

大蒜果聚糖外切酶的一些酶学特征研究

目的：研究大蒜(Allium sativum L.)果聚糖水解酶(FEH)的酶学特征。方法：采用硫酸铵分级沉淀确定FEH 所在的沉淀组分,采用薄板层析和离子色谱法研究酶解产物,通过3,5- 二硝基水杨酸(DNS)法测定还原糖的变化量计算酶活力,进而研究FEH 的酶切位点,研究温度、pH 值、离子强度、底物质量浓度对FEH 活力的影响。结果：大蒜FEH 存在于0～20% 硫酸铵饱和度组分,根据酶解产物判断该酶属于外切酶,最适反应温度为45℃,最适反应pH 值为5.5,最适离子强度1.5mol/L 氯化钠,最适反应质量浓度为4mg/mL。结论：存在于大蒜中的果聚糖外切酶会影响大蒜加工产品的质量和保鲜大蒜贮藏的糖代谢。     

金属离子对小球藻Chlorella vulgaris生物量和总脂肪酸含量的影响的研究

本文研究了无光照异养条件下八种金属离子对小球藻Chlorella vulgaris的生物量和总脂肪酸含量（TFAC）的影响。Cu2＋,Zn2＋是小球藻生长的限制性营养因子,通过添加0．08mg／LCuS04＇5H20可使小球藻生物量从1．24g／L提高到3．60g／L;添加0．2mg／LZnS04．71t20,可使小球藻生物量从1．71g／L提高到3．96g／L。Mg2＋缺失条件可得到最高总脂肪酸含量,但是生物量有所减少。Mo6＋,Mn2＋和Fe3＋对小球藻的生物量和油脂含量无明显的影响,说明这些金属离子对小球藻的生长没有特殊的贡献。提高Fe3＋的浓度有利于总脂肪酸的提高。添加50mg／L和100mg／L的CaCl2·2H20可分别得到最大生物量和最高总脂肪酸含量。     

Purification and Characterization of Intracellular α-galactosidase from Rhizopus sp. AOI

根霉Rhizopus sp．A01的菌丝体破碎液依次经过三相分离、SephaαexG-100凝胶过滤获得了电泳纯的α-半乳糖苷酶,纯化了54．8倍,总酶活回收率达到27．3％,在SDS-PAGE上显示相对分子质量为85．6ku的单-条带,凝胶过滤表明该酶表观相对分子质量为302ku。该酶水解对硝基苯-α—D-吡喃半乳糖苷的最适pH值为4．5,最适温度为55％,表观Kn值为（0．242±0．027）mmol／L,表观Kcat／Km值为4．089×10^5L／（mol·s）;对蜜二糖和棉子糖有弱的水解作用,水解速度依次为138．3μmol／（h·mg）、19．7μmol／（h·mg）。水解活性受Fe^2＋和Fe^2＋的显著激活,但受Mn^2＋、Cu^2＋、Hg^＋和Mg^2＋等离子的强烈抑制。该酶活性在pH4．0～8．2保持稳定,在50℃时保温90min,残余酶活达到了48％。     

ClO_2在大蒜腌制中的应用研究

新鲜大蒜在腌制过程中易发生褐变,降低商品价值。实验通过在新鲜大蒜的腌制过程中添加ClO2(20、40、60、80 mg/L),研究了ClO2对腌制大蒜品质的影响。研究表明:40mg/L的ClO2能够有效抑制大蒜褐变,显著降低酶活,减少微生物菌落总数,对产品风味影响不大。     

粗糙脉孢菌突变菌株合成漆酶的发酵条件研究

研究了影响粗糙脉孢菌突变菌株合成漆酶的一些摇瓶发酵条件，包括通气量、培养温度、甲醇浓度、Cu2＋浓度等。结果表明，在500mL三角瓶中装入含150μmol／L Cu^2＋浓度的发酵培养基BMMY 50mL，接种后于30℃，200r／min培养7d，用0．5％甲醇诱导，在第5天时漆酶酶活最高可达3．88u／mL。     

Enterobactersp．SYA2乳糖酶酶学性质研究

采用硫酸铵盐析对Enterobactersp．SYA2乳糖酶进行分级沉淀,研究了该酶的最适作用温度、热稳定性、最适作用pH、pH稳定性及金属离子的影响。结果表明：选取硫酸铵的饱和度30％～85％进行分级沉淀,分级沉淀后得到乳糖酶的比活为45．85U／mg;该酶最适作用温度为40℃～45℃,在35℃和40℃处理时酶活损失不大,在45℃和50℃处理时酶活损失较大,最适作用pH为6．5,pH在6．0－8．5酶活最为稳定,Mg^2＋、Mn^2＋、Na^＋对该酶有一定激活作用,Zn^2＋,Cu^2、Fe^2＋对该酶有不同程度的抑制作用,当酶添加量为1U／mL,乳清水解率3h达50％;而添加量为2U／mL时乳清水解率1h达50％。