白灵菇菌丝体多糖的分离纯化及理化性质研究

研究白灵菇菌丝体粗多糖的分离纯化技术,并对得到的多糖进行纯度鉴定及理化性质研究。结果表明,白灵菇菌丝体多糖（PNMP）经DEAE-Cellulose52和Sephadex G-200柱层析后得到单一组分PNMPⅢ-a,经分析鉴定,PNMPⅢ-a为不含双糖、糖醛酸和核酸的非淀粉类的均一多糖;其相对分子质量为15213Da。PNMPⅢ-a完全酸水解后,经高效液相色谱分析确定其糖基的组成为葡萄糖（Glc）、鼠李糖（Rha）、木糖（Xyl）和核糖（Nbo）。红外光谱分析表明,PNMPⅢ-a是一种含有氨基、硫酸酯键、β-糖苷键和α-D葡萄糖的蛋白多糖。      

桑黄菌丝体多糖的分离纯化及理化性质分析

研究桑黄粗多糖的分离和纯化工艺,并对多糖组分进行理化性质分析。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到两个组分P-47000和P-8700;经高效液相色谱分析证明,两组分均为纯品,且不含蛋白质、核酸,为非淀粉类多糖,分子质量分别为4.74×104D和8.71×103D,均由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成,P-47000中各单糖物质的量比为3.47:1.99:1:63.27:13.44,P-8700中各单糖物质的量比为10.46:1:1.03:182.75:30.94。     

灰树花菌丝体多糖G.F.-1的分离纯化及其理化特性的研究

通过对灰树花菌丝体进行多糖的提取、分离纯化,得到多糖G.F.-1。研究表明,G.F.-1是一种均一性好、分子量为1.23×106的大分子纯多糖,其单糖组成的摩尔比为Xyl∶Man∶Glc=0.9∶1.4∶4.7;一级结构是主链中β(1→3)、β(1→6)糖苷键为主,分枝点主要发生在C6位的β-D-葡聚糖所构成。     

中国被毛孢发酵虫草菌丝体多糖的提取、纯化及其理化性质

利用中国被毛孢虫草菌液体深层发酵培养得到的菌丝体,通过正交试验优化得到了虫草多糖的提取工艺条件为:提取温度100℃,提取时间120 min,料液比1∶15,提取次数4次。粗多糖经Sevag法脱蛋白、透析袋透析、DEAE-cellulose离子交换和Sephadex G-100柱层析纯化后,得到3种多糖(命名为HSP-1、HSP-2和HSP-3)。经紫外扫描、Sephacryl S-300 HR柱层析检测确定HSP-1和HSP-2为均一组分,HSP-3为非均一组分。苯酚-硫酸法测得HSP-1和HSP-2的含糖量分别为89.42%和85.63%。Sephacryl S-300 HR柱层析测得HSP-1和HSP-2的相对分子质量分别为1.7×104Da和9.8×103Da。GC-MS测得HSP-1的单糖组成及比例为:D-葡萄糖∶D-甘露糖∶D-半乳糖=4.522∶1∶1.378,HSP-2的单糖组成及比例为:D-葡萄糖∶D-甘露糖∶D-半乳糖∶D-阿拉伯糖=2.687∶4.591∶1∶0.212。红外光谱测定结果显示HSP-1和HSP-2都含有α型糖苷键。     

印度块菌多糖的纯化及其理化性质研究

以云南产印度块菌为原料,采用水提醇沉法从其子实体中提取粗多糖,经过Sevage法脱蛋白、DEAE-52纤维素柱层析分离,得到3种多糖组分PTI-1、PTI-2、PTI-3,选择PTI-2通过Sephadex G-100柱进一步纯化,得到了均一纯多糖,命名为PTI-2A,并对PTI-2A进行基础理化测定。结果表明:PTI-2A分子量为193388.2u,易溶于水、稀酸、稀碱,不溶于甲醇、丙酮、氯仿、乙醚和二甲基亚砜等有机溶剂,不含蛋白质、核酸、酚类、淀粉和游离单糖。     

天麻水溶性多糖分离纯化及理化性质研究

本实验研究云南野生天麻（GastrodiaelataBlume）多糖的分离纯化及理化性质,实验结果表明,天麻粗多糖提取的最佳工艺条件为温度50℃、浸提时间3h、料液比1：10（w／v）,乙醇浓度80％。在该条件下天麻粗多糖得率约为9．67％（干重）。天麻水溶性多糖（WPGB）经Sevag法脱蛋白、透析、乙醇沉淀、DEAE．52纤维素层析及SephadexG-100层析分离纯化得到WPGB．A．H和WPGB—A．L,经高效液相色谱仪分析证明,WPGB．A．H为纯品,且得率为0．824％（干重）,经过其理化性质鉴定表明,WPGB．A．H不含蛋白质、核酸、糖醛酸,为非淀粉类多糖,其平均分子质量为28840D。     

印度块菌多糖的纯化及其理化性质研究

以云南产印度块菌为原料,采用水提醇沉法从其子实体中提取粗多糖,经过Sevage法脱蛋白、DEAE-52纤维素柱层析分离,得到3种多糖组分PTI-1、PTI-2、PTI-3,选择PTI-2通过Sephadex G-100柱进一步纯化,得到了均一纯多糖,命名为PTI-2A,并对PTI-2A进行基础理化测定。结果表明:PTI-2A分子量为193388.2u,易溶于水、稀酸、稀碱,不溶于甲醇、丙酮、氯仿、乙醚和二甲基亚砜等有机溶剂,不含蛋白质、核酸、酚类、淀粉和游离单糖。      

香蕉多糖的分离纯化及其性质研究

本文建立了香蕉多糖的提取纯化方法,并对提取的香蕉多糖进行了理化性质分析。香蕉多糖经40%乙醇分级得到的组分Len5,用Seohadex G-150凝胶柱层析得到单一峰,Len5 的酸性水解液经纸层析和薄层层析分析,其单糖组成为葡萄糖和木糖,用Sephadex G-150 凝胶柱层析法测得其分子量为43000道尔顿。     

荠蓝胶多糖的分离纯化和理化性质研究

研究荠蓝胶脱除蛋白的方法,荠蓝胶多糖的分离纯化,以及部分理化性质的测定。采用水提醇沉法从荠蓝籽中提取荠蓝胶,比较了Sevag法、碱性蛋白酶+Sevag法、胰蛋白酶+Sevag法3种脱除蛋白方法,此后经DE-52离子交换柱进行纯化得到精制多糖。采用凝胶电泳、紫外扫描等进行纯度鉴定,红外扫描、液相色谱分析其结构和单糖组成,并进行部分理化性质的测定。结果表明,碱性蛋白酶+sevag法是脱除荠蓝胶中蛋白的有效方法,分离纯化的荠蓝胶多糖CSP(camelina sativa polysaccharide)为单一级分,含有糖醛酸结构,吡喃糖环和β-糖苷键,其单糖组成包括鼠李糖、木糖、阿拉伯糖和葡萄糖4种,摩尔比为11.95∶13.95∶0.79∶0.27。荠蓝胶多糖CSP是一种水溶性,有较高黏度的酸性多糖类物质。     

苦丁茶多糖的提取分离纯化及部分理化性质研究

以多糖提取率为指标,采用单因素实验和正交实验对苦丁茶多糖的提取工艺条件进行优化,确定最佳提取工艺为:水料比20:1、80℃、提取50 min。在此条件下,苦丁茶多糖提取率为2.43%,先后采用Sevag法脱蛋白、分级醇沉法、DEAE—52纤维素离子交换柱层析法对其进行分离纯化,最后得到K_1和K_22个组分。同时对各苦丁茶多糖进行理化性质分析,结合Sevag法预实验所得出的结果,推测苦丁茶多糖可能为以某种方式结合蛋白的糖缀合物。     

香菇菌丝体多糖的分离纯化和抗氧化作用

采用超声破碎和热水浸提相结合的方法提取香菇菌丝体多糖,通过L9(34)正交试验考察料液比、浸提温度、超声强度和浸提时间对多糖提取的影响,确定香菇菌丝体多糖最佳提取条件。利用D EA E-5 2离子交换和SephadexG100凝胶过滤层析纯化香菇菌丝体多糖,紫外扫描和薄膜电泳方法鉴定多糖的纯度;采用DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除实验及血浆丙二醛的生成抑制作用和抑制H2O2诱导红细胞氧化溶血检测多糖的抗氧化性。结果表明:香菇菌丝体多糖最佳提取条件为料液比1:15、浸提温度90℃、超声波破碎功率400W、浸提时间3h,最适条件下鲜菌丝体的多糖提取量为3.38‰;纯化后的多糖(LMPⅡ)具有清除超氧阴离子自由基和羟自由基活性的能力,能够抑制血浆丙二醛的生成,抑制H2O2诱导红细胞氧化溶血,且呈现一定效量关系。显示纯化的香菇菌丝体多糖具有较强的抗氧化作用。     

人工虫草多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用

目的：研究人工虫草不同部位多糖及固体培养残基多糖对小鼠CCl4肝损伤的保护作用。方法：取健康的雄性小鼠60只,按体质量随机分成6组：正常对照组、急性CCl4肝损伤模型组、虫草子实体多糖组、菌丝体多糖组、固体培养残基多糖组和阳性药物组,每组10只。用紫外分光光度法测定比较血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,测定肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总蛋白(TP)含量,并对肝细胞的组织形态学进行观察。结果：虫草多糖子实体、菌丝体和固体培养残基多糖组,能显著抑制CCl4引起的小鼠血清ALT、AST活性及肝脏MDA含量的升高,以及肝脏SOD含量的降低,并能显著减轻CCl4引起的肝小叶内的灶性坏死。结论：虫草多糖子实体、菌丝体和固体培养残基多糖组对小鼠化学性肝损伤具有保护作用,人工虫草子实体多糖效果最优,其次为菌丝体多糖,再次为固体培养残基多糖。     

虫草头孢菌粉粗多糖的理化性质和含量测定研究

目的:研究虫草头孢菌粉粗多糖的理化性质并测定其多糖含量。方法:用斐林试剂检测其还原性;用硫酸-苯酚法测多糖的含量。结果:本方法制备的虫草头孢粗多糖没有还原性,不含蛋白质成分;粗多糖中多糖的含量为35.37%。     

蛹虫草多糖的纯化及其分子量的测定

以蛹虫草子实体为材料,对水提醇沉、硫酸锌盐去蛋白后获得蛹虫草粗多糖（CP）进行分离纯化。采用膜分离技术、DEAE．52柱层析及SephadexG-100柱层析对CP进行分离纯化,并使用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定各组分多糖分子量,以表征不同路径所得多糖的分子量分布。结果表明：CP经膜过滤、DEAE-52柱层析及SephadexG-100进一步柱层析得到多糖组分CP2-c2-s2,经HPGPC法鉴定,CP2-c2-s2为均一多糖组分,其平均分子量为20200Da。     

蛹虫草胞外多糖的提取纯化及免疫活性研究

目的提取纯化蛹虫草发酵液中的胞外多糖,初步研究其结构及免疫活性。方法乙醇沉淀多糖,用Sevag法除去蛋白质、透析法除去小分子物质,经CM-52纤维素柱层析后得纯品。用紫外光谱测定多糖纯度,用凝胶柱层析法测定相对分子质量,高效毛细管电泳和红外光谱分析其分子结构,检测胞外多糖对小鼠巨噬细胞系RAW264.7产生NO的影响。结果蛹虫草胞外多糖经脱蛋白、CM-52纤维素柱层析后可获得单一对称峰的纯多糖,相对分子质量为3.49×10^4,含羟基、糖醛结构和羰基结构,单糖基之一为甘露糖。多糖可显著刺激巨噬细胞分泌NO,具有活化免疫细胞、增强机体免疫力的作用。结论该方法可获得高纯度蛹虫草胞外多糖,并证明它对巨噬细胞有活化作用。     

人工培养冬虫夏草胞外多糖的分离纯化及组成分析

将冬虫夏草菌丝体培养液以醇沉法提取多糖,通过DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100凝胶层析柱分级纯化后得到两种单一的中性多糖组分EPS-1w和EPS-2w。应用紫外分光光度、Sephadex G-100凝胶柱层析法和比旋度法鉴定多糖的纯度,凝胶过滤法、理化实验和高效液相色谱研究其相对分子质量、理化性质及组成。结果表明:EPS-1w和EPS-2w为均一组分且易溶于水、稀酸、碱,其平均分子量分别约为4.65×104u和3.48×104u,均主要是由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖组成,其物质的量比分别为23.7∶6.2∶8.5和35∶3.6∶3.1。      

龙须菜琼胶多糖的提取、纯化与性能表征

龙须菜(Gracilaria Lemaneiformis)的热水提取物,经DE-22和Sephadex G-200柱层析纯化,得到一种含微量硫酸基的琼胶多糖,此多糖经Q-Sepharose柱层析鉴定为单一组分。紫外光谱显示它不含蛋白质、多肽及核酸,红外光谱揭示它含3,6-内醚半乳糖特征吸收以及微量的硫酸基,热学性质表明在其0～700℃升温过程中存在两个失重过程,旋光分析表明随温度的升高,该多糖水溶液存在一个由有序构象(螺旋结构)向无序构象(无规线团)转变的过程。     

桦褐孔菌多糖IOP3a的分离纯化及其体外抗肿瘤活性研究

采用水浴浸提,Sevage 法去除蛋白分离得到粗多糖,DEAE-SepharoseCL-6B 离子交换柱、SepharoseCL-6B和Sephadex G-200 凝胶柱层析得到桦褐孔菌均一纯多糖IOP3a,用MTT 法研究IOP3a 对Jurkat、Daudi 肿瘤细胞体外抑制作用。结果表明：IOP3a 对肿瘤细胞Jurkat 和Daudi 的增殖具有明显的体外抑制作用(P ＜ 0.01),并且具有量效依赖性,其最大抑制率分别达到71.84% 和75.14%。     

金针菇菌丝体多糖的研究

本文研究了金针菇菌丝体中多糖的提取、纯化和分子量分布及其测定。样品用pH8～9的弱碱性水溶液于室温下提取水溶性多糖,经三次提取已基本完全。提取液经浓缩、醇析、离心、干燥后得粗多糖,得率为7.07％。粗多糖再经Savage法脱蛋白、再次醇析后得灰白色纯多糖,得率为0.6％。纯多糖用高效液相色谱法分离得到四个色谱峰,它们的分子量分别为1,930,000、574,000、56,000和15,000。     

人工冬虫夏草不同部位氨基酸含量测定

目的：检测人工冬虫夏草不同部位中氨基酸的含量。方法：使用氨基酸分析仪,以茚三酮为衍生试剂,采用柱后衍生法测定人工虫草不同部位中氨基酸含量。结果：在蛹虫草的固体培养残基、子实体、菌丝体中都至少含有17种常见氨基酸和8种必需氨基酸,总氨基酸含量分别为8.32%、21.68%和23.19%,必需氨基酸的含量分别为3.74%、8.11%和8.88%。结论：人工虫草中不但子实体含有腺嘌呤、腺苷和虫草素,菌丝体及固体培养残基也含有这3种主要核苷类物质,具有进一步开发利用价值。