基于基质需求特征确立脱氮假单胞杆菌产维生素B12的发酵原料

对于工业化发酵而言,选择一种适宜的发酵原料对提高微生物发酵产量及降低发酵成本显得尤为重要.该文首先在合成培养基中考察了氨基酸对脱氮假单胞杆菌合成维生素B12的影响,结果表明谷氨酸等氨基酸对菌体生长和维生素B12合成具有较大的促进作用.甜菜糖蜜作为制糖工业的副产物,其成本相对低廉,但营养组分检测显示,甜菜糖蜜含有丰富的碳源和有机氮类物质,其中有机氮类又以谷氨酸居多,而且还含有一定量的合成维生素B12所必需的甲基供体甜菜碱.基于此,最终确立了以甜菜糖蜜作为维生素B12发酵的主要原料.在该原料下,脱氮假单胞杆菌摇瓶发酵结束时(168h)的菌体量(光密度)和维生素B12产量分别达到37.3mg/L和108.37mg/L.     

典型性甲基供体对脱氮假单胞杆菌代谢过程的氧调控作用

本文在7L发酵罐中分别以甜菜碱和氯化胆碱作为合成维生素B12的甲基供体,分别考察了二者对脱氮假单胞杆菌代谢过程的影响.结果表明:使用氯化胆碱的罐批出现了溶氧过早回升、pH剧烈下降等异常的代谢现象,致使发酵过程的菌体生长缓慢且维生素B12合成量低;而使用甜菜碱作为甲基供体时,其菌体代谢活力要明显优于使用氯化胆碱的罐批,整个发酵过程的pH和溶氧均能保持在稳定且合适的水平,最终的菌体量和维生素B12产量也更高.     

恶臭假单胞杆菌发酵条件的优化

在已筛选出产海藻糖合酶菌株———恶臭假单胞杆菌的基础上 ,研究了该菌株的发酵条件。实验结果表明 ,最佳发酵工艺条件为 :发酵温度 3 0℃ ,发酵pH 7 2 ,最佳通风量 10 0mL培养液 /5 0 0mL三角瓶 ,发酵终点为发酵后 5 2h。     

典型性甲基供体对脱氮假单胞杆菌代谢过程的氧调控作用

本文在7L发酵罐中分别以甜菜碱和氯化胆碱作为合成维生素B₁₂的甲基供体,分别考察了二者对脱氮假单胞杆菌代谢过程的影响。结果表明:使用氯化胆碱的罐批出现了溶氧过早回升、pH剧烈下降等异常的代谢现象,致使发酵过程的菌体生长缓慢且维生素B₁₂合成量低;而使用甜菜碱作为甲基供体时,其菌体代谢活力要明显优于使用氯化胆碱的罐批,整个发酵过程的pH和溶氧均能保持在稳定且合适的水平,最终的菌体量和维生素B₁₂产量也更高。      

无机氮源对脱氮假单胞杆菌产维生素B12代谢过程的影响

通过摇瓶培养的方式研究了无机氮源对脱氮假单胞杆菌发酵产维生素B12的代谢调控作用。首先考察了硫酸铵、硝酸铵、硝酸钠、磷酸氢二铵和氯化铵等5种不同无机氮源对脱氮假单胞杆菌代谢过程的影响。结果表明,硫酸铵是维生素B12发酵较为适宜的无机氮源;在此基础上进一步研究了NH4+浓度对脱氮假单胞杆菌发酵过程的影响,结果发现高浓度的NH4+能明显促进菌体的生长,但是会对维生素B12的合成产生一定的负作用;基于此,提出了脱氮假单胞杆菌摇瓶发酵过程的NH4+限制性补加策略,以克服NH4+在菌体生长与维生素B12合成上的矛盾。      

假单胞菌SWU-M生产弹性蛋白酶发酵条件的研究

研究弹性蛋白酶的产生与发酵条件,应用微生物学方法从牛肚中分离筛选了1株弹性蛋白酶用于生产菌株PseudomonassspSWU-M。研究结果表明,产生弹性蛋白酶的最佳发酵条件是:蔗糖6%、葡萄糖2%、干酪素3%、Na2HPO40.4%、MgSO·47H2O0.01%,起始pH值为7.0,摇振转速为150r/min。在后12h添加营养素和变温培养能提高酶的产量。     

恶臭假单胞菌发酵条件的研究

从未发病的K326烟株根际土壤中筛选出对TMV具有高度拮抗活性菌株A3,发酵液的抑制效果可达95%以上,为此,从碳源、氮源、pH、温度、通气量及发酵时间等方面对该菌株的摇瓶发酵条件进行研究。结果表明,A3菌株发酵适宜温度为28 ℃,在该温度下发酵60～70 h达到菌体最大数量,且抑菌效价最高;以葡萄糖为适宜的碳源可以更好的促进菌量的生长和抗病毒物质的分泌,有机氮中酵母膏或蛋白胨对菌株的生长和抗病毒活性成分生成均能达到理想的效果,鱼粉则不能被A3菌株很好的利用;pH 7是菌株最适宜的发酵范围,偏酸不利于菌株的生长;适当加大通气量能更好地促进A3菌株的繁殖及抗病毒物质的分泌。     

恶臭假单胞菌产精氨酸脱亚胺酶发酵条件及特性的研究

对恶臭假单胞菌N0705产精氨酸脱亚胺酶的发酵条件及部分酶学性质进行了研究.结果表明,在培养温度28℃,培养基初始pH值为6.6,接种量4%,装液量40mL/250mL,发酵时间50h时,精氨酸脱亚胺酶酶活最大.精氨酸脱亚胺酶发酵粗酶液在温度37℃及pH 6.0～7.0时有较好的稳定性.     

交替假单胞菌H_7产甲壳素酶发酵条件的研究

系统地研究了氮源、起始pH、培养基装量、培养温度和时间等因素对交替假单胞菌H7产甲壳素酶的影响。通过正交实验对H7的发酵条件进行了优化,最佳发酵条件为:培养温度37℃,起始pH7.0,底物浓度0.1%,装瓶量125mL。优化后菌株H7的酶活力由原来的0.59U/mL提高至0.69U/mL。     

产胞外多糖植物乳杆菌C88发酵条件优化

研究了发酵条件(初始pH值、温度和碳源)对植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)C88生长及胞外多糖产生情况的影响.结果表明,适合菌株生长和胞外多糖多糖产生的发酵条件为:起始pH值7.0,发酵温度37°C,发酵时间为48 h.碳源优化实验结果表明,果糖为促进菌株生长和胞外多糖产生的最适合碳源.在优化发酵条件下(初始pH值7.0,发酵温度37℃和添加2%果糖作为碳源),植物乳杆菌C88活菌数在培养24 h时接近达到109mL-1,胞外多糖产量从29.86 mg/L提高到40.96 mg/L(均为质量浓度).     

紫外分光光度法测定润洁滴眼液中维生素B12的含量

紫外分光光度法测定润洁中维生素B_(12)的含量,可简化检验步骤,方便快捷。     

利用厌氧菌生物合成维生素B12的初步研究

本文报道了利用菌种自然选育、定向筛选和小罐发酵等试验研究方法,总结出了利用费氏丙酸茵进行厌氧培养生物合成维生素B12的发酵工艺,使发酵单位有了很大提高,这对利用厌氧茵生产维生素B12具有一定的指导意义。     

维生素B_(12)的生物合成研究

维生素B12广泛应用于医药、食品和畜牧业,主要由微生物发酵得到。脱氮假单胞菌(Pseudomonas denitrificans)和费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)是主要的生产菌种。与之相应,维生素B12存在好氧和厌氧2条生物合成途径,生物合成过程十分复杂,2条合成途径大体相同又各有特点。维生素B12发酵产量的提高有待于菌种的改良和发酵工艺的改进。了解维生素B12生物合成途径和代谢调控机制具有重要意义,可为育种工作提供理论基础。     

发酵条件对木醋杆菌合成细菌纤维素影响的研究进展

产细菌纤维素能力较强的微生物是木醋杆菌。影响较大的发酵条件有：①培养基中含有乳酸盐或甲硫氨酸，能加速细胞生长，提高纤维素产量。②当氧分压为大气压的10％-15％时，纤维素的产量最高。提高溶氧会使气相的CO2分压同时加大，而降低纤维素的生产速率。③在发酵培养基中加入醋酸作为能源，能保持培养基中pH的稳定，有利于纤维素的生成。④在培养基中添加少量纤维素酶可提高纤维素的产量。分别添加1．5％的乙醇，0．1％的醋酸，0．2％的柠檬酸，纤维素的产量可分别提高59．5％，44．4％和40．5％。(陶然)     

猕猴桃溃疡病菌拮抗菌筛选、鉴定及发酵条件优化

目的:从不同地区猕猴桃根际土壤中筛选拮抗猕猴桃溃疡病菌的菌株,优化其产生抑菌活性物质的发酵条件,为猕猴桃溃疡病的生物防治提供潜在的资源菌。方法:采用平板稀释法从猕猴桃根际土壤中分离获得菌株,采用抑菌圈法筛选拮抗菌;通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析对其进行鉴定;并采用单因素及正交试验优化培养基组分及发酵条件。结果:从土壤中共分离到288株放线菌,其中编号为NA-TXL-1的菌株对猕猴桃溃疡病菌的拮抗效果最佳,采用预防法、治疗法进行盆栽实验,发酵原液的防治效果分别为73.06%、55.62%,初步鉴定该菌株为抗生链霉菌。其最佳发酵配方和培养条件为:乳糖30 g/L、酵母粉3 g/L、NaCl 1 g/L、K_2HPO_4 0.5 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L、FeSO_4 0.01 g/L,种子培养基为乳糖-酵母粉培养基,接种量为2%,起始pH值为7.0,发酵原液、上清液、重悬液分别培养5、14、5 d。结论:经鉴定,拮抗菌株为Streptomyces antibioticus。在优化的发酵条件下,该菌株对猕猴桃溃疡病菌具有更好的拮抗效果。     

菠萝果酒发酵工艺条件的优化

以菠萝汁为原料,对菠萝果酒的发酵工艺进行研究。通过正交试验得出菠萝果酒发酵的最佳工艺条件为:酵母接种量6%,糖含量240 g/L,SO2添加量80 mg/L,果胶酶用量120 mg/L,主发酵温度为22℃,发酵6 d,再经后酵和陈酿,得到果香浓郁、色泽金黄的优质菠萝果酒。