荧光光电法检测化妆品中致病菌的研究

建立了一种利用荧光光电技术快速检测化妆品中致病菌的方法。分别对化妆品中的大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌进行检测。结果显示此方法检测大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的特异性良好,检测菌液和人工污染爽肤水及乳液样品的灵敏度均达到100cfu·mL-1,总检测时间可控制在14 h以内。     

聚合酶链式反应技术快速检测化妆品中大肠杆菌的研究

利用聚合酶链式反应(PCR)技术建立了一种快速检测化妆品中大肠杆菌的方法.根据大肠杆菌的ITS保守序列设计特异性引物,确定引物的特异性;比较3种不同提取大肠杆菌DNA的方法,确定煮沸法为最优方法;模拟染菌的化妆品样品,对其进行增菌,并作为模板进行PCR扩增.结果表明,此方法可以在原样品活菌浓度约8×100 cfu/mL时通过12h增菌后检测出来,总的检测时间可以控制在24 h内.     

化妆品中金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌检出能力验证结果与分析

为提升对化妆品中金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的检测能力,增强实验室竞争能力,本实验室参加CNAS T0710化妆品中金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌检出能力验证。按照能力验证作业指导书和《化妆品卫生规范》(2007年版)的要求进行增菌,采用16Sr DNA全序列分析、全自动微生物生化鉴定系统(VITEK2)和全自动微生物基因指纹鉴定系统(Ribo Printer)对分离出的疑似菌进行鉴定。结果显示,样品HZP167-1检出金黄色葡萄球菌,HZP167-2检出铜绿假单胞菌,HZP167-3检出金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌,HZP167-4检出表皮葡萄球菌,HZP167-5未检出。5个样品测试均取得满意的结果。     

双重荧光定量PCR技术在药品微生物检验中的应用

目的建立快速检测金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的双重荧光定量PCR方法并在药品微生物检测中应用。方法通过设计特异性引物和探针,扩增金黄色葡萄球菌的femB基因和铜绿假单胞菌的DNA gyrase subunit B基因,建立荧光定量PCR方法。将该方法应用于30批次药品微生物检测。结果建立同时检测金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的双重荧光定量PCR方法,从DNA提取到检测完毕仅需2 h。检测灵敏度为50 copies/μL,特异性为100%。30批次样品检验结果表明该方法与传统细菌培养方法结果一致。结论该法缩短了检测时间,具有良好的灵敏性和特异性,在药品微生物检验中有很好的应用前景。     

化妆品中致病菌检测规范方法和微生物富集方法的评价

为考察《化妆品安全技术规范》（2015年版）的方法（以下简称规范方法）中培养基质量对试验结果的影响，以及微生物富集方法（microbial enrichment general，以下简称ENR方法）和规范方法的适用性和一致性，以20株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌及其染菌样品进行试验，比较了4种不同品牌培养基对规范方法试验结果的影响。结果显示，4种品牌培养基对金黄色葡萄球菌检测结果和化妆品染菌样品的检出率存在显著差异，ENR方法的适用性检测结果显著优于规范方法。基于试验结果，本研究发现市售培养基质量良莠不齐；对于化妆品染菌样品，ENR方法的检出率显著优于规范方法。     

酶底物法检测包装饮用水中铜绿假单胞菌方法比对

滤膜法为现行包装饮用水中铜绿假单胞菌测定的国家标准方法，酶底物法测定包装饮用水中铜绿假单胞菌已通过国内外多个标准认证。采用酶底物法与滤膜法对包装饮用水中铜绿假单胞菌进行检测。通过标准菌株加标试验，酶底物法检测包装饮用水中铜绿假单胞菌的方法精密度相对标准偏差为0.8%～9.0%,定量质控样品测定的所有结果均在真值范围内，且方法的相对误差为0.8%。对两种方法检测结果进行统计学分析发现：两种方法在统计学上无显著性差异。与滤膜法相比，酶底物法具有操作简单、结果准确性高、稳定性好等特点，酶底物法可作为评价包装饮用水中铜绿假单胞菌污染的补充方法。     

中和剂对化妆品微生物指标检测结果的影响

采用不同的前处理方法进行化妆品微生物指标检验的供试液制备,参考《中国药典》使用标准菌株进行检验方法的适用性研究。试验结果显示：使用含中和剂的SCDLP液体培养基、改良卵磷脂肉汤、D/E中和肉汤制备供试液,加菌计数回收试验结果及控制菌(耐热大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌)阳性检出率,均优于按照《化妆品安全技术规范》(2015年版)用生理盐水制备供试液。其中采用D/E中和肉汤进行样品制备,对样品中防腐剂的中和效果最好。为提高化妆品微生物学指标检测的准确性,建议样品的供试液制备应选用适宜的中和剂,以消除样品的抑菌性。     

长江下游某地区饮用水中铜绿假单胞菌的赋存特征

针对长江下游某地区饮用水中铜绿假单胞菌的含量进行排摸,比较2020年1月—2022年12月铜绿假单胞菌的检测平均值,水源地Q取水与输水中铜绿假单胞菌的含量明显高于水源地C。水源地Q取水中铜绿假单胞菌平均含量达420.5MPN/(100 mL),输水中达242.0 MPN/(100 mL);水源地C取水中铜绿假单胞菌平均含量达201.4 MPN/(100 mL),输水中达82.5MPN/(100 mL)。水源地Q相关联水厂N进水铜绿假单胞菌均值含量远高于水源地C相关联水厂T进水的含量,其检测结果分别为232.1、2.1 MPN/(100 mL);水厂N进水铜绿假单胞菌的检出率达58.3%(7/12)、水厂T进水铜绿假单胞菌的检出率达50%(6/12),与水源地输水铜绿假单胞菌含量和检出率相比,显著降低。进水经给水厂处理后,水厂N、水厂T出水铜绿假单胞菌均未检出。与其他季节相比,在气温较高时(每年7月—10月),水源地铜绿假单胞菌含量显著增高,并有逐年最高值递增的趋势,当气温较高时,进水中铜绿假单胞菌含量也存在高值,建议在高温时期对铜绿假单胞菌进行持续监测。     

石榴皮与诃子联合制剂对铜绿假单胞菌抑菌作用的研究

目的:探讨石榴皮与诃子水煎剂单独及联合制剂对铜绿假单胞菌的体外抑菌作用,为中药联合治疗临床上铜绿假单胞菌感染提供参考数据及实验依据。方法:采用杯碟法、常量稀释法和微量棋盘法,测量抑菌圈直径和石榴皮和诃子水煎剂单独的最小抑菌浓度(MIC),计算二者连用时的抑菌指数(FIC),分析石榴皮和诃子水煎剂单独及联合制剂对铜绿假单胞菌的抑菌作用。结果:石榴皮与诃子单独制剂及联合制剂对铜绿假单胞菌有一定的抑菌作用。杯碟法结果显示,牛津杯周围可见明显的抑菌环,且抑菌环直径大小与药物浓度呈正比,其抑菌效果依次为:二者联合诃子石榴皮;常量稀释法和微量棋盘法结果显示,石榴皮水煎剂MIC为250 mg/mL;诃子水煎剂MIC为62.5 mg/mL,FIC为0.25。结论:石榴皮与诃子单独水煎剂对铜绿假单胞菌均有一定的抑菌作用,且抑菌效果强度与药物浓度呈正比;二者联合后彼此为协同效应,提示二者联合后可提高对铜绿假单胞菌的抑菌效果。     

一项微生物能力验证的多种方法检测结果分析

为确保微生物能力验证结果的准确报出,本实验室采用了多种方法进行CNAS T 0710的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的能力验证比对检验,结果表明:以上多种检测方法的测试结果相吻合,均显示5份样品中有2份检出铜绿假单胞菌,2份检出金黄色葡萄球菌。最终5份样品测试均取得满意结果,在分析比较中也总结出各种检验方法的优缺点。