橘叶黄酮的纯化及其体外抗氧化能力研究

优化大孔吸附树脂纯化橘叶总黄酮的工艺条件,对比考察纯化前后橘叶黄酮的体外抗氧化能力。在单因素试验的基础上,采用响应面法设计优化总黄酮吸附工艺,以吸附率为指标,考察上样液质量浓度、上样液pH值、上样液流速3个因素对吸附效果的影响。并对洗脱剂及其用量进行考察。对比研究橘叶黄酮纯化前后清除羟自由基、DPPH自由基的能力。D101型大孔树脂对橘叶总黄酮纯化的较佳工艺为:上样液质量浓度2 mg/mL,上样液流速1 BV/h,上样液pH 2.5;其他条件为上样液总黄酮量与树脂体积之比为7.7∶1(mg/mL),洗脱剂用量与树脂质量之比为5.6∶1(mL/g)。纯化后,总黄酮含量从4.8%提升至72.8%。同一黄酮浓度下,纯化后体外抗氧化能力均较纯化前强。大孔树脂纯化工艺对橘叶黄酮类成分具有良好的富集作用,且纯化后黄酮是总黄酮中发挥抗氧化能力的主要贡献成分。     

龙牙楤木中黄酮类化合物的大孔树脂纯化工艺研究

以龙牙楤木嫩芽提取物为原料,采用大孔树脂对其中黄酮类化合物进行纯化,并对其黄酮含量、1,1–二苯基–2–三硝基苯肼(1,1–diphenyl–2–picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除活性进行测定。通过比较7种大孔树脂对龙牙楤木黄酮静态吸附及解吸能力,筛选出最适纯化黄酮的大孔吸附树脂AB–8,并进一步对AB–8的动态吸附及解吸条件进行优化,获得最适条件为:上样流速3 BV/h,上样浓度3.5 mg/mL,上样量3 BV;最佳洗脱条件为:乙醇洗脱剂流速1.0 BV/h,洗脱剂用量3 BV,洗脱剂体积分数为70%。在此工艺条件下,总黄酮含量由184 mg/g提升至754.4 mg/g。结果表明,大孔树脂AB–8适用于分离纯化龙牙楤木芽中总黄酮,且经纯化后的总黄酮含量提高了4.1倍,纯化后总黄酮对DPPH自由基清除能力的IC50值为0.51 mg/mL。     

密蒙花黄酮的纯化及抗氧化活性研究

为考察密蒙花黄酮纯化工艺参数,并评估密蒙花黄酮的抗氧化活性。以总黄酮含量为指标,采用大孔吸附树脂法对密蒙花黄酮进行纯化,考察5种不同类型大孔吸附树脂对密蒙花黄酮的动态吸附及解吸附能力,筛选出最佳树脂类型和纯化工艺,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基清除活性等4种抗氧化指标评价密蒙花抗氧化活性并与黄酮含量进行相关分析。筛选出X-5型树脂,并确定最佳纯化工艺为:样品上样质量浓度6.00 mg/mL,上样流速2 BV/h,上样量20 BV,解吸附流速1.5 BV/h,解吸附剂用量2 BV,80%乙醇解吸附效果最好。密蒙花粗提物经纯化后,其总黄酮、毛蕊糖苷和蒙花苷含量分别提高2.28倍、2.72倍和2.00倍,纯化后密蒙花抗氧化活性显著增强,且与黄酮含量之间存在显著相关性。筛选出大孔树脂法纯化密蒙花黄酮的最佳条件,黄酮对密蒙花抗氧化活性具有显著作用。     

大孔树脂纯化沉香叶黄酮工艺优化及纯化前后抗氧化性比较

研究沉香叶黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化性。通过静态和动态实验,考察树脂种类、粗提液浓度、洗脱剂、上样流速、洗脱流速对沉香叶黄酮吸附解吸性能的影响,确定最佳纯化工艺条件;采用羟自由基法、DPPH自由基和ABTS自由基法,比较纯化前后沉香叶黄酮的抗氧化性。结果表明,NKA-9大孔树脂纯化沉香叶黄酮效果最好,最佳条件为:以1.5 mL/min速度将5.0 mg/mL粗提液上柱,用70%(v/v)乙醇以2.0 mg/mL速度洗脱,此条件下沉香叶黄酮纯度提高至76.58%±3.46%。沉香叶黄酮纯化后清除羟自由基、DPPH自由基和ABTS自由基IC₅₀值分别为(0.120±0.008)、(0.016±0.009)、(0.042±0.002)mg/mL,远低于纯化前的(0.300±0.015)、(0.170±0.008)、(0.160±0.009)mg/mL,说明沉香叶黄酮纯化前后均具有较强的抗氧化性,纯化后抗氧化性明显增强。NKA-9大孔树脂适合分离纯化沉香叶黄酮。     

涩柿树皮单宁的纯化及抗氧化活性

选用超声波法从涩柿树皮中提取单宁,溶剂法、大孔树脂法纯化粗提物,并考察了不同纯度的单宁对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和羟自由基（·OH）的清除作用。结果表明：涩柿树皮单宁的超声波提取率为5.6%;大孔吸附树脂纯化涩柿树皮单宁的最佳工艺参数为：以HPD-500树脂为吸附树脂,上柱流速1.5 mL/min,上样质量浓度1.2 mg/mL;洗脱流速1.5 mL/min,乙醇体积分数60%;粗提物、乙酸乙酯萃取物、大孔树脂纯化物、乙酸乙酯萃余物经大孔树脂纯化后产物、乙酸乙酯萃取物经大孔树脂纯化后产物的纯度分别为5.6%、11.5%、19.4%、47.4%、53.3%;当质量浓度为1 mg/mL时各纯度单宁对DPPH自由基有最大清除率,清除率分别为69.07%、80.19%、92.96%、94.02%、94.05%;清除DPPH自由基的IC50值分别为0.68、0.52、0.13、0.12、0.11 mg/mL;当质量浓度为0.9 mg/mL时各纯度单宁对·OH有最大清除率,清除率分别为43.04%、73.99%、83.00%、94.68%、96.23%。     

大孔树脂纯化芫荽总黄酮及芫荽总黄酮抗氧化和抗菌活性研究

目的:研究芫荽总黄酮的大孔树脂纯化工艺及总黄酮抗氧化、抗菌活性。方法:通过筛选优化大孔树脂型号,优化大孔树脂提取芫荽总黄酮条件,利用DPPH芫荽总黄酮抗氧化活性,琼脂扩散法测试芫荽总黄酮抗菌活性。结果:AB-8树脂对芫荽总黄酮有较好的吸附和解吸效果,最优工艺条件为:芫荽总黄酮上样液的质量浓度为1.5 mg/mL,上样速率为2 mL/min,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为4BV,洗脱速率为2mL/min,芫荽黄酮提取物清除DPPH·自由基的EC50为1.5mg/mL。对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、黑曲霉均有抗菌活性,但是对酿酒酵母无效。结论:AB-8型大孔树脂富集芫荽总黄酮效果最佳。     

无籽刺梨渣中黄酮的纯化及其抗氧化性

以无籽刺梨渣黄酮提取物为研究对象,通过比较5种大孔树脂对其静态吸附率和解吸率的影响,筛选出适宜纯化刺梨渣黄酮的树脂类型,并测定其抗氧化性。结果表明,D101型树脂为纯化无籽刺梨渣黄酮的最佳树脂。当样液浓度为0.861 mg/mL时,树脂吸附6 h就已达到吸附饱和;在原液pH为3.6的弱酸条件下,且以95%乙醇作为解吸溶剂对D101型树脂的解吸效果最好,纯化后的无籽刺梨渣黄酮纯度达到80.0%,是纯化前粗黄酮纯度的5倍。纯化后的无籽刺梨渣总黄酮对DPPH·自由基、O_2~(-·)自由基、·OH自由基的清除作用及总还原力方面均表现出较高的活性。     

白茅根黄酮纯化工艺及抗运动疲劳作用研究

采用大孔树脂纯化白茅根黄酮提取物，并比较不同产物的抗运动疲劳活性。通过静态吸附-解吸试验筛选适宜的色谱柱型号后，采用单因素试验探讨大孔树脂纯化白茅根黄酮提取物的最佳工艺条件，并利用动物试验考察不同产物的抗运动疲劳活性。结果表明，AB-8型大孔树脂纯化白茅根黄酮的最佳条件为上样液浓度2.0 mg/mL、上样液pH 5.0、上样液体积60 mL、上样流速2.0 mL/min、洗脱液乙醇的体积分数70%、洗脱流速1.0 mL/min、洗脱液体积100 mL，所得产物中黄酮化合物的含量为（64.2±1.5）%，约为纯化前2.24倍。动物试验结果显示，中、高剂量的白茅根黄酮纯化产物可明显延长小鼠的力竭游泳时间，降低体内乳酸与尿素氮的生成量并增加肝、肌糖原储备量，同时显著改善体内超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶的活力，从而可知纯化后的白茅根黄酮产物具有较好缓解运动疲劳的作用。     

三种食用菌多糖的基本结构与抗氧化活性研究

通过水提醇沉法提取香菇、黑木耳和红托竹荪的边角废料菌托中的多糖,并用Sevag试剂和透析法分离纯化,得到三种食用菌多糖。采用紫外分光光度计、高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）、红外光谱法（infrared spectroscopy,IR）、核磁共振波谱法（nuclear magnetic resonance,NMR）和刚果红实验分析三种食用菌多糖的分子量、官能团、糖苷键和三螺旋结构。将清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine free radical,DPPH·）和羟基自由基（Hydroxyl free radicals,OH·）的能力及Fe3+总还原力来判断三种食用菌多糖抗氧化能力,比较分析三种食用菌的基本结构和抗氧化活性。结果显示,制备的三种食用菌多糖都具有较好的均一性,分子量分布在万级和百万级。三种食用菌多糖含有相似的官能团,是既具有α构型又具有β构型的酸性多糖,且均具有三螺旋结构。此外,三种食用菌多糖在实验浓度范围内,均具有良好的抗氧化活性。其中红托竹荪菌托多糖在1.0 mg/mL浓度时对DPPH和在3.0 mg/mL浓度时对OH自由基的清除能力优于香菇和黑木耳多糖,高达66.86%和35.69%,对DPPH和OH自由基的清除能力IC₅₀值分别为0.010和0.195 mg/mL。综上,三种食用菌多糖的基本结构无显著性差异,但抗氧化活性差异较大,为工业化生产利用红托竹荪边角废料提取食用菌多糖奠定基础。     

大孔树脂纯化菠萝蜜果皮黄酮工艺

本实验以菠萝蜜果皮为原料,比较5种大孔树脂对菠萝蜜果皮黄酮吸附率和解吸率的影响,筛选出适合纯化菠萝蜜果皮黄酮的大孔树脂,通过单因素和正交实验优化纯化工艺;测定菠萝蜜果皮黄酮纯化前后清除DPPH自由基和ABTS自由基作用,分析纯化效果。结果表明:NKA-9树脂纯化菠萝蜜黄酮效果较好,最佳条件为粗提液浓度6 mg/m L,上样流速1.5 m L/min;洗脱剂70%(v/v)乙醇,洗脱流速2.5 m L/min,菠萝蜜果皮黄酮纯度提高至80.15%。菠萝蜜果皮黄酮纯化后清除DPPH自由基和ABTS自由基IC_(50)值分别为0.0054、0.015 mg/m L,优于纯化前的IC_(50)值0.041、0.092 mg/m L。以上说明,NKA-9树脂适合分离纯化菠萝蜜果皮黄酮。     

青藏高原狭果茶藨子黄酮纯化工艺及抗氧化活性研究

以青藏高原产的狭果茶藨子为原料,研究其黄酮纯化工艺及抗氧化活性.通过静态吸附试验对D101、D218、D315、HPD-600、AB-8这5种大孔树脂进行筛选,考察上样浓度、上样量、上样流速以及洗脱剂浓度、洗脱流速对狭果茶藨子黄酮吸附和解吸性能的影响,确定最佳树脂类型和纯化工艺条件;以羟自由基、超氧阴离子自由基、DPP...     

大孔吸附树脂分离纯化花椒叶总黄酮及其产品抗氧化功能研究

研究大孔吸附树脂分离纯化花椒叶总黄酮及其抗氧化功能。结果表明：D4020 型树脂对花椒叶总黄酮有较好的吸附和解吸效果,D4020 型树脂纯化花椒叶总黄酮的条件为：NaCl 饱和的pH5 的花椒叶总黄酮质量浓度2.19mg/mL,以流速2BV/h 通过吸附柱;采用2BV 70% 乙醇溶液以解吸流速2BV/h 洗脱,经纯化后花椒叶黄酮纯度由3.18% 提高到16.92%。吸附平衡符合Freundlich 吸附等温式,NaCl 存在时不影响吸附等温式,且吸附量随NaCl 浓度的提高而增大。纯化后的花椒叶总黄酮对DPPH 自由基清除的IC50 为1.8μg/mL,远优于VC 的IC504μg/mL,纯化后的花椒叶总黄酮的还原能力显著强于VC。纯化后的花椒叶总黄酮具有较高的抗氧化能力,是一种值得开发的植物资源。     

AB-8大孔树脂对红腰豆总黄酮纯化工艺的优化及其体外抗氧化活性研究

以红腰豆总黄酮粗提液为原料,研究大孔树脂对红腰豆黄酮的纯化工艺和效果,比较了8种树脂对红腰豆总黄酮的静态吸附和解吸性能,对AB-8型大孔树脂分离纯化红腰豆总黄酮进行了单因素、Box-Benhnken中心组合设计和响应面法优化试验,并考察了红腰豆总黄酮纯化前后体外抗氧效果。结果表明,AB-8树脂为纯化红腰豆总黄酮的最佳树脂,确定了其最佳的吸附工艺条件为：上样质量浓度4.0 mg/mL,上样液pH 6.3,上样流速2.0 mL/min,上样体积5.0 BV,在此条件下吸附率可达(98.03±0.30)%;最佳的解吸工艺条件为乙醇体积分数75%,洗脱流速3.0 mL/min,洗脱体积2.0 BV,在此条件下解吸率可达(94.52±0.24)%。纯化后红腰豆总黄酮纯度提高了约2.85倍,纯化前DPPH.、.OH和O_2-.的清除率IC₅₀值分别为1.18、1.40、6.51 mg/mL,纯化后分别为0.37、0.82、1.77 mg/mL,纯化后红腰豆总黄酮提取物的体外抗氧化活性明显增强。     

苹果叶多酚的纯化及其抗氧化性研究

对苹果叶多酚的纯化及其抗氧化性进行研究。采用大孔吸附树脂对苹果叶多酚进行初步纯化、Sephadex LH-20 进一步精制,并进行高效液相分析。结果表明X-5 树脂对苹果叶多酚有较好的吸附解吸效果,X-5 树脂纯化苹果叶多酚的条件为上柱液质量浓度3.658mg/mL、上柱液pH3、吸附流速2.0mL/min;以体积分数40% 乙醇为解吸剂,洗脱流速1.0mL/min,洗脱体积4BV。在此条件下纯化后的苹果叶多酚的纯度从10.07% 提高到38.55%;X-5 树脂对苹果叶多酚的吸附为放热过程,吸附过程符合Langmuir 等温吸附模型和Freundlich 等温吸附模型。经过X-5 树脂纯化后的苹果叶多酚对DPPH 自由基和NO2 － ·的清除能力有所增强;苹果叶中根皮苷的含量为2.45%,粗提物经过X-5 树脂纯化和Sephadex LH-20 精制后得到的苹果叶多酚精制品中根皮苷的含量为47.61%,占制品中总多酚的91.51%。     

刺梨多酚的纯化工艺及体外抗氧化研究

以刺梨全果为原料,探讨刺梨多酚的纯化工艺,并分析其抗氧化作用。比较AB-8、D101、D301、HPD100、HPD300和LSA-10六种不同型号的大孔树脂对刺梨多酚的吸附及解吸效果,筛选最佳大孔吸附树脂;在三个实验温度下探讨AB-8型对刺梨多酚的静态吸附热力学特性,通过研究初始pH、吸附时间、解吸液浓度、上样量及洗脱液用量等多个因素优化刺梨多酚的纯化参数,并进一步研究其抗氧化活性。结果表明,AB-8型大孔树脂更适于刺梨多酚的吸附,其吸附过程符合Freundlich热力学模型(R²>0.990 0)及Langmuir模型(R²>0.950 0),当实验温度为298 K时更利于大孔树脂对刺梨多酚的吸附;其较适纯化参数为：吸附时间600 min、解吸溶剂80%乙醇溶液、上样量10 mL、洗脱液用量50 mL。在该纯化工艺参数下,刺梨多酚的平均含量从30.45%增加至56.92%。抗氧化实验表明,刺梨多酚有较好的抗氧化能力,粗提液和纯化液对DPPH·及ABTS⁺·的清除能力都存在显著差异,在同一浓度下纯化后的刺梨...     

景天三七总黄酮的纯化、自由基清除活性及初步鉴定

通过比较D-101、AB-8、X-5、DA-201 4种大孔吸附树脂对景天三七总黄酮的静态吸附和解吸附性能,筛选出最适合的树脂及最佳静态吸附-解吸附条件。对纯化后的总黄酮进行初步鉴定,并考察了纯化前后的体外抗氧化效果。结果表明,DA-201型大孔吸附树脂的吸附和解吸附效果最好,其最佳静态吸附分离工艺参数为:吸附时间为1 h,样液质量浓度为0.7 mg/mL,上样液pH为3.0,解吸附乙醇浓度为90%。在该条件下静态吸附率为81.05%,解吸附率为86.05%。纯化后,总黄酮的纯度由19.38%提高到43.78%,其羟自由基、DPPH自由基清除率的IC₅₀分别由69.47、44.02 μg/mL下降到43.25、30.16 μg/mL。另外初步判断纯化后的景天三七总黄酮可能含有水飞蓟素类、金丝桃苷类、山奈酚类、槲皮素类化合物。     

大孔树脂纯化山茱萸黄酮工艺研究

采用大孔树脂对山茱萸黄酮进行分离纯化,确定其分离纯化条件,树脂的筛选实验结果和静态吸附动态学研究表明,所选的4种大孔树脂,AB-8树脂属于快速吸附树脂,吸附率和解吸率都很高,是理想用于山茱萸黄酮分离纯化的树脂,AB-8树脂动态吸附、解吸实验表明,当上样流速2.0mL/min,上样浓度为1.0mg/mL,上样量70mL,用1.5 mL/min的60%的乙醇做解吸剂进行解吸时,山茱萸黄酮纯度可达到67.38%,具有一定的应用价值。     

大孔树脂对二角菱壳多酚的吸附及解吸性能研究

研究了大孔树脂分离纯化二角菱壳乙酸乙酯萃取液中多酚的方法。对7种大孔树脂进行了静态吸附和解吸的研究,筛选出了效果最佳的大孔树脂D101。对D101大孔树脂进行动态吸附和解吸条件的优化,最佳条件为:上样固形物质量浓度5mg/mL,上样流速1mL/min,洗脱溶剂乙醇体积分数70%,洗脱流速4mL/min,洗脱体积5 BV。总多酚含量由提取物冻干样品的478mg GAE/g上升到纯化后的825mg GAE/g,提高了1.73倍,回收率为59.43%。放大试验中,其回收率和纯化率并不随大孔树脂数量的增加而改变,说明该优化条件适合于大规模生产应用。     

响应面法优化大蓟根总黄酮纯化工艺及其纯化前、后的抑菌活性比较

在单因素实验的基础上,利用响应面试验优化大孔树脂纯化大蓟根黄酮提取物工艺,并比较纯化前、后的抑菌活性。通过静态吸附-洗脱实验,考察不同类型大孔树脂对大蓟根黄酮化合物的吸附与解吸性能,选择最佳吸附树脂型号后,采用动态吸附-洗脱实验确定最佳纯化工艺条件,另通过“滤纸片法”考察纯化前、后的黄酮化合物对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果表明,大蓟根黄酮提取物的最佳纯化工艺条件为:质量浓度为2.96 mg/mL、pH4.97的黄酮提取液70 mL,以1.0 mL/min流速上样至D101型树脂后,经180 mL体积分数70.2%乙醇溶液,以1.0 mL/min流速洗脱,在该条件下总黄酮的回收率为69.8%,纯度为67.4%。体外抑菌试验结果表明,与提取物相比,纯化后的黄酮化合物对三种受试菌的抑制圈直径均有显著性增大（P<0.05）,抑菌活性更好。