运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙的含量测定

文章旨在建立高效液相色谱法测定运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙(Calcium-β-hydroxy-β-methylbutyrate,HMB-Ca)含量的方法。取样品于50 mL容量瓶中，加入0.1 mol/L盐酸溶液约40mL，超声处理30 min，用0.1 mol/L盐酸溶液定容至50 mL，用0.45μm滤膜过滤，经Phenomenex Gemini C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离，以0.01 mol/L庚烷磺酸钠溶液:甲醇(95:5,V:V)为流动相等度洗脱，流速0.8 mL/min，柱温30℃，进样量10μL，二极管阵列检测器214 nm波长采集数据，外标法定量。HMB-Ca在5～1000 mg/L浓度范围内线性良好，相关系数R2为0.99999。3个浓度水平的平均加标回收率在96.9%～98.1%，相对标准偏差(n=6)为0.87%～1.84%，精密度的相对标准偏差(n=6)为0.32%，方法检出限为0.020 g/100 g，定量限为0.050 g/100 g。该方法操作简便、灵敏度高，具有良好的准确度和精密度，适用于运...     

β-羟基-β-甲基丁酸钙安全性和有效性研究进展

β-羟基-β-甲基丁酸钙(calcium β-hydroxy-β-methyl butyrate, CaHMB)是β-羟基-β-甲基丁酸(β-hydroxy-β-methyl butyric acid, HMB)的钙盐。CaHMB已通过美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration, FDA)的一般公认安全(generally recognized as safe, GRAS)认定和中国的新食品原料申请。近年来CaHMB在运动营养食品、特殊医学用途配方食品(Food for Special Medical Purpose, FSMP)中的应用逐渐增多。本文对CaHMB在毒理学研究和人群试食试验中的安全性及有效性进行综述, 以期为其安全有效的应用提供依据。国内外批准使用情况、毒理学研究和人群试食试验均表明CaHMB的安全性较高。人群试食试验提示补充CaHMB可能具有一些有益的健康效应, 包括增加老年人、艾滋病或癌症患者等的体重、瘦体组织、肌肉质量和力量, 减少肌肉损伤, 以及在阻抗训练中增加耐力, 在预防或改善肌肉减少等方面有较好的应用前景。但针对CaHMB对健康健身人群的有效性有待进一步研究。     

特殊医学用途婴儿配方食品中生物素含量的测定

本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定特殊医学用途婴儿配方食品中生物素含量的分析方法。样品经0.2 mol/L磷酸121℃水解30 min提取,并通过生物素免疫亲和柱净化后,采用Acquity UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱进行分离,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,经电喷雾电离串联质谱在多离子反应监测(MRM)模式下进行测定,内标法定量。在最优化条件下,生物素在0.50~50.00 ng/mL范围内线性关系良好(R²=0.9986),方法检出限为0.75μg/100 g。特殊医学用途婴儿配方食品中生物素相对标准偏差在0.42%~4.77%之间,不同添加浓度回收率为97.27%~102.06%。该方法具有样品处理操作简单,灵敏度高,分析周期短等优点,可以满足特殊医学用途婴儿配方食品中生物素含量的测定,可为企业质量控制和政府监管提供有力的技术支撑。     

半制备高效液相色谱-离子色谱法检测婴幼儿配方食品中低聚半乳糖的含量

优化并建立了半制备高效液相色谱法分离和收集、离子色谱法测定婴幼儿配方食品中低聚半乳糖的方法。本实验以乳粉、特殊医学配方奶粉和液态奶为实验对象,利用半制备高效液相色谱法分别收集婴幼儿配方食品中的二糖和三糖及聚合度(Degree of polymerization,DP)3以上的糖,再利用β-半乳糖苷酶水解收集到的聚合度3及3以上的糖组分,利用离子色谱法测定酶解后的半乳糖和葡萄糖的含量,通过计算得到样品中低聚半乳糖的含量。半制备高效液相色谱馏分固定相为Ag+色谱柱(200 mm×10 mm),流动相为100%超纯水,流速0.3 mL/min,进样量100 μL,柱温80℃;离子色谱条件固定相为Carbo Pac PA-1色谱柱(250 mm×4 mm),流动相为0.5 mol/L的氢氧化钠溶液、0.5 mol/L的乙酸钠和超纯水梯度洗脱,柱温30℃,进样量25 μL。测定的异乳糖、葡萄糖、半乳糖、1,6-β-D-半乳二糖和1,3(4)-β-D-半乳二糖线性范围在1.0～30.0 μg/mL,相关系数在0.9985～0.9999,回收率在82.80%～87.67%,相对标准偏差(Relative standard deviation,RSD)≤5%。该方法结果准确,能够满足检测要求,前处理操作简单,便于大批量样品的检测。     

β-基-β-基丁酸钙在食品中的应用现状

目前新资源食品原料β-基-β-基丁酸钙在食品中的应用广泛,其应用主要是基于其可以促进肌肉合成,减少肌肉蛋白降解等。文章综述了β-基-β-基丁酸钙在食品中的应用现状,包括在动物营养、运动营养以及在特殊医学用途配方食品中的应用等。     

气相色谱-串联质谱法测定食用植物油中β-谷甾醇含量

建立了气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)测定食用植物油中β-谷甾醇含量的分析方法。样品经2 mol/L氢氧化钾-乙醇溶液皂化、石油醚萃取后,采用GC-MS/MS在多反应监测(MRM)模式下对β-谷甾醇含量进行测定。该方法在2.0~20.0μg/m L线性范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999 6;以胆固醇作替代内标,平均加标回收率为95.7%~101.4%,相对标准偏差为1.0%~3.7%;方法的检出限为0.2 mg/kg。该方法操作简便,检测灵敏度高,干扰小,适用于食用植物油中β-谷甾醇含量的检测。     

GC-MS/MS法测定保健饮品中β-羟基-β-甲基丁酸及其钙盐的含量

目的:建立GC-MS/MS法测定保健饮品中β-羟基-β-甲基丁酸及其钙盐含量的方法,解决基质干扰对β-羟基-β-甲基丁酸灵敏度的影响,实现保健饮品中β-羟基-β-甲基丁酸及其钙盐的痕量检测。方法:选取甲醇作为提取试剂,超声提取,定容后用于GC-MS/MS分析。结果:检出限为10 ng·mL^-1,定量限为20 ng·mL^-1,加标回收率为91.0%～96.0%,相对标准偏差为0.98%～1.94%。结论:该方法快速简便、准确可靠、灵敏度高以及重复性好,可为保健饮品中β-羟基-β-甲基丁酸及其钙盐含量的测定提供快速准确的检测方法。     

酶水解-液相色谱法测定婴幼儿食品中的色氨酸

利用酶解水解法,建立了婴幼儿配方乳粉(以下简称乳粉)和特殊医学用途婴儿配方食品(以下简称为医学食品)中游离和总色氨酸的高效液相色谱检测方法。样品经蛋白酶水解后,经C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)分离,以甲醇-0.1%乙酸溶液作为流动相等度洗脱,紫外检测器串联荧光检测器检测,外标法定量。结果表明:在质量浓度为0.2～100μg/mL范围内线性关系良好(r2=0.9999)。添加质量分数在100,500,1000 mg/100 g时,色氨酸的回收率介于99.0%～105.3%之间。色氨酸的检出限为1.5 mg/100g,定量限为5 mg/100 g。本方法操作简便,重现性好,可应用于市售乳粉和医学食品中色氨酸含量的测定,填补了检测标准缺失的空白。     

高效阴离子交换色谱法测定婴幼儿配方奶粉中酵母β-葡聚糖

建立一种测定婴幼儿配方奶粉中酵母β-葡聚糖的分析方法。奶粉样品经蛋白酶酶解去除蛋白质,脂肪酶酶解去除脂肪,葡聚糖酶酶解β-葡聚糖产生葡萄糖,经高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测,计算β-葡聚糖含量。结果表明,最优酶解条件为：酶解温度50 ℃、酶解时间2.0 h、溶壁酶添加量500 μL。采用PA10阴离子交换柱进行分离葡萄糖,葡萄糖在0.10～50.0 mg/L范围内线性良好（R2＞0.999 5）,添加水平在10.0～50.0 mg/100 g范围的回收率为96.9%～102.1%,精密度试验结果相对标准偏差为2.43%（n=5）,方法检出限为3.0 mg/100 g,定量限为10.0 mg/100 g。该方法灵敏、准确,可用于婴幼儿配方奶粉中酵母β-葡聚糖的测定。     

液相色谱-串联质谱法测定水产品中β-内酰胺类抗生素的残留

建立了同时测定水产品中,6种β-内酰胺类抗生素药物残留的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法.样品经乙腈-水(15∶2,v∶v)混合液提取,HLB固相萃取柱净化.以乙腈-0.01mol/L醋酸铵溶液(pH4.5)作为流动相,C18色谱柱进行分离,电喷雾正离子多反应监测模式进行检测.方法检测限为0.2～2.0μg/kg,加标回收率为80.8％～92.9％,相对标准偏差为2.6％～9.1％(n=9).该方法准确、灵敏、简便,适用于水产品中6种β-内酰胺类抗生素残留的测定.     

液相色谱-串联质谱法检测牛奶中10种β-兴奋剂

建立了液相色谱-串联质谱同时检测牛奶中10种β-兴奋剂残留量的方法.样品经沉淀蛋白质,酸性水溶液提取, 提取液经Oasis MCX 固相萃取柱净化,LC/MS/MS方法测定.采用了Thermo Hypersil Gold (150×2.1 mm,5 μm) 色谱柱;5 mmol 乙酸铵水溶液-甲醇流动相,梯度洗脱.方法线性相关系数r均大于0.999.克伦特罗检出限为1.68 μg/kg,其余9种β-兴奋剂的检出限在0.146～0.203 μg/kg之间;克伦特罗定量限为3.37 μg/kg,其余9种β-兴奋剂的定量限在0.290～0.407 μg/kg之间.3个添加水平下,10种β-兴奋剂平均回收率在91% ～127%之间.     

气相色谱-质谱法测定食品中 3-乙酰基-2,5-二甲基呋喃

目的 建立气相色谱-质谱法（gas chromatography mass spectrometry,GC-MS）测定食品中合成香料3-乙酰基-2, 5-二甲基呋喃的方法。方法 样品用正己烷涡旋提取后过滤,含油脂样品采用冷冻过滤技术去除油脂和其他杂质,选用TG-5MS毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm,0.25 μm）,载气流速1 mL/min进行分离后进质谱分析。结果 3-乙酰基-2,5-二甲基呋喃在0.005~10 μg/L质量浓度范围内曲线线性良好,相关系数为0.9997;在不同基质及不同加标浓度下,加标回收率为80.79%~103.76%,相对标准偏差（n=6）为1.83%~7.87%;3-乙酰基-2, 5-二甲基呋喃在不同基质中的检出限均可达到1 μg/kg,定量限均可达到3 μg/kg。结论 该方法前处理方便快捷、准确度高、灵敏度好,可以用于食品中3-乙酰基-2, 5-二甲基呋喃含量的快速检测,为合成香料的安全使用和监管提供技术手段。     

番茄红素原料及保健食品中番茄红素、β-胡萝卜素含量测定通用方法的建立

本研究建立一种测定番茄红素原料及保健食品中番茄红素、β-胡萝卜素含量的通用方法。一般类型样品用含2,6-二叔丁基对甲酚的二氯甲烷溶液(BHT溶液)直接溶解,微囊化样品先用含2,6-二叔丁基对甲酚的N,N-二甲基甲酰胺超声提取后再用BHT溶液溶解稀释,后均采用高效液相色谱检测分析,在40 min内完成目标化合物的分离检测。在实验条件下,番茄红素和β-胡萝卜素分离度和线性关系良好,检出限分别为0.08μg/m L和0.09μg/m L。一般类型样品重复性实验番茄红素和β-胡萝卜素的相对标准偏差(RSD)分别为3.20%和3.01%;微囊化样品重复性实验番茄红素的RSD为2.37%,β-胡萝卜素未检出。两类样品番茄红素的加标回收率在92.65%～107.49%之间,β-胡萝卜素的加标回收率在94.73%～105.12%之间。该方法稳定、准确、适应性广,基本涵盖所有类型番茄红素原料及保健食品中番茄红素和β-胡萝卜素含量的测定。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定配方食品中的VB12

建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱测定配方食品中VB12的方法。样品经预处理后采用HLB固相萃取小柱净化,C18反相色谱柱（100 mm×2.1 mm,3 μm）进行分离,甲醇-8 mmol/L乙酸铵溶液（19∶81,V/V）为流动相,等度洗脱,用电感耦合等离子体质谱测定钴离子浓度并间接测定样品中VB12的含量。结果表明,在7 min内可完成化合物的分析,目标化合物峰形较好,VB12在0.1～500 μg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999,检出限为0.02 μg/kg,不同食品基质在高、中、低3 个添加水平下的平均回收率在81.3%～103.6%之间,相对标准偏差在0.4%～4.6%之间。本方法简便、快速、灵敏度高、抗基质干扰能力强、动态范围宽,可用于各类配方食品中VB12的测定。     

不同衍生剂柱前衍生-HPLC-SPD二极管阵列测定特殊医学用途配方粉中牛磺酸含量

考察3种不同衍生剂的衍生效果,建立柱前衍生-高效液相色谱-SPD二极管阵列对特殊医学用途配方粉中牛磺酸含量的检测方法。特殊医学用途配方粉经温水溶解,超声辅助提取,以乙酸铵溶液（pH4.2）-乙腈作为流动相,采用 2,4-二硝基氟苯（2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB）、丹磺酰氯（dansulfonyl chloride,Dansyl-Cl）、邻苯二甲醛（O-phthalaldehyde,OPA）3种不同衍生剂对其进行柱前衍生,用高效液相色谱-SPD二极管阵列进行测定。从样品检测总时长、操作步骤、回收率、样品稳定性及准确性多角度考察这3种不同衍生剂对牛磺酸含量测定的影响。结果表明：牛磺酸含量在浓度为2.01 μg/mL～60.30 μg/mL的范围内线性关系好,相关系数均达0.999以上,在20、40、80 mg/100 g的加标水平下,回收率为94.4%～103.7%,3种衍生剂均能满足特殊医学用途配方粉中牛磺酸的测定,实际样品检测结果差异不大;从整个检测分析过程看,3种不同衍生剂的衍生方式适合程度依次为2,4-二硝基氟苯＞丹磺酰氯＞邻苯二甲醛。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肝中的17-β-雌二醇

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定猪肝中17-β-雌二醇(17-β-estradiol, E2)残留量的检测方法。方法 猪肝样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解后用25.0 mL甲醇提取, 加入2.0 g氯化锌除脂, 用25.0 mL水溶液稀释后上样液过ENVI-Carb柱, 用5.0 mL甲醇淋洗, 二氯甲烷:甲醇(7:3, V:V)洗脱后经氨基柱进一步净化, 以甲醇-0.50 mmol/L氟化铵作为流动相, 经ACQUITY UPLC BEH C18 (50 mm×2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱分离后, 在电喷雾负离子多反应监测扫描(multiple reaction monitoring, MRM)模式下进行检测。结果 E2的线性范围为0.01~100.00 μg/L, 相关系数r2>0.999, 检出限为7 ng/kg, 定量限为20 ng/kg, 添加水平为0.02、0.05和0.10 μg/kg时的平均回收率为101.1%~106.7%, 日内精密度为5.1%~7.3% (n=6), 日间精密度为10.0%。应用建立的方法对5份猪肝样品进行测定, 所有样品均检出E2。结论 该方法具有灵敏度高、操作简单快速的特点, 适用于猪肝中E2残留量的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定动物尿液中23种β-受体激动剂

目的 建立一种动物尿液中23种β-受体激动剂残留的液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。方法 样品经酸解释放结合态药物,混合型阳离子(MCX)固相萃取柱富集净化,5%氨水甲醇洗脱,浓缩。采用乙腈和5 mmol/L乙酸胺-0.2%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱, 质谱(ESI_⁺)采用多反应监测模式(MRM)对β-受体激动剂的定量离子和定性离子进行监测。结果 本方法在10 min内完成23种兴奋剂的有效分离。在猪尿液、牛尿液、羊尿液中0.2、0.4和2 μg/L添加水平下,23种β-受体激动剂的平均回收率为65.7%~112.6%, 相对标准偏差小于16.5%(n=6), 方法定量限为0.2 μg/L, 检出限为0.1 μg/L。结论 该方法高效、准确, 适合测定动物尿液中23种受体激动剂药物残留,并为相关标准制修订提供参考。     

液相色谱-串联质谱法检测猪肉中28种β2-受体激动剂

目的建立动物源食品中28种β2-受体激动剂药物的LC-MS/MS检测方法。方法待测样品中的β2-受体激动剂用0.2 mol/L乙酸钠(pH5.2)溶液提取,经固相萃取柱净化、浓缩、定容后采用液相色谱-串联质谱法在正离子模式下检测。结果该方法在2.5～25μg/L范围内有良好的线性关系,相关系数r>0.996,在猪肉中,不同的添加水平下该方法的平均回收率范围在60.8%～116.6%,相对标准偏差为1.74%～18.47%;定量下限为0.500μg/kg。结论此方法灵敏度高、准确、重现性好,适用于猪肉中β2-受体激动剂残留量的检测。     

β-环糊精固定化工艺研究

以壳聚糖为载体,采用物理掺和法固定β-环糊精(β-CD)。优化得到最佳固定化条件:β-CD添加量4.00g/100mL,壳聚糖添加量3.00g/100mL,搅拌时间45min,NaOH溶液浓度1.00mol/L,静置固化时间1h,采用上述工艺,固定化量达到0.34gβ-CD/g壳聚糖。     

反相高效液相色谱法快速测定复方维生素片中微囊化β-胡萝卜素

目的建立一种快速测定复方维生素片中微囊化β-胡萝卜素的反相高效液相色谱法。方法样品经0.1 mol/L的碳酸钠溶液破坏微囊,甲醇-乙腈(7∶3,V/V)混合溶液超声提取,采用Agilent SB-C_8柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,流动相为甲醇-乙腈(9∶1,V/V),检测波长为448 nm。结果β-胡萝卜素在本试验色谱条件下能完全分离,其线性范围为0.41~6.20μg/ml,平均回收率99.4%~103.3%,RSD2.0%。结论该方法操作简便,能测定复方维生素片中微囊化β-胡萝卜素,精密度和回收率高,重复性好,结果符合要求。