以ORAC法为评价指标优化制备大豆抗氧化肽

以大豆分离蛋白为原料,用ORAC(oxyen radical absorbance capacity)法对3种商业蛋白酶(Alcalase、Neutrase、Pepsin)的酶解产物进行抗氧化活性评估,以制备具有抗氧化能力的大豆肽。结果表明:在其适宜酶解条件下,Alcalase酶解产物的ORAC值最高,Neutrase次之,而Pepsin酶解产物的最低。Alcalase酶解产物ORAC最高值可达Trolox当量1900.48μmol Trolox equivalent/g Peptide,谷胱甘肽当量1711.91mg Glutathione equivalent/g Peptide,说明该条件下所制备的大豆肽具有非常好的抗氧化活性。同时,研究发现,利用ORAC法测定大豆肽的抗氧化活性结果与DPPH(1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl)法测定的结果具有显著的相关性。     

ORAC法测定保健食品抗氧化能力体内外实验对比分析

目的：探讨ORAC(oxygen radical absorbance capacity)荧光法测定保健食品抗氧化能力的体内体外实验结果的相关性。方法：以VC和3种保健食品为样品,用ORAC荧光法作为检测方法,用抗氧化能力(即Trolox当量)作为定量依据,通过体内体外实验测定保健食品的抗氧化能力。结果：ORAC荧光法测定保健食品抗氧化能力体内体外的实验结果存在一定相关性。当体外检测样品抗氧化值折合小鼠灌胃剂量大于25μmol Trolox/kg时,用该样品连续灌胃小鼠30d,动物体内抗氧化实验结果呈现阳性。结论：通过ORAC荧光法体外实现测定保健食品抗氧化能力,能够推测用同样方法检测动物体内抗氧化实验的结果。     

金银花叶有效成分的抗氧化活性研究

建立高效液相转换波长法,测定金银花叶粗分物中绿原酸、木犀草素和木犀草苷的含量,绿原酸占水相原液的含量为2.05%,木犀草素、木犀草素在金银花叶粗提物EA相中的含量分别为1.12%、0.57%。以抗坏血酸(Vc)为阳性对照的,用DPPH?法、FRAP法、ORAC法三种体外抗氧化方法来测定和评价金银花叶有效成分的抗氧化作用。结果表明：金银花叶粗提物、粗分物、绿原酸.、木犀草素及木犀草苷均具有良好的抗氧化性,其中木犀草素的抗氧化能力最强,其IC50值为0.01764 mg/mL,还原能力1751.8±13.9 mmol/L,ORAC值23817.44 μmol Trolox/g。其次为粗分30%乙醇洗脱相,其IC50值为0.02548 mg/mL,还原能力933.8±11.6 mmol/L,ORAC值10557.97 μmol Trolox/g,且各物质随着抗氧化剂浓度及纯度的增加,抗氧化性逐渐增强。因此对金银花叶有效成分在抗氧化方面的应用具有广阔的开发利用前景,可作为新型的高效无毒的抗氧化剂。     

糙米体外消化过程中酚类物质含量及抗氧化活性

以糙米为对象,围绕其体外消化过程酚类物质及抗氧化活性变化开展研究。结果表明：粳型糙米中总酚含量显著高于籼型糙米（约1.5?倍）。胃和小肠消化显著促进粳型和籼型糙米中酚类物质释放（P＜0.05）,其释放量（以没食子酸当量计）最高值为460.9?mg/100?g和401.1?mg/100?g,粳型糙米中酚类物质释放量显著高于籼型糙米;两者酚类物质释放量随消化时间变化趋势均符合幂函数模型。铁离子还原/抗氧化能力（ferric-reducing antioxidant power,FRAP）和氧自由基清除能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）实验表明糙米体外消化过程中释放的酚类物质具有良好抗氧化能力,粳型和籼型糙米消化液FRAP值（以Trolox当量计）最大为10.76、8.44?μmol/g,ORAC值（以Trolox当量计）最大为6.82?μmol/g和6.23?μmol/g。     

亨氏马尾藻醇提取物及其不同溶剂萃取物的抗氧化活性研究

研究了亨氏马尾藻95%乙醇提取物不同溶剂级分的体外抗氧化活性。采用Folin-Ciocalteu法测定亨氏马尾藻醇提取物(总提取物)以及石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物五个部位的总酚含量,并通过DPPH·、ABTS~+·清除及ORAC三种方法评价五种提取物的抗氧化活性。结果表明,乙酸乙酯萃取物的总酚含量最高,为(12.71±0.02)mg GAE/g(没食子酸当量)。在不同抗氧化测定方法中,亨氏马尾藻醇提取物及其不同溶剂萃取物均表现出不同程度的抗氧化活性。其中,乙酸乙酯萃取物抗氧化活性较强,其DPPH和ABTS半数清除率分别为(0.89±0.01)mg/m L和(0.73±0.03)mg/m L,ORAC值达到(1803.78±81.37)μmol TE/g。     

脱盐乳清粉代谢产物的抗氧化和抗肿瘤活性初步研究

比较研究以脱盐乳清粉为主要原料,采用乳杆菌A-2进行发酵制备的代谢产物(LF),并初步探讨了LF抗氧化和抗肿瘤活性的功能。通过对发酵液的p H、总糖和Ca~(2+)含量的测定,筛选出最佳菌悬液浓度为1OD/mL;用ABTS法和ORAC法来测定和评价乳杆菌A-2发酵产物的抗氧化作用。在反应体系中,脱盐乳清粉和LF的ABTS清除率的IC50分别为34.29mg/mL和19.74mg/mL,LF的ABTS清除率的能力优于脱盐乳清粉;其相对ORAC值分别为75.46μmol Trolox/g和114.78μmol Trolox/g,LF清除AAPH的能力为脱盐乳清粉的1.5倍,结果显示LF具有一定抗氧化活性。采用MTT法检测LF对人舌癌细胞系Cal-27细胞增殖的影响,LF的IC50为19.1 mg/mL,且浓度在4~32 mg/mL的范围内,对人舌癌细胞系Cal-27细胞的抑制率呈剂量依赖性,与脱盐乳清粉组比较,差异具有显著性。     

草鱼肽的体外生理功能

以草鱼为原料制取生理活性肽,采用高效液相色谱法(HPLC)测定其对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性,采用DPPH自由基清除法、氧自由基清除能力(ORAC)法研究其抗氧化性。结果表明:草鱼肽抑制ACE活性IC5 0为0.229mg/mL,清除DPPH自由基的IC50为7.630mg/mL,ORAC值为1317.962μmol Trolox/g,采用草鱼制备有效的生理活性肽是可行的。     

不同产地马齿苋的抗衰老活性比较

为了研究不同产地马齿苋的化学成分和活性差异,本文选取了四个不同产地的马齿苋作为样品,利用福林酚比色法、硼氢化钠-四氯代苯对醌法、氧自由基吸收能力ORAC法测定了其总酚含量、总黄酮含量和其抗氧化值,并通过秀丽隐杆线虫模型研究样品对线虫寿命的延长效果。结果表明,四川产地的马齿苋在四个指标上都具有最高的效果:总酚含量99.28μg GAE/mg DW,总黄酮含量121.57μg CE/mg DW,ORAC值3.32μmol Trolox/mg DW,能够把线虫的平均寿命从19.53 d延长到26.65 d,延长了36.49%。该延长效果具有浓度依赖性。通过相关性分析,ORAC与总黄酮含量具有强相关性(R2=0.99),而马齿苋醇提物的抗氧化活性可作为影响其其延长线虫寿命效果的指标(R~2=0.95)。综上所述,马齿苋具有良好的抗衰老作用,而四川产地的马齿苋的效果最好,具有较大的发展潜力与空间。马齿苋醇提物在线虫模型中发挥抗衰老作用的过程中,很可能是其中黄酮物质起到抗氧化作用从而促进的。     

ORAC法评价16种茶叶的抗氧化能力

目的评价4类不同发酵类型16种茶叶样品总抗氧化能力。方法采用氧自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)法。结果闽红茶样品ORAC值最高,为1379.1μmol TE/g,其次为乌龙茶水仙,其ORAC值为1270.7μmol TE/g,第三位绿茶品种的古丈毛尖,其ORAC值为1247.1μmol TE/g。绿茶样品整体均具有较高的ORAC值,但4类茶叶的ORAC值无统计学差异(P0.05)。结论 4类茶叶样品均具有一定的抗氧化活性,但尚不能认为不同种类茶叶的ORAC值不同。     

抗氧化黑豆肽的分离纯化与结构鉴定

以氧自由基清除能力(ORAC)为评价指标,通过超滤与大孔树脂吸附、乙醇分级洗脱对黑豆蛋白酶解产物进行初步分离,采用Sephadex G-25凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱(RP-HPLC)与排阻色谱(SEC)逐级纯化,最终得到RP-HPLC P2组分SEC P2肽段和RP-HPLC P4组分SEC P3肽段2个纯化多肽,质量浓度为1 mg/mL的2个纯化多肽的ORAC值(Trolox当量)分别为307.5和314.6μmol/L,其氧自由基清除能力分别是超滤分离抗氧化最强黑豆肽组分(Mr1 000)的2.68和2.74倍,经Edman降解、N-端测序进行结构鉴定,纯化后的2个抗氧化肽段的氨基酸组成序列结构分别为Tyr-Asn-Ile和Trp-Asn-Pro,N-端分别为具有酚羟基结构的酪氨酸Tyr和疏水性很强的色氨酸Trp。     

核桃粕、核桃仁酶解物抗氧化活性的研究

比较核桃粕、核桃粕蛋白提取物、核桃仁、去皮核桃仁、脱脂核桃仁和脱脂去皮核桃仁酶解物的抗氧化活性。结果表明,各样品酶解物还原力大小顺序为：核桃仁〉核桃粕蛋白提取物〉核桃粕﹥脱脂核桃仁〉去皮核桃仁〉脱脂去皮核桃仁。当底物浓度为10 mg/mL时,核桃仁直接酶解物的还原力达到谷胱甘肽的79.74%。ORAC值大小顺序为：核桃仁〉脱脂核桃仁〉核桃粕蛋白提取物〉核桃粕〉去皮核桃仁〉脱脂去皮核桃仁。核桃仁直接酶解物的ORAC值最大,为1560.75 μmol Trolox equivalent/g Peptide,与等质量的谷胱甘肽的ORAC值相当。各样品对H2O2诱导PC12细胞损伤均有保护效果,其中核桃仁直接酶解物的保护效果最好,当底物浓度为0.10 mg/mL、0.25 mg/mL和0.50 mg/mL时,均比其它样品的细胞存活率高,分别为72.64%、90.43%和84.98%;当底物浓度为1.00 mg/mL时,脱脂核桃仁酶解物的保护效果最好,细胞存活率为85.11%。     

大孔吸附树脂纯化亚麻木酚素及其抗氧化活性研究

研究不同乙醇浓度对大孔吸附树脂纯化亚麻木酚素(SDG)的影响,并分析比较相应洗脱物的抗氧化活性。结果表明:与亚麻籽粕相比,洗脱物的纯度和抗氧化活性均有一定的提高。其中,30%乙醇洗脱物中SDG含量最高为62.49%,该洗脱物对DPPH自由基的清除率为44.2%,对Cu~(2+)的还原能力为0.91 mg Trolox/mg样品,对Fe~(2+)的螯合率为53.54%。     

雪莲果中菊淀粉型低聚果糖的神经保护作用

从体外抗氧化活性和细胞保护方面探讨雪莲果中菊淀粉型低聚果糖(YOs)的神经保护作用。采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力(FRAP)3种方法评价其体外抗氧化活性;采用H2O2所致SH-SY5Y细胞损伤模型,评价YOs的细胞保护作用。YOs对DPPH自由基的IC50为(0.272±0.078) mg/mL,相当于(141.01±15.67)Troloxμmol/g YOs;对ABTS自由基的IC50为(2.67±0.89) mg/mL,相当于(195.81±8.13)Troloxμmol/g YOs。FRAP值为(10.12±0.35)mmol/g,相当于(82.40±1.59)Troloxμmol/g YOs。此外,YOs(0.5和1 mg/mL)可显著逆转H2O2(200μmol/L)所致SH-SY5Y细胞的损伤。综上,YOs具有较强的体外抗氧化活性,对类神经细胞的氧化应激损伤具有明显的保护作用,可作为防治脑老化的功能因子进行研究和开发。     

热处理对苦荞麦粉总抗氧化能力的影响

采用分光光度计法和抗氧化能量指数法对来自重庆市城口县的苦荞麦粉中总黄酮含量和抗氧化能力进行了分析。样品加热(100℃,20min,样品:水=1:2,w/v)前后,总黄酮含量为83.52mg芦丁当量/100g干重和67.38mg芦丁当量/100g干重,ORAC值为76.45μmol TE/g干重和63.93μmol TE╱g干重,损失分别达到19.32％、16.38％,呈显著差异(P<0.05)。但热处理前后的苦荞麦粉都表现出良好的抗氧化性。     

雪莲果体外抗氧化和自由基清除能力

抗氧化能力是衡量果蔬营养及保健价值的重要指标之一。雪莲果是一种药食两用植物,对多种慢性疾病有缓解作用。分别采用5 种方法(DPPH、ABTS、FRAP、SASR 和MCC)对雪莲果块根甲醇提取液的自由基清除能力及抗氧化活性进行体外评价。结果表明：DPPH 法测定的Trolox 当量抗氧化能力(TEAC)为410.263mg Trolox/g md,抗坏血酸当量抗氧化能力(AEAC)为230.485mg VC/g md,IC50 值为1.464mg/mL;ABTS 法测定的TEAC 为267.584mg Trolox/g md,AEAC为41.597mg VC/g md,IC50 值为1.269mg/mL;SRSA 法测定的TEAC 为652.816mg Trolox/g md,AEAC 为101.451mg VC/g md,IC50 值为7.720mg/mL。说明雪莲果块根提取物对DPPH 自由基、ABTS+·和O2·三种不同的自由基均有一定的清除活性。此外,雪莲果块根提取物还具有较高的总抗氧化(FRAP 值为131.723 mgFeSO4/g md)和较强的金属螯合能力(73.193%)。     

菜籽肽的ACE、肾素抑制活性及抗氧化性研究

本研究采用1、3、5、10 ku的超滤膜分离菜籽蛋白嗜热菌蛋白酶水解物(TPH),得到了4种不同分子质量的菜籽肽,研究了各菜籽肽的血管紧张素转化酶-Ⅰ(ACE)抑制活性、肾素抑制活性、氧自由基吸附能力(ORAC)和细胞抗氧化(CAA)活性。结果表明,菜籽肽的分子质量与其ACE抑制活性、肾素抑制活性以及ORAC值有明显的正相关性(P0.05);1 ku的菜籽肽的ORAC值远高于TPH的,其ORAC值(Trolox)高达(4 363.53±45.87)μmol TE/g,是谷胱甘肽(GSH)的2.4倍,其中2个菜籽肽的ORAC值与GSH相当(p0.05);细胞抗氧化试验表明TPH的CAA值最高,为(26.53±1.71)μmol QE/g,其次是1 ku组分,其CAA值是(23.91±0.69)μmol QE/g。研究认为,菜籽蛋白酶水解物及各菜籽肽不仅具有ACE和肾素双重抑制活性,还有一定的氧自由基吸收能力。因此,菜籽蛋白可用于开发降血压制剂或相关功能性产品。     

脱脂米糠碱溶醇溶物抗氧化活性研究

脱脂米糠的碱溶醇溶物具有良好的体外抗氧化活性。从脱脂米糠中提取抗氧化物,采用羟基自由基体系、DPPH自由基体系、超氧阴离子自由基体系、亚油酸体系、纯猪油体系、ORAC体系、PC12细胞氧化损伤体系,研究脱脂米糠的碱溶醇溶物清除自由基和脂质过氧化物的效果。结果表明:当样品质量浓度为0.2 g/m L时,其对·OH的清除率超过50%;样品质量浓度为0.6mg/m L时,酶解产物的DPPH清除率可达90%;样品质量浓度45.0 mg/m L时,O_2-清除率约为50%;样品浓度高于60μg/m L时,样品的ORAC值与异VC钠相当;在亚油酸体系中,500μg/m L的样品有明显的抗氧化效果,500μg/m L和1 mg/m L的样品显著好于相同浓度的异VC钠;在猪油抗氧化体系中,质量分数5%样品添加组的猪油达到相同的pov所需的天数延长;随着样品质量浓度的增加,PC12细胞存活率呈现依次升高的趋势,5 mg/m L的样品的PC12细胞存活率达到82.2%,抗氧化效果好于200μmol/L的Trolox。     

沙葱总酚含量及体外抗氧化活性与ACE酶抑制活性的研究

以沙葱脱脂干粉为原料制备水提物,测定其总酚含量和ACE酶的抑制活性,并且评价其体外抗氧化活性。采用Folin-Ciocalteu法测定沙葱水提物中总酚含量,利用清除2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]自由基抗氧化法,以及铁离子还原能力(Ferric-reducing antioxidant power,FRAP)法对其进行抗氧化活性评价,并且采用紫外法对ACE酶抑制活性进行测定。结果表明,沙葱水提物中总酚含量为10.20 mg GAE/g DW,ABTS法测定得到的Trolox等价抗氧化能力为9.55 mg Trolox/g DW,半抑制浓度为4.94 mg/mL,FRAP值为107.26μmol Fe~(2+)/g,沙葱水提物对ACE酶活性抑制作用的IC_(50)值为18.57 mg/mL。综上所述,沙葱是具有抗氧化活性与ACE酶抑制活性的天然植物酚类的潜在来源,可能在高血压防治方面发挥功效,可用于降压类功能性产品的开发。     

桂花酶解物中酚类物质及其抗氧化活性研究

运用LC-MS/MS对桂花酶解物中的酚类物质进行研究,发现桂花酶解物中含有36种酚类物质,包括单咖啡酰基奎宁酸、咖啡酸4-O-葡萄糖苷、5-O-对香豆酰基奎宁酸、4-O-对香豆酰基奎宁酸、木犀草素-7-O-6″-丙二酰基葡萄糖苷、麦角甾苷、异麦角甾苷等物质。抗氧化活性研究发现,桂花酶解物浓度大于0.8 mg/m L时,对ABTS+、DPPH·自由基清除率达90%以上,均显著高于芦丁(p0.05),略低于Trolox;桂花酶解物的还原力为3.0左右,显著高于芦丁的1.0左右(p0.05),稍高于Trolox;桂花酶解物的TEAC和ORAC值分别为648.66μmol Trolox/g和813.53μmol Trolox/g,均显著高于芦丁(p0.05);桂花酶解物的ABTS+、DPPH·自由基清除能力和还原力与总酚含量均呈显著的线性正相关。     

柠檬酸提取海带渣中多糖及其抗氧化活性与结构的研究

以海带渣为原料,采用柠檬酸提取法提取海带渣中多糖,并与直接柠檬酸提取的海带多糖进行抗氧化活性与结构比较。研究表明,海带渣多糖的提取率为7．00％±0．03％,其抗氧化活性与直接酸提的海带多糖相当,具有较好的氧自由基清除能力（ORAC值为130．13μmol Trolox／g）、DPPH自由基清除能力（18．89μmol Trolox／g）、ABTS自由基清除能力（53．58μmol Trolox／g）和还原力（37．56μmol Trolox／g）,其中ORAC值比抗氧剂BHT高2倍。所得海带渣多糖的主要组分分子量为310182u（2．73％）和30515u（97．27％）。红外光谱图分析表明海带渣多糖与直接酸提的海带多糖结构相似。