鹿茸乙醇提取物对秀丽隐杆线虫抗衰老的作用

以秀丽隐杆线虫为模式生物,探究鹿茸乙醇提取物对秀丽隐杆线虫抗衰老的作用。通过寿命、紫外应激、热应激、运动、产卵等实验检测鹿茸乙醇提取物对线虫衰老的影响;通过检测鹿茸乙醇提取物对野生型线虫和突变体线虫抗氧化应激能力的实验,初步探究其衰老作用及机理。结果表明,鹿茸乙醇提取物为2.5 mg/mL时能延长线虫寿命,最长寿命为28 d;具有抗紫外和热应激的能力,线虫平均寿命分别为2.81和3.28 d,优于对照组;能提高线虫运动和产卵能力;氧化应激条件下能显著（P<0.05）延长野生型线虫生存时间;加药组与对照组的clk-1突变体线虫在氧化应激条件下生存时间无明显差异,表明其作用机理可能为激活线粒体信号通路,上调抗氧化基因gst-4、gst-7和skn-1及热抗性基因hsp16.2的转录水平。因此,鹿茸乙醇提取物对线虫具有抗衰老的作用。     

红鳘鱼胶对秀丽隐杆线虫的体内抗衰老作用

该实验以秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）为模型,以红鳘鱼胶为原料,探究红鳘鱼胶（HMYJ）、即食花胶（JSYJ）及鱼胶复配物（YJFP）对秀丽隐杆线虫的寿命、运动能力、应激能力和体内抗氧化活性的影响。结果表明,与空白对照组相比,HMYJ、JSYJ及YJFP分别使线虫的寿命延长了9.09%、9.09%、27.03%;JSYJ和YJFP能促进线虫运动;HMYJ、JSYJ及YJFP均能抵抗紫外应激和热应激的损伤。在紫外应激条件下,YJFP、JSYJ、HMYJ使线虫存活率分别提高了33.33%、22.22%、11.11%;而在热应激条件下,YJFP、JSYJ、HMYJ使线虫存活率都增大了11.11%。此外,HMYJ、JSYJ及YJFP干预后,线虫体内过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）的活性显著提高（P<0.05）,丙二醛（MDA）的含量显著降低（P<0.05）,其中JSYJ样品组降低了43.20%,HMYJ样品组降低了30.80%,YJFP样品组降低了22.80%。综上,HMYJ、JSYJ及YJFP可通过延长线虫寿命,提升其运动能力,提高线虫抗应激损伤的能力及体内抗氧化酶的活性来减缓线虫衰老,该研究也为鱼胶的开发利用提供了理论基础。     

铁皮石斛叶多糖对秀丽隐杆线虫体内抗衰老作用

目的：基于模式生物秀丽隐杆线虫（以下简称线虫）探究铁皮石斛叶多糖的抗衰老能力。方法：采用含不同质量浓度（0.5、1.0、2.0 mg/mL）铁皮石斛叶多糖的大肠埃希氏菌OP50菌液每天饲喂线虫,以饲喂大肠埃希氏菌OP50菌液组作为空白对照,观察铁皮石斛叶多糖对线虫寿命、生殖能力、运动能力和应激能力的影响,同时测定线虫体内活性氧水平及抗氧化酶的酶活力,分析铁皮石斛叶多糖对线虫体内抗氧化能力的影响。结果：与空白对照组线虫相比,在本实验考察的质量浓度范围内,铁皮石斛叶多糖均可延长线虫的寿命,提高其运动、应激能力,同时不会损害线虫的生殖能力,并且能有效提高过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力,显著降低线虫体内丙二醛含量（P＜0.05）。结论：铁皮石斛叶多糖可能通过提高线虫抗氧化酶活力及提高线虫抗应激能力,降低线虫体内活性氧水平并减缓细胞氧化损伤,进而发挥延长线虫寿命的功效。     

发酵祛湿汤体外抗氧化活性及对秀丽隐杆线虫抗衰老作用

利用自由基清除能力评价发酵祛湿汤（Fermented Qushi Decoction,FQD）的体外抗氧化活性;结果显示,与未发酵祛湿汤（Qushi Decoction,QD）相比,高剂量FQD组的总抗氧化能力显著提高,其中1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率、羟自由基清除率和总还原能力分别提高了24.38%、11.98%、11.76%。FQD对线虫总产卵量无显著影响,并能促进线虫的运动;与QD相比,FQD干预后线虫平均寿命延长了8.02%～26.36%;在热应激条件下,FQD组最长存活时间提高了25%,在氧化应激下,FQD组线虫的生存时间较QD提高了16.67%。此外,FQD作用后,线虫体内抗氧化酶活性显著增强（P<0.05）,脂褐质的堆积水平降低。综上,FQD通过提高体外抗氧化能力,延长线虫寿命,提升抵抗应激能力和抗氧化酶活性来延缓线虫的抗衰老作用。该研究初步表明发酵祛湿汤具有抗衰老作用,为保健品开发和利用提供理论基础。     

超声波法提取1-脱氧野尻霉素

研究了利用超声波强化法从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素(DNJ).以乙醇溶液为浸提剂,超声波强化为辅助条件,提取了桑叶中的DNJ.考察了超声功率、料液配比、超声温度以及超声时间等因素对DNJ提取率的影响.结果表明:提取DNJ的最佳条件是超声功率125 W,每克桑叶浸提剂用量40 mL,超声温度70℃,超声时间20 min,DNJ的得率为0.091%,固形物中DNJ纯度为27.2%.     

紫薯提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响

以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)作为模式生物研究紫薯提取物(purple sweet potato extract,PSPE)对寿命的影响及其可能的作用机制。将秀丽隐杆线虫分别培养在普通培养基及添加不同浓度(70、140、280μg/m L)PSPE的NGM培养基,研究PSPE对线虫寿命、体内脂褐素含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力以及抗氧化相关基因表达水平的影响。结果显示,喂饲280μg/m L PSPE的线虫比空白组线虫平均寿命延长33%,脂褐素水平降低30%,体内SOD和CAT抗氧化酶活力分别提高了17.7%和47.5%。饲喂PSPE后线虫体内daf-16、ctl-1和sod-3基因m RNA水平均有不同程度的提高,其中280μg/m L PSPE组线虫体内daf-16基因转录水平提高23.2%,ctl-1基因转录水平提高37.4%,sod-3基因转录水平提高84.6%,而age-1基因转录水平呈下降的趋势,280μg/m L剂量组降低了26.4%。     

牡蛎多肽组分OE-I抗氧化活性及其对秀丽隐杆线虫抗衰老作用

采用超滤对牡蛎酶解液（oyster enzymatic hydrolysate,OE）进行分级,获得OE-I（＜5 kDa）、OE-II（5～10 kDa）与OE-III（＞10 kDa）3 个多肽组分。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力和亚铁离子螯合能力为指标,评价牡蛎多肽3 个组分的体外抗氧化活性。以秀丽隐杆线虫为模型,研究不同剂量牡蛎多肽组分OE-I对线虫寿命、急性氧化应激、热应激、体内抗氧化酶活力、体内活性氧和细胞凋亡的影响,测定线虫寿命相关基因的表达水平并分析其抗衰老机制。结果发现,牡蛎多肽组分OE-I的抗氧化活性最强,且与空白组相比,OE-I高剂量组线虫的寿命极显著延长（P＜0.01）;线虫体内3 种主要抗氧化酶中超氧化物歧化酶活力显著提高（P＜0.05）,过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力极显著提高（P＜0.01）,线虫体内活性氧的积累和细胞凋亡减少;此外,组分OE-I通过上调skn-1、daf-16、sod-3和mtl-1基因的表达,下调daf-2和age-1基因的表达,提高了线虫的应激抵抗能力。综上,牡蛎多肽组分OE-I可作为抗氧化和抗衰老的功能性食品基料。     

1-脱氧野尻霉素与糖代谢酶相互作用的分子动力学计算

1-脱氧野尻霉素(DNJ)是从桑叶中发现的一种天然生物碱,由于其结构与葡萄糖相似,可竞争性抑制糖苷酶活性,从而显著降低多糖的降解水平。本试验采用分子对接和分子动力学模拟方法,从PTP1B、PPARα、PPARγ、α-淀粉酶(α-Amylase)和α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase)等蛋白中确定了DNJ的作用靶标,并阐明其作用模式。结果表明,α-Glucosidase与DNJ的结合力有绝对优势,进一步的氢键分析和能量分解结果表明,Glu268、Asp330和Asp199是关键残基,在DNJ与α-葡萄糖苷酶结合中有重要作用,其作用方式是形成稳定的氢键作用,静电力作用和极性溶剂化能是主要的结合力来源。DNJ小分子通过与上述关键残基的作用稳定结合在α-葡萄糖苷酶口袋内部,从而抑制α-葡萄糖苷酶的生物活性,发挥降血糖作用。上述研究从分子结构层面阐明了DNJ和α-Glucosidase的作用模式,为基于DNJ结构进行理想药物的设计和小分子数据库的虚拟筛选提供了参考。     

1-脱氧野尻霉素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用机制

运用紫外光谱法、荧光光谱法和圆二色光谱法,研究桑叶提取物1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin,DNJ）对α-葡萄糖苷酶的作用。结果发现：DNJ与α-葡萄糖苷酶反应的半抑制浓度为0.297 μg/mL,作用类型为竞争型抑制;其与α-葡萄糖苷酶主要通过静电吸引力相互作用形成基态复合物,并使α-葡萄糖苷酶的内源荧光猝灭;DNJ与α-葡萄糖苷酶相互作用形成复合物的过程是熵驱动的吸热反应,静电吸引力是两者结合反应的主要驱动力。不同温度（273、298、310 K）条件下荧光猝灭常数（Ksv）分别为1.48×104、1.29×104、1.12×104 L/mol。DNJ使α-葡萄糖苷酶的构象发生变化,且使其二级结构重新排列;诱导酶活性口袋关闭,不利于底物结合到活性位点,推测这可能是DNJ抑制α-葡萄糖苷酶活性从而降低血糖水平的机理。     

忧遁草乙醇提取物对秀丽隐杆线虫的抗衰老作用及机制

目的：以秀丽隐杆线虫为模式生物,探究忧遁草乙醇提取物（Clinacanthus nutans ethanol extract,CNEE）对线虫的抗衰老作用及作用机制。方法：通过寿命、产卵、运动等实验检测忧遁草乙醇提取物对线虫抗衰老的作用;通过急性氧化应激、抗氧化酶活力测定、活性氧（ROS）测定、实时荧光定量PCR等实验初步探究忧遁草乙醇提取物的抗氧化能力及延缓衰老的作用机制。结果：忧遁草乙醇提取物在100μg/mL时能延长N2野生型线虫寿命（P<0.001）,对其运动能力也有促进作用（P<0.001）,同时对产卵能力没有毒性影响（P>0.05）;该提取物还可以提高线虫在急性氧化应激条件下的寿命（P<0.05）及过氧化氢酶的活力（P<0.01）,并有效降低体内ROS的堆积情况（P<0.05）,上调daf-16(P<0.01)及下游ctl-1(P<0.001)基因的表达水平。但在daf-16突变株线虫中,没有观察到正常条件或急性氧化应激条件下延寿的作用,也没有提高过氧化氢酶的活力、降低ROS水平、提高daf-16和ctl-1表达水平的情况（P...     

羧甲基壳聚糖在秀丽线虫体内的抗衰老作用

目的:基于模式动物秀丽线虫探究羧甲基壳聚糖的抗衰老能力。方法:检测羧甲基壳聚糖处理前后,秀丽虫寿命、运动能力、吞咽频率以及排泄周期的变化,同时测定过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活力,判断羧甲基壳聚糖线虫体内抗氧化的能力。结果:500和1000 mg/L羧甲基壳聚糖分别能显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)延长秀丽线虫的寿命,而500 mg/L能够极显著(P<0.01)提高秀丽线虫运动能力活跃度,加速咽泵运动,缩短排泄周期。同时,100、500和1000 mg/L羧甲基壳聚糖均能极显著(P<0.01)提高秀丽线虫过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活力。结论:500 mg/L的羧甲基壳聚糖抗衰老作用较好强,具有抗氧化、抗衰老的应用前景。     

D-手性肌醇对高糖导致氧化损伤线虫延缓衰老的作用及机制

目的:研究D-手性肌醇(D-chiro-inositol,DCI)对高糖膳食导致氧化损伤的线虫延缓衰老的作用,并探究其延缓衰老的作用机制。方法:将线虫同期化后分别培养在含有0、5、10、20 μm/L的DCI的高糖培养基中,记录线虫死亡数目,检测线虫体内脂褐素自发荧光强度及体内的活性氧(ROS)水平;试剂盒法检测线虫的体内相关抗氧化酶活力;PCR 法检测抗衰老相关基因mRNA表达水平。结果表明:DCI可以显著延长线虫的平均寿命(10、20 μm/L,p<0.05),极显著降低线虫体内脂褐素和ROS水平(20 μm/L,p<0.01)。此外,20 μm/L剂量组氧化损伤线虫体内超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力显著增加(p<0.05),age-1、daf-2基因mRNA 表达水平显著下调(p<0.05),而sir-2.1、sod-3、daf-16、ctl-1基因的mRNA表达水平显著上调(p<0.05)。结论:DCI对高糖导致氧化损伤线虫有保护作用,其延缓线虫衰老的作用机制可能与其调控抗衰老相关基因表达有关。     

酸浆宿萼抗衰老作用及机理研究

为系统探究酸浆宿萼水提物对秀丽隐杆线虫衰老的影响并初步阐明作用机理,以胡桃醌为氧化剂,构建氧化应激模型,观察酸浆宿萼水提物处理后野生型线虫(N2)和突变体线虫(eat-2、daf-2、clk-1)氧化应激条件下存活时间以及对野生型线虫(N2)的运动能力、生殖能力和寿命的影响.通过qPCR测定相关抗氧化基因的表达水平.酸...     

芫荽提取物对秀丽隐杆线虫体内抗氧化活性的初步探究

以南京高淳产芫荽为实验材料,研究其籽和成熟茎叶水提物对秀丽隐杆线虫体内活性氧的清除作用及对百草枯诱导秀丽隐杆线虫氧化应激损伤的保护作用,并揭示其作用机制。结果表明两种水提物均能够显著降低秀丽隐杆线虫体内活性氧水平(P<0.05),呈现剂量-效应关系;在百草枯引起的急性氧化测定中,两种水提物均可显著提高秀丽隐杆线虫氧应激状态下的生存率,但芫荽茎叶水提物的最低有效浓度为1 mg/mL,而芫荽籽水提物的最低有效浓度为0.1 mg/mL;实时荧光定量PCR结果说明,两种水提物可显著影响氧化衰老有关的ⅡS信号通路上daf-2和daf-16的基因表达量。因此,芫荽提取物对秀丽隐杆线虫起到了较好的体内抗氧化效果。     

花生四烯酸对秀丽隐杆线虫紫外辐射损伤的修复作用

为探究花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对机体紫外辐射(UVR)损伤的修复作用,建立了秀丽隐杆线虫的UVR损伤模型,考察了AA对UVR后秀丽隐杆线虫寿命、运动能力、产卵能力及体内活性氧(ROS)水平的影响。结果表明,7 MJ/cm²剂量UVR损伤的秀丽隐杆线虫经AA干预处理后,能提高秀丽隐杆线虫的寿命、运动和产卵能力,在AA浓度为50 μmol/L时效果最佳,其运动和产卵能力分别较对照组提高了63.6%和96.6%,且在该浓度下能显著降低体内ROS水平(p<0.05)。即AA对UVR损伤后的秀丽隐杆线虫具有一定的修复作用。研究结果为AA在抗紫外辐射功能性食品或药品的研发提供了理论依据。