细点圆趾蟹含肉下脚料酶解物中抗氧化肽的分离与鉴定

目的：从细点圆趾蟹含肉下脚料的胰蛋白酶酶解产物中分离鉴定具有高ABTS+·清除率的抗氧化肽。方法：通过超滤系统、Sephadex G-15和半制备型RP-HPLC,从细点圆趾蟹含肉下脚料酶解产物中分离制备抗氧化肽,用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱（UPLC-ESI-TOF-MS/MS）对肽的结构进行表征,再通过合成肽对其结构与ABTS+·清除率进行验证。结果：获得2个ABTS+·清除能力较强的抗氧化肽,其氨基酸序列分别为Tyr-Glu-Gly（YEG）和Tyr-Glu（YE）。合成肽YEG和YE的分子质量分别为367.35 u和310.30 u,纯度分别为98.52%和98.04%,清除ABTS+·的IC50值分别为0.456 mg/mL和0.184 mg/mL,且YE的IC50值比L-还原型谷胱甘肽高30.30%。结论：细点圆趾蟹含肉下脚料的胰蛋白酶酶解产物含有抗氧化活性的肽类成分,为其抗氧化肽的开发提供理论依据。     

响应面法优化复合酶水解细点圆趾蟹下脚料工艺

为了提高蟹类资源利用率,研究胰蛋白酶和风味蛋白酶水解细点圆趾蟹下脚料的工艺条件。在单因素试验基础上,选用温度、pH、加酶量、时间4个反应因素,以蛋白质的水解度为指标,通过4因素3水平Box-Behnken响应面分析法优化其水解条件。实验表明,最适水解条件为:温度50℃,pH值为7.5,加酶量为1200U/g,时间为3.5h(先添加胰蛋白酶,1.2h后加风味酶),酶的复合比为2:1,液料比为3:1,在此条件下,水解度可达到26.22%。验证实验水解度为26.01%,表明实验结果与软件优化结果相符。     

东海细点圆趾蟹含肉率及肌肉营养价值的分析

对细点圆趾蟹的含肉率,以及利用常规肌肉营养测试方法对东海细点圆趾蟹的肌肉营养成分进行测定,结果表明:细点圆趾蟹的含肉率为23.67%,蟹肌肉粗蛋白质、粗脂肪、水分、灰分的含量分别为17.94%,1.37%,73.25%,4.7%。分析了肌肉蛋白质中17种常见氨基酸含量(色氨酸未测),其氨基酸总量为16.43%,其中必需氨基酸占氨基酸总量的38%,鲜味氨基酸占氨基酸总量的36%,其构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)标准,并且含有丰富的钾、钙、镁、铁等矿质元素。综合数据表明,细点圆趾蟹具有较高的营养价值,适合进一步开发利用。     

细点圆趾蟹蒸煮液β-环糊精包合及真空浓缩技术研究

目的:以细点圆趾蟹蒸煮液为原料,研究蒸煮液β-环糊精包合及真空浓缩技术。方法:利用电子鼻技术确定细点园趾蟹蒸煮液浓缩前β-环糊精的最佳添加量,提高蒸煮液挥发性物质在真空浓缩过程中的保留量。在单因素试验基础上,采用正交试验法优化真空浓缩工艺,得到较佳的真空浓缩工艺参数。结果:β-环糊精最佳添加量为0.7%;真空浓缩工艺条件是:浓缩温度50℃,浓缩时间110 min,相对真空度0.075 MPa。结论:在最佳工艺条件下所得蟹浓缩汁,氨基酸态氮含量0.92 g/100 m L,具有浓郁的蟹香味。     

电子束辐照对细点圆趾蟹肉营养及滋味成分的影响

以细点圆趾蟹蟹肉为材料,研究电子束辐照对蟹肉营养和滋味成分的影响,为电子束辐照技术在水产品加工中的应用提供依据。结果表明：辐照处理后7 kGy及以上剂量组蟹肉总氨基酸和非必需氨基酸含量下降比较明显;辐照没有改变蟹肉的第1和第2限制性氨基酸种类,各组蟹肉必需氨基酸与总氨基酸之比和必需氨基酸与非必需氨基酸之比均分别超过40%和60%,为质量较好的蛋白质;脂肪酸分析结果显示,电子束辐照对蟹肉饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸总量均无显著影响;随着辐照剂量增加,蟹肉中的游离氨基酸总量呈下降趋势,但呈鲜、甜鲜味的游离氨基酸含量有所增加,说明适当的辐照剂量对蟹肉氨基酸的呈味有改善作用;蟹肉中的主要呈味核苷酸是5’-肌苷酸二钠,辐照后蟹肉5’-腺苷酸和5’-肌苷酸二钠含量有所上升,而5’-鸟苷酸二钠含量有所下降,辐照对蟹肉鲜味有提升作用;结合鲜味氨基酸和呈味核苷酸的鲜味协同效应,各辐照组味精当量值均高于对照组,其中1 kGy组蟹肉的味精当量值最高,达到17.92%。综合蟹肉氨基酸、脂肪酸组成和滋味成分的变化规律分析,认为1～9 kGy剂量电子束辐照对蟹肉营养和滋味没有明显的负面影响,可用于对蟹肉进行前处理。     

鲅鱼鱼肉中组胺菌的分离与鉴定

通过生物胺菌(BAB)筛选培养基的初筛、高效液相色谱(HPLC)-柱后衍生-荧光检测(FLD)技术的分析以及VITEK 2菌种鉴定系统的使用,对鲅鱼鱼肉中的组胺菌(HFB)进行分离和鉴定。结果表明,分离的13株生物胺菌均为革兰氏阴性菌,其中8株为组胺菌。经鉴定,组胺菌分别为大肠埃希氏杆菌(两株)、荧光假单胞菌、侵肺巴斯德菌、泡囊短波单胞菌、居泉沙雷菌、类鼻疽伯克霍尔德菌、杀鲑气单胞菌,鉴定可信性大于87%。     

秋刀鱼中组胺菌的分离及其理化性质研究

采用不同选择性培养基对秋刀鱼组织中的产组胺菌进行筛选分离,通过理化性质分析对筛选出的菌株进行初步鉴定,同时研究了温度和pH值对不同菌株组胺产生能力的影响。结果显示,分离获得5株产组胺菌,分别命名为菌株1、菌株2、菌株3、菌株4、菌株5,经鉴定依次属于哈夫尼菌属(Hafnia)、志贺氏菌属(Shigella)、变形菌属(Proteus Hauser)、沙雷铁氏菌属(Serratia)和假单胞菌属(Pseudomonas)。5株菌在4～36℃温度下及pH值4.5～8.5范围内均能产生组胺,最适温度分别为20、36、36、20和25℃,最适pH值分别为8.5、7.5、6.5、6.5、7.5,在适宜培养条件下组胺产生能力均可超过20 mg/mL。4℃低温和pH值4.5条件下5株菌组胺产生能力均显著(p0.05)降低,但仍能保持较高的水平。以上结果为秋刀鱼组胺菌的控制提供了理论依据。     

鱼露中组胺降解菌的分离筛选及耐受性

生物胺(biogenic amines)在某些食品尤其是发酵食品中广泛存在,具有一定的食用安全隐患.为获得用于鱼露等发酵食品的生物胺降解菌,从天然发酵鱼露中采用双层显色培养基法初步筛选出不产生物胺的菌株,再用高效液相色谱(HPLC)法进行复筛,得到一株具有高效组胺降解能力的菌株MZ5.经鉴定该菌株为库德毕赤酵母(Pic...     

咸鳓鱼中产组胺菌的分离与鉴定

针对细菌引起的腌制水产品中生物胺残留问题,胺以传统工艺腌制的咸鳓鱼为对象,利用组胺菌筛选培养基,从不同腌制时期的咸鳓鱼样品中对产组胺微生物进行了筛选,通过16S r DNA测序完成了分离菌株种属鉴定,采用PCR扩增检测了分离菌株组氨酸脱羧酶基因携带情况,并用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)检测了分离菌株发酵液中组胺的含量。结果表明,分离纯化后共获得32株疑似产生物胺细菌,分布于3个属8个种。葡萄球菌属细菌是优势分离菌株,共计29株,以腐生葡萄球菌数量最多,共16株;24株分离菌株携带组氨酸脱羧酶基因; 23株分离菌株发酵液中测出不同浓度的组胺含量,产组胺菌发酵液组胺平均含量达38. 10μg/m L,其中,1株腐生葡萄球菌菌株发酵液中组胺质量浓度高达100. 21μg/m L,是分离菌株中组胺积累能力最强的菌株。咸鳓鱼生产中产组胺菌的研究,对评估咸鳓鱼的安全性,科学指导其发酵菌株筛选具有理论指导意义。     

鲭鱼鱼肉中组胺产生菌的筛选与鉴定

根据产组胺能力,采用二步筛选法从鲭鱼肉中分离、筛选组胺产生菌(HPB),并通过生理生化实验结合16S rRNA序列同源性分析,对分离得到的HPB进行鉴定。结果表明：筛选出的5株组胺产生菌中,2株为革兰氏阴性菌、3株为革兰氏阳性菌,将5株菌接种到含2.0g/100mL组氨酸的培养基中,36℃条件下培养24h,培养液中组胺产量分别为210.5、823.0、130.5、229.0、217.0mg/L。根据生理生化特性与16S rRNA序列同源性分析,分离得到的HPB分别为蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)、溶酪大球菌(Macrococcus caseolyticus)以及松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri)。     

一株甲醇利用菌的分离、鉴定及特性研究

为了筛选高效利用甲醇的功能性微生物,从气化厂甲醇车间附近的土壤中分离筛选菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列对其进行鉴定,并对菌株生长及甲醇降解条件进行研究。结果表明,分离得到一株细菌,编号为4311,经鉴定为甲基球形菌属（Methylopila sp.）。该菌株最适生长条件为初始甲醇体积分数1.0%,初始pH值5.0,氯化钠添加量0.05%,氮源为蛋白胨,其添加量为2 g/L。在此优化条件下,菌株4311对1.0%（V/V）甲醇的降解率达到85%。     

PCR detection and identification of histamine-forming bacteria in filleted tuna fish samples

Total of 14 filleted yellowfin tuna fish (Thunnus albacares) sold in wholesale fish market and supermarkets in Milan, Italy, were purchased and tested to determine microbial count, histamine level, histamine-forming bacteria, and their ability to produce histamine in culture broth. Although histamine level was less than 10 ppm, many samples showed high total viable bacterial and enterobacterial counts that reached dangerous levels after temperature abuse for short periods of time. A PCR assay targeting a 709-bp fragment of the histidine decarboxylase gene (hdc) revealed that 30.5% of the 141 enteric bacteria isolated from samples were positive and potentially able to produce histamine. The hdc positive strains were mainly isolated from fish bought at wholesale fish market, where we observed several possible risk factors, such as handling in poor and non-refrigerated conditions during fillet preparation. These positive strains were identified as Citrobacter koseri/Enterobacter spp. and Morganella morganii, by 16S/23S rRNA internal transcribed spacer amplification and 16S rRNA sequence analysis. The strains showed a variable ability of histamine production, with Morganella morganii being the most active histamine-producing species. A direct DNA extraction from fish and a PCR targeting the hdc gene showed a high degree of concordance with the results obtained through microbiological and chemical analyses, and could aid in the prompt detection of potentially contaminated fish products, before histamine accumulates. PRACTICAL APPLICATION: The use of methods for the early and rapid detection of bacteria producing biogenic amines is important for preventing accumulation of these toxic substances in food products. In this study, we used a molecular approach for the detection of histamine-forming bacteria in fish. PCR-based methods require expensive equipment and a high degree of training for the user, but are fast (< 24 h) and reliable. They now represent the best predictive methods to identify a potential risk factor in fish products during processing, storage, and marketing and can be used in the investigation of risk reduction strategies.     

腊肠中降胆固醇乳酸菌的筛选及鉴定

通过硫磷铁比色法,该试验从腊肠中共分离到具有降胆固醇能力的乳酸菌35株,胆固醇的清除能力为9.65％～48.23％,清除率在40％以上的有11株,而乳酸菌HC12的胆固醇清除率最高(48.23％).通过对乳酸菌HC12的形态观察、生理生化试验、糖发酵试验及16S rDNA序列分析等研究,鉴定HC12为干酪乳杆菌.     

当阳地区鲊广椒中乳酸菌的分离鉴定及其应用

采用传统培养分离方法和分子生物学技术对湖北省当阳地区鲊广椒中的乳酸菌进行分离鉴定,通过电子舌和电子鼻技术评价植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）强化发酵对鲊广椒品质的影响,并通过主成分分析（PCA）获得具有优良鲊广椒发酵特性的菌株。结果表明,从5份鲊广椒样品中分离获得18株产生溶钙圈的菌株,经16S rDNA序列分析鉴定发现,其中11株为L. plantarum。通过电子鼻分析发现,L. plantarum强化发酵时,多数鲊广椒样品挥发性风味物质中的芳香类物质含量明显提升;通过电子舌分析发现,L. plantarum强化发酵时,多数鲊广椒样品酸味明显提升,而鲜味和丰度（鲜味的回味）明显下降;PCA结果表明,L. plantarum HBUAS52019和L. plantarum HBUAS52006可作为鲊广椒发酵优良的菌株。     

紫薯腐败菌的分离与鉴定

目的 从自然腐败的紫薯上分离纯化紫薯腐败菌, 通过反接种确定其致腐性, 并将其鉴定到属。方法 通过多次稀释平板涂布培养, 进行单菌落形态学观察, 将菌种反接种到新鲜紫薯上, 筛选出腐败菌, 以真菌ITS序列、细菌16S rDNA序列构建发育树, 鉴定到属, 再将鉴定结果与分离的菌种的形态学鉴定结果对比, 验证菌种鉴定结果。结果 从样品中分离出6种典型腐败菌, 有4种属, 分别为枝孢霉属、青霉属、曲霉属、芽孢杆菌属。结论 确定紫薯的腐败菌为哥氏枝孢霉(Cladosporium gossypiicola)、Penicillium christenseniae、热带青霉(Penicillium tropicum)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)和阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)。     

酸马乳源降解亚硝酸盐乳酸菌的分离及鉴定

为筛选亚硝酸盐降解能力强、产酸快、发酵风味好的乳酸菌,以新疆传统酸马乳为筛选源,经亚硝酸盐降解试验初筛、接种辣 椒酱复筛,筛选出一株亚硝酸盐降解率达88.91%、发酵辣椒酱风味佳的乳酸菌C27。 总酸复筛试验显示,菌株C27可以明显缩短发酵 周期,发酵辣椒酱第8天,总酸含量达2.15 g/100 g。 菌株C27经形态观察、生理生化试验及16S rRNA序列分析鉴定为肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）。 耐酸及耐胆盐试验显示,菌株C27在pH 3.0及0.30%胆盐环境中能够生长,满足益生菌在肠胃定植的首要条件。因此菌株C27可以作为发酵辣椒酱专用发酵剂进行生产应用。     

百香果果浆内生细菌的分离鉴定及生长条件的研究

为了解百香果果浆的内生细菌,该研究采用平板计数琼脂（PCA）培养基从百香果果浆中分离内生细菌,通过形态观察及分子生物学技术对其进行鉴定,并对其生长条件进行研究。结果表明,从百香果果浆中分离得到3株菌落形态单一、均呈浅黄色的内生细菌,分别编号为GJ2-5、GJ2-13、GJ2-19,均呈革兰氏阳性。3株内生细菌均为泛菌属（Pantoea）,其中,菌株GJ2-5和GJ2-13均为分散泛菌（Pantoea dispersa）,菌株GJ2-19为Pantoea eucrina。3株内生细菌的最适生长培养基均为LB液体培养基,最适生长pH值均为5.5,最适生长温度均为35 ℃,生长周期为迟滞期（0～6 h）、对数期（6～18 h）、平稳期（18～22 h）和衰亡期（22 h以后）。     

传统发面面肥中乳酸菌的分离与鉴定

为改善青贮饲料发酵品质筛选提供乳酸菌资源,实验采用实验室纯培养方法结合生理生化分析,对新疆传统发面面肥样品中乳酸菌的种类、形态学及生理生化特性进行研究,对分离的菌株运用16S r DNA基因序列和系统发育研究进行种属鉴定。结果表明,分离得到三株乳酸菌,其中F5和F28两株被鉴定为Bacillus sp.,F3被鉴定为Paenibacillus sp.。3株菌在p H4~7能生长,在3%和6.5%Na Cl条件下生长状况良好,在10~45℃温度范围能生长。两株芽孢杆菌中F5菌株产酸能力较强,F28菌株生长速率较快,并且这两株菌均能利用多种碳源。所以,实验中筛选出的三株乳酸菌均可选作青贮饲料制作过程中的添加剂。      

台湾乳白蚁纤维素降解菌的分离和鉴定

该研究从广西柳州本地的台湾乳白蚁（Coptotermes formosanus）体内筛选一株纤维素降解菌,通过形态观察、生理生化试验以及分子生物学对其进行鉴定,并采用滤纸片法及3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定该菌株的纤维素酶活力。结果表明,筛选获得一株可在以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基上生长的菌株,命名为BW,并鉴定其为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）;菌株BW的纤维素酶活力最高,为（93.73±0.22）U/mL。