提取方法对接骨草中9种核苷类物质的影响

研究建立了高效液相色谱法测定核苷类物质含量及比较提取工艺对核苷类物质含量的影响。试验采用Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为甲醇,流动相B相为纯水,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,DAD检测波长为262 nm,柱温为30℃。检测方法显示:9种核苷类物质的检测线性范围为0.02～250 mg/L;检出限(S/N=3)在0.003～0.035 mg/kg之间;加标回收率(N=6)在85.38%～102.45%之间,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的接骨草中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种接骨草核苷类物质的总含量以亚临界萃取最高,亚临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了接骨草核苷类物质;结果表明,从接骨草核苷类物质的含量及物质特性保留的角度考虑,选择接骨草的提取工艺以亚临界萃取为宜。     

不同提取工艺下艾叶中核苷类物质的同时检测

建立高效液相色谱法测定核苷类物质含量并比较提取工艺对核苷类物质含量的影响。采用Reprosil-Pur Basic C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为甲醇;流动相B相为纯水,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,DAD检测波长260 nm;柱温40℃。检测方法显示,9种核苷类物质的检测线性范围为0.02~200 mg/L;检出限(S/N=3)在0.003~0.02mg/kg;加标回收率(N=6)在86.45%~106.88%、检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的艾叶中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种艾叶核苷类物质总含量以亚临界萃取最高,亚临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留艾叶核苷类物质;结果表明,从艾叶核苷类物质含量及物质特性保留的角度考虑,选择艾叶的提取工艺以亚临界萃取为宜。     

商陆中9种核苷类物质的快速检测方法

建立高效液相色谱法测定核苷类物质,探究含量并比较提取工艺对核苷类物质含量的影响。采用Waters Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为甲醇;流动相B相为纯水,梯度洗脱,流速1.0 mL/min, VWD检测波长260 nm;柱温37℃。检测方法显示, 9种核苷类物质的检测线性范围为0.05～100 mg/L;检出限(S/N=3)为0.002～0.018 mg/kg;在加标浓度分别为1.0, 5.0, 10.0和20.0 mg/g条件下,加标回收率(N=6)为87.12%～104.22%,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的商陆中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种商陆核苷类物质的总含量以超临界萃取最高,超临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了商陆核苷类物质。结果表明,从商陆核苷类物质的含量及物质特性保留的角度考虑,选择商陆的提取工艺以超临界萃取为宜。     

茵陈蒿的提取及其中核苷类物质分析和在卷烟中的应用

采用不同方法提取茵陈蒿,建立高效液相色谱法测定茵陈蒿核苷类物质,比较提取工艺对茵陈蒿核苷类物质含量的影响,并研究了茵陈蒿提取物在卷烟中的应用。采用Agilent 959990-902 Eclipse Plus C_(18)色谱柱(4.6mm×150 mm);流动相A相为甲醇,流动相B相为纯水;梯度洗脱,流速0.9 m L/min;DAD检测波长265 nm;柱温38℃。检测方法显示,9种核苷类物质的检测线性范围为0.02~400 mg/L;检出限(S/N=3)在0.005~0.025 mg/kg;加标回收率(N=6)在89.36%~106.41%,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的茵陈蒿中叶尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种茵陈蒿核苷类物质总含量以亚临界萃取最高;卷烟加香应用结果表明,茵陈蒿亚临界萃取物能与烟香协调,增加香气厚实、饱满度和爆发力,改善余味。     

香蕉皮中6种多酚的HPLC检测及制备工艺研究

试验采用RP-HPLC法比较不同提取工艺对海南香蕉皮中原儿茶酸(Protocatechuicacid)、儿茶素(Catechin)、绿原酸(Chlorogenicacid)、咖啡酸(Caffeicacid)、阿魏酸(Ferulicacid)和芦丁(Rutin)6种多酚含量的影响。试验采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(125 mm×4.6 mm×5μm),流动相A相为甲醇;流动相B相为0.01 mol/L磷酸溶液,梯度洗脱,流速为0.8 m L/min,DAD检测波长:280 nm;柱温40℃。检测结果表明,不同提取工艺得到的海南香蕉皮粉中原儿茶酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和芦丁5种海南香蕉皮多酚的总含量以亚临界萃取最高,亚临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了海南香蕉皮多酚;该检测方法的回收率为98.52%~102.65%,精密度为0.88%~2.10%,定量下限为0.01 mg/L;结果表明,从海南香蕉皮多酚的含量及物质特性保留的角度考虑,选择海南香蕉皮的提取工艺以亚临界萃取为宜。     

葡萄柚中色素组分的测定及萃取条件对色素的影响

采用高效液相色谱法比较不同提取工艺对葡萄柚(Citrus paradise Macf.)中叶黄素(Lut)、玉米黄素(Zea)、β-隐黄素(β-Cryp)、α-胡萝卜素(α-C)和β-胡萝卜素(β-C)5种色素含量的影响。采用Waters YMCTM Carotenoid3μm色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为乙腈,流动相B相为乙酸乙酯,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,DAD检测波长450 nm,柱温30℃。检测方法显示,4种多酚的检测线性范围为0.1~2 000 mg/L;检测限在0.002~0.01 mg/L之间,加标回收率在97.11%~101.02%之间,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同提取工艺得到的葡萄柚中叶黄素、玉米黄素、β-隐黄素、α-胡萝卜素和β-胡萝卜素5种葡萄柚色素的总含量以亚临界萃取最高,且亚临界萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了葡萄柚色素。从葡萄柚色素的含量及物质特性保留的角度考虑,选择葡萄柚的提取工艺以亚临界萃取为宜。     

HPLC法测定中国白酒中的γ-氨基丁酸和核苷类物质

建立测定白酒中γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）和核苷类物质（腺苷、尿苷）的高效液相色谱分析方法。确定检测γ-氨基丁酸的色谱条件为流动相A∶B（A-乙腈;B-50 mmol/L三水合乙酸钠）=35∶65（体积比）,流速为1.0mL/min,柱温40℃,检测波长为436nm;确定检测核苷类物质的色谱条件为：流动相10%甲醇,流速为0.8 mL/min,柱温40℃,检测波长为254 nm。对20种白酒分析结果显示,不同香型白酒中功能成分差异明显。GABA在浓香型白酒中较高,其中2号酒样中GABA含量达0.867 mg/L。核苷类物质在芝麻香型和酱香型白酒中要高于浓香型,其中9号达到438.960 mg/L。该方法用于白酒中GABA和核苷类物质的分析具有分离效果佳、精密度高、稳定性高的特点。     

提取工艺对色谱法检测芦荟叶多酚含量影响

试验采用高效液相色谱法法比较不同提取工艺对芦荟叶中没食子酸(Gallic acid)、原儿茶酸(Protocate-chuicacid)、儿茶素(Catechin)、绿原酸(Chlorogenicacid)、表儿茶素(Catechin)、咖啡酸(Caffeicacid)、阿魏酸(Ferulicacid)和芦丁(Rutin)8种多酚含量的影响。试验采用ZORBAX SB-C18色谱柱(125 mm×4.6 mm×5μm),流动相A相为乙腈;流动相B相为0.1(V/V)甲酸,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,DAD检测波长为280 nm,柱温为45℃。检测结果表明,不同提取工艺得到的芦荟叶粉中没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、咖啡酸、阿魏酸和芦丁8种芦荟叶多酚的总含量以超临界二氧化碳萃取最高,超临界二氧化碳萃取过程没有加热处理,最大程度地保留了芦荟叶多酚;该检测方法在加标为1 000~100 000μg/kg浓度范围内的回收率为98.21%~103.28%,精密度为1.29%~4.67%(n=6),方法的检出限为0.02~0.05 mg/L,检测线性范围最宽为0.01~500 mg/kg;结果表明,从芦荟叶多酚的含量及物质特性保留的角度考虑,选择芦荟叶的提取工艺以超临界二氧化碳萃取为宜。     

蛹虫草及其培养基中主要核苷类成分的分析比较

采用高效液相色谱法测定虫草中的核苷类成分,优化后的色谱条件为YMC-Polyamine 柱(250mm × 4.6mm,5μm);采用梯度洗脱,流动相：乙腈- 水(V/V)：0～15min 为90:10,15～20min 为86.5:13.5,20～30min 为75:25,30～35min 为70:30;流速：1mL/min;柱温：30℃;检测波长：259nm;进样量：10μL。结果表明：胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离,该方法稳定性好、精密度高、重现性好,适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现,蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似,但含量差异非常显著,同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高,其他核苷类成分很少,因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。     

高效液相色谱分析虫草中核苷类成分

为虫草中核苷类成分研究和质量控制提供参考,建立了一种高效液相色谱(HPLC)定量分析胞苷酸、尿苷酸、尿嘧啶、鸟苷酸、肌苷酸、次黄嘌呤、尿苷、腺苷酸、胸腺嘧啶、腺嘌呤、2′-脱氧腺苷酸、肌苷、鸟苷、2′-脱氧鸟苷、胸苷、腺苷、2′-脱氧腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)腺苷这19种核苷的方法。采用X select HSS T3 column(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速1 m L/min,柱温40℃,检测波长254 nm。研究表明:19种核苷精密度RSD为0.11%~2.82%,稳定性RSD为0.22%~1.63%,保留时间RSD为0.14%~3.47%,重复性RSD为1.3%~5.2%,回收率为84.9%~108.3%,说明该方法准确、可靠,采用该方法成功测定了多种虫草产品中核苷的质量分数。     

异丁醇萃取-高效液相色谱法测定马铃薯中α-茄碱

目的建立异丁醇萃取和高效液相色谱法(HPLC)测定马铃薯中α-茄碱含量的新方法。方法马铃薯匀浆样品经5%乙酸溶液搅拌提取30 min,提取液调节p H至11.0后加入异丁醇进行萃取,萃取液加热浓缩,N2吹干。残渣经甲醇复溶,过0.45μm滤膜后进样,HPLC检测α-茄碱含量。流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(22∶78,V/V),Discovery C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,检测波长210 nm,进样量20μl。结果在0.02~1.00 mg/ml范围内,α-茄碱的峰面积和浓度的线性关系良好(r=0.999 7)。检测限和定量限分别为0.68和2.27μg/ml,方法检出限为1.38μg/g。样品在0.04、0.40和2.00 mg/g 3个添加水平下的加标回收率为98%~116%。方法精密度RSD为0.16%~1.79%。结论该方法具有快速、简便,准确度和精密度高等特点,适用于马铃薯中的α-茄碱含量的快速检测。     

SPE-HPLC法测定橄榄油中角鲨烯的含量

该文建立了固相萃取(SPE)——高效液相色谱(HPLC)测定橄榄油中角鲨烯含量的方法。采用硅胶固相萃取小柱提取净化样品。色谱柱:Inertsil ODS–SP–C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈∶四氢呋喃=90∶10,流速1.2 m L/min,检测波长208 nm,柱温35℃。本方法的最低检测浓度为0.02 mg/g。标准曲线在20~500μg/m L范围内线性良好,相关系数R2=0.999 9。角鲨烯的平均回收率为92.2%,相对标准偏差(RSD)为1.47%(N=5),是一种快速、简便、准确、重复性好的检测橄榄油中角鲨烯含量的方法。     

高效液相色谱法测定鸡蛋中三聚氰胺

建立采用固相萃取净化,高效液相色谱法测定鸡蛋中三聚氰胺含量的方法。样品采用三氯乙酸和乙酸铅溶液提取,优化样品提取时间、色谱柱及固相萃取柱,最终确定为样品提取20min、采用TC-C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱和PCX固相萃取柱。采用紫外检测器,检测波长为240nm,流动相为乙腈:辛烷磺酸钠-柠檬酸缓冲液(10:90,V/V),流速1.0mL/min,进样量20μL,外标法定量。三聚氰胺在1～50μg/mL范围内,具有良好的线性关系(R2=1),在添加质量浓度为5～20mg/kg范围内,三聚氰胺添加回收率在72.8%～87.6%,RSD(n=6)为1.5%～4.0%,最低检测限为0.54mg/kg。     

决明子中8种天然滋味物质的HPLC法同时检测

试验比较不同来源决明子提取物对葡萄糖、果糖、甘露醇、决明子苷、决明子苷Ⅴ、决明子苷Ⅳ、决明子黄素和决明子二醇苯甲酸酯8种天然滋味物质的色谱法检测及决明子来源对其含量的影响。试验采用Waters symmetry C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为80%乙腈水溶液(含0.01%三氟乙酸和2.0 mmol/L醋酸铵水溶液);流动相B相为水溶液(含0.01%三氟乙酸和2.0 mmol/L醋酸铵),梯度洗脱,流速为0.8 m L/min,DAD检测波长:254 nm;柱温45℃。检测方法显示:8种天然滋味物质的检测线性范围为0.02~500 mg/L,线性关系良好(r0.997 0);检出限(S/N=3)在0.005~0.02 mg/kg之间;在加标浓度为1.0~50.0 mg/kg条件下,加标回收率(N=9)在86.34%~103.88%之间,检测方法灵敏有效。     

烟草中果糖嗪的超声提取工艺研究

建立了烟草中果糖嗪的超声提取工艺和高效液相色谱含量测定方法。提取工艺为:萃取剂为纯水,萃取时间40min,液固比50:3(mL/g)。色谱条件为:分离柱为Waters Carbohydrate Analysis柱(3.9mm×300mm),流动相为乙腈:水(V/V)=80:20,流量1.0mL/min,柱温为室温,检测波长275nm,进样体积10μL。结果:标准曲线的相关系数的平方为0.9969,线性范围6～14μg/mL,果糖嗪的平均回收率为98.7%,相对标准偏差RSD均小于3%,检测限为0.5μg/mL,烟草中果糖嗪的质量百分含量约为0.02%,适用于烟草样品中果糖嗪的定量分析。     

固相分散萃取-高效液相色谱法测定郫县豆瓣中四种苏丹红染料的研究

建立了郫县豆瓣中苏丹红Ⅰ～Ⅳ的固相分散萃取(SPDE)-高效液相色谱(HPLC)分析方法。样品用无水硫酸钠作为分散剂,以乙腈提取样品中的苏丹红,提取液用中性氧化铝层析柱进行净化。用Inertsil ODS-sp C18柱(4.6mm×250mm,5μm))分离,流动相A为乙腈,流动相B为0.1%甲酸水溶液(A∶B为90∶10,V/V),等度洗脱,流速1mL/min,柱温40℃。二极管阵列检测器检测,检测波长为517nm,利用保留时间和光谱图定性,外标法定量。4种苏丹红染料在0.10～20.00μg/mL范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9999,苏丹红Ⅰ～Ⅳ的检出限(LOD)分别为0.009～0.013mg/kg(信噪比S/N=3)。在添加浓度为0.5～10.0mg/kg范围内平均回收率达81.67%～93.28%,相对标准偏差(RSD)为1.07%～4.61%(n=6)。     

固相萃取-高效液相色谱法测定纺织品中的有害抗菌剂

为了评估纺织品中有毒有害抗菌剂的风险等级,建立了固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC)测定纺织品中三氯卡班、α—溴肉桂醛、2—(4—噻唑)—苯并咪唑、4—氯—3—甲基苯酚4种有毒有害抗菌剂的分析方法。纺织品经甲醇-四氢呋喃提取后,经强阳离子固相萃取小柱净化,采用安捷伦Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(长度150 mm,孔径4.6 mm,填充物粒径5μm),以体积比乙腈/水40/60为流动相,对目标物进行有效分离,采用DAD检测器检测,结合色谱保留时间和光谱图进行定性,以标准曲线定量。4种有毒有害抗菌剂在质量浓度为1.0～100.0 mg/L范围内线性良好,相关系数均大于0.999。以信噪比S/N为10计算,该方法的定量限为2.2～3.6 mg/kg。在添加水平为5～100 mg/kg时,回收率为86.5%～100.3%,相对标准偏差为1.9%～4.3%。     

RP-HPLC法同时测定柑桔皮中橙皮苷和柚皮苷的含量

采用反相高效液相色谱测定不同提取条件下柑桔皮中橙皮苷和柚皮苷的含量,同时采用光电二极管阵列检测器检测两组分的紫外光谱.色谱柱为ODS C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为40/60),流速为1.0mL/min,检测波长270nm,柱温25℃.橙皮苷和柚皮苷的线性范围分别为0.007168～0.28g/L和0.012288～0.48g/L;二者含量分别为17.5～21.9mg/g(RSD=0.77%～1.86%)和2.14～2.78mg/g(RSD=0.98%～1.59%);其平均回收率分别为98.5%～99.4%(RSD=0.69%～1.78%)和99.3%～101.1%(RSD=0.43%～1.45%);检出限分别为0.28μg和0.16μg.该法简便、准确、重现性好,线性范围宽,适于对含有两组分的植物进行质量评价.     

紫马铃薯花色苷的提取纯化与鉴定

对超声波辅助提取紫马铃薯花色苷工艺条件进行优化,并用NKA-9大孔吸附树脂进行纯化,液相色谱结合紫外-可见光谱扫描分离和鉴定花色苷组成。结果表明：花色苷最佳提取条件为料液比1:50(2.5g/100mL柠檬酸溶液)、超声功率400W、提取温度45℃、提取时间10min,以干质量计算紫马铃薯种花色苷含量为1.362mg/g;用NKA-9大孔吸附树脂纯化,8倍柱床体积洗脱出占总量98.35%的的花色苷,花色苷纯度达到90.23%;高效液相色谱鉴定出紫马铃薯含有5种组分,其中3种分别是矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷和芍药-3-葡萄糖苷,其含量分别为0.27、0.057mg/g和0.46mg/g,三者总和占马铃薯中总花色苷含量的57.78%。马铃薯中含量最高的花色苷成分出峰保留时间为12.224min,其结构未知。     

加压溶剂法提取紫色马铃薯中花色苷的工艺优化

以紫色马铃薯粉为原料,使用加压溶剂提取的方法萃取紫色马铃薯中的花色苷。探讨提取时间、提取温度、料液比和提取剂的浓度对花色苷提取率的影响,并通过响应面法确定了最佳提取工艺参数为乙醇浓度为77%,提取温度为67℃,提取时间为25 min,料液比为1∶58,在最优条件下的花色苷提取量为200.13 mg/100 g。超声波辅助提取法提取紫色马铃薯中的花色苷,其最佳工艺条件下提取花色苷量为139.30 mg/100 g,加压溶剂法提取量高于超声波辅助提取法。