南瓜活性多糖的降糖作用及其组成分析

为研究南瓜多糖对正常及糖尿病模型小鼠血糖的影响 ,本实验采用新的分离工艺从南瓜粉中提取得到南瓜粗多糖 (PP) ,用DEAE分级获得 3个组分 ,收集的主导组分过SephadexG 10 0柱 ,获得 2个组分 .收集有活性的组分 (AP) ,经SephadexG 2 0 0柱 ,证实为单一峰 .以葡萄糖为标准 ,苯酚 硫酸法测得总糖质量分数为 80 .6 % ;气相色谱分析其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及鼠李糖     

羧甲基化南瓜多糖的制备及抗氧化、降血糖活性研究

目的：提高南瓜多糖体外抗氧化活性和降血糖活性。方法：以南瓜为研究对象,考察一氯乙酸浓度、反应温度和反应时间对羧甲基化南瓜多糖取代度的影响,并进行抗氧化活性和降血糖试验。结果：羧甲基化南瓜多糖的最佳制备条件为一氯乙酸浓度1.9 mol/L、反应温度73 ℃、反应时间3 h,该条件下的羧甲基化多糖取代度为1.247。在一定质量浓度范围内,南瓜多糖(PP)、羧甲基化南瓜多糖(CM-PP)的抗氧化能力与质量浓度呈剂量依赖性,与修饰前南瓜多糖相比,多糖的羧甲基化修饰可以提高其对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结论：羧甲基化南瓜多糖的优化工艺合理可行,且具有较强的抗氧化活性和降血糖活性。     

南瓜多糖的分离、纯化及其降血糖作用

为探寻南瓜中对正常及糖尿病模型小鼠血糖有影响的未知有效成分 ,本实验依次采用有机溶剂分步萃取、除蛋白、透析、乙醇沉淀及葡聚糖柱层析等分离手段 ,以小白鼠血糖值作为筛选活性成分的指标 ,在分离的每一阶段对分离所得各个组分进行活性定量评估 ,并追踪活性最强的部分 ,最后分离纯化出降血糖活性最强的组分G———南瓜多糖。高效液相色谱证明其为杂多糖 ,分子量为 1.16× 10 5。     

不同品种的南瓜多糖对糖尿病小鼠血糖的影响研究

探讨不同品种的南瓜中提取的南瓜多糖(PP)对糖尿病模型小鼠血糖的影响.选用浙江当地常见的有代表性的5种不同类型的南瓜及浙江大学自行培育的高出粉率南瓜,采用新的分离工艺从南瓜粉中提取得到PP,对其营养组成及降血糖效果进行比较.结果表明6种不同品种的南瓜粉主要营养成分不同,从中提取的PP降血糖效果也明显不同,其中PP2#与6#降血糖效果最显著(均P<0.001).结论表明:南瓜品种对其降血糖效果影响较大.     

莲藕不同部位多糖的理化特征与抗氧化活性研究

采用分步醇沉法制备莲藕食用部位、皮和节中多糖(EP60/75/90、PP60/75/90和NP60/75/90),分析其基本组成、理化特征及抗氧化活性,明确活性多糖在莲藕中的分布。不同部位多糖的组成存在明显差异,其中由食用部位制备多糖的纯度较低。高效分子排阻色谱分析发现,莲藕不同部位多糖均以1.30~1.63 ku的低分子组分为主,且含有少量的结合蛋白。体外抗氧化活性评价发现:食用部位多糖的抗氧化活性较藕皮多糖和藕节多糖弱,尤其是DPPH自由基清除能力和FRAP总抗氧化能力(p0.05);藕皮多糖的抗氧化活性均为PP60PP75PP90;藕节多糖NP60和NP90的活性相当,其羟自由基清除能力强于NP75(p0.05),而FRAP总抗氧化能力则较弱(p0.05)。莲藕抗氧化活性多糖主要分布于皮和节中,其活性强弱可能与结合蛋白含量和分子量的高低有关。     

南瓜降血糖活性成分的筛选及初步鉴定

在被追踪的降血糖活性组分为未知的情况下,从南瓜中筛选出降血糖活性成分—南瓜多糖(PCEC),并对其作初步鉴定。借鉴祖国经典方剂的溶剂提取法,并在药理试验的配合下采用动物实验进行筛选,用成分分析及紫外扫描法对PCE-C进行鉴定。结果表明,小鼠经腹腔注射7h后就可以使其血糖值由(15.32±3.38)mmol/L降至正常范围(5.77±1.46)mmol/L;南瓜多糖主要由糖(69.82％)和蛋白质(17.53％)组成,UV吸收显示一个典型的糖吸收峰,而无核酸(260nm)和蛋白质(280nm)的特征吸收峰。从而筛选并初步鉴定出南瓜中的降血糖活性成分为多糖类物质。     

南瓜多糖的分级醇沉与抗氧化活性研究

以新鲜南瓜为原料,经热水浸提后以不同体积分数乙醇溶液(60%,70%,80%和90%)分级沉淀,依次得到4种南瓜多糖样品(PPA-60,PPA-70,PPA-80和PPA-90),为探究不同组分间的差异,分别测定其总糖含量、蛋白含量、半乳糖醛酸含量及单糖组成,并利用红外和紫外光谱进一步分析分级醇沉产物之间的特性差异。结果表明,南瓜多糖PPA-60,PPA-70,PPA-80和PPA-90均为结合蛋白的多糖复合物,其中70%,80%乙醇沉淀的多糖含量较高(PPA-70PPA-80PPA-90PPA-60),60%乙醇沉淀的样品蛋白含量显著高于其他组;单糖检测结果显示4种多糖样品均由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,但单糖组成比例存在差异;4种多糖样品均具有一定的抗氧化活性,抑制羟自由基的能力随着乙醇体积分数的升高逐渐增大(PPA-90PPA-80PPA-70PPA-60)。     

南瓜多糖的分离与纯化

研究了南瓜多糖提取液的分离与纯化。试验结果表明 ,提取液用TCA法脱蛋白 ,去除率达 94.3 3 % ,采用SephacrylS 40 0HR凝胶柱层析逐步分析纯化 ,分离得到 2种多糖PP Ⅰ和PP Ⅱ。利用醋酸纤维膜电泳法对PP Ⅰ和PP Ⅱ进行纯度检测 ,表明 2种组分都达到了均一的纯度。     

茯苓多糖抗氧化作用研究

比较研究茯苓水溶性多糖、酸性多糖及其不同酸度多糖的抗氧化作用,为茯苓多糖开发应用提供科学依据。采用水和1 mol/LNa OH溶液分别提取得到茯苓水溶性多糖(PWP)及酸性多糖(PAP);取水提取茯苓水溶性多糖后的药渣,依次用0.1 mol/L~1.0 mol/L梯度Na OH溶液分级提取分离10种茯苓酸性多糖组分(PSAP1-PSAP10)。通过对多糖还原能力、DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率等指标的测定,比较PWP、PAP和10种PSAP1→PSAP10组分的抗氧化活性。研究结果表明,PWP和PAP具有抗氧化作用;PSAP1→PSAP10分级提取的10种多糖组分均具有不同程度的抗氧化作用,其中PSAP8和PSAP9抗氧化作用优于其他组分。综合分析,茯苓多糖具有良好的抗氧化作用,其酸性多糖的抗氧化作用与其酸性强弱相关。     

南瓜多糖对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

实验目的:通过南瓜多糖(Pumpkin Polysaccharide,PP)对α-葡萄糖苷酶活性的影响,探讨南瓜多糖降血糖作用的可能机制.实验方法:实验依次采用加热浸提、有机溶剂分步萃取、减压浓缩、冷冻干燥等工艺方法制备南瓜多糖;提取正常大鼠小肠上段-α葡萄糖苷酶,酶活力采用P-硝基苯麦芽庚糖(PNPG)比色法进行测定,优化α-葡萄糖苷酶作用的最佳实验条件,考察南瓜多糖对α-葡萄糖苷酶活性的影响.实验结果:在实验优化的α-葡萄糖苷酶作用的反应条件下,即在反应时间2h、反应温度49℃、缓冲液pH6.0、底物PNPG浓度为10mmol/L的实验条件下,南瓜多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较弱.结论:南瓜多糖的降血糖作用不是通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性实现的,而是通过其它途径实现的.     

酶法水解麦冬多糖及其产物的分离鉴定

采用生物酶法水解纯化后的麦冬多糖,并对其产物的成分进行分析。利用葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱对麦冬粗多糖进行分离纯化,得到相对分子质量为48 347的纯麦冬多糖。使用Absidiasp.O8 s菌产酶水解纯麦冬多糖,产物经Sephadex G-100和Sephadex G-50柱分离,得到OP-1、OP-2、OP-3三种组分,相对分子质量分别为32 452、9 231和1 354。通过高效液相色谱分析纯麦冬多糖及其水解产物的单糖组成,结果表明,纯麦冬多糖的单糖组成为葡萄糖和果糖,其水解产物OP-1、OP-2、OP-3三种组分的单糖组成分别为果糖、果糖、葡糖糖和果糖。     

南瓜多糖的提取及纯化

南瓜是一种具有药用价值的食品,实验用热水浸提、醇析、Severge法除蛋白,水相透析得到南瓜粗多糖,通过DEAE-Sepharose和SephadexG-100柱的分离纯化得到2种水溶性多糖,经酸解,纸色谱分析得组分1的单糖组成为D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸,组分2的单糖组成为D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和葡萄糖醛酸。     

软枣猕猴桃多糖的分离与纯化及其分子质量的测定

对通过水提醇沉法提取、Sevag法脱蛋白得到的软枣猕猴桃多糖进行分离纯化,利用DEAE-纤维素52离子交换层析对软枣猕猴桃多糖进行初步分离,得到4种软枣猕猴桃多糖组分;利用葡聚糖凝胶对软枣猕猴桃多糖组分进一步分离的最佳条件为葡聚糖凝胶型号为Sephadex G-200、层析柱规格为D1.1cm×100cm、多糖质量浓度为10g/L。以此条件分离,得到含量较高的软枣猕猴桃多糖-Ⅱ纯品。通过Sephadex G-200凝胶柱层析鉴定软枣猕猴桃多糖-Ⅱ是均一的纯多糖,通过紫外光谱鉴定软枣猕猴桃多糖-Ⅱ不含核酸及蛋白。同时测得软枣猕猴桃多糖-Ⅱ的分子质量为83733D。     

龙须菜琼胶多糖的提取、纯化与性能表征

龙须菜(Gracilaria Lemaneiformis)的热水提取物,经DE-22和Sephadex G-200柱层析纯化,得到一种含微量硫酸基的琼胶多糖,此多糖经Q-Sepharose柱层析鉴定为单一组分。紫外光谱显示它不含蛋白质、多肽及核酸,红外光谱揭示它含3,6-内醚半乳糖特征吸收以及微量的硫酸基,热学性质表明在其0～700℃升温过程中存在两个失重过程,旋光分析表明随温度的升高,该多糖水溶液存在一个由有序构象(螺旋结构)向无序构象(无规线团)转变的过程。     

香菇子实体多糖分离纯化的研究

将香菇子实体干粉经热水浸提、乙醇沉淀,得到香菇多糖粗品。香菇多糖粗品经Sevage法去除游离蛋白,H2O2脱色,用DEAE-纤维素柱层析,经蒸馏水、0.05mol/LNaCl、0.1mol/LNaCl、0.2mol/LNaCl、0.3mol/LNaCl和0.4mol/LNaCl洗脱,得到6个香菇多糖级分A～F;然后用SephadexG-200柱进一步纯化香菇多糖B级分,得香菇多糖亚级分B-1和B-2;再研究其中的B-1。采用SephdexG-200柱层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳法,证实该多糖组分为均一多糖。     

方格星虫多糖的分离纯化及单糖组成

方格星虫多糖经碱法提取、三氯乙酸脱蛋白、DEAE-52纤维素柱层析、Sephadex G-100凝胶柱层析纯化得到精制方格星虫多糖（Sipunculus nudus polysaccharide,SNPS）。测定SNPS的理化性质和单糖组成,结果表明：SNPS为白色粉末状单一组分;经理化性质测定和紫外光谱分析,表明SNPS的多糖质量分数为99.35%,糖醛酸质量分数为22.21%,不含蛋白质和核酸,不含硫酸根;气相色谱分析结果表明方格星虫多糖SNPS主要由阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.16∶9.54∶1。本研究表明SNPS是从方格星虫中得到的均一组分纯多糖。     

蛹虫草胞外多糖的制备、结构分析及其免疫活性

本实验选择蛹虫草菌株CICC 14014液态发酵培养，提取蛹虫草胞外多糖，测定其理化性质及结构，并对其免疫活性进行研究。采用DEAE-Sephacel阴离子交换柱联合Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱纯化蛹虫草胞外多糖；利用高效液相色谱法测定多糖分子质量，利用傅里叶变换红外光谱鉴定多糖结构；选用BALB/c小鼠构建免疫损伤模型，考察其体质量及免疫器官指数变化情况，观察其脾脏组织切片形态，计算其T、B细胞增殖率，测定其血清细胞因子及免疫球蛋白质量浓度。结果表明，蛹虫草发酵液中多糖质量浓度为3.15 mg/mL，经分离纯化后所得单一多糖分子质量为3.67 kDa，纯度可达86.13%。动物实验结果表明，蛹虫草胞外多糖可明显提高免疫器官指数，能够有效促使T细胞（低剂量时）、B细胞增殖和免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）G、IgA、IgM、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-2、干扰素（interferon，IFN）-γ的分泌，免疫调节效果显著。研究结果表明蛹虫草胞外多糖可修复环磷酰胺导致的BALB/c小鼠免疫功能损伤，为开发蛹虫草发酵液资源建立了部分理论支撑。     

芒果多糖的纯化与光谱分析

采用热水浸提、乙醇沉淀法得到芒果多糖粗品;采用苯酚-硫酸法测其多糖含量为(46.3±1.75)mg/g。DEAE-25纤维素和Sephadex G-75凝胶层析柱进一步分离纯化得到白色絮状多糖;高效阴离子交换色谱法分析其单糖组成。结果表明：该多糖是由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖等单糖组成,其含量分别为(6.3±1.40)、(11.9±1.76)mg/g和(13.8±1.52)mg/g。红外光谱分析表明具有明显的多糖特征吸收峰,该多糖结构主要为β-糖苷键连接的吡喃型葡聚糖。     

南瓜多糖复合酶法提取及纯化的研究

南瓜中的有效成分南瓜多糖对糖尿病症状有显著的治疗效果,为了开发和利用这一功能成分,本实验采用酶解的方法提取南瓜多糖。首先利用正交试验确定复合酶添加量为纤维素酶1%,果胶酶1.5%,木瓜蛋白酶1%;利用正交试验确定复合酶的最佳反应条件为温度40℃,pH值为5.5,反应时间为30min。在最佳条件下,多糖的提取率为28.8%。将复合酶法制得的南瓜粗多糖经脱色、透析后,上DEAE-纤维素柱层析,得到三种级分。主要级分PPIII经SepharoseCL-4B凝胶柱层析、紫外扫描和冻融分析鉴定为均一组分。