珍珠粉对小鼠酒精肝的保护作用的实验研究

目的观察珍珠粉对小鼠酒精肝的保护作用。方法采用食用酒精诱导小鼠肝损伤,比色法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)浓度,计算肝脏指数。结果珍珠粉高剂量可使小鼠酒精肝损伤血清ALT、AST升高的水平降低,降低小鼠肝损伤的肝脏MDA的水平,提高SOD的活性,降低升高的肝脏指数,与模型组比较均有显著差异(P<0.01)。结论珍珠粉对小鼠酒精肝有明显的保肝作用。     

氨基酰化酶固定化细胞光学拆分DL-丙氨酸

用具有氨基酰化酶基因的大肠杆菌工程菌构建固定化细胞,并对DL-丙氨酸进行酶拆分进行了实验研究。考察了温度、pH、底物浓度、金属离子和时间对酶促反应的影响。确定了氨基酰化酶固定化细胞光学拆分DL-丙氨酸中酶促反应的最佳工艺条件:pH=7.5,温度50℃,反应时间6h,Co2+离子浓度5×10-4mol/L,在该条件下,D-丙氨酸产率为87.2%,光学纯度为98.0%。     

高效液相色谱法测定甲氨基阿维菌素B2a苯甲酸盐原药含量

建立了高效液相色谱法测定甲氨基阿维菌素B2a苯甲酸盐原药含量的分析方法.该方法采用甲醇-乙腈-0.33％氨水溶液(体积比为43:43:14)为流动相,DAD检测器,244 nm波长下进行检测.测定结果表明,甲氨基阿维菌素B2a苯甲酸盐质量浓度为0.0482～1.4464 mg/mL时,该方法线性关系良好,相关系数为0....     

L-2-氨基丙醇的绿色合成新工艺研究

以L-2-丙氨酸为原料,用水做溶剂,在5％Ru／C纳米催化剂作用下,催化加氢还原得到L-2-氨基丙醇,优化的工艺参数为：L-2-丙氨酸水溶液的浓度为15％,50％的磷酸水溶液作为助剂,氢气压力为5．5MPa,在100℃下反应12h,收率为85％,光学纯度为99％以上。     

冻干重组乙型肝炎疫苗国家参考品的制备及标定

目的 制备1批冻干参考品,用于体外相对效力测定准确评价重组(啤酒酵母)乙肝疫苗的生物学活性。方法 疫苗原液中分别加入5％和1％的蔗糖和明胶作为保护剂,制成冻干参考品。检测各项质量指标并观察其稳定性,并以Merck公司的参考品为标准,以ELA法协作标定其体外相对效力。结果 各项质量指标均符合现行规程要求,体外相对效力保持稳定,分装量准确,原液蛋白均值为24.72μg/ml,相应液体疫苗蛋白均值为12.27μg/ml。并经3家实验室协作标定,24次检定结果合并计算相对效力为0.993。结论 该冻干参考品可用作重组啤酒酵母乙肝疫苗效力检定的质控参考品,该批参考HBsAg含量定为11.0μg/ml。     

人脲原体核酸检测试剂盒国家参考品的制备

目的制备人脲原体核酸检测试剂盒国家参考品。方法培养人脲原体两大生物群14个标准血清型菌株,培养液灭活后经颜色改变单位(color change unit,CCU)法与PCR相结合的方法进行定值,组成能覆盖脲原体所有表型及基因型的14份阳性参考品P1-P14(浓度为106 CCU/ml)及14份检测限参考品L1-L14(浓度为104 CCU/ml);选择6份能排除脲原体核酸检测试剂盒非特异性或交叉反应的样品组成阴性参考品N1-N6;选择生物群1的微小脲原体(ureaplasma parvum,UP)1和UP14作为重复性参考品R1、R2(浓度分别为105和104 CCU/ml)。用5家公司生产的脲原体核酸检测试剂盒对参考品进行验证,确定准确性、特异性、检测限、重复性、稀释线性的性能指标;并考察参考品在不同条件下(2~8℃放置7 d,37℃放置3、7、12 d,-20℃及常温反复冻融5次)的稳定性。结果支原体各培养液经CCU法测定,浓度均在106~107 CCU/ml之间,以CCU法测定浓度为靶值,绝对偏差均在±0.5个数量级以内。4家公司生产的不同试剂盒检测参考品,在准确性、特异性、检测限及重复性上均符合要求;在稀释线性上,最低稀释浓度为102 CCU/ml的样品只有2家可以检出,其他几家的稀释线性相关系数以103~106 4个浓度计算,r值均0.990 0;1家(RNA检测)检测R2的重复性,CV为5.5%。经不同条件处理的参考品的稳定性有轻微变化,但均处于设定的可接受范围内。结论制备了人脲原体核酸检测试剂盒国家参考品,该参考品可满足人脲原体核酸分型、定性及定量检测要求,经多家实验室进行验证,可用于国内大多数试剂盒的性能评价及临床实验室质量评价。     

一种解酒护肝片对小鼠酒精性肝损伤的保护作用的研究

目的:研究解酒护肝片对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:将小鼠随机分为5组,正常组、模型组、解酒护肝片低剂量组、中剂量组、高剂量组。采用白酒灌胃造模,造模与给药同时进行。6周后测定血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果:各剂量解酒护肝片能显著降低小鼠血清ALT、AST活性和肝组织MDA、TG含量(P<0.05或P<0.01),提高肝组织SOD和GSH活性,各预防治疗组之间比较提示,以高剂量解酒护肝片作用最为显著。结论:解酒护肝片能有效预防小鼠酒精性肝病。     

卵清蛋白国家定量参考品的建立

目的建立卵清蛋白国家定量参考品。方法用德国试剂盒测定不同厂家、不同级别卵清蛋白的含量,筛选与试剂盒标准卵清蛋白含量符合率最高的样品作为参考品原料,并对参考品保护剂进行验证。将参考品贮存母液系列稀释后,经3个实验室协作标定,确定其标示量。结果选取SigmaGⅡ作为参考品原料;参考品保护剂对卵清蛋白测定结果无影响,并可显著提高参考品的稳定性;经协作标定,确定浓度为15、10、5和2.5ng/ml系列参考品的标示量分别为(17.96±1.00)、(12.25±1.51)、(6.79±1.14)和(3.11±0.31)ng/ml。结论已建立了含量准确,重复性和线性较好的卵清蛋白国家定量参考品。     

重组人血小板生成素参考品的研制

目的 制备重组人血小板生成素参考品,为ｒｈＴＰＯ的体外生物学活性测定提供相对标准。方法 采用ＴＰＯ依赖细胞株进行ｒｈＴＰＯ体外生物学活性测定。结果 效价测定９次。ＳＤ＝０．１５７９．ＣＶ＝１４．１％,平均效价 为ｌ１０００Ｕ／支,其他项目均达到国家标准品要求。参考品置－２５℃保存６个月后稳定性良好。结论 作为参考品可 用于ｒｈＴＰＯ体外生物学活性控制。     

梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品的研制

目的建立梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品。方法通过对84份血浆的复核、确证,组建梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品,并将3份效价检测用参考品溯源至国际标准品,经5家实验室的协助标定,确定参考品的质量标准,并对参考品进行均匀性及稳定性评估。结果梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品由25份阴性及25份阳性样品组成,3份效价检测用参考品的效价定值分别为12、10和5 IU/mL。协助标定确证25份阴性参考品均为阴性,25份阳性参考品均为阳性,效价参考品的效价检测值均≤0. 625 IU/mL。参考品的均匀性及稳定性均符合要求。结论研制的参考品可作为梅毒非特异性抗体检测试剂的质量控制和评价使用。     

富含硅的天然矿泉水降血脂活性研究

探讨富含硅的天然矿泉水(富硅水)对大鼠饲喂高脂饲料造成的高脂血症预防作用。将成年雄性Wistar大鼠做模型测定各组大鼠的体重及肝指数,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG),并做肝脏病理学检查。结果表明,富硅水各剂量组血清甘油三酯显著降低(P0.01);血清中ALT与AST极显著降低(P0.01);均显著降低肝指数(3.99±0.19)%,(4.07±0.19)%,(3.97±0.29)%;同时病理组织学显示富硅水能明显改善大鼠的肝细胞脂肪变性。富硅水能够有效预防高脂模型引起的高脂血症的发生或发展。     

浅谈4-氨基氨替比林萃取光度法测定挥发酚的影响因素

挥发性酚类的分析方法较多,化学法中测定较低浓度水样的多采用的是4-氨基安替比林萃取分光光度法。文章对该方法测定挥发酚的几种影响因素进行了探讨。     

农药制剂中皮肤接触致敏组分BIT的检测和控制

在实验的基础上,提出了一种农药制剂中BIT(1,2-苯并异噻唑啉-3-酮)的检测方法和BIT纯品定值的方法。该方法中,BIT纯品的定值,采用"气相色谱法+水分"相组合的杂质倒扣法及用差示扫描量热(DSC)法测定纯度,使标准品定值结果更接近真值。结果表明:该法的检测下限(LOQ):39.38ng/μL,线性相关系数r=0.99995,回收率:99.96%～102.7%,检测精度RSD:0.032%～2.043%。     

抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体体外生物学活性检测方法的优化及验证

目的优化抗肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)单克隆抗体体外生物学活性的检测方法,并进行验证。方法对TNF-α单克隆抗体体外生物学活性检测方法中的结晶紫染色液浓度、细胞浓度、放线菌素D(Act D)浓度及TNF-α杀伤浓度进行优化,并对该方法的精密度及专属性进行验证。绘制质量控制图,对抗TNF-α单克隆抗体样品进行20次重复检测。结果结晶紫染色液、细胞浓度、Act D和TNF-α的最适浓度分别为0.2%、1.5×105个/ml,1 ng/ml和0.8μg/ml。同一人员于不同日6次重复测定参考品的半数有效浓度(ED50)均值为(44.18±6.858)ng/ml,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为15.522%;不同日由3位不同人员重复测定参考品的ED50均值为(41.19±3.05)ng/ml,RSD值为7.40%;在TNF-α浓度一定的情况下,随着抗TNF-α单克隆抗体和阳性对照Humira浓度的降低,细胞的存活率随之降低,其他抗体无此现象。抗TNF-α单克隆抗体样品的20次测定结果均成立。结论成功优化了抗TNF-α单克隆抗体体外生物学活性检测方法的条件,该方法具有良好的精密度及专属性。     

4－氨基安替比林比色法测定水中苯胺类

基于苯胺与４－氨基安替比林的显色反应提出一种新的苯胺测定方法。本方法可以测定浓度为０．０２～４０ｍｇ／ｌ的苯胺水样，方法的回收率为９５．９％～１０２％，相对标准偏差为０．６３％～１．９７％。     

浅析地表水中挥发酚测定的影响因素

国标中规定用4—氨基安替比林萃取光度法测定水体中挥发酚,该方法适用于饮用水、地表水和地下水较低浓度水样中挥发酚的测定。此方法灵敏度高、精密度好,但实验空白值、试剂的纯度等因素对测定结果产生较大影响。文章对该方法测定挥发酚的几种影响因素进行了探讨。     

药用胶塞中二丁基二硫代氨基甲酸锌的 高效液相色谱分析方法研究

建立高效液相色谱(HPLC)法测定药用胶塞中二丁基二硫代氨基甲酸锌的残留量的方法。药用胶塞浸于液氮脆化后粉碎,经四氢呋喃-乙腈(体积比为10∶90)超声提取制得供试品溶液。以四氢呋喃-乙腈(体积比为35∶65)为流动相,供试品溶液经SunFire C₁₈色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5 μm)分离后,用254 nm检测波长进行HPLC测试。试验结果显示：二丁基二硫代氨基甲酸锌的质量浓度在20～750 μg·mL^-1范围内与HPLC峰面积的线性相关性良好,相关因数为0. 999 9;高、中、低质量浓度的供试品溶液的HPLC峰面积的相对标准偏差小于3%,测试精密度高;本方法检出限和定量限分别为20和30 ng,加标回收率为98. 84～102. 58%,供试品溶液在6 h内稳定。本方法简便、准确、灵敏、稳定,适用于测定药用胶塞中二丁基二硫代氨基甲酸锌的残留量。     

头孢卡品前体酸的合成

头孢卡品前体酸是合成盐酸头孢卡品酯的重要中间体,以7-氨基头孢烷酸为起始原料,经水解反应得3-脱乙酰基-7-氨基头孢烷酸,再与（Z）-2-（2-叔丁氧羰基氨基噻唑-4-基）-2-戊烯酸、二异丙胺作用得到头孢卡品前体酸。总收率70％以上,纯度98％以上。     

戊型肝炎病毒IgG抗体国家参考品的建立

目的制备戊型肝炎病毒IgG抗体国家参考品。方法从我国多省血液中心、采浆站收集血清、血浆样品300份,应用国内外5家HEV IgG抗体诊断试剂进行筛选,制备HEV IgG国家参考品,并对参考品的稳定性及适用性进行检测。结果制备了HEV IgG国家参考品,其中阴性参考品30份;阳性参考品10份;灵敏度参考品1份,依据HEV IgG国际标准品进行标化,定量为3 U/ml;精密性参考品1份。参考品经4℃及室温放置10 d,37℃放置7 d,以及反复冻融3次后,测定结果与-20℃放置参考品检测结果一致,稳定性良好。5个厂家试剂对参考品的检测结果显示该参考品具有较好的适用性。结论制备了戊型肝炎病毒IgG抗体国家参考品,为提高诊断试剂的质量奠定了基础。     

HPLC法测定L-丙氨酸甲酯盐酸盐中L-丙氨酸含量

建立了HPLC法分离测定L-丙氨酸甲酯盐酸盐中L-丙氨酸含量。色谱条件为:Shim-packVP-ODS柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-NaH2PO4水溶液,NaH2PO4溶液浓度为0.05mol·L-1、pH值为6.50(H3PO4调节),甲醇与NaH2PO4溶液体积比为1∶9;流速0.80mL·min-1;柱温为30℃;检测波长为210nm;进样量5μL。该方法的建立为L-丙氨酸甲酯盐酸盐的测定提供了新方法。