多重抗药性突变株中α－淀粉酶高产菌株选育

以解淀粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｅｆａｃｉｅｎｓ）Ａ－４为出发菌株，经诱变处理，选育多重抗药性突变株。研究结果表明，抗药性突变株α－淀粉酶产量提高的正变率和正变幅度明显大于非抗药性突变株，负变率和负变幅度也较高。经ＮＴＧ和ＮＴＧ－ＵＶ诱变处理，获得一株林可霉素、Ｄ－环丝氨酸和万古霉素多重抗性突变株ＬＣＶ＿５（Ｌｉｎ￣ｒ，Ｃｓ￣ｒ，Ｖｍ￣ｒ），其α－淀粉酶活力比出发菌株Ａ－４提高３２．５％，发酵周期短，摇瓶为４０ｈ，酶活力达４６１ｕ／ｍｌ．     

β—甘露聚糖酶水解植物胶条件的研究

由地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ＬＩｃｈｅｎｉｆｏｒｍｓ）ＮＫ－２７菌株产生的胞外β－甘露聚糖酶在４０℃，ＰＨ６．５－７．０，酶液终浓度１０ｕ／ｇ的条件下，酶解１％魔芋粉和瓜儿豆胶胶液１ｈ后，所获得的酶解产物经薄板层析（展层剂：正丁醇：吡啶：水＝６：４：３，显色剂：苯胺－二苯胺－磷酸）检测表明为单糖和低聚糖。     

β－甘露聚糖酶水解植物胶条件的研究

由地衣芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｌｕｓＬｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株产生的胞外β－甘露聚糖酶在４０℃，ｐＨ值６．５～７．０，酶液终浓度１０ｕ／ｇ的条件下，酶解１％魔芋粉和瓜儿豆胶胶液１ｈ后，所获得的酶解产物经薄板层析（展层剂：正丁醇：吡啶：水＝６：４：３，显色剂：苯胺－二苯胺－磷酸）检测表明为单糖和低聚糖。     

U．V．诱变法选育pof~－糖化酵母

ＧＹＮＢ培养基中肉桂酸浓度达到１００μｇ／ｍｌ时，酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｖｉｓｉａｅｐｏｆ~－ｓｔａ）的生长受到抑制，而糖化酵母（ＳａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔｉｃｕｓＰＯＦ１ＳＴＡ）能够生长。用紫外线诱变糖化酵母，在ＧＹＮＢＳＣＡ１００培养基平板上检出ｐｏｆ~－糖化酵母营养缺陷株。经糊精发酵试验、模拟啤酒发酵试验、ＣＯ＿２失重试验及糖化酶活性比较，选育出三株性能优良的糖化酵母单倍体（ｐｏｆ~－ＳＴＡ），发酵速度快，糖化酶活性略低于出发菌株。发酵的啤酒用“两杯法”进行品评，酒体丰满，香气新鲜，略带果酒味，无酚臭味。     

U.V.诱变法选育pof—糖化酵母

ＧＹＮＢ培养基中肉桂酸浓度达到１００μｇ／ｍｌ时，酿酒酵母（Ｓａｃｃｈｑｒｏｍｙｅｓ ｃｅｒｖｉｓｉａｅｐｏｆ－ｓｔａ）的生长受到抑制，而糖化酵母（Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｅｓ ｄｌａｓｔａｔｉｃｕｓ ＰＯＦ１ＳＴＡ）能够生长。用紫外线诱变糖化酵母，在ＧＹＮＢＳＣＡ１００培养基平板上检出ｐｏｆ－糖化酵母营养缺陷株。经糊精发酵试验、模拟啤酒发酵试验ＣＯ２失重试验及糖化酶活性比较，选育出三株性能优良的糖化酵     

玉米淀粉深层发酵生产L－乳酸

本文报道了使用米根霉（ＲｈｉｚｏｐｕｓＯｒｙｚａｅ）ＴＬ－５２７－９菌株用玉米淀粉深层发酵生产Ｌ－乳酸。探讨了不同碳源、氮源、底物浓度、液化条件、通气量、种龄对Ｌ－乳酸生成的影响，在３Ｍ３发酵罐中，当玉米淀粉投料浓度为１３％时，７罐平均产Ｌ－乳酸９．４１ｇ／１００ｍｌ，对糖转化率７９．５５％。发酵液经分离提取精制，Ｌ－乳酸纯度达９８％以上。同时在研究过程中利用高压液相色谱测定了Ｌ－乳酸代谢变化。本结果表明米根霉ＴＬ－５２７－９菌株具有Ｌ－乳酸产率高和发酵快的特点。     

玉米淀粉深层发酵生产L－乳酸

本文报道了使用米根霉（ＲｈｉｚｏｐｕｓＯｒｙｚａｅ）ＴＬ－５２７－９菌株用玉米淀粉深层发酵生产Ｌ－乳酸。探讨了不同碳源、氮源、底物浓度、液化条件、通气量、种龄对Ｌ－乳酸生成的影响，在３Ｍ３发酵罐中，当玉米淀粉投料浓度为１３％时，７罐平均产Ｌ－乳酸９．４１ｇ／１００ｍｌ，对糖转化率７９．５５％。发酵液经分离提取精制，Ｌ－乳酸纯度达９８％以上。同时在研究过程中利用高压液相色谱测定了Ｌ－乳酸代谢变化。本结果表明米根霉ＴＬ－５２７－９菌株具有Ｌ－乳酸产率高和发酵快的特点。     

糖化酵母在干啤酒生产中应用的研究（Ⅰ）──具有糖化酶活性和去除POF1基因的糖化酵母的选育

比较了多株单、双倍体糖化酵母，选出糖化酶活性及发酵度较高的糖化酵母单倍体──Ｓｏｃ．ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ２６０６７－４４。同时发现糖化酵母单倍体菌株的酶活性高于二倍体菌株。含有ＰＯＦ１基因的糖化酵母（ｐｏｆ＋表型）可脱羧肉桂酸形成苯乙烯，ｐｏｆ－菌株无此能力。通过气相色谱检测肉桂酸－酒花麦汁发酵液中的苯乙烯含量，可以鉴别出去除ＰＯＦｌ基因的菌株。本文利用酵母菌的群体杂交法，通过Ｓ．ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ２６０６７－４４与酿酒酵母单倍体杂交，获得１株糖化酶活性及发酵度较高，并且去除了ＰＯＦ１基因的单倍体菌株Ｈ－３（２）－２（ａ，ＳＴＡ，ｐｏｆ－）·     

提高黑曲霉糖化酶活力的研究：II.浓醪发酵技术

以黑曲糖化霉ｓｙ８９－１为出发菌株，采用亚硝基胍（ＮＴＧ）处理，获得适合於浓醪发酵的变异株ｓｙ８９－２，在玉米面，淀粉总浓度为２６％培养基中，５吨罐发酵１４０小时糖化酶活力达到２４０００ｕ／ｍｌ左右。     

二种重组α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中降低双乙酰的作用

利用已构建的含有短芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｂｒｅｖｉｓ）和产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、α -乙酰乳酸脱羧酶（α -ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ,α -ＡＬＤＣ）基因的工程菌株 ,并使它们分别在大肠杆菌中高效表达 ,获得重组α -ＡＬＤＣ。在实验室 ,用２Ｌ体积的麦芽汁进行啤酒生产试验 ,添加２种重组α -ＡＬＤＣ后 ,使啤酒中的双乙酰含量快速下降到或始终保持在０．１ｍｇ／Ｌ以下。证明得到的重组α -ＡＬＤＣ能有效地降低啤酒中双乙酰含量。这２种重组α -ＡＬＤＣ可进一…     

生乳中芽孢杆菌属芽孢的分布

生乳中芽孢杆菌属芽孢的分布龟井俊郎［日］等设定牛乳等低酸性食品的加热杀菌条件．必须把污染原料的微生物，尤其是把耐热强的细菌芽孢列为指标，并将其杀死为目的。形成细菌芽孢的有芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）；棱状芽孢杆菌（Ｃｌｏｓｌｒｉｄｕｍ）；芽孢乳杆菌（...     

溶栓纳豆菌的筛选与应用

为开发具有特定生理活性的新型纳豆保健品,从酱豆、豆豉及纳豆中分离和筛选到５株明显纤溶活性的芽孢菌株,其中ＮＫ－５菌株活性最高,故被用作纤溶活性纳豆生产菌。经鉴定ＮＫ－５菌株为枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｓｔｉｌｉｓ）,该菌株的重要特点是产生强力纤溶酶和大量胞外粘质。后者经鉴定为ｒ－多聚谷氨酸。用ＮＫ－５菌株试制的纳豆既有日本纳豆典型的感官特征和营养组成,还具有很高的纤溶活性,其酶活性在贮存中     

耐盐脱毛蛋白酶产生菌的研究：Ⅰ.耐盐脱毛蛋白酶产生菌的筛选

从已经开始掉毛的盐腌猪皮上筛选到一株可在８％盐浓度下生长的耐盐菌，该菌产生的蛋白酶具有较好的脱毛性能。经初步鉴定为芽孢杆菌，命名为Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ｎｏ８１３。     

碱性脱毛蛋白酶产生菌的选育

从富含蛋白质的土壤中筛选出的碱性蛋白酶产生菌，命名为Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．８（简称为Ｎｏ．８）。Ｎｏ．８菌能在ｐＨ６￣１２且含有较高浓度钙离子条件下生长并产酶，与目前的碱性蛋白酶生产菌如地衣芽孢杆菌２７０９相比，它具有较强的耐碱性和耐钙离子性。培养基起始ｐＨ值为７．５，接种菌龄为１８ｈ种子液２％，在３５￣３７℃，培养４８￣６０ｈ的条件下，Ｎｏ菌产生的蛋白酶活力可稳定在１７００￣１８００ｕ／ｍｌ，     

红曲色素、乳酸链球菌素、山梨酸钾对乳酸菌株的影响

本实验对乳酸发酵香肠所用菌株植物乳杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍ）和啤酒片球菌（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｕｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）在生长和产酸方面受红曲色素、乳酸链球菌素（Ｎｉｓｉｎ）、山梨酸钾的影响进行了研究，实验证明１６００ｐｐｍ红曲色素对这两株菌的生长及产酸在４８ｈ内影响不大；Ｎｉｓｉｎ对这两株菌的生长及产酸均有较大影响，而且啤酒片球菌比植物乳杆菌对Ｎｉｓｉｎ更敏感：山梨酸钾对这两株菌的生长产酸没有显著影响。这一实验结果为３种物质加入到发酵香肠中代替亚硝酸盐的可行性提供了实验参考。     

糖化酵母在干啤酒生产中应用的研究（Ⅰ）：具有糖化酶活性和去除POF…

比较了多株单、双倍体糖化酵母，选出糖化酶活性及发酵度较高的糖化酵母单倍体－Ｓａｃ．ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ２６０６７－４４。同时发现糖化酵母单倍体菌株的酶活性高于二倍体菌株。含有ＰＯＦ１基因的糖化酵母可脱羧肉桂酸形成苯乙烯，ｐｏｆ－菌株无此能力。通过气相色谱检测肉桂酸－酒花麦汁发酵液中的苯乙烯含量，可以鉴别出去除ＰＯＦ１基因的菌株。     

L-异亮氨酸的发酵条件

从黄色短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＡＴＣＣ１４０６７出发，选育获得一株Ｌ－异亮氨酸高产菌ＺＱ－４．试验结果证明，生物素是ＺＱ－４菌株唯一必需生长因子，生物素或玉米浆用量分别为５０μｇ／Ｌ和２０ｍＬ／Ｌ时可得到较高的产酸率。为了获得较高的Ｌ－异亮氨酸积累量，培养基中葡萄糖质量浓度为１４０ｇ／Ｌ，硫酸铵用量为４０ｇ／Ｌ时较为适宜；以适当的摇瓶装液量改善通风状况可明显提高产酸率。在适宜的发酵条件下，ＺＱ－４经摇瓶发酵培养３ｄ，Ｌ－异亮氨酸积累量可达２８～３０ｇ／Ｌ．     

啤酒酵母融合株QSB—Ⅺ6的生产性试验

ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓＣｅｒｅｖｉｓｉａｅＱＳＢ－Ⅺ６菌株系酵母菌种ＬＱ１６与ＱＳＢ７的灭活原生质体融合株。ＱＳＢ－Ⅺ６菌株应用于车间生产中，成品酒的各项理化指标均已达到国家优质酒标准，其中双乙酰值平均在０．０６ｍｇ／ｌ以下，真正发酵度平均为７１．８５８％。该融合株凝聚性强，酒液口味独特，清淡爽口。经多次重复试验证明，该菌株各项优良性状稳定，非常适合于规模化生产。     

里氏木霉液体发酵法生产纤维素酶

通过比较几株霉菌产纤维素酶活力，发现里氏木霉ＲｕｔＣ－３０活力最高；采用Ａｖｉｃｅｌ与麸皮复合碳源，以及使用ＫＨ２ＰＯ４－Ｋ２ＨＰＯ４缓冲系统控制发酵液ｐＨ，２８℃摇瓶发酵６ｄ，最高酶活达到ＣＭＣａｓｅ１００－１２５Ｕ／ｍｌ，ＦＰＡ９－１２Ｕ／ｍｌ。采用２．５升发酵罐培养，通过控制ｐＨ和溶氧，纤维素酶活力为ＣＭＣａｓｅ１３３．４Ｕ／ｍｌ，ＦＰＡ１１．６７Ｕ／ｍｌ。用硫铵盐析法提取制得纤维素酶干粉，其活力为ＣＭＣａｓｅ３０７４．９Ｕ／ｇ，ＦＰＡ１６６．７Ｕ／ｇ。     

葡萄糖的化学发光检测法及对发酵过程糖耗曲线的测定

本文首次将葡萄糖和Ｃｕ~（２＋）的氧化反应与Ｃｕ~（２＋）催化下鲁米诺和Ｈ_２Ｏ_２的化学发光反应偶联，建立了葡萄糖的化学发光（ＣｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅＣＬ）检测法，并成功地测定了酒精酵母发酵过程中的糖耗曲线。该方法操作简便，线性范围宽（１０~（－６）～１０~（－３）ｍｏｌ／Ｌ）。Ｆ－检验结果表明，ＣＬ法的测量精度明显高于传统的２，５－二硝基水扬酸比色法（ＤＮＳ法）。ＣＬ法的变异系数和最低检测限分别为２．６％和２．３×１０~（－６）ｍｏｌ／１（０．２ｍｌ，８３ｎｇ），均大大小于ＤＮＳ法的变异系数（５．０％）和最低检测限（１．１１×１０~（－５）ｍｏｌ／Ｌ，３ｍｌ，６μｇ）。