中国曲中凝乳酶高产菌株的筛选及产酶条件的研究

目的:从中国曲中筛选凝乳酶高产茵株以代替小牛皱胃酶作凝乳剂.方法:采用酪蛋白平板进行初筛,测定茵株发酵产酶活力并进行复筛,研究其产酶发酵条件.结果:经多次复筛选育出1株高产凝乳酶活力茵株 Rhizopus arrhizus F34.碳源种类对该菌株产酶影响较大,无机氮源对产酶有抑制作用;MgSO4、FeSO4、ZnSO4对产酶也有较大的抑制作用,CaC12、KC1有利于凝乳酶的产生;pH、发酵温度和发酵时间对F34菌株产酶影响显著.结论:F34菌株产凝乳酶的最佳发酵培养基是:米粉麸皮水解液4.5%、豆粉水解液4.0%、CaC12 0.3%、KC10.5%;最适发酵条件:初始pH 4.5,发酵温度34℃,培养时间60 h.     

产脂肪酶菌株的筛选及产酶条件优化

从土壤样本中分离出一株具有较高活力的产脂肪酶菌株,初步确定为假单胞菌属。对该脂肪酶产酶条件进行优化,最佳碳源为糊精、氮源为硫酸铵,最适发酵温度为30℃,最适起始pH为7.0。     

脂肪酶产生菌产酶条件的研究

对脂肪酶产生菌进行了筛选,并对优势菌株杆菌的产酶条件进行研究.研究包括培养基组成(碳源、氮源、无机盐)、初始pH值等影响因素.通过正交试验,获得了较为优化的脂肪酶产酶条件,获得的最大酶活为68.58 U/mL.     

红曲米中凝乳酶产生菌的筛选及液态发酵条件的优化

红曲米是我国古代流传下来的一种传统添加剂,红曲米中微生物所产凝乳酶具有凝乳作用.采用酪蛋白平板法和Arima时间法筛选出了1株产生凝乳酶能力强的菌株M5.通过正交试验,对该霉菌产凝乳酶发酵条件进行了初步优化, 结果表明,PDA 培养基是该霉菌产凝乳酶的最佳培养基,最佳培养条件为温度30℃、转速为160 r/min、振荡培养72 h,凝乳活力可达到150.6 SU.     

产菊粉酶菌株的筛选及产酶条件优化

从盐碱地菊芋根际土壤中筛选出112株产菊粉酶菌株,并从中得到一株酶活较高的真菌A-6,经菌落观察以及采用真菌通用引物ITS1和ITS4 PCR扩增RNA基因序列,测序鉴定结果为烟曲霉Aspergillus fumigatus。对其产酶条件进行单因素分析结果显示,真菌A-6的pH耐受范围较广,且具有一定的耐盐性。经正交实验进行产酶条件优化,确定了A-6的最佳产酶条件为菊芋提取液（EJA）100g/L,酵母膏（YE）25g/L,NaCl为5g/L,NH4H2PO45g/L,pH为5,30℃,170r/min下振荡培养3d,酶活最高为13.29U/mL。      

高产蛋白酶菌株的筛选及产酶条件优化

从山西临汾汾河滩涂的表层土壤中分离到22株产蛋白酶菌株,用检测蛋白酶产生水解圈和蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出一株高产蛋白酶菌株P5,并通过正交试验对其产酶条件进行了研究。结果表明,影响P5菌株发酵产酶因素的主次顺序为培养温度、接种量、培养时间;影响P5菌株发酵培养基组成因素的主次顺序为氮源含量、起始pH值、碳源含量;确定的P5菌株的最佳产酶条件为,在以30 g/L葡萄糖为碳源,50 g/L蛋白胨为氮源,起始pH7.0的最适产酶培养基中,培养温度35℃,接种量为8%的条件下发酵培养48 h,具有最大产酶量,其蛋白酶活力可达129.2 U/mL。     

浓香型白酒产糖化酶菌株筛选及产酶条件研究

利用透明圈法从浓香型白酒曲房空气中筛选得到1株产糖化酶能力较强的菌株（J8M．53）,液体培养96h后,糖化酶活性可以达到887u／mL。研究发酵条件对该菌株产糖化酶能力影响,结果表明：虽然该菌株产糖化酶的最适初始pH值、培养温度和最佳碳源分别为5℃、30℃和可溶性淀粉,但在pH值为4,培养温度为40℃时酶活依然保持在较高的水平,且菌株对其他各碳源都有一定的利用。该菌株属于好氧菌或者兼性厌氧菌,对氧的需求量较大。另外,该菌株对酒精有一定的依赖性,并具有较强的耐酒精能力,当培养液中酒精浓度6％vol时,菌株的糖化酶活性最高,酒精浓度为12％vol时的糖化酶活性是最大值的74％。     

产纤维素酶菌株的筛选及产酶条件的优化

为了得到产酶性能好且稳定的菌株,利用CMC平板初筛和摇瓶发酵复筛,从采自不同地区的样品中筛出5株产酶较高的菌株。采用液体发酵方法对其中产酶最好的菌株A6产酶条件进行研究。结果表明,该菌株最适产酶温度为32℃,初始pH值为5.5,接种量为5%,培养时间为4d,微晶纤维素与麸皮配比为7:3,氮源为复合氮源。     

蛹虫草产纤溶酶活性菌株的筛选及产酶条件的研究

蛹虫草是著名的药用真菌,具有扩张气管、镇静、抗心律失常、降血压、抗病原微生物、抗恶性肿瘤等多种药理活性。本研究采用蛋白纤维平板法筛选出具有溶纤活性的蛹虫草菌株,通过综合分析,选择产纤溶酶比活性最高的菌株,并对该菌株的产酶条件进行了优化。研究结果显示:菌株产酶最佳营养条件的组分为2%葡萄糖,2%蛋白胨,碳氮比为1/1;最佳环境条件为温度25℃,pH为6,装液量60 mL,发酵周期9 d,接种量2%,转速150 r/min。在此条件下,发酵液纤溶酶活力可达到111.85 U/mL。     

三株产几丁质酶菌株的筛选、产酶条件优化及水解虾壳的研究

目的:筛选鉴定产几丁质酶的菌株并优化其发酵条件,最终应用于虾壳降解研究。方法:以盐城市滩涂海泥为样品,利用平板筛选水解几丁质的菌株,运用生物信息学方法鉴定菌株,通过单因素优化其发酵条件,并将筛选得到的菌株和优化后的发酵条件用于虾壳发酵。结果:鉴定得到三株显著降解胶体几丁质的菌,分别是发光杆菌（Photobacterium sp. LYM-1）、需钠弧菌（Vibrio sp. WM-1）和希瓦氏菌（Shewanella sp. ZXY-1）;优化发酵条件:发光杆菌的碳源为几丁质10 g/L,氮源为NH₄Cl 2.0 g/L,接种量为3%,发酵液pH为6.5,温度为32 ℃,发酵1 d酶活最高为15.37±0.55 U/mL,是优化前的4.37倍;需钠弧菌的碳源为几丁质10 g/L,氮源为NH₄Cl 2.0 g/L,接种量为3%,发酵液pH为7.5,温度为22 ℃,发酵2 d酶活最高为40.82±6.03 U/mL,是优化前的1.60倍;希瓦氏菌的碳源为几丁质10 g/L,氮源为(NH₄)₂SO₄ 2.0 g/L,接种量为3%,发酵液pH为6.5,温度为22 ℃,发酵1 d酶活最高为25.64±3.29 U/mL,是优化前的2.47倍;三株菌均能利用虾壳产几丁质酶,但利用效率均低于几丁质,酶活力分别为10.25±0.95、32.16±2.25和21.81±4.27 U/mL。结论:本研究从盐碱地筛选得到三株产几丁质酶的菌株,优化后酶活力均得到提高,且均能利用虾壳产几丁质酶,为发酵虾壳制备几丁质酶提供新的菌株来源。     

高产α-转移葡萄糖苷酶菌株的选育及其产酶条件研究

α-转移葡萄糖苷酶是生产低聚异麦芽糖的关键酶。本文成功选育一株高产a-转移葡萄糖苷酶菌株ASP-2。并对该菌株进行了固态发酵条件优化，结果表明：麸皮和水的质量比为1：1，35℃培养48h时产酶量及酶活较高，ASP-2菌株生长的最适pH值为6．0，碳源和氮源不是该菌株在此培养基中产酶的必需元素，从降低生产成本的角度考虑，可以不用。     

大豆异黄酮糖苷水解酶高产菌株的筛选

采用选择平板分离、初筛,摇瓶发酵复筛;从保藏菌种和豆豉分离茵中筛选得到一株能高产大豆异黄酮糖苷酶的菌株——03。该菌在培养基组分为玉米芯3％;豆饼粉0．2％;KH2PO40．4％;CaCl20．04％;MgSO4;7H2O0．04％;自然pH,接种量为10％,培养温度为30℃,培养周期为60hr的培养条件下,其酶活力可达388．572U／ml。     

产腈水合酶菌株的驯化选育及其产酶条件的优化

以Rhodococcussp YL 1为出发菌株 ,通过逐渐增加培养基中丙烯腈的浓度重复继代培养 ,得到 1株酶活为 79 8U/mg的腈水合酶高活力菌株YL 2 ,酶活比出发菌株YL 1提高了 87%。对菌株YL 2的产酶条件进行了优化。结果表明 ,葡萄糖、诱导剂脲、Co2 + 及pH是影响腈水合酶高效表达的主要因素。在葡萄糖浓度为 2 0g/L ,诱导剂脲的添加量为 0 0 6g/L ,钴离子加入量为 0 3g/L ;培养温度为 30℃ ,培养基初始 pH为 7 0的条件下培养 4 0h后 ,酶活可达 134 5U/mg ,比优化前提高了 6 9%。     

粒毛盘菌培养条件及其产色素条件初步研究

选择成熟的盘菌子实体进行组织分离,获得25株纯培养物。对其中的L.brasiliense84-2、L.sclerotii88-2、L.singerianum95-1培养条件进行初步研究,结果表明,这三株菌株生长的最适条件为:马铃薯250g/L,葡萄糖20g/L,蛋白胨5g/L,维生素B10.01g/L,25℃,pH5.5;对L.brasiliense84-2产色素条件进行研究,结果表明其产色素的最适条件为:马铃薯250g/L,NaHCO320g/L,KNO35g/L,甘氨酸0.01g/L,pH7.0。     

热稳定性过氧化氢酶工程菌株发酵条件的研究

重组大肠杆菌UM2 1携带来自嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶的基因 ,在以IPTG作为诱导物时 ,在IPTG浓度为 0 75mmol/L、起始 pH6 5、装液量 5 0mL/2 5 0mL三角瓶的条件下 3 7℃诱导 3h ,酶的表达水平最佳 ;在以乳糖作为诱导物时 ,在乳糖质量浓度为 10 g/L、起始 pH7 5、装液量 5 0mL/2 5 0mL三角瓶的条件下 ,3 7℃诱导 5h ,酶的活力最高。乙酸的存在能够抑制酶的表达。工程菌在最适条件下酶活力可达 3 0 0 0 0～ 3 5 0 0 0U/L以上 ,约是原始菌株嗜热脂肪芽孢杆菌的 10倍。工程菌在无选择压力的条件下连续传代 60代 ,基本保持稳定 ,连续传代 10 0代 ,仍有 80 %左右的菌株携带重组质粒。     

可得然多糖生产菌株的筛选、鉴定及其培养条件的研究

可得然多糖是一种可溶性多糖,是由葡萄糖残基以β-1,3糖苷键连接组成的直链无分支葡聚糖.这种多糖被广泛应用在食品行业中.聚合度的不同导致这种多糖具有不同的理化性质.因此发现具有合成可得然多糖的不同微生物资源是非常重要的,但到目前为止,只报道了粪产碱杆菌和农杆菌具有合成这种多糖的能力.研究从土壤中筛选到一株能合成可得然多糖的细菌,通过16S rDNA扩增、序列比对,发现该菌株(Cu-4)是革兰氏阳性的假单胞菌属(Pseudomonas sp.).通过对影响该菌株合成可得然多糖的因素研究,发现葡萄糖是最适碳源,酵母粉是最适氮源,培养基初始最适pH为7.0.文章首次报道了Pseudomonas sp.也能合成可得然多糖.     

球孢链霉菌溶菌酶的产生条件研究

研究了球孢链霉菌S186（Streptomycesglobisporus）溶菌酶的产生条件，球孢链霉菌在由糊精2．0％，大豆蛋白0．4％，多聚股0．2％，NaCl0．7％，KH2PO40．05％，Na2HPO40．1％，CaCl20．01％（起始pH7．5）组成的培养基中，30℃，240r／min振荡培养96h，酶活力达到30．1U／ml。     

小曲酒最佳培菌糖化工艺条件研究

对以大米为原料,传统小曲、纯种根霉曲和耐高温型酿酒高活性干酵母作糖化发酵剂的小曲酒的生产工艺进行了探讨,并对影响小曲酒出酒率和品质的因素（培菌糖化时间、培菌糖化温度和用曲量）作了较深入的研究,确定了小曲酒生产的最佳培菌糖化工艺条件：培菌糖化时间24h;培菌糖化温度30℃-35℃。用曲量：传统小曲0．8％、纯种根霉曲0．4％、耐高温型酿酒高活性干酵母0．15％。     

纤维素酶菌株的选育及其产酶条件

试验以具有一定纤维素酶活力的黑曲霉菌株A．niger598为出发菌株，经紫外光、甲基磺酸乙酪(EMS)的复合诱变，选育出一优良的突变株An—238，其产生的纤维素酶活力是出发菌株的2．48倍。同时对菌株An—238的产酶培养基和条件进行了优化，并最终测得纤维素酶活453U／g。     

谷氨酰胺转氨酶菌株的筛选及其产酶条件研究

利用蛋白质交联-絮凝沉淀性能测定方法,从土壤中分离得到1株高产谷氨酰胺转氨酶(microbial transglutaminase,MTG)的菌株,命名为HF-82,初步确定为链霉菌属。单因素试验确定最适产酶氮源和碳源分别是蛋白胨和葡萄糖,正交试验确定最适发酵培养基为(g/L):葡萄糖25.0,蛋白胨20.0,酵母提取物5.0,Mg SO4·7 H2O 2.0,K2HPO4·3 H2O 2.0,Na H2PO42.0,Ca CO33.0,p H7.0。此发酵工艺条件下,MTG的酶活可达到0.53 U/m L。