湖北省烟草黑胫病菌生理小种研究初报

在湖北省襄樊、恩施等主要烟区采集烟草黑胫病病株样本111个,分离纯化出30个烟草黑胫病菌株。采用游动孢子悬浮液注射接种鉴别寄主和TTZ(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)颜色反应两种方法鉴定其生理小种类型。结果表明,供试的30个菌株在TTZ培养基中的反应皆为红色,有24个菌株在鉴别寄主反应中对L8和NC1071有较强致病力,而对N.nesophila无致病力,应为1号生理小种,占供试菌系的80%,为湖北省优势生理小种;其他6个菌株中有4个菌株对NC1071有较强致病力,但对L8致病力较弱,有1个菌株对L8和NC1071致病力较弱;1个菌株对NC1071致病力较弱,但对L8有较强致病力;6个菌株对N.nesophila无致病力,是否为2号生理小种还是其他致病型,尚待进一步研究确定。     

云南玉溪烟区烟草黑胫病菌的生理小种鉴定及其致病性分析

为明确云南玉溪烟区烟草黑胫病菌生理小种的类别及对主栽品种的致病性,以来源于玉溪市新平县和澄江市的172株烟草疫霉菌为材料,采用TTC法及活体植株接种法明确其生理小种的归属和组群分布,以不同生理小种的烟草疫霉菌株为接种体,研究生理小种鉴定接种技术并验证其可靠性。结果表明,TTC平板上呈现红色的供试烟草疫霉菌株均属于0号或1号生理小种;活体植株接种显示,0号和1号生理小种有149株和12株,分别占比86.63%和6.98%;无致病力及未鉴定出小种归属的菌株分别有2株和9株,分别占比1.16%和5.23%。表明新平县和澄江市烟草黑胫病菌以0号生理小种为主。致病性测定显示,170个菌株对主栽品种KRK26、云烟87和K326均有较强致病力。此外,寄主离体叶片与茎秆轻微致伤后,对烟草黑胫病菌生理小种的抗感反应与活体植株注射接种结果一致,具有同等的鉴别力。说明离体材料致伤接种的方法可用于区分不同烟草品种对黑胫病的抗感性。     

重庆市烟草黑胫病菌生理小种研究初报

在重庆市涪陵、彭水、石柱等烟区采集了40个烟草黑胫病菌菌株,并采用游动孢子悬浮液注射接种鉴别寄主和TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)颜色反应两种方法鉴定其生理小种类型.结果表明,40个菌株对烟草品种L8具有较强的致病力,而对Nicotiana nesophila无致病力;在TTC培养基中皆呈现红色反应,说明供试的40个菌株皆为1号生理小种.     

湖北省恩施州烟草黑胫病菌生理小种研究

１９９５～１９９８ 年从恩施州烟草上采集到黑胫病标样１０２ 个,分离纯化出４６ 个菌系,根据鉴别寄主的病害反应鉴定其生理小种。用游动孢子悬浮液注射１０ 叶期左右鉴别寄主的茎基部,所用鉴别寄主为Ｌ８、Ｎ Ｃ１０７１、Ｎ．ｎｕｄｉｃａｕｌｉｓ和小黄金１０２５。结果表明：４６ 个菌系对Ｌ８、Ｎ Ｃ １０７１ 和Ｎ．ｎｕｄｉｃａｕｌｉｓ无致病力,应为０ 号小种。其中有２０ 个菌系来源于Ｌ８ 杂交种ＭＳＫｙ１４×Ｌ８,说明恩施烟区杂交种ＭＳＫｙ１４×Ｌ８ 由于黑胫病菌生理小种变化而造成的黑胫病发病的可能性很小。本文对于该品种在生产上有一定程度的黑胫病发生的原因做了初步探讨。     

烟草黑胫病菌0号生理小种不同条件下培养特性的研究

研究了烟草黑胫病菌0号生理小种的若干培养性状,为进一步展开与之相关的研究和综合防治提供理论基础。用培养基、光照、菌龄、诱导剂和诱导时间等不同因素研究了对烟草黑胫病菌0号生理小种的生长速度、产孢量和游动孢子释放量等方面的影响。结果表明,燕麦培养基较适于其生长和产生孢子囊,光照限制其生长;在本实验周期内,培养21 d的菌丝较适宜诱导,0.1%KNO3溶液浸泡菌丝有助于孢子囊的产生;经26℃培养72 h后,突降12℃处理0.5 h,结合1%葡萄糖溶液可促使孢子囊释放游动孢子,并延长后者的活动时间。     

云南省烟草疫霉生理小种的初步鉴定

病菌生理小种在不同地区的分布有各自特点, 研究各地的生理小种特点可有的放矢安排品种, 达到防病、抗病的目的。就云南省烟草黑胫病病原进行了分离纯化, 采用根部创伤接种法对部分病原进行了致病性测定与生理小种鉴定。结果表明, 2004年分离的39株烟草黑胫病菌株致病率为22.22%~100.00%, 平均发病率为93.73%, 病情指数2.8~86.1。2005年分离的45株烟草黑胫病菌株致病率为66.67%~100.00%, 平均发病率为96.05%, 病情指数16.7~97.2。2006-2008年对55个地方代表菌株进行生理小种鉴别, 发现55个菌株在不同烟草品种上存在致病力分化, 对同一品种致病力存在差异;确定有50个菌株为0号生理小种, 占供试菌系的90.91%, 说明云南省烟草黑胫病菌优势菌为0号生理小种, 在本次鉴定的供试菌株中未发现1、2、3号生理小种。     

烟草黑胫病菌研究进展(一)

系统综述了烟草黑胫病菌的发现与命名、分类、生物学特征、分布与为害、致病机理、生理特性及寄主范围等方面的最新研究进展。     

烟草黑胫病菌对甲霜灵的敏感性则定

烟草黑胫病菌（Phytophthora parasitica var nicotianae)对甲霜灵的敏感性测定结果表明：所测菌株菌丝生长对甲霜灵都存在不同程度的敏感性,Ec50值平均为0．2132μg/mL,Ec95值平均为6．5623μg/mL,但不同菌株对甲霜的敏感性不同,Ec50值芯围在0．0573－0．08485μg/mL之间,相差15倍左右。Ec95值的范围在2．3393－21．8051μg/mL之间,相差9倍左右。其中以9734－1、9716－3和9706－2的耐药性最明显。甲霜灵对烟草黑胫病菌孢子囊的产生也有明显的抑制作用,5．0μg/mL的甲霜灵对烟草黑胫病菌的产孢抑制率为100％,通过甲霜灵对烟草黑胫病菌继代培养物的测定也证明了烟草黑胫病菌对甲霜灵的耐药性。     

烟草黑胫病菌研究进展(Ⅰ)

系统综述了烟草黑胫病菌的发现与命名、分类、生物学特征、分布与为害、致病机理、生理特性及寄主范围等方面的最新研究进展.     

烟草黑胫病菌研究进展(Ⅱ)

综述了烟草黑胫病菌致病性与生理分化的发现、机制、类型、主要途径、鉴定方法(生理生化法和寄主法)以及交配型的类型和在无性繁殖条件下发生变异的因素等方面的主要研究进展,并对烟草黑胫病菌致病性与生理分化、接种方法进行了比较分析和讨论。     

烟草疫霉拮抗菌筛选、鉴定及发酵条件研究

从毕节8个县市种植烟草的田地采集土壤样品122份,筛选出5 株对烟草疫霉有较强拮抗作用的菌株。其中一菌株抑菌活性最强且拮抗效果稳定,综合形态学、生理生化及分子生物学实验可以将其鉴定为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus ）,记为1205。该菌株现已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO.M2012382。经过对1205菌株的液体摇瓶发酵条件研究,结果表明,1205菌株摇瓶振荡的最适培养条件：培养基为NYBD,接种量为1%,初始pH值为6.0,培养温度为28℃,装液量为20mL/100mL,摇床转速为160r/min,培养时间为28h。     

6种杀菌剂对烟草黑胫病菌的毒力测定

采用生长速率法对"谱克"、"银法利"、"烯酰锰锌"、"敌克松"、"利尔"和"甲霜灵锰锌"6种杀菌剂进行了毒力试验.结果表明:50%"谱克"、68.75%"银法利"和69%"烯酰锰锌"对烟草黑胫病菌菌丝生长均有较好的抑制效果,其中以50%"谱克"的效果最好,其EC50为1.2704 μg/mL;60%"敌克松"、50%"利尔"杀菌剂次之,EC50分别为304.2533 μg/mL和371.1388μg/mL;72%"甲霜灵锰锌"的EC50最高,为610.1751μg/mL.     

烟草黑胫病菌研究进展(Ⅲ)

综述了烟草黑胫病菌抗甲霜灵菌株群体动态及抗性水平 ,抗药性产生的原因 ,抗甲霜灵菌株的生物学性状遗传与变异 ,甲霜灵对烟草黑胫病菌的毒性作用方式 ,烟草黑胫病菌对甲霜灵抗性的遗传稳定性 ,对甲霜灵的抗药性治理策略和核酸分子杂交技术、PCR、RAPD、RFLP、ELISA技术在烟草黑胫病菌研究中的应用以及烟草黑胫病菌毒性遗传等方面的最新研究进展。     

常德发酵米粉中的微生物分离纯化与鉴定

本文对常德发酵米粉中的微生物进行了分离纯化,并用试剂盒对其进行了鉴定.鉴定结果为胚芽乳杆菌（Lactobacillus plantaum）等十二株乳酸杆菌,鸟链球菌（Enterococcus avium）等五株乳酸链球菌,酿酒酵母（Saccharomyces cervisiae）等九株酵母菌.     

土壤中烟草疫霉的分离与量化测定

从温室盆栽接种试验土和烟田土中分别取样，在室温下晾干，研碎并通过１ｍｍ直径的网筛，用选择性培养基土壤稀释平板法和叶片诱饵法分离烟草疫霉菌株；用土壤稀释平板法测定了云南主要烟区土样的烟草疫霉密度。结果看出，连作烟田的病菌密度高于轮作田，低凹烟田高于山地烟田。叶片诱饵法试验表明，以烟茎切片的诱集效果最好，其次是烟叶和马铃薯叶，番茄叶和辣椒叶的诱发效果相似，花生叶诱集不到烟草疫霉。     

烟草疫霉生防细菌的筛选及鉴定

为获得防治烟草黑胫病的生防菌株,通过对峙平板法,从烟田土壤中分离出1株对烟草疫霉具有很好抑菌作用的细菌B40-3.培养3 d后,该菌株对烟草疫霉抑菌带宽度为0.9 cm,抑菌圈半径为2.3 cm,并对其余12种植物病原真菌有很好抑制作用.该菌株在LB液体培养基中,37 ℃,210 rpm条件下培养40 h,OD值达到最大值.依传统生理生化反应鉴定,B40-3属于枯草芽孢杆菌.     

烟草黑胫病拮抗放线菌的分离与筛选

从堆沤过圈肥的土壤中采集样品,用平板法对所采样品进行菌株分离、纯化培养,共获得原始放线菌101株,再通过室内拮抗试验,从随机28株试验菌株中初步获得16株具有一定拮抗作用的菌株。对拮抗效果较好的6株菌株以及抑菌圈较小、但其菌落较大的A15菌株进一步做盆栽防治试验。结果表明,A6的防治效果最好,达到55.26%,其它菌株效果一般。     

不同香料烟品种和品系对烟草黑胫病菌的抗病性研究

以浙江绍兴地区15个香料烟品种和品系对烟草黑胫病菌进行抗病性鉴定,采用游动孢子液灌根接种、茎注射接种和茎伤口菌丝块接种。结果表明,供试的5个亲本和10个杂交后代中,亲本品种沙姆逊、Toy、Argjiro和巴斯马高度感病,杂交后代中Toy×沙姆逊和泰国沙姆逊×巴斯马也较易感病,而沙姆逊×Toy、ms沙姆逊×沙姆逊和巴斯马×沙姆逊3个品系却高度抗病。采用的3种接种方法中,茎伤口接种的病情指数显著高于游动孢子液灌根接种和茎注射接种。      

抑制烟草黑胫病的混合菌株优化

通过正交试验筛选混合菌株有效抑制烟草黑胫病病原菌（Phytophthora parasitica）菌丝的生长,其中1107、1205、1601、5801和7403五株芽孢杆菌（Bacillus）在室内NYBD培养基上培养,参照5因素3水平正交试验设计进行混菌比例优化。结果表明,1107菌株在生物量和抑菌活性方面都表现出了显著性。5株芽孢杆菌（1×108 CFU/mL）的最优组合为芽孢菌株1107、7403、1601、5801的添加量均为1.2 mL,芽孢菌株1205添加量为0.6 mL。在此优化条件下,生物量（OD600 nm值）为3.18±0.02,抑菌圈直径为（24.22±0.68） mm,分别比单独培养的菌株或其他混合菌株都显著提高。     

拟氨基多糖抑菌剂K1、K2对烟草黑胫病原菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)的抑制效果研究

采用生长速率法测定了拟氨基多糖类抑菌剂K1、K2对烟草黑胫病原菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)的抑菌效果。结果表明:K1、K2对烟草黑胫病原菌均有显著的抑制作用,且抑制效果随K1、K2浓度的增大而增强;20 mL/L的K1、K2对烟草黑胫病原菌的抑制率分别为50.58%、84.68%,EC50分别为26.15、4.87 mL/L。