辐射诱导细胞内凝溶胶蛋白变化及其对小鼠氧化损伤的影响

为研究凝溶胶蛋白(Gelsolin)在辐射损伤中的作用,以6、8和12Gyγ射线分别照射BALB/c小鼠和人小肠上皮隐窝细胞(HIEC).于照后不同时间抽提HIEC全蛋白,Western blot半定量法检测胞浆型Gelsolin(cGSN)蛋白相对含量.照射后24h给受照小鼠注射重组人源Gelsolin蛋白,不同照后...     

γ辐射对小鼠脾脏及红细胞的氧化损伤

报道２Ｇｙ６０Ｃｏγ射线照射小鼠后２４ｈ，对其脾脏ＳＯＤ活力及ＬＰＯ含量的影响，以及对小鼠外周红细胞的ＳＯＤ活力及其释放Ｏ_２~－能力的影响。     

瓜氨酸对辐射致小鼠肠道损伤的防护作用及机制研究

电离辐射会导致动物肠道的损伤,瓜氨酸在小肠上皮细胞内合成,同时被证明对肠道具有一定的保护作用。通过构建小鼠急性辐射致肠道损伤模型,设置正常对照组、单纯辐照组以及辐照加瓜氨酸组,研究瓜氨酸的辐射防护作用及机制。实验结果表明：在辐照后连续一周腹腔注射1 g·kg^-1·d^-1的瓜氨酸能够显著延长受照小鼠中位生存期,增加小鼠体重,显著降低小鼠血浆内毒素含量,提高黏着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)和肠道紧密连接(Occludin)蛋白的表达水平,同时降低一氧化氮(Nitric Oxide,NO)和诱导型一氧化氮合酶(inducible Nitric Oxide Synthase,iNOS)的表达量。本实验证明：瓜氨酸可以通过改善受照小鼠肠道屏障完整性,改善肠道屏障功能,缓解亚硝化应激,对电离辐射小鼠肠道损伤具有保护作用。     

耐辐射球菌PprI蛋白对急性放射损伤小鼠防护作用的初步研究

研究耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤的防护作用,初步探讨其作为一种新的抗辐射蛋白的作用机制。将PprI蛋白或生理盐水注射入小鼠肌肉内,观察辐照后第1、7、14、28天小鼠外周血象以及小鼠骨髓、胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡情况。研究结果表明：与生理盐水注射组相比,PprI蛋白注射组外周血白细胞计数于照后第28天显著增高（p〈0．05）;外周血小板数和淋巴细胞百分率于照后第1、7天显著增高（p〈O．05）;PprI蛋白注射组脾脏淋巴细胞凋亡率在照后第1、7、14天明显降低（p〈0．05）;胸腺淋巴细胞凋亡率于照后第14和28天明显降低（p〈0．05）;骨髓细胞凋亡率在照后第1、14和28天明显降低（p〈0．05）;并且骨髓细胞凋亡率于照后第28天基本恢复正常。上述结果初步表明,耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤有着明显的防护作用。     

FL对辐射所致小鼠多脏器损伤的防护作用

采用6.0Gy^60Coγ射线一次全身照射BALB/C小鼠，分别于照前和照后不同时间给予FL或与其他细胞因子G-CSF、IL-11和EPO联合应用，观察其对小鼠外周血细胞计数的影响，以及使用这些细胞因子后受照小鼠心、肝、肾、肺、脾、胸等脏器的组织病理学改变。结果表明，在照前2h给予FL，能加速小鼠外周血细胞尤其是白细胞的恢复，并可减轻照射所致小鼠心、肝、肾、肺、脾、胸腺等脏器的损伤。     

海带多糖对受照小鼠脑血管损伤的保护作用

为观察海带多糖对照射后脑皮层中小胶质细胞及微血管的影响,将120只雌性昆明小鼠随机分为对照组、单纯给药组、照射组及照射给药组,用⁶⁰Co γ射线局部照射昆明小鼠脑部以建立放射性损伤的动物模型。分别于照射后1 d、7 d、14 d,对小鼠进行麻醉,取脑组织,通过免疫组织化学法测定小鼠脑皮层中血管Collagen Ⅳ蛋白及小胶质细胞Iba-Ⅰ蛋白的表达情况。结果表明,海带多糖可在有效抑制脑皮层中小胶质细胞激活的同时减少皮层微血管的丢失,从而进一步减轻小鼠的放射性脑损伤,有望成为一种安全有效的放射防护剂。     

金属硫蛋白对胸腺嘧啶的辐射保护作用

用竞争动力学方法测定了金属硫蛋白清ＯＨ自由基的速率常数，研究了在Ｎ２Ｏ饱和的水溶液中金属硫蛋白对胸腺嘧啶的辐射保护作用。结果表明金属硫蛋白能有效地清除ＯＨ，对胸腺嘧啶有良好的保护作用。对胸腺嘧啶的氧饱和甲酸钠水溶液γ辐解产物分析表明，Ｏ＾－２和Ｈ２Ｏ２不会直接造成胸腺嘧啶的损伤。     

低剂量辐射对小鼠肠道损伤的影响

采用3种不同低剂量(L组0.04 Gy/d、M组0.12 Gy/d、H组0.2 Gy/d)辐射对3组Balb/c小鼠进行连续5天的照射(分别累积照射0.2、0.6、1.0 Gy),设立对照组(NC),照射结束后测定小鼠体重、外周血象、脏器指数、小肠组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、免疫细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α)、DNA损伤、细胞凋亡等指标的变化。通过比较不同低剂量辐射下小鼠肠道损伤指标的变化,以探讨低剂量辐射小鼠肠道损伤最佳照射剂量,为低剂量辐射小鼠肠道损伤模型的建立提供科学依据。结果表明,连续照射5天后,各照射组相比于对照组,小鼠体重、脏器指数均有不同程度下降(脾脏指数L组p＜0.05、M、H组p＜0.01);小肠组织中MDA含量明显升高(L组p＜0.05、M、H组p＜0.01);SOD含量有不同程度下降;TNF-α、IL-2、IL-1β和IL-6作为代表性促炎因子呈剂量依赖性升高(IL-1β:M、H组p＜0.05,IL-2:M组p＜0.05、H组p＜0.01,TNF-α:M、H组p＜0.05);M、H组有明显DNA损伤及细胞凋亡。通过以上结果得出本次低剂量辐射小鼠肠道损伤模型的最佳照射剂量及方法为0.12 Gy/d连续照射5天累积0.6 Gy。     

姜黄素对辐射诱导的胰腺外分泌细胞损伤的保护作用

将大鼠胰腺外分泌细胞(AR42J)分为实验组与对照组,两组细胞根据姜黄素处理水平又分为A/B/C/D/E 5个姜黄素处理组,分别经0、2、4、8、16 μM姜黄素处理,实验组予以一次性大剂量X射线照射(6 Gy),模拟急性辐射损伤事件。照后收集细胞蛋白行免疫印迹试验(Wensten-blot)检测凋亡相关蛋白PARP、BCL-2,应激及能量代谢相关因子HIF-1ɑ、LDHA、PDH表达情况,MTT法检测细胞增殖活力,荧光酶标仪检测细胞ATP及ROS生成情况。清洁级大鼠24只随机分为对照组、单纯加药组、单纯照射组、照射+加药组,予以12 Gy X射线照射或假照射,射后24小时处死并解剖取出胰腺组织,Wensten-blot检查能量代谢相关蛋白表达情况,以探讨姜黄素在胰腺外分泌细胞辐射损伤中的作用及其机制。结果表明,与对照组相比,单纯照射组细胞在受照24 h后,凋亡蛋白PARP表达升高,BCL-2蛋白下调,线粒体膜电位下降表明线粒体受损。辐照促使缺氧诱导因子HIF-1α表达上调,介导糖酵解的关键因子LDHA表达增强,PDH表达下调。细胞增殖活力下降,ROS生成增多,沉默HIF-1表达在一定程度上抑制了辐照诱导的这种能量代谢转变。经姜黄素预处理,纠正了HIF-1α及LDHA的表达上调,部分恢复PDH表达,有效清除氧自由基,并且对细胞的增殖能力及ATP生成具有正向作用。动物实验显示辐照诱导HIF-1α表达加强,调控能量代谢相关蛋白表达发生改变,LDHA表达增强,PDH表达下调;经姜黄素预处理,纠正了HIF-1α上调所介导的能量代谢相关蛋白的表达变化,趋势与细胞实验相符。以上结果说明,胰腺外分泌细胞在电离辐射损伤下,通过上调HIF-1α表达,促使能量代谢发生转变,糖酵解途径加强,而经线粒体的有氧氧化受到抑制。姜黄素通过下调HIF-1α,纠正了辐射诱导的细胞能量代谢紊乱,并有效清除氧自由基,保护线粒体,从而发挥其对胰腺外分泌细胞的辐射损伤的保护作用。     

紫外辐射对磷脂和脂质体的过氧化损伤及胆固醇对过氧化损伤的保护作用

以卵磷脂(L-α-phosphatidylcholine)和以卵磷脂制备的单层脂质体为材料,研究紫外线引发磷脂和脂质体膜的过氧化反应以及胆固醇对过氧化反应的保护作用.用20μmol的L-α-phosphatidylcholine和胆固醇按一定的摩尔比混合制备的磷脂溶液和脂质体,经过紫外线照射后,用硫代巴比妥酸(Thiobarbituric acid,TBA)法检测接受照射的样品中过氧化产物的量.结果表明,磷脂和脂质体过氧化程度随紫外线照射量增加,且由卵磷脂制备的单层脂质体对辐射的敏感性明显强于磷脂.含胆固醇的脂质体的过氧化程度明显低于不含胆固醇,而胆固醇对磷脂无明显保护作用.磷脂和脂质体的过氧化程度与其浓度和照射量都相关,而胆固醇只对脂质体有保护作用.     

当归蛋白对小鼠的辐射防护作用

通过80%硫酸铵沉淀与Sephadex G-50凝胶过滤层析,从当归饮片中得到分子量为18.33 kDa的当归蛋白(命名AP)。用X射线对小鼠进行全身照射至吸收剂量6 Gy,建立急性照射损伤模型,以阿米福汀为对照,监测小鼠的体质量、外周血白细胞数、胸腺指数、脾脏指数、脾集落形成单位(CFU-S)、脾脏表观、脾组织病理分析和脾脏抗氧化活力等指标,检验当归蛋白AP的辐射防护效应。结果表明,当归蛋白AP可使受照小鼠的外周血白细胞数量、胸腺指数、脾脏指数、CFU-S和脾脏的过氧化氢酶活力分别增加135%、103%、23%、219%和180%,改善脾白髓损伤,使其体质量下降率减少94%。结果提示,当归蛋白AP对小鼠具有辐射防护作用。     

融合蛋白PTD-SOD对受紫外线照射豚鼠皮肤损伤的保护作用

采用0.26×10-4W/cm2的紫外线(UVB)照射豚鼠背部皮肤,于照射后给予不同的融合蛋白(PTD-SOD1和PTD-SOD2)霜剂和野生型SOD霜剂涂抹受照部位皮肤,利用数码相机拍摄豚鼠背部皮肤颜色的变化情况,用Photoshop软件通过测量分析皮肤红斑度的变化来反映辐射损伤的程度,以探讨两种融合蛋白和野生型SOD对受照豚鼠的皮肤保护作用。结果表明,照射后立即给予PTD-SOD有较好的保护作用,其效果随给药剂量的增加而增加。PTD-SOD1蛋白对一次性UVB辐射损伤的保护作用最好,野生型SOD蛋白对一次性UVB辐射损伤也有保护作用,其效果与PTD-SOD2蛋白相当。     

骨形成蛋白对小鼠造血型急性放射损伤治疗作用的研究

小鼠经^60Coγ射线6．5－7．5Gy照射后,分别于肌袋内植入纯化牛BMP,或腹腔内注入可溶性rhBMP-2m,或移植Pbk-hBMP-2/NIH3T3人腹腔内,观察动物的30d活存情况,并检测几种造血参数。结果表明,pbBMP（纯化牛骨形成蛋白）、hBMP-2m(重组骨形成蛋白－2多肽）Pbk-BMP-2/NIH3T3 cell line(PBKhBMP-2转基因细胞株）对小鼠6．5、7．0、7．5Gyγ射线照射后急性放射造血损伤有治疗作用：GM－CFU集落形成率、各项造备参数和30d活存率均较对照组有显著性差异（P＜0.01)。本工作结果提示,BMP对成年动物放射所致造血损伤具有治疗作用,其机理与促进已损伤的造血功能的修复作用有关。     

富勒烯衍生物对X射线所致小鼠肝线粒体损伤的保护作用

采用不同剂量(12、20、40、80 Gy)X射线照射昆明种小白鼠,于照前或照后给予富勒烯多大环多胺衍生物(CB),研究富勒烯衍生物对X射线所致小鼠急性肝线粒体损伤的保护作用。结果表明,不同剂量X射线照射可使小鼠肝线粒体氧化受损,表现为线粒体肿胀,发生脂质过氧化反应,产生脂质过氧化物——丙二醛等物质,用富勒烯大环多胺衍生物干预的小鼠可明显减少线粒体肿胀及脂质过氧化物的形成。说明富勒烯大环多胺衍生物有助于减轻辐射引起的线粒体受损,维护线粒体结构和功能的完整性。     

白果清蛋白提取物对γ射线辐射损伤小鼠的保护作用研究

白果清蛋白提取物(Ginkgo albumin extract,GAE)是本实验室首次从白果中分离提取得到的具有较好 抗氧化及延缓衰老活性的水溶性蛋白提取物,本工作探讨了白果清蛋白提取物对8．5 Gy及3．2Gy的γ,射线辐 射损伤小鼠的保护作用。实验结果表明,8．5Gy的γ射线辐射小鼠后,其30d存活率呈显著性下降,辐射对 照组的存活率为0,GAE高剂量给药组为20％;外周血象在辐射后受到不同程度的破坏,与辐射对照组相比, GAE给药组的血象指标下降幅度较小,恢复较快,具有显著性的差异;GAE能显著增加中剂量的γ射线辐射 损伤小鼠血清中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性和DNA含量,显著性促进辐射小鼠体 内受损免疫机能的恢复。结果表明,GAE能通过增强辐射损伤小鼠的抗氧化能力、造血功能及体内免疫功能 来起到对辐射损伤小鼠的保护作用。     

EGCG辐射保护作用的研究

采用MTT方法和脉冲场凝胶电泳方法，以人肝LO2细胞株为研究对象，对没食子儿茶素没食子酸脂（epigallocatechin gallate，EGCG）的辐射保护作用进行了研究。MTT结果表明，EGCG在5－50μmol/L的浓度下，对细胞有明显的保护作用，并对细胞的修复有促进作用；脉冲场凝胶电泳方法结果显示，EGCG作用可减少辐射所致的DNA双链断裂水平。两者均显示EGCG可减少对辐射导致的细胞死亡。     

硒对辐射诱发HPRT基因突变的保护作用

本研究应用细胞质分裂阻滞法,检测了＾６０Ｃｏγ射线对人胚肺细胞ＨＰＲＴ基因突变的损伤效应,分析了硒对γ射一照射所致细胞ＨＰＲＴ基因突变损伤效应的保护作用,人胚肺细胞经不同剂量＾６０Ｃｏγ射线照射后,ＨＰＲＴ基因突变变异子数,在各剂量组与对照组射组相比均明显增加。细胞ＨＰＲＴ基因突变变异子数随着剂量增加而逐渐增加,两者呈良好的线性关系。人胚肺细胞与１＊１０＾－ｍｏｌ／Ｌ硒作用２４ｈ后接受照射,细胞Ｈ     

低剂量微波辐射减轻γ射线对小鼠造血系统的损伤

为探讨低剂量微波与γ射线复合照射对小鼠造血系统的影响,将雄性昆明小鼠随机分为对照组、微波照射组、γ射线照射组及微波与γ射线复合照射组.微波组与复合组小鼠先接受功率密度为120μW/cm2的微波照射,1h/d,持续14 d,第15天给予γ射线照射组和复合组5.0 Gy60Coγ射线一次性全身照射.于照射后3d、6d、9d、12d处死动物,取胸骨及脾脏,对各组病理形态变化进行定量检测和分级.结果显示,单独γ射线与复合照射均可导致骨髓组织经历典型的凋亡坏死、空虚、再生修复和恢复4个阶段的病理改变,但复合组的病变轻于电离照射组,恢复也更快.脾脏系数结果显示,照后9 d、12 d复合组脾脏系数显著高于电离照射组(p<0.05).脾脏病理显示,脾损伤病变过程与骨髓造血组织基本相似,复合组病变轻于电离照射组.本实验表明预先低剂量的微波辐射可减轻γ射线对小鼠造血系统的严重损伤.     

CpG-ODN对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用

本次研究主要探讨CpG-ODN对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用。实验中C57BL/6L小鼠受到5 Gy ¹²C⁶⁺离子全身照射,在照射后急性期计算小鼠脾脏指数,苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色观察脾脏组织结构变化。另外,免疫组化法检测γ-H₂AX蛋白含量以判断脾脏细胞DNA发生双链断裂((Double-strand break,DSB)情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediatedd UTPnickandlabeling,TUNEL)法检测脾脏细胞凋亡水平,荧光标记法检测外周血CD19⁺B细胞数量。结果显示,经¹²C⁶⁺离子照射后CpG-ODN处理,小鼠脾脏指数提高,脾脏红髓萎缩程度减轻,白髓面积增大,其内淋巴B细胞排列密度提高,发生DSB和凋亡的细胞数量减少,外周血CD19+B细胞数量增加。这些表明CpG-OD...