酿造酱油回收油脂的酶法脱酸工艺研究

全大豆酿造酱油经过压榨工序抽取酱油时,可回收部分大豆油脂,但由于油脂氧化和酸败形成的大量游离脂肪酸（FFAs）,导致回收油脂的酸价高达64.68（KOH） mg/g,降低了回收油脂的利用价值。通过单因素及正交试验研究酿造酱油回收油脂的酶法脱酸工艺。结果表明,最佳的酶法脱酸条件为：反应时间12 h,反应温度50 ℃,甘油添加量6.6%,脂肪酶添加量为3%。在该优化工艺条件下,酿造酱油回收油脂的脱酸率高达93.75%,油脂的酸价可降低至2.86（KOH） mg/g,低于GB 2716—2018《食品安全国家标准 植物油》中食用植物油关于酸价的最高指标要求（≤3 mg/g）。进一步研究表明,在该脱酸反应体系中,固定化脂肪酶Novezym 435具有良好的脱酸稳定性。     

酶法改性微藻油脂制备功能性油脂的研究进展

多不饱和脂肪酸是一类对人体健康有益的生物活性物质,微藻油脂富含多不饱和脂肪酸,是天然可食用的潜在油源。利用微藻油脂开发制备型功能性油脂,替代动植物天然功能性油脂,不仅可提高天然功能性油脂的品质,解决供应问题,而且有望得到新的功能性油脂制品。对酶法制备功能性油脂的方法、常见微藻的油脂含量及其油脂的脂肪酸组成进行综述,并对酶法改性微藻油脂制备富含多不饱和脂肪酸的单酰甘油酯、结构三酰甘油酯、功能性磷脂等功能性油脂的研究进展进行了介绍。酶法改性微藻油脂制备功能性油脂是高值化利用微藻油脂的新途径。     

油脂酶法改性研究进展

通过改变油脂结构和组成来提高天然油脂营养性，是油脂深加工主要方向，也是油脂界研究热点。本文详细介绍应用于油脂酶法改性的脂肪酶种类和性质、酶促反应体系以及ＰＵＦＡ富集、结构油脂的酶法加工途径等。     

精炼对水酶法核桃油的品质及其抗氧化活性的影响

以水酶法核桃原油、脱酸核桃油、脱胶核桃油和脱臭核桃油为原料,针对4种油样中功能性成分、理化指标和自由基清除率以及加速氧化试验的结果,分析精炼对水酶法核桃原油品质及其抗氧化活性的影响。结果表明：精炼在一定程度上会降低水酶法核桃原油的有益伴随物含量且减弱油脂的清除自由基能力;为避免油脂过度精炼,核桃原油经脱酸这一精炼步骤后油样的各项理化指标均已满足水酶法一级核桃油质量要求,与核桃原油相比,脱酸核桃油在加速氧化试验中维生素E、β-谷甾醇含量下降幅度较小、氧化稳定性较强;根据加速氧化试验结果推算可知,水酶法核桃原油、脱酸核桃油的货架期至少为312 d。     

脂肪酶固定化新材料

脂肪酶因其在油脂工业中的重要作用而成为酶研究领域的重点。脂肪酶的不稳定性和高昂的价格是限制其广泛应用的主要原因。对脂肪酶进行固定化是增强其稳定性、降低应用成本的关键。改进脂肪酶固定化工艺的一个重要方面就是选择和开发适合相应脂肪酶的固定化材料。从脂肪酶的固定化材料方面,对无机、有机、复合载体等固定化材料进行了综述,特别是对各种新型的固定化材料予以了归纳,对脂肪酶固定化材料的选择有一定的指导意义。     

米糠毛油酶法脱酸的工艺优化

米糠毛油普遍酸价较高,采用常规的脱酸方式存在炼耗高、预处理要求高、营养成分损失大、油品品质差等问题。酶法脱酸可以有效避免上述问题。采用固定化脂肪酶CALB对米糠毛油进行酶法脱酸研究,得到优化工艺条件为甘油与游离脂肪酸摩尔比1∶3、剪切速度25 m/s、剪切时间20min、加酶量50 g/kg、反应温度70℃、反应时间6 h、甘油中水分含量25%、真空度小于1 000 Pa、通氮气,在此条件下酯化率可达92. 5%。     

固定化酶技术在油脂精炼及结构脂制备 过程中的应用研究进展

生物酶技术在油脂精炼和结构脂制备中具有广阔的应用前景，而酶的固定化有利于实现酶的重复利用。为了促进固定化酶技术在油脂行业中的应用，就固定化酶技术在油脂脱胶、油脂脱酸和结构脂制备中的应用研究现状进行了综述，并对研究方向进行了展望。固定化酶技术的应用对于油脂产业提质增效具有积极的作用。未来应围绕新型生物酶的发掘以及生产过程中酶活的保持展开研究。     

水酶法提取油脂研究进展

油脂来源十分广泛,因而高效、安全、环保的提取技术在油脂工业化生产中具有重要的意义。水酶法提取油脂条件温和、绿色、安全、生产工艺简单且所得油脂营养价值较高,在不同油脂原料的提取中具有应用潜力。对水酶法提取油脂的原理和优缺点进行了介绍,重点综述了水酶法在植物油脂、动物油脂和微生物油脂提取中的应用研究进展,以及水酶法与其他辅助手段的联用,以期为水酶法油脂提取技术的发展和应用提供参考。     

酶法酯化脱酸米糠油产品质量与安全性评价

对酶法酯化脱酸工艺所生产的米糠油进行了质量与安全性评价。分别对其特征指标、品质指标、食品安全指标、甘油三酯组成、油脂伴随物含量,以及炼耗、辅料消耗、能耗等工艺指标进行了分析,发现酶法酯化脱酸米糠油的特征指标和质量指标均符合我国米糠油国家标准的要求,其脂肪酸、甘油三酯组成与传统工艺所生产米糠油无明显差异,维生素E、甾醇、角鲨烯、谷维素等有益伴随物保留率更高,反式脂肪酸、3-氯丙醇酯、缩水甘油酯等风险因子生成量减少,且得率大幅度提高,辅料消耗、能耗等显著降低。酶法酯化脱酸工艺所生产的米糠油是一款更安全、更营养的米糠油产品。     

水酶法提取生物油脂的研究进展

本文阐述了水酶法提取生物油脂的研究概况,包括主要的工艺过程和特点以及相关的影响因素,并对当前水酶法提油的研究现状和热点进行了总结,重点关注了水酶法提取微藻油的最新研究进展。提出了水酶法提油发展过程中有待解决的关键问题,并且展望了水酶法提取生物油脂的应用前景。     

Active lactonizing lipase (LipL) efficiently overproduced by Pseudomonas strains as heterologous expression hosts

Pseudomonas sp. strain 109 secretes lactonizing lipase (LipL), which catalyzes efficient intramolecular transesterification of omega-hydroxyfatty acid esters to form macrocyclic lactones. Because Escherichia coli was found to be unsuitable as an expression host due to the predominant formation of inactive LipL-inclusion bodies and a lack of proper secretion machinery which is also required for the formation of active LipL, Pseudomonas strains were surveyed as expression hosts. Pseudomonas sp. strain 109, an original LipL producer, showed a 7.1-fold higher level of active LipL when the lipL gene under the control of tac-lacUV5 tandem promoter was introduced together with a limL gene encoding a LipL-specific chaperon. Pseudomonas aeruginosa ADD 1976 containing a T7 RNA polymerase gene in the chromosome and plasmid-borne lipL-limL genes under the control of T7 promoter showed a 13-fold higher level of active LipL. Several combinations in the number of lipL and/or limL genes on the plasmid were investigated, and (lipL)3-limL was found to be most efficient, yielding a 67-fold greater production of active LipL than that obtained by the wild-type Pseudomonas sp. strain 109.     

醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜固定化脂肪酶的研究

以醋酸纤维素(CA)和聚四氟乙烯(PTFE)为材料制备醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜,采用吸附-交联相结合的固定化方法,用该复合膜固定化脂肪酶。研究温度、吸附时间、酶液质量浓度、交联时间和交联剂体积分数对脂肪酶固定化效率和催化效果的影响,并对固定化酶膜的酶学性质进行研究。得到最佳的固定化条件为：温度25℃、吸附时间2h、酶液质量浓度0.02g/mL、交联时间3h、交联剂(戊二醛)体积分数0.2%,固定化酶最大酶活力为17.2U/cm2。固定化酶膜的酶学性质为：最适温度35℃,比游离酶降低了5℃;最适pH8.5,与游离酶相比pH值向碱性偏移1.0;经10次(10h /次)重复使用后,固定化酶相对酶活力为55.5%。SEM结果显示CA-PTFE复合膜能较好的固定化脂肪酶。     

Regulation of lipid droplet-associated proteins following growth hormone administration and feed restriction in lactating Holstein cows

Lipid metabolism plays a crucial role in the adaptation of dairy cows to periods of energy insufficiency. The objective of the current study was to determine if lipolytic proteins are consistently regulated when energy mobilization is stimulated by different factors. We evaluated 2 models of altered energy balance in mid-lactation Holstein cows, including feed restriction (FR) and administration of bovine growth hormone (GH), by quantifying the abundance and (or) phosphorylation of hormone-sensitive lipase (HSL), perilipin (PLIN), and adipose triglyceride lipase (ATGL). For GH administration, adipose tissue and blood samples were collected 4 d before and 3 and 7 d after administration of GH (n = 20 cows). Similarly, adipose and blood samples were obtained 6 d before and 1 and 4 d after initiation of FR (n = 18 cows). Estimated net energy balance decreased and nonesterified fatty acid concentration increased in both experimental models. Decreased ATGL and PLIN protein abundance was observed with GH administration and FR. Additionally, the abundance of phosphorylated HSL_Ser565 decreased in both models. Decreased abundance of phosphorylated PLIN was observed with GH administration, but not FR. Decreased ATGL protein abundance appears to be a consistent response to energy insufficiency in lactating cows, as this response was also described with negative energy balance at the onset of lactation. In contrast, the abundance of PLIN protein and phosphorylation of HSL using antibodies targeting serine residue 565 of HSL (HSL_Ser565) were altered in the current research, but not at the onset of lactation. Our findings demonstrate that lipolysis is altered through the regulation of multiple proteins, and that this regulation differs according to physiological state in lactating cows.     

根霉ZZ-3脂肪酶发酵条件的优化及酶学性质研究

对根霉ZZ-3脂肪酶产酶条件的优化及脂肪酶酶学性质进行了研究。结果表明,250 mL三角瓶液体培养,培养基装液量100 mL,根霉ZZ-3产脂肪酶的最佳培养基为：黄豆粉3 g/100mL,（NH4）2S040.3 g/100mL,MgS04 0.2 g/100mL,K2HPO4 0.2 g/100mL,花生油0.3 g/100mL,pH自然。在温度28℃、转速150 r/min,摇床培养时间2 d,发酵酶活力达到124.60 U/mL。对该酶的酶学性质进行了初步研究,该酶最适pH7.5,最适反应温度37℃,在pH7～9、温度低于40℃条件下酶活稳定。     

内生黑曲霉产脂肪酶条件研究及其粗酶酶学特性

针对新疆酿酒葡萄中获得的1株产脂肪酶的内生黑曲霉菌株C2J6,研究了该菌株的产酶条件及酶学特性。结果表明,该菌适宜的产酶条件为1%的乳糖为碳源,1%的蛋白胨为氮源,培养基初始pH值为8.0,培养温度35℃,培养时间约72h,此时所产脂肪酶的活力可达18.75U/mL。该菌所产脂肪酶粗酶液的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为7.0,为中温中性酶;在50℃保温1h酶活力保留54.55%,具有良好的热稳定性;在pH值3.0~7.0范围内较稳定,有一定的耐酸性。金属离子Mn2+对酶活力有促进作用,Zn2+、Fe2+、Cu2+对酶活力有抑制作用,K+、Ca2+、Na+、Mg2+对酶活力影响不大。该酶在以葵花油和谷物调和油为底物时,酶活分别为228%和180%,明显高于橄榄油和油烟机废油。     

TLL脂肪酶C末端修饰对其底物选择性的调节作用

本研究以甘油三酯脂肪酶TLL为研究对象,将偏甘油酯脂肪酶AOL的C末端(Y246-H266)与其C末端(I241-P256)替换,获得突变体TLL_CC,并在毕赤酵母X-33中成功地进行了重组表达。乳化橄榄油的水解实验显示,C末端的置换不影响TLL脂肪酶的p H特性,但是TLL_CC的最适反应温度较TLL脂肪酶下降了15℃。这可能意味着长的C末端可以增加酶分子整体的柔性,进而降低其最适反应温度。三油酸甘油酯的水解实验发现,TLL脂肪酶和突变体TLL_CC反应体系中残留的三酯分别为28.31%和48.12%。而酯化合成甘油酯实验显示,TLL_CC催化的反应体系中TAG生成量仅为野生型的56.67%,但DAG的生成量却相同。上述研究表明,TLLC末端的这种置换明显减弱了TLL脂肪酶水解和合成TAG的能力,但并不影响其合成DAG的能力。这说明C末端的氨基酸替换可能对脂肪酶TLL的底物选择性起到调节作用。     

发酵生产脂肪酶的菌株筛选及其应用

采用从大庆日月星油厂附近的土壤中筛选得到产脂肪酶的菌株xjA,在固态发酵的条件下生产脂肪酶,并将所产脂肪酶应用于合成共轭亚油酸甘油酯。本实验利用单因素和正交试验方法确定产脂肪酶的最佳固态发酵条件：在种龄36h的情况下,碳源(麸皮)与氮源(豆粕)质量比(m麸皮:m豆粕)为1:4、V培养基:V加水量 1:1、接种量0.3%、发酵温度29℃、发酵时间3d。在此条件下进行固态发酵,固态培养基中脂肪酶的活力最高,可达1450U/g;所得脂肪酶用于合成共轭亚油酸甘油酯,产物中共轭亚油酸(CLA)接入率可达到13.6%。     

Klebsiella sp.B-36的分离鉴定及产脂肪酶特性研究

从郑州西郊采集的土壤样品中筛选到一株产耐高温酸性脂肪酶菌株B-36,根据其形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析初步鉴定为克雷伯氏茵(Klebsiella sp.).对该菌株产脂肪酶特性研究结果表明:该酶的适宜作用温度为60℃,适宜pH 4.0,该酶在60℃热处理70 min酶活力可保持在80％以上,说明该酶具有良好的热稳定性.同时,该酶在酸性环境中静置lh后还保持70％以上的酶活力,说明该酶在酸性条件下较稳定.金属离子Mg2+、Ca2、Na+以及EDTA对酶有明显的激活作用,Fe3+、Cu2+及ZN2+对酶有抑制作用,K+对酶几乎没有影响.