鳝鱼皮胶原蛋白肽的制备及其抗氧化性能的研究

以新鲜鳝鱼皮为原料,将鳝鱼皮处理成干燥的粉末,采用酶解法提取胶原蛋白肽。在考察酶的种类、pH、酶解温度和酶解时间4个因素提取效果的基础上,进行了实验。优化实验分析结果表明,从鳝鱼皮中提取胶原蛋白肽的最佳工艺条件为:选用碱性蛋白酶,提取酸度为pH=9,提取时间为4h,提取温度为45℃。在上述条件下,冷冻干燥制得的胶原蛋白肽成品为白色粉末,胶原蛋白含量为77.70%。在对胶原蛋白肽的提取工艺进行优化的同时,也对所得的胶原蛋白肽成品进行抗氧化性能的测定,在DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、还原能力、抗脂质过氧化能力和金属离子的螯合能力等方面的实验结果表明,鳝鱼皮胶原蛋白肽表现出良好的抗氧化活性。     

乙酸与胃蛋白酶提取鳗鱼骨胶原蛋白工艺的研究

对鳗鱼骨胶原蛋白的提取工艺进行了研究。采用乙酸和胃蛋白酶提取胶原蛋白,探讨了提取时间、酶量、乙酸浓度和料液比4个影响因素对胶原蛋白提取率的影响。实验结果表明,鳗鱼骨胶原蛋白最佳提取工艺为,采用1:45的料液比0.5mol/L乙酸作为提取剂,加入2.5%胃蛋白酶,在37℃下反应28h,其提取率最高为80.80%。     

淡水鱼皮鱼鳞胶原蛋白粉的成分比较

对淡水鱼皮、鱼鳞胶原蛋白粉的成分进行了分析比较:两者的氨基酸总量、蛋白质、酸溶蛋白、多肽、游离氨基酸含量基本接近,鱼鳞胶原蛋白粉的羟脯氨酸含量、矿物质含量高于鱼皮胶原蛋白粉。      

淡水鱼皮胶原蛋白提取工艺研究（I）

研究了罗非鱼、鳙鱼、草鱼和鲫鱼4种淡水鱼皮胶原蛋白的提取工艺。结果表明，鱼皮用乙醚2次除脂效果显著，除脂率依次为92．4％、95．1％、66．8％和76．7％，除脂后胶原蛋白的提取率和得率都略有增加。除非胶原蛋白的工艺为：先用NaOH浸泡6h，再用NaCl浸泡6h，4种鱼皮胶原蛋白对应的提取率分别为34．4％、28．7％、31．5％和42．5％，得率依次为8．4％、8．0％、8．2％和6．1％，比其他处理相应高出0．4～2．3倍、0．04～1．6倍、0．1～0．9倍和0．07～0．5倍。乙酸的提取效果优于柠檬酸，对应提取率分别为34．8％、23．6％、33．6％、43．0％，得率依次为8．5％、6．6％、8．63％、6．19％，比柠檬酸相应高2．4～4．3倍、1．7～4．0倍。温度对罗非鱼、鳙鱼和草鱼鱼皮胶原蛋白提取影响较大，最佳提取温度都为20℃，其对应提取率依次为34．05％、27．05％、33．38％，得率分别为8．32％、7．54％、8．58％；温度对鲫鱼鱼皮胶原蛋白的提取影响较小，在520℃范围内提取率和得率分别约为42％和6％左右。     

淡水鱼皮胶原蛋白粉的成分分析

对淡水鱼皮胶原蛋白粉的成分进行了分析,结果表明,蛋白质含量91.37%、酸溶蛋白75.20%、多肽67.76%、羟脯氨酸10.47%、氨基酸总量90.55%、游离氨基酸7.44%。      

灌胃纳米超氧化物歧化酶脂质体对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）是一种特发性结肠炎症,会引起腹泻、便血、腹痛等症状,其发病率不断上升。现有研究表明氧化应激是造成UC的重要原因之一,而超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）在缓解UC症状上有一定的效果。因此,本实验通过加热SOD使其自组装形成SOD纳米颗粒（记作ΔSOD）,以提高SOD的生物利用度,通过理化指标分析发现ΔSOD纳米颗粒的活力、细胞跨膜能力以及自由基清除能力较天然SOD均显著提高;再采用逆向蒸发法制备ΔSOD脂质体（记作L-ΔSOD）,并灌胃UC模型小鼠,结果显示,与阳性对照组和模型组相比,L-ΔSOD可以显著改善UC,降低小鼠疾病活动指数评分,恢复小鼠结肠组织状态,增加结肠长度,降低结肠密度和脾脏系数,恢复黏膜上皮完整性;同时L-ΔSOD可以降低结肠组织MDA含量,并通过减少细胞促炎因子质量浓度、提高谷胱甘肽过氧化物酶活力和紧密连接蛋白mRNA水平来改善UC。综上,L-ΔSOD对UC具有较好的改善作用,本实验可为SOD促进人体健康的实际应用提供参考。     

淡水鱼皮胶原蛋白粉的成分分析

对淡水鱼皮胶原蛋白粉的成分进行了分析,结果表明,蛋白质含量91.37%、酸溶蛋白75.20%、多肽67.76%、羟脯氨酸10.47%、氨基酸总量90.55%、游离氨基酸7.44%。     

淡水鱼皮胶原蛋白提取优化工艺研究(Ⅱ)

采用正交实验研究了罗非鱼、鳙鱼、草鱼和鲫鱼4种淡水鱼皮胶原蛋白提取的优化工艺,同时利用eBioService系统分析了纯化胶原蛋白的分子质量和组成。实验结果表明,4种淡水鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺各不相同,在最佳提取条件下,其胶原蛋白提取率依次为36.57%、30.58%、35.14%、45.17%;而得率依次为8.93%、8.52%、9.03%、6.50%。eBio Service系统分析显示4种鱼皮所提取的胶原蛋白电泳区带都与I型胶原蛋白的特征相同,分子质量范围为110～130ku,纯度约为82%～85%。     

淡水鱼皮胶原蛋白提取工艺研究(Ⅰ)

研究了罗非鱼、鳙鱼、草鱼和鲫鱼4种淡水鱼皮胶原蛋白的提取工艺。结果表明,鱼皮用乙醚2次除脂效果显著,除脂率依次为92.4%、95.1%、66.8%和76.7%,除脂后胶原蛋白的提取率和得率都略有增加。除非胶原蛋白的工艺为:先用NaOH浸泡6h,再用NaCl浸泡6h,4种鱼皮胶原蛋白对应的提取率分别为34.4%、28.7%、31.5%和42.5%,得率依次为8.4%、8.0%、8.2%和6.1%,比其他处理相应高出0.4-2.3倍、0.04-1.6倍、0.1-0.9倍和0.07-0.5倍。乙酸的提取效果优于柠檬酸,对应提取率分别为34.8%、23.6%、33.6%、43.0%,得率依次为8.5%、6.6%、8.63%、6.19%,比柠檬酸相应高2.4-4.3倍、1.7-4.0倍。温度对罗非鱼、鳙鱼和草鱼鱼皮胶原蛋白提取影响较大,最佳提取温度都为20℃,其对应提取率依次为34.05%、27.05%、33.38%,得率分别为8.32%、7.54%、8.58%;温度对鲫鱼鱼皮胶原蛋白的提取影响较小,在520℃范围内提取率和得率分别约为42%和6%左右。     

鲟鱼皮胶原蛋白的理化特性研究

本文以俄罗斯鲟鱼皮为原料,采用酸法和酶法提取胶原蛋白,研究了酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶促溶性胶原蛋白(PSC)的蛋白类型、结构、热变性温度和溶解度等理化性质,并与牛跟腱I型胶原蛋白(BATC)进行比较。SDS-PAGE电泳图显示ASC和PSC均包含了两条α链(α1链和α2链),为I型胶原蛋白;傅立叶红外光谱图表明提取的2种胶原蛋白均保存了完整的三螺旋结构,但ASC的有序度相对较高;ASC和PSC的热变性温度分别为32.48℃和32.68℃,低于BATC;在酸性pH条件下(pH 1~4),ASC和PSC溶解度较高,当Na Cl浓度大于2%时,PSC的溶解度较高;扫描电镜显示2种胶原蛋白均为网状结构,ASC的孔径较均匀,且孔径较小。上述结果表明提取方法不同,导致2种胶原蛋白的理化性质具有一定的差异,但都具有较好的热稳定性、溶解性,能形成较好的网状结构,有潜力的作为胶原蛋白的替代来源。     

口服胶原蛋白水解物对皮肤的修复作用

介绍了口服胶原蛋白水解物的吸收利用机制,综述了其在细胞水平、动物实验和临床实验上对皮肤修复作用的研究进展,并对口服胶原蛋白水解物产品的开发应用前景作了展望。     

相对分子质量分布对水解蛋白质型表面活性剂性质的影响

采用AS1.398酶水解明胶不同时间,获得不同相对分子质量分布的水解蛋白质,然后通过酰化反应合成相应的水解蛋白质型表而活性剂.应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析测试技术对水解蛋白质的相对分子质量分布进行了分析,并且对表面活性剂的氨基取代度、起泡力、乳化力、表面张力进行了测试.结果表明高相对分子质量分布的表而活性剂的起泡力和乳化力较强,而低相对分子质量分布的表面活性剂降低溶液表面张力的能力较强,不同相对分子质量分布的表面活性剂具有不同性质的表面活性;可通过控制水解蛋白质的相对分子质量分布,获得不同用途的水解蛋白质型表面活性剂.     

胶原酶解物对双醛淀粉-明胶复合膜性质的影响

本文考察了罗非鱼皮胶原酶解物(TSCH)对双醛淀粉(DAS)交联明胶膜理化性质的影响,探讨了膜对人皮肤永生化角质(Ha Cat)细胞的相容性。结果发现,TSCH添加量从0增加至16%时,DAS交联明胶膜的抗拉伸强度从55.00 MPa下降至24.85 MPa,而断裂延伸率随着TSCH添加量的增加呈现先增大后减小的趋势。DAS交联明胶膜在30℃水中的溶解率为33.10%,当膜中TSCH含量超过4%后,膜的溶解率接近100%。然而,不管TSCH添加量是多少,经过240 min后膜中含有的TSCH全部释放到水中。SDS-PAGE的结果表明,在DAS交联明胶膜中添加的TSCH会阻碍明胶蛋白分子的相互交联作用。另一方面,将Ha Cat细胞培养于DAS交联明胶膜时,Ha Cat细胞活力只有11.39%,当DAS交联明胶膜中含有8%的TSCH时,Ha Cat细胞活力可以达到108.20%。以上结果表明,添加TSCH的DAS交联明胶膜在化妆品领域将具有一定的应用潜力。     

罗非鱼鱼皮胶原蛋白降血压酶解液的制备与活性研究

本文研究了单酶和复合酶水解罗非鱼鱼皮胶原蛋白制备抑制帆管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）的工厂艺条件。通过正交试验确定了菠萝蛋白酶和Alcalase 2．4L蛋白酶单独水解鱼皮胶原蛋白的最适酶解条件。菠萝蛋白酶和Alcalase 2．4L蛋白酶的最适酶解温度，pH，酶，底物，时间，底物浓度分别为45℃，pH4．5，4000U／g，4h，6％和55℃，pH7．5，6000μ／g，2h，4％。在甲．酶水解的基础上，进行复合酶水解实验，结果表明：先采用菠萝蛋白酶水解，再用Alcalase2．4L蛋白酶水解，效果更佳。采用该双酶复合水解工艺，所得水解产物的水解度为30．43％，体外对ACE的抑制率达68．6％。采用Sephadex G-25，HPLC的分离方法对酶解液进行分离纯化，得到了高抑制活力的组分。所得水解原液，Sephadex G-25过柱所得高活力组分的IC50分别为2．82mg／ml利0．65mg／ml。     

胶原蛋白水解物戊二醛改性研究

本文对胶原蛋白水解物进行了戊二醛改性,研究了戊二醛用量、温度、pH值、反应时间对改性的影响,确定了获得最佳乳化性和乳化稳定性的最佳改性条件,并对改性前后胶原蛋白水解物在乳化性、乳化稳定性、分子量、吸水性、吸油性和保水性方面的差别进行了比较.     

胶原蛋白水解物戊二醛改性研究

本文对胶原蛋白水解物进行了戊二醛改性,研究了戊二醛用量、温度、pH值、反应时间对改性的影响,确定了获得最佳乳化性和乳化稳定性的最佳改性条件,并对改性前后胶原蛋白水解物在乳化性、乳化稳定性、分子量、吸水性、吸油性和保水性方面的差别进行了比较。     

扇贝裙边胶原蛋白酶解物清除超氧阴离子能力的研究

以扇贝裙边为原料,采用酶法提取胶原蛋白,并采用酶解技术制备扇贝裙边胶原蛋白酶解物,研究扇贝裙边胶原蛋白酶解液清除超氧阴离子的能力.结果表明:木瓜蛋白酶添加量为质量分数1.5%,酶解时间为90 min,酶解温度为60 ℃时,扇贝裙边胶原蛋白酶解物清除超氧阴离子的能力最好,为46.52%.     

响应面试验优化基于胶原特性酶解猪皮工艺及其抗氧化特性

以新鲜猪皮为原料,基于凝胶特性以羟脯氨酸含量为指标,对影响胃蛋白酶酶解过程的各个因素进行研究,通过Box-Behnken设计优化酶解工艺;以清除O2－•、•OH、H2O2能力和DNA损伤保护作用为指标研究酶解产物的抗氧化功能。结果表明：最佳酶解条件为加酶量0.25%、料液比1∶2（g/mL）、酶解时间1.65 h、酶解温度41.15 ℃,在此酶解条件下其产物清除O2－•的IC50值为20.19 mg/mL;清除•OH的IC50值为6.36 mg/mL;清除H2O2的IC50值为0.65 mg/mL;对DNA损伤保护作用的IC50值为1.86 mg/mL。     

玉米蛋白水解物的酶法制备及其对结肠炎的缓解作用

为了探究玉米蛋白水解物对肠道屏障功能的保护作用，本文首先以玉米蛋白粉为原料，采用Alcalase对其进行酶解，考察了不同酶解条件对水解物中谷氨酰胺含量的影响，建立了玉米蛋白的最适水解体系。然后以葡聚糖硫酸钠为诱导剂构建小鼠结肠炎模型，系统的评价了玉米蛋白水解物对小鼠结肠炎的缓解作用。结果表明：Alcalase的最适酶解条件为酶解温度64℃，酶解时间2.5 h，加酶量1300 U/g；在此条件下，水解物中谷氨酰胺含量可达到8.79%。所制得的玉米蛋白水解物（375和625 mg/kg·bw）能够明显改善结肠炎小鼠体重下降，缓解结肠缩短，降低疾病活动指数，减轻结肠组织中炎症细胞的浸润，调节炎症细胞因子水平。玉米蛋白水解物对小鼠结肠炎具有良好的缓解作用，本研究旨为拓宽玉米蛋白粉的高值化利用及开发肠道保护的功能性食品提供理论依据。     

胶原水解产物的分离研究

本文介绍了分离蛋白质常用的方法步骤，概述了胶原蛋白水解产物分离研究的情况，介绍了本实验室对酶水解胶原蛋白混合物分离的研究结果。