罗非鱼皮胶原肽的制备及抗氧化活性研究

采用酶法从罗非鱼皮中制取胶原肽,选用动物蛋白水解酶,当酶的添加量为0.5%,61℃,pH 6.7下水解3 h时,蛋白质的回收率为92.97%,水解度为9.37%.水解产物90%以上相对分子质量低于10 kD的胶原肽.胶原肽对由Fe^2＋引发的卵磷脂脂质体过氧化有一定抑制作用,同时对·OH具备一定的清除作用.     

虾副产物制备的钙肽结合物理化性质研究

研究由虾加工副产物经过胰蛋白酶水解得到的多肽与氯化钙反应制备的钙肽结合物的理化性质。钙肽结合物中肽含量75.03 g/100g,钙含量11.56 g/100g,水分含量6.02 g/100g。温度对钙肽结合物的溶解度影响较小,在酸性或碱性条件下钙肽结合物溶解性很好,不溶于常见的有机溶剂。钙肽结合物的紫外、红外光谱均表明钙与肽之间形成了新的化学键。     

罗非鱼多肽- 锌配合物的制备及其生物活性

目的：探索罗非鱼多肽- 锌配合物的制备工艺条件,并通过动物实验测试其生物活性。方法：比较影响蛋白多肽与锌发生配合反应的因素,筛选适宜工艺条件,采用光谱法对配合物结构进行初步鉴定,并以小鼠为动物实验对象,选择超氧化物歧化酶活力、氧化型谷胱甘肽还原酶活力、巨噬细胞吞噬百分率、超氧阴离子自由基清除率为指标,确定配合物的体内外生物活性。结果：蛋白多肽- 锌配合物制备的适宜工艺条件为pH5.0、温度80℃、蛋白质的水解度15%、多肽与Zn 的质量比为4:1,制备配合物的得率约为54%、Zn 的配合率为55%,配合物中锌含量为6.5 × 104mg/kg;配合物的光谱特征峰证实多肽与Zn2+ 生成了一种新型配合物;配合物能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、显著提高小鼠肝组织匀浆中SOD 和肾组织中氧化型谷胱甘肽还原酶的活力,并对体外超氧阴离子自由基有很好的清除效果。结论：多肽与Zn2+ 在一定条件下通过配合作用生成多肽- 锌配合物,该配合物具有提高小鼠巨噬细胞吞噬能力、提高超氧化物歧化酶和氧化型谷胱甘肽还原酶活力、清除氧自由基等生物活性。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽亚铁螯合修饰及螯合物性质的研究

以罗非鱼皮为原料制备胶原蛋白肽(TSGP),胶原蛋白肽与亚铁盐进行螯合反应,对TSGP亚铁螯合物的理化性质及功能特性进行研究。实验优化得出最佳螯合反应条件是m多肽∶mFeCl2·4H2O=500∶1,pH为6.0,反应时间50min,温度35℃。通过荧光光谱、紫外光谱和红外光谱测定发现Fe2+与TSGP的羧基与氨基均可发生配位反应。抗氧化活性测定实验表明,螯合物具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+自由基的能力。     

酶法水解牦牛皮蛋白制备抗氧化肽工艺的优化

以牦牛皮为原料,用碱性蛋白酶水解牦牛皮蛋白制备抗氧化肽。以水解度和牦牛皮蛋白水解物对DPPH自由基清除率的IC₅₀值为评价指标,在单因素实验的基础上,结合响应面（Box-Behnken）试验设计筛选出牦牛皮抗氧化肽的最佳制备工艺。结果表明,最佳制备工艺为:水解温度51 ℃,酶用量10890 U/g,水解时间10.6 h,pH8.5,底物浓度5%,此时水解度为41.39%±0.69%,牦牛皮抗氧化肽清除DPPH·、ABTS+·、·OH的IC₅₀值分别为2.884、2.110、2.523 mg/mL。综上,该制备工艺下的牦牛皮抗氧化肽对自由基有良好的清除能力,且有较强的还原能力,说明牦牛皮抗氧化肽有望作为天然抗氧化剂得到开发利用。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽酶解液的制备及其抗氧化特性研究

以罗非鱼皮为原料,采用直接酶法提取胶原蛋白肽,用正交试验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成。结果表明,碱性蛋白酶添加量为0．5％,固液比1：3,酶解时间为3h,酶解温度50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13．5％。并对产品胶原蛋白肽的抗氧化特性进行了分析。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽制备的工艺优化

以罗非鱼鱼皮为原料,研究利用酶法制备胶原蛋白肽制品。测定了罗非鱼皮的基木组成成分,利用低温连续相变萃取技术进行脱脂处理;以水解度、水解产物分子量和感官评定为指标,研究蛋白酶种类对酶解的影响;以水解度为指标,研究酶解条件对水解度的影响,并采用响应面试验对鱼皮胶原肽制备工艺进行优化;用凝胶过滤色谱法测定酶解液分子质量分布。结果表明:采用碱性蛋白酶水解鱼皮效果最好,酶解的最佳工艺条件为:时间7 h、加酶量7%、温度60℃、pH值10.38,在此条件下碱性蛋白酶水解罗非鱼皮的水解度最高可达23.01%。由本法所得胶原肽是以分子质量180~1000 u之间的寡肽(约2~8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的生理活性,可作为功能因子广泛应用于保健食品、化妆品、医药等各个行业当中。     

罗非鱼下脚料分离蛋白的制备及其性质研究

采用酸碱法(pH-shifting)提取罗非鱼下脚料蛋白,主要探讨提取的pH对提取蛋白的得率、分离蛋白的基本成分、溶解性、乳化性和分子量分布的影响。结果表明:在料液比1∶9(g/g)、pH 2.0、pH 3.0以及pH 12.0、pH 13.0条件下溶解,pH 5.5条件下沉淀,提取蛋白得率达52%以上。冷冻干燥制备罗非鱼下脚料分离蛋白粉,其蛋白含量高于85%(干基)。功能特性的研究显示,在pH12.0条件下提取的分离蛋白功能特性最好,其溶解度和乳化活性指数分别为60.80%和42.07 m2/g。SDS-PAGE电泳分析显示,不同pH条件下提取的罗非鱼下脚料蛋白的分子量分布差别不大,主要显示分子量为200 ku和44.3 ku的蛋白条带,分别是肌原纤维蛋白组分中的肌球蛋白和肌动蛋白,另有部分蛋白条带在14.30 ku,属于小分子的肌浆蛋白。     

响应面优化罗非鱼下脚料发酵制备蛋白肽的工艺

为提高罗非鱼下脚料蛋白质的水解度,向罗非鱼下脚料中接种枯草芽孢杆菌,采用响应面实验对罗非鱼下脚料发酵制备蛋白肽的工艺进行了优化。以爬坡实验(Plackett-Burman,PB)筛选出影响水解度的显著因素,通过最陡爬坡实验逼近最大水解度区域,并利用Box-Behnken实验进行响应面分析,最后运用高效体积排阻色谱法分析制备的罗非鱼蛋白肽的分子量分布情况。响应面实验结果表明,罗非鱼下脚料制备蛋白肽的最佳发酵工艺为:罗非鱼下脚料13.8%、发酵温度为34℃、装载量为48.6 mL/250 mL,优化后罗非鱼下脚料蛋白质的水解度高达33.12%。高效体积排阻色谱结果表明,制备的罗非鱼蛋白肽中低聚肽的含量高达74.058%。     

罗非鱼皮明胶的制备及性质研究

以干燥的罗非鱼鱼皮为原料,经脱色溶胀后热水熬胶来制备明胶,通过正交实验法对罗非鱼鱼皮明胶的提取工艺进行优化,并分别对明胶黏度、吸水性、保水性、等电点和氨基酸组成进行了测定。结果表明,鱼皮明胶最佳提取工艺为氢氧化钠浓度2．0％,浸泡24h,盐酸的浓度为0．5％,浸泡4h时,熬胶温度在80℃,时间为8h,提取率为47．54％。     

罗非鱼蛋白酶解液的多肽与钙复合物的制备及其抑菌分析

采用木瓜蛋白酶和风味酶的复合酶解罗非鱼蛋白,制取富含多肽的酶解液;并将酶解液中的多肽与Ca2+反应制备多肽-钙螯合物,探讨反应液的pH值、反应温度、反应时间、多肽与CaCl2的质量比对螯合反应的影响,并对产物进行抑菌实验。结果表明：多肽液与Ca2+的最佳螯合工艺为反应pH7.13,反应温度29.5℃,反应时间24.05min,多肽与CaCl2的质量比2.68:1,在此最佳条件下钙的螯合率为87.5%;产物对多种微生物,特别是对细菌的生长有良好的抑制作用。     

罗非鱼加工副产物不同部位硫酸软骨素的制备、理化性质及结构表征

采用双酶酶解、氯化十六烷基吡啶法从罗非鱼副产物不同部位（鱼头、鱼脊骨、鱼鳍、鱼尾）制备硫酸软骨素,利用紫外光谱、醋酸纤维电泳、红外光谱和高效液相色谱对其理化性质和结构特征进行分析。结果表明,鱼头、鱼尾所含硫酸软骨素主要为C型（Δdi6S）,含量分别为46.10%和41.01%;鱼脊骨、鱼鳍所含硫酸软骨素主要为A型（Δdi4S）,含量分别为71.86%和69.59%。纯度从高到低依次为鱼头90.37%、鱼尾83.33%、鱼脊骨59.76%、鱼鳍52.01%。鱼头、鱼脊骨、鱼鳍、鱼尾硫酸软骨素的单糖组成主要由不同比例的葡萄糖醛酸、葡萄糖和氨基半乳糖构成,mn依次为51 422、18 402、19 481、76 371。不同部位提取的硫酸软骨素的种类和组成有明显差异,其中罗非鱼头、鱼尾提取的硫酸软骨素与鲨鱼软骨来源硫酸软骨素结构相似,有望作为代替鲨鱼硫酸软骨素的潜在来源。     

花生红衣多酚-锌配合物的制备及其抗氧化性质

采用超声波辅助法乙醇提取花生红衣多酚(PSP),将PSP与人体必需金属元素Zn2+配合,制备花生红衣多酚-锌配合物(PSP-Zn),采用响应面试验研究PSP-Zn制备条件,并研究其抗氧化性能。结果表明,在反应温度57.82℃、p H 5.86、质量比4.27︰1时,PSP与Zn2+的螯合率最高,为46.30%。PSP-Zn的清除DPPH自由基能力高于同浓度的PSP、VC、VE,且随浓度增加而增强;浓度1200μg/mL时,PSP-Zn的DPPH自由基清除率84%;PSP-Zn的清除羟基自由能力要略弱于PSP,且PSP-Zn和PSP的清除羟基自由能力均弱于同浓度的VC、VE。     

蒜皮水溶性多糖的制备及结构表征

为制备蒜皮水溶性多糖(water-soluble polysaccharide from garlic skin,GSWSP)并表征其结构,采用水提醇沉法、DEAE-52纤维素层析法和Sephadex G-100凝胶色谱法,从蒜皮中提取和分离纯化出GSWSP;运用色谱、光谱、扫描电镜观察等方法对其一级结构、高级结构、介...     

罗非鱼皮胶原酶解物对HaCat细胞生长的影响

研究经不同商业酶水解后得到的罗非鱼皮胶原酶解物对人皮肤角质细胞HaCaT生长的影响,并对胶原酶 解物的抗氧化活性与促进细胞生长作用的关系进行探讨。结果表明：罗非鱼皮经中性蛋白酶（neutral enzyme, NE）、碱性蛋白酶、胰蛋白酶水解得到的酶解产物中,NE酶解物（neutral enzymatic hydrolysate,NEH）具有显著的 体外抗氧化活性和促进HaCaT细胞增殖的活性（P＜0.05）;NEH（1～5 ku）在质量浓度为25 mg/mL时对HaCaT细胞 的生长具有显著的促进作用（P＜0.05）,并在24 h内能显著促进细胞划痕处伤口愈合（愈合率（81.10±5.77）%, P＜0.05）。经氨基酸组成分析和凝胶色谱分析发现,NEH（1～5 ku）主要包含2 个肽组分,NEH（1～5 ku）的 抗氧化氨基酸苯丙氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸的质量分数要显著高于其他分子质量的肽 组分（P＜0.05）。研究认为,经NE水解得到胶原肽分子质量为1～5 ku组分对HaCaT细胞生长具有促进作用,这可 能与肽组分中抗氧化氨基酸质量分数较高有关。     

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。     

Properties of Alaska Pollock Skin Gelatin: A Comparison with Tilapia and Pork Skin Gelatins

ABSTRACT:  The objective of this work was to compare the physiochemical and rheological properties of Alaska pollock skin gelatin (AG) to those obtained for tilapia and pork skin gelatins. Results were also obtained for some mixed gels containing AG and pork skin gelatin, or AG and tilapia gelatin. AG contained about 7% hydroxyproline (Hyp), which was lower than that of tilapia (∼11%) or pork skin gelatin (∼13%). Most of the protein fractions in AG were α chain, β chain, and other oligomers. The gel strength of AG was 98 gram-force at 10 °C, and increased at a greater rate than other gelatins with decreasing temperature. The gel melting point of AG was the lowest with the oil-drop method, while the viscosity of AG was the highest of the samples studied. The rheological properties of gelatins were determined using small amplitude oscillatory shear testing. G' was nearly independent of frequency for most of the gelatin gels, but AG gels showed a slight dependence on G' and a minimum in G". G' was found to be a power law function of concentration for all gelatins used: G'= k × Cⁿ. In rheological measurements, AG also showed the lowest gel melting temperature and sharpest melting region. Increasing gelatin concentration resulted in a higher melting temperature and a broader melting region for all gelatin gels. For both the AG-pork and AG-tilapia mixed gels, the gel melting temperatures decreased and melting regions narrowed as the AG fraction was increased.     

罗非鱼皮胶原蛋白水解产物的体外抗氧化活性和体内抗衰老作用

对罗非鱼皮胶原蛋白水解制备水解产物（tilapia skin gelatin hydrolysate,TSGH）,分离得到3 个肽组分（TSGH-1、TSGH-2和TSGH-3）,分析肽组分氨基酸组成,并对TSGH-3的体外抗氧化活性和体内抗衰老能力进行评价。结果表明：TSGH-3的分子质量低,疏水性氨基酸含量高,从自由基清除和金属螯合两个方面证实了TSGH-3具有很好的体外抗氧化活性。TSGH-3能显著增加由D-半乳糖诱导衰老大鼠的血清、肝脏和肾脏组织的总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,并且能显著降低丙二醛的含量。此外,TSGH-3的摄入可以保护大鼠的肝脏和肾脏指数。因此,TSGH-3在抗氧化、抗衰老方面具有较好的应用潜力。     

微射流-酶处理对罗非鱼皮胶原蛋白结构和理化特性的影响

为了研究微射流-酶复合改性方法对罗非鱼皮胶原蛋白结构及理化性质的影响。本文采用3种蛋白酶分别协同微射流处理鱼皮胶原蛋白,研究不同处理方法对其质构特性、流变特性及微观结构的影响。结果表明:微射流-酶处理的鱼皮胶原蛋白粒径变小,分布更加均匀及黏度上升的特点,微射流-胰蛋白酶和微射流-胃蛋白酶处理的胶原蛋白的网状结构致密均一,凝胶强度、硬度和黏性分别提高75.17%和14.44%,27.26%和77.66%,67.87%和8.90%,但是微射流-木瓜蛋白酶处理的胶原蛋白的网状结构稀疏且分布不均,凝胶强度、硬度和黏性分别降低21.06%,35.96%,28.28%。其中,微射流-胃蛋白酶处理的鱼皮胶原蛋白感官评分最高,具有更容易被人们接受的感官要求。研究结果有利于提升罗非鱼加工副产物的高值化利用水平。