内源性n-3多不饱和脂肪酸对下丘脑神经干细胞来源外泌体miRNA的调节

目的：通过培养fat-1转基因小鼠下丘脑神经干细胞获取外泌体并提取总RNA进行高通量测序,研究内源性n-3多不饱和脂肪酸（n-3 polyunsaturated fatty acids,n-3 PUFAs）对丘脑神经干细胞来源外泌体miRNA的调节作用,探究n-3 PUFAs抑制下丘脑炎症及肥胖的作用机制。方法：分别培养fat-1转基因小鼠与野生型C57BL/6小鼠下丘脑神经干细胞,从细胞培养上清液中收集外泌体并提取总RNA,经高通量测序后利用生物信息学技术对差异表达的miRNA进行分析及靶基因预测,对靶基因进行基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）富集分析后,利用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR）进行相对表达量的测定。结果：与野生型C57BL/6小鼠相比,fat-1转基因小鼠下丘脑神经干细胞来源的外泌体miRNA具有特异表达谱,且具有显著差异表达的miRNA靶基因处于下丘脑炎症、脂肪酸代谢等通路中关键位置。经qPCR验证,差异表达的miRNA关键靶基因表达均受到调控。结论：内源性n-3 PUFAs水平的增加可以调节下丘脑神经干细胞外泌体中miRNA的表达,进而调控炎症反应与脂质代谢相关基因的表达,从而发挥抑制下丘脑炎症、抵抗肥胖的作用。     

不同泌乳期人乳外泌体miRNA表达谱的研究

采用超高速离心法从人乳中提取出囊泡结构物质,从粒径、形态和外秘体特异性标记蛋白3个方面来确定提取的物质为外泌体。采用高通量测序得到不同泌乳期外泌体中microRNA(miRNA)的表达谱。对表达谱进行分析,在人乳外泌体中共检出852种miRNA,有283种miRNA在早、中、晚3个泌乳期中均有所表达。其中,表达量排名前10位的miRNA占到总量的50%以上。在外泌体中高表达的miRNA(占总外泌体miRNA表达量2%以上的)并没有受到泌乳期的显著影响;而在外泌体中低表达的一些miRNA(占总外泌体miRNA表达量0.01%以下的)容易受到泌乳期的显著影响。此外,发现在人乳外泌体中有88种miRNA与炎症相关,其中有65种在不同泌乳期均稳定表达。综上,人乳外泌体可能具有调控炎症的功能,本研究为更好地研究不同泌乳期人乳外泌体生理功能提供基础数据。     

牛乳外泌体中miRNA的测序与分析

采用密度梯度离心法提取牛乳外泌体,利用Illumina测序技术对外泌体中非编码小RNA(sRNA)进行测序,探索牛乳microRNA(miRNA)的表达谱。对原始序列进行质量控制,共获得3 899 629条纯净sRNA序列,长度集中于28 nt,与数据库比对后鉴定到61种已知miRNA,346种新miRNA。基因本体论富集结果表明,牛乳外泌体miRNA在细胞过程、单一生物体过程、代谢过程等生物过程发挥作用;主要构成细胞、细胞器等组成;主要参与结合、催化活性、转运蛋白活性等分子功能。京都基因与基因组百科全书通路富集结果表明,已知miRNA与新miRNA靶基因均显著富集在百日咳（ko05133）、趋化因子信号通路（ko04062）、内吞作用（ko04144）、溶酶体（ko04142）等通路,牛乳外泌体miRNA在特定信号通路中发挥重要作用。     

驴乳外泌体中miRNA的测序与分析

为探究驴乳外泌体中微小RNA(miRNA)的种类和功能性,利用Illumina测序技术对驴乳外泌体中非编码小RNA(sRNA)进行测序分析,鉴定其中的miRNA并以人乳外泌体miRNA作为对照组进行生物信息学分析。驴乳外泌体中sRNA在质量控制之后,长度主要分布在18～22 nt,在其中共鉴定到212个miRNA,其中包括16种已知miRNA和196种新miRNA。基因本体论富集分析发现,驴乳外泌体miRNA的功能性与人乳相似,构成细胞、细胞器等组分;具有结合和催化活性等功能;参与细胞代谢、生物调节等过程。京都基因与基因组百科全书通路富集分析发现,驴乳外泌体miRNA参与醛固酮的合成与分泌、Hedgehog信号、线粒体调节、癌症等通路。     

n-3多不饱和脂肪酸饮食对小鼠肥胖及相关细胞因子的影响

目的：研究n-3 多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fat acids,PUFAs)饮食对小鼠肥胖程度及相关细胞因子血清水平的影响,探讨其作用机理。 方法：将健康小鼠分为高饱和脂肪酸饮食组、n-3 多不饱和脂肪酸饮食组和对照组,记录每周小鼠进食量和体质量,实验结束时用ELISA 法检测小鼠血清增食因子A(orexin-A)、抵抗素(resistin)、脂联素(adiponectin)水平。 结果：n-3 多不饱和脂肪酸饮食组小鼠与高饱和脂肪酸饮食组小鼠相比,肥胖程度明显降低 (P ＜ 0.05),血清的增食因子A 水平明显降低(P ＜ 0.05),血清的抵抗素水平明显升高(P ＜ 0.05),血清的脂联素水平升高但无统计学差异;n-3 多不饱和脂肪酸饮食组小鼠的各项指标和对照组相比均无统计学差异。结论：n-3 多不饱和脂肪酸饮食与饱和脂肪酸饮食相比,可抑制肥胖的发生和发展。     

n-3多不饱和脂肪酸富集纯化的研究进展

n-3多不饱和脂肪酸为一类独特的生物活性物质,在生物体内具有广泛的生理功能.随着对其生理功能的认识和研究的不断深入,对n-3多不饱和脂肪酸富集纯化的研究也成为热点.主要介绍n-3多不饱和脂肪酸的富集纯化方法,并对植物种子中α-亚麻酸的富集以及鱼油中DHA和EPA富集的研究进行了综述.     

高n-3多不饱和脂肪酸鸡蛋的开发研究进展

介绍了n-3多不饱和脂肪酸类别、营养功能及使用哪些饲料原料可以生产高n-3多不饱和脂肪酸鸡蛋,分析了鸡蛋中多不饱和脂肪酸的沉积规律和影响因素,并概述了高n-3多不饱和脂肪酸鸡蛋特点,以及存在的问题和解决途径,为开发高n-3多不饱和脂肪酸鸡蛋提供依据。     

n-3多不饱和脂肪酸对疾病的预防与治疗作用

n-3多不饱和脂肪酸主要源于亚麻籽、胡桃仁、大豆以及海洋生物。增加n-3多不饱和脂肪酸摄取量可以促进视网膜、大脑和神经系统发育。n-3多不饱和脂肪酸通过各种途径降低人体心血管疾病和炎症的发生,降低糖尿病患者血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和甘油三酯(TG)水平。膳食中增加n-3多不饱和脂肪酸的含量可以对心血管疾病、糖尿病、炎症等患者有辅助治疗效果;n-3多不饱和脂肪酸可以作用于神经细胞,对注意力不集中、抑郁症、精神分裂症有一定的疗效。n-3多不饱和脂肪酸可抑制体外培养的乳腺、前列腺和结肠癌细胞增生,促进细胞凋亡。     

n-3多不饱和脂肪酸抑制骨骼肌蛋白异常分解的研究进展

胰岛素/Akt信号通路受阻所致的骨骼肌细胞蛋白异常分解,可能是骨骼肌萎缩发生的重要原因。不同n-3多不饱和脂肪酸在骨骼肌细胞内、外作用于胰岛素/Akt信号通路上的多个位点,均有助于维持通路的正常运作。其中,植物来源n-3多不饱和脂肪酸ALA能通过活化胰岛β细胞胞膜的GPR40直接促进胰岛素分泌;海鱼来源n-3多不饱和脂肪酸EPA与DHA能有效维持骨骼肌细胞内Akt活性并增加胰岛素敏感性。本文通过对相关文献的归纳总结,阐释n-3多不饱和脂肪酸基于胰岛素/Akt信号通路抑制骨骼肌细胞蛋白异常分解的机制,为通过膳食手段干预骨骼肌萎缩提供新的思路。     

山羊乳及绵羊乳外泌体miRNAs表达谱的分析与差异比较

为揭示山羊乳和绵羊乳外泌体的潜在功能差异,对山羊乳和绵羊乳外泌体进行提取和鉴定,利用Illumina平台对羊乳外泌体中非编码小RNA(sRNA)进行高通量测序,并对微小RNA(miRNA)表达谱和功能进行注释。在山羊乳外泌体中鉴定出161种已知miRNAs序列和5种新型miRNAs序列;绵羊乳外泌体中鉴定出80种已知miRNAs序列和7种新型miRNAs序列,其中miR-148a、miR-26a和let-7b在2种羊乳样本中表达量较高。miR-151只在山羊乳外泌体样本中检出。通路富集发现山羊乳miRNAs靶基因分子功能集中在结合和催化活性等方面,而绵羊乳外泌体miRNAs靶基因具有肠菌素结合的功能,且对宿主发育具有一定促进作用。结果提示山羊乳和绵羊乳来源的miRNAs可能具有某些共性和独特的靶基因类型,可能在缓解病原微生物感染、炎症、抑制癌细胞增殖迁移等方面发挥不同功能。上述miRNAs测序与分析研究可为羊乳外泌体的后续功能开发提供参考。     

超声辅助脂肪酶催化合成富含n-3多不饱和脂肪酸磷脂的研究

以脂肪酶Lipozyme TL IM为催化剂,研究了合成富含n-3多不饱和脂肪酸磷脂的最佳工艺条件,即以正庚烷:异辛烷:正已烷=8:1:1为超声介质,溶剂(mL)/底物(g)=2,酶用量为25%,超声介质中水分质量分数为2%,超声功率70 W,55℃下连续超声5.5 h,在此条件下酯交换到磷脂上的DHA和EPA总质量分数为22.99%。由此可见,通过超声辅助及酯交换条件的优化,不仅可以大大缩短反应所需的时间,而且也能充分激活Lipozyme TL IM的酶活力,从而提高酯化反应的效率。     

伊拉兔肌内磷脂n-3多不饱和脂肪酸体外抗肿瘤功效及作用机理

根据之前的研究成果体外模拟伊拉兔肌内磷脂n-3 多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids,PUFAs） 的组成,并研究其功能特性。结果表明：采用噻唑蓝法对复合n-3 PUFAs作用的敏感细胞进行筛选,证实伊拉兔 肌内磷脂n-3 PUFAs在30～180 μmol/L剂量范围对HepG2、MV3和A375肿瘤细胞的生长均有抑制作用,且HepG2细 胞对复合肌内磷脂n-3 PUFAs的敏感度最高;HepG2的细胞形态及数量变化与复合n-3 PUFAs呈现明显的时效和量 效关系;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素和碘化丙啶双染法对肿瘤细胞进行凋亡检测,证实伊拉兔肌内复合磷脂 n-3 PUFAs的凋亡作用;进一步研究发现,复合n-3 PUFAs及其单体（α-亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和 二十二碳六烯酸）均能够引起HepG2细胞内氧化应激的改变,它们通过显著上调细胞内丙二醛的累积量以及活性氧 的相对荧光强度水平,同时下调超氧化物歧化酶的活力实现对HepG2细胞的诱导凋亡作用,其中二十二碳六烯酸在 非酶促氧化反应中发挥主要作用,这是肌内磷脂n-3 PUFAs诱导HepG2细胞凋亡的机制之一。     

n-6/n-3多不饱和脂肪酸比例对HepG2细胞脂代谢的影响

本文研究了不同比例n-6/n-3多不饱和脂肪酸对HepG2细胞影响,通过体外培养细胞60μM不同比例LA/ALA培养24 h,通过反转录PCR研究不同比例LA/ALA对HepG2细胞SREBP-1、FAS、HMG-CR、LDLr和Apo B蛋白等脂代谢相关基因及蛋白表达量的影响。结果表明在组1(LA)、组2(10:1 LA/ALA)、组3(5:1 LA/ALA)、组4(1:1 LA/ALA)、组5(1:5 LA/ALA)、组6(1:10LA/ALA)和组7(ALA)7组比例中,1:1 LA/ALA比例处理细胞效果最佳,此比例脂肪酸通过下调HepG2细胞SREBP-1和FAS基因的表达来降低细胞TG的含量;下调HMG-CR基因的表达,上调LDLr基因的表达来降低细胞TC和LDL-C含量;通过上调SR-B1基因表达增加胆固醇逆转运,从而实现对HepG2脂代谢的有效调控。此多不饱和脂肪酸体外营养评价模型,为n-6/n-3多不饱和脂肪酸最佳营养比例推荐及食用植物油中多不饱和脂肪酸比例营养评估提供理论依据。     

Bioavailability of Eicosapentaenoic and Docosahexaenoic n-3 Polyunsaturated Fatty Acids in Salmon Patties Compared with Capsules

ABSTRACT This sequential treatment trial compared the bioavailability of eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) from salmon patties fortified with fish oil (DHA:EPA ratio = 1.8, total DHA + EPA about 2.2 g), unfortified salmon patties (DHA:EPA ratio = 1.9, total DHA + EPA about 1.1 g), and fish oil capsules (DHA:EPA ratio = 1.6, total DHA + EPA = 500 mg) in healthy older adults. Fortified salmon patties produced a significantly higher mean incremental area under the curve (AUC_{fasting-9 h}) than unfortified patties for plasma EPA (37.6 in contrast to 12.9 μg·h/mL, p = 0.017), for plasma DHA (103.7 in contrast to 40.8 μg·h/mL, p = 0.035) and for plasma EPA + DHA (141.2 in contrast to 53.7 μg·h/mL, p = 0.031). Plasma EPA and DHA responses were larger with the fortified than the unfortified patties, indicating that fish oil incorporated into the salmon patties was bioavailable.     

多不饱和脂肪酸的营养作用及其基因表达调控

多不饱和脂肪酸是一种重要的营养物质,是所有细胞膜的重要成分,具有重要的生理功能,人们越来越关注多不饱和脂肪酸的研究与应用。本文着重论述了多不饱和脂肪酸的营养功能和其调控基因表达的分子机制。     

ω-3多不饱和脂肪酸在改善鸡蛋营养质量方面的研究

本文对ω-3多不饱和脂肪酸的化学结构、特性、作用及在改善鸡蛋营养质量等方面的研究进行了综述,讨论了如何通过饲喂对鸡蛋的脂肪组分加以调控,从而使其成为人类ω-3多不饱和脂肪酸的重要来源。     

Means of Delivering Recommended Levels of Long Chain n-3 Polyunsaturated Fatty Acids in Human Diets

ABSTRACT:  n-3 Polyunsaturated fatty acids (n-3PUFA) of marine origin have been shown to be essential for brain development and cognitive function. In addition to their essentiality, the scientific literature is full of evidence to suggest that regular consumption and/or dietary supplementation with long chain n-3PUFA give several health benefits including: prevention of cardiovascular diseases, inflammatory diseases, dyslexia, and depression. Long chain n-3PUFA intake in the Western countries, including Australia, has been shown to be inadequate. This is largely due to the fact that the Western populations do not eat seafood on a regular basis because of its cost and availability, and many individuals do not like the flavor/taste/odor of seafood. Foods fortified with long chain n-3PUFA could play an important role in meeting the demands for optimal health. Marine n-3PUFA are not likely to compete with saturated, monounsaturated, and n-6PUFA as a major source of dietary fat; however, increasing the intake of foods containing marine n-3PUFA is an important strategy for the prevention of chronic illnesses. Recent developments in food technology allow fortification of foods, such as bread, dairy products, eggs, pasta, biscuits, margarines, and other spreads, without the undesirable fish odor/taste and with reasonable shelf life. There is a need to increase the amount of long chain n-3PUFA consumed per serve and optimize their bioavailability. This article reviews the foods fortified with marine n-3PUFA and their role in meeting daily requirements, and highlights the need for further research in this important area of functional foods.     

n-3多不饱和脂肪酸加重FFAR4基因缺失小鼠结肠炎进程

炎症性肠病（inflammatory bowel disease, IBD）是一种慢性肠道疾病,额外营养支持有助于缓解IBD患者病情。研究表明膳食中n-3多不饱和脂肪酸具有良好的抗炎作用,而人群研究表明部分IBD患者额外补充n-3多不饱和脂肪酸无益于其疾病缓解。大规模测序发现n-3多不饱和脂肪酸受体基因FFAR4存在突变,n-3多不饱和脂肪酸在IBD治疗中的不确定结果是否与FFAR4基因的缺失有关,目前尚不清晰。通过对野生型（WT）小鼠和FFAR4基因缺失（FFAR4KO）小鼠进行结肠炎造模,并同时对两组小鼠额外补充n-3多不饱和脂肪酸,实验结果表明,在同时补充n-3多不饱和脂肪酸的情况下,相较于WT小鼠,FFAR4KO小鼠的结肠炎更加严重,表现为更多的体质量丢失、更高的疾病活动指数（disease activity index,DAI）、更高的结肠髓过氧化物酶（MPO）活性以及更高的结肠炎症因子转录水平。该研究为IBD患者得到精确营养干预提供了理论依据。     

多不饱和脂肪酸对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

本文利用MTS比色分析法、细胞形态学分析法及诱导分化法结合油红染色比色分析法研究了α-亚麻酸(alpha-linolenic acid,ALA)、亚油酸(linoleic acid,LA)对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响。MTS结果显示,在一定浓度范围内ALA、LA均能呈剂量依赖关系和时间依赖关系的抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖,且ALA抑制增殖作用强于LA;细胞形态学分析结果显示,ALA、LA在高浓度时均显示出细胞毒性作用;倒置显微镜观察和油红染色检测结果显示,ALA、LA、ALA/LA混合脂肪酸(1:1,n/n)在12.5~200μmol/L浓度范围内均能浓度依赖式的抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,且ALA抑制分化作用强于LA,但当浓度100μmol/L时,ALA/LA混合脂肪酸(1:1,n/n)的抑制分化作用强于同浓度的ALA,当浓度为200μmol/L时,比较ALA/LA摩尔比为1:4、1:2、1:1的混合脂肪酸抑制分化效果发现,比值为1:1的略强但相互之间效果差异不明显。