基于铜纳米团簇的纳米探针比色法检测牛奶中胆固醇含量

基于铜纳米团簇的纳米技术建立简便快速检测牛奶中胆固醇含量的方法。采用铜纳米团簇模拟辣根过氧化物酶催化活性,在胆固醇氧化酶存在条件下,胆固醇被催化氧化产生双氧水,双氧水在铜纳米团簇作用下氧化愈创木酚显色。在优化条件下,比色法检测胆固醇的线性范围为40～320 μg/mL,检出限为5 μg/mL,回收率为99.8%～101.2%。该方法用于牛奶实际样品中检测,精密度、重现性、稳定性和准确性均较好,可作为测定牛奶中胆固醇含量的快速检测方法。     

基于封装酶的金属有机框架纳米酶级联催化实现鱼肉中次黄嘌呤的可视化检测

目的 基于金属有机框架(metal-organic framework, MOF)封装黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XOD)构建纳米酶级联催化体系, 实现次黄嘌呤(Hypoxanthine, Hx)的可视化检测。方法 室温下采用一步法仿生矿化工艺将天然酶XOD封装于1,4-苯二甲酸铜(copper 1,4-benzenedicarboxylate, CuBDC) MOF纳米酶中, 制备封装酶的金属有机框架材料(XOD@CuBDC), 探究其过氧化物酶活性及级联催化性能。通过最适反应条件的优化, 建立颜色强度与Hx浓度的标准曲线, 考察该方法对鱼肉中Hx的检测。结果 与使用游离XOD和CuBDC组成的级联反应系统比较, XOD@CuBDC催化速度更快, 显色强度更强, 酶储存更稳定。该体系的颜色强度与Hx浓度在0.015~0.470 mmol/L范围内具有线性关系(R2>0.99), 方法检出限(S/N=3)为10.47 μmol/L。应用于不同新鲜程度的牙鲆鱼肉中Hx含量测定, 结果与高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)呈线性关系, 相关性为0.98865。结论 构建的XOD@CuBDC纳米酶级联催化体系具有良好的稳定性和催化性能, 能够用于鱼肉中Hx的快速检测。     

基于单链DNA模板合成铜纳米簇的四环素无标记检测

以聚T单链DNA为模板合成的铜纳米簇作为荧光探针,建立了一种快速、非标记型的荧光生物传感检测新方法,并用于实际样品中四环素的检测.结果表明,该方法用于检测四环素残留的检出限为0.01μmol/L,用于实际样品四环素残留的测定低限为48μg/kg,而且无需要任何荧光染料标记或复杂的DNA序列设计,所有过程均在室温下10 ...     

基于金纳米簇与纳米金的荧光内滤效应检测脂肪酶活性

目的 建立一种基于吐温80自氧化作用催化纳米金形成与荧光内滤机制,相对简单、快速、适用于蛋白浓度较高的游离酶的脂肪酶活性检测方法。方法 使用金纳米簇作为荧光基团,纳米金作为吸收剂,基于荧光内滤机制测定游离脂肪酶活力。设置对照试验对吐温80浓度、氯金酸浓度、温度、pH等反应条件进行优化,探索最适条件下脂肪酶水解反应时间及吐温80还原纳米金的时间并对反应体系进行抗干扰检测,验证该方法的可行性。结果 当脂肪酶酶活力在13.5～15092.0 U/L时,荧光强度的差值随脂肪酶活力的升高而增加,相关系数为0.9977,脂肪酶活力的检出限为2.34 U/L (信噪比为3)。结论 该方法操作相对简单、快速、检测范围较大、灵敏度高,具有实用性,可适用于蛋白浓度较高的游离酶的脂肪酶活力测定。     

ATP代谢物安培酶生物传感器的研制及在鱼肉鲜度测定中的应用

目的:研制一种通过测定鱼组织中三磷酸腺苷(ATP)降解产物次黄嘌呤(HX)、肌苷(INO)、肌苷酸(IMP)代谢物来定量检测鱼肉鲜度的生物传感器系统。方法:用K1或H表示鲜度,K1或H取决于鱼肉中ATP降解产物的量。降解产物通过安培法检测,利用3种以二茂铁甲酸(FCA)为媒介体的导电聚吡咯酶电极,分别固定黄嘌呤氧化酶(XO)、核苷磷酸化酶(NP)和核苷酸酶(NT),定量检测HX、INO和IMP。结果:该传感系统可以快速测定HX、INO、IMP含量。同时发现即使鱼肉被储存于-12℃,7d后也会迅速分解。结论:该传感器简单、快速、使用方便,用来检测淡水鱼的鲜度,效果令人满意。     

智能手机辅助铜纳米簇/金属有机框架杂化荧光探针检测小白菜中的百草枯

目的 基于铜纳米簇(coppernanoclusters,CuNCs)/金属有机框架(metal-organicframeworks,MOF)复合材料谷胱甘肽(glutathione, GSH)-CuNCs/Al-MOF构建一种智能检测小白菜中百草枯的快速、简便的方法。方法 利用化学还原法和溶剂热法制备由GSH修饰的GSH-CuNCs和Al-MOF,合成新型荧光传感材料GSH-CuNCs/Al-MOF,并构建一种比率型荧光检测方法。通过百草枯和GSH-Cu NCs的电子转移和静电相互作用, GSH-CuNCs聚集荧光发生淬灭,而Al-MOF的荧光强度在整个过程中保持不变,复合探针的荧光强度比率反映百草枯的浓度。结果 百草枯在5～100μmol/L范围内线性关系良好,检出限为1.4μmol/L,检测时间为7～15min,选择性和抗干扰能力良好。利用智能手机RGB识别可视化定量检测百草枯,检出限为4.4μmol/L。方法可用于小白菜中百草枯的检测,回收率为96.05%～106.30%。结论 该方法首次实现对百草枯的比率荧光智能检测,具有快速、简便、低成本等特点,为联吡啶类除草剂的检测提供研...     

金纳米簇在食品安全检测中的研究进展和应用

金纳米簇作为一种新型的纳米材料具有良好的生物相容性、荧光性、手性、模拟酶性能等优点,在食品安全检测中具有很大的应用前景。尤其金纳米簇具有极佳的荧光性能,主要表现为斯托克斯位移大、荧光可调、光学稳定性高等优点。此外,金纳米簇还具有类似天然氧化酶的催化特性,相较于传统天然酶,其稳定性更高,因此被应用于传感检测。本文主要从金纳米簇的荧光性能和类过氧化物酶性能出发,总结了近5年金纳米簇在食品安全检测中的检测原理及应用,包括对金属离子、微生物和生物毒素、农药和兽药残留等其他方面,最后对金纳米簇在食品安全检测中的未来发展面临的挑战进行讨论,以期为金纳米簇在食品检测领域的应用提供参考。     

基于DNA-银纳米颗粒比色法高灵敏度检测过氧化氢和葡萄糖

建立一种基于DNA-银纳米颗粒(DNA-AgNPs)高灵敏比色传感器检测过氧化氢和葡萄糖的方法。在DNA保护下,用硼氢化钠还原硝酸银合成DNA-AgNPs,加入过氧化氢后其溶液颜色由黄褐色变为无色,从而实现过氧化氢的比色法检测。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成过氧化氢,利用此方法可间接测定葡萄糖的含量。在优化试验条件下,对过氧化氢和葡萄糖的检测限为分别为0.36μmol/L和1.13μmol/L。以梨汁为实际样品,通过标准加入法测定葡萄糖含量,加标样品的回收率范围在87.00%～96.02%。该方法实现了食品中过氧化氢和葡萄糖的快速、可视化检测,提高了检测的精确性和灵敏度,为构建食品中目标物的检测方法提供了参考。     

纳米二氧化铈模拟过氧化物酶的研究进展

过氧化物酶在自然界中广泛分布,其利用过氧化氢来催化各种有机和无机化合物的氧化,在诸多领域得以应用。但由于过氧化物酶属于生物有机材料,存在纯化困难、稳定性差等缺点,也限制了其应用环境。纳米酶作为一种高效、简单、稳定、高性能的天然酶替代物在各种应用中得到了广泛的研究,克服了天然酶在工业等方面的实际局限性,其中纳米二氧化铈（CeO₂NPs）由于具有过氧化物酶特性已成为科学界研究的热点之一。本文综述了近几年纳米二氧化铈模拟过氧化物酶在食品分析、生物标志物的检测、医学、光学传感、仿生等方面应用的研究进展,显示出它在不同研究领域的巨大潜力,希望能为后续进一步研究提供一定的参考。     

基于DNA保护的银纳米簇荧光探针检测啶虫脒

目的设计合成DNA-AgNCs荧光探针用于检测啶虫脒。方法以啶虫脒的适配体DNA为保护剂,硼氢化钠为还原剂还原AgN03,合成发射波长为421nm的DNA-AgNCs。啶虫脒溶液与该纳米簇混合时,荧光强度降低,根据该现象检测啶虫脒。结果在37℃的条件下,啶虫脒于DNA-AgNCs体系中(在pH=7.0的磷酸缓冲溶液中)反应60 min后荧光猝灭,啶虫脒的浓度在5～200μmol/L范围内呈现出良好的线性关系,检出限为2.8μmol/L(S/N=3)。结论该检测方法较简单,易操作,快速、准确、灵敏,适用于测定啶虫脒。     

Amperometric Determination of Fish Freshness by a Hypoxanthine Biosensor

The traditional determination of fish freshness is to detect total volatile basic nitrogen, microbial load or hypoxanthine. These methods are complex and expensive. A hypoxanthine biosensor was constructed by using immobilised xanthine oxidase and a platinum electrode. The enzyme was immobilised on a silk membrane. The electrode detected the hydrogen peroxide released during the enzymatic reaction. A linear range from 0·05 to 100×10⁻⁶ M of hypoxanthine was observed. When the method was applied to fish samples, the results obtained agreed well with those obtained by the conventional total volatile basic nitrogen and microbial load. This biosensor provides a reliable, simple, rapid and economical method for the measurement of fish freshness.     

复合酶中糖化酶活力的测定

复合糖化酶的酶活力检测是主要的质量控制指标,只有选用合理的糖化酶活力检测方法,才能真实反映出复合酶中糖化酶活力的高低.为避免因协同作用而产生的复合酶中其他酶制剂对糖化酶活力检测的干扰,作者总结了以往的研究成果,结合4种不同酶制剂的作用机理,最终否定了常用的淀粉底物法,确定了麦芽糖底物法为首选方法.     

基于阳极氧化铝比色阵列传感器对鱼肉新鲜度的测定

为了快速、准确地对鱼肉新鲜度进行无损实时监测,本研究以阳极氧化铝片为基材,选取13种指示剂作为气敏材料,构建了一种可视化比色阵列传感器。利用所构建的比色阵列传感器对贮藏过程中大菱鲆鱼肉新鲜度进行测定。结果表明,在25 ℃条件下,当贮藏时间超过22 h时,鱼肉的总挥发性盐基氮（TVB-N）含量达到32.85 mg/100 g,鱼肉发生腐败变质,此时的比色阵列传感器中的阵列点发生颜色变化。提取阵列点在响应前后的红、绿、蓝（Red、Green、Blue,RGB）值并进行差减,对其进行聚类分析和主成分分析。结果表明,该传感阵列能够准确区分不同贮藏时间段的鱼肉新鲜度。此外,将该阵列传感器应用于不同贮藏时间下鲤鱼和美国红鱼新鲜度的检测,结果表明通过传感阵列预测的TVB-N值与实际测量值之间没有显著性差异。因此,将该传感器应用于鱼肉新鲜度监测具有可行性。     

铜、碘掺杂碳点过氧化物模拟酶比色探针检测茶叶中痕量Pb(II)

基于Pb(II)对铜、碘掺杂碳点模拟酶的活性调节,建立简单、灵敏测定茶叶中Pb(II)的比色探针新方法。铜、碘掺杂碳点的动力学分析结果表明：其模拟酶催化参数符合典型的米氏方程模型。Pb(II)吸附于铜、碘掺杂碳点表面后,可促进底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB）的氧化。Pb(II)在0.27～27.02?mg/L范围内呈良好的线性关系。将该方法用于Pb(II)含量的测定,其检出限可达到34.3?μg/L,实际茶叶样品的加标回收率在92.41%～101.85%范围内,满足GB?5009.12—2017《食品中铅的测定》中的检测要求。该方法具有简便、稳定、特异性强等特点,其检出限也低于国家规定的食品中Pb(II)含量限值。     

检测牛奶中过氧化氢的电化学酶传感器的研制

构建一种基于聚硫堇的丝网印刷电化学酶传感器,用于牛奶中过氧化氢的检测。将硫堇电聚合在丝网印刷碳电极上,用壳聚糖二氧化硅溶胶凝胶包埋辣根过氧化酶并固定于聚硫堇电极表面,制成新型过氧化氢生物传感器。结果显示：在牛奶标液中加入不同浓度的过氧化氢后,该酶传感器的响应电流与过氧化氢浓度在3×10-5～1.5×10-3mol/L范围内呈良好的线性关系(R＝0.9964),最低检出限为1.675×10-5mol/L。该传感器应用于牛奶中过氧化氢的检测与国标碘量法基本一致,其加样回收率范围为85.6%～89.4%。该酶传感器灵敏快速(15min)、制作方便、样品处理简单,有望用于牛奶中过氧化氢的快速检测。     

蜂蜜中β-葡萄糖苷酶活性测定及来源分析

以对硝基苯基β-D- 葡萄糖苷(pNPG)为底物,对蜂蜜中β- 葡萄糖苷酶活性测定条件进行研究。结果表明：蜂蜜中β- 葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件为以柠檬酸- 磷酸氢二钠缓冲液为提取液,pH5.0,温度60℃,底物浓度30mmol/L。酶促反应在2.5h 和37℃时酶促反应曲线线性关系最好。研究还发现,β- 葡萄糖苷酶可能是蜜蜂在采集加工过程中加入进去的,同时,该酶活性还可能与蜂蜜的新鲜度相关。     

水溶性可得然寡糖的制备及其活性研究

研究了在碱性条件下,利用双氧水均相氧化降解可得然胶,制备低分子量水溶性可得然寡糖的工艺条件。通过单因素试验对氢氧化钠浓度、双氧水加量、反应温度、反应时间等影响降解的条件进行了优化,最终确定了降解的最佳工艺条件是氢氧化钠的浓度为2 mol/L、双氧水加量为1.5% (V/V)、降解温度为40 ℃、降解时间为48 h。利用纸层析和红外光谱对降解产物进行表征,结果表明降解后产品的化学结构未发生改变。进一步研究了产物可得然寡糖体内抗肿瘤、对竹节虾生长性能影响及抑菌试验,结果表明：可得然寡糖具有一定的抑瘤效果,小鼠实验表明,剂量为50 mg/kg体重时,抑瘤率可达48.73%;竹节虾饲料中添加可得然寡糖可提高其存活率,添加量为400 mg/kg时,酚氧化酶活力最高,达到2.96 U/mg;可得然寡糖对金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌效果,对大肠杆菌具有较微弱的抑菌效果,而对安琪酵母菌无抑菌效果。     

谷氨酸脱羧酶活力测定中GABA比色定量方法研究

建立了谷氨酸脱羧酶活力测定中γ-氨基丁酸比色测定方法,该方法灵敏度高、精确性和重现性好。测定程序为:取酶反应液0.4ml,加入Na2CO3(1mol/L)0.1ml、pH10.0硼酸盐缓冲液(0.2mol/L)0.5ml、6%苯酚1ml,混匀,于室温下(20℃)在5min内加入5.2%NaClO溶液1ml,混匀后放置4～8min,然后沸水浴l0min,立即冰浴20min,待溶液出现蓝绿色后,加入2.0ml60%乙醇溶液,混匀后于20℃水浴中放置20～40min,测定640nm处的吸收值。经采用比色法和高效液相色谱法对谷氨酸脱羧酶酶反应液进行测定,两种方法的测定结果相对误差为4.91%。     

鱼肉鲜度测定方法研究进展

综述了用于鱼肉鲜度测定的几类不同方法 ,包括感官评价方法、微生物学方法、物理和化学方法和生物传感器方法等 ,并比较了不同测定方法的特点 ,阐明了鱼肉鲜度测定方法的未来发展趋势。