红毛藻多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节机理

本研究以环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）诱导的免疫力低下小鼠为模型,探究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharides,BFP）对免疫抑制小鼠免疫力的影响。结果表明,BFP干预能够显著提高免疫抑制小鼠自然杀伤细胞活性、巨噬细胞吞噬能力和清除碳颗粒能力;增强T淋巴细胞增殖作用,上调CD4＋ T细胞比例,降低CD8＋ T细胞比例并增加CD4＋/CD8＋,降低辅助性T细胞17和CD3－CD19＋ B细胞的比例;提高血清溶血素、免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）A和IgG、免疫相关细胞因子白细胞介素（interleukin,IL）-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、干扰素-γ（interferon-γ,INF-γ）的质量浓度,对免疫抑制小鼠的非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫均具有良好的调节作用。在明确BFP对免疫抑制小鼠免疫功能具有保护作用的基础上,分析其对免疫抑制小鼠肠道相关免疫细胞表面受体的影响,发现BFP能够显著或极显著下调Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）2、TLR4、IL-6和TNF-α基因（P＜0.05）和蛋白（P＜0.01）的表达,推测BFP通过TLR2/TLR4下游相关信号通路调节轴发挥增强免疫力的功能。本研究可为深入认识海洋食品的营养价值,推进海洋食品在居民膳食中的应用提供科学依据。     

红毛藻多糖对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP）对H2O2诱导的人结肠腺癌（Caco-2）细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：构建过氧化氢（H2O2）诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞裂解液中的抗氧化物水平及相关酶活力,评价BFP对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果：BFP可明显提高H2O2诱导氧化损伤的Caco-2细胞活力,降低细胞内活性氧生成水平,提高细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽水平,减少丙二醛生成,并通过抑制Caspase-3和Caspase-9活性来改善氧化应激损伤引起的细胞凋亡。结论：BFP对H2O2诱导氧化应激损伤的Caco-2细胞具有保护作用,可通过增强细胞内源性抗氧化酶活力、提高非酶类抗氧化物水平和抑制细胞凋亡明显缓解H2O2诱导的Caco-2细胞氧化应激损伤。     

勐库大叶茶蛋白降血脂肽的酶解制备及活性分析

以碱提酸沉法提取的勐库大叶茶蛋白为研究对象,以牛磺胆酸钠结合能力为考察指标,通过单因素实验和响应面分析法优化勐库大叶茶蛋白降血脂肽的制备工艺,并对最优工艺条件下的酶解物进行降血脂活性评价和氨基酸组成分析.结果表明,勐库大叶茶蛋白降血脂肽的最佳制备条件为胃蛋白酶酶解3 h、pH2.1、底物浓度2.7％、酶底比0.3％、温...     

基于酶活力和细胞模型分析广佛手多糖降血糖活性及作用机制

佛手（Citrus medica ‘Fingered’）是一种药食同源的芸香科柑桔属植物,产自广东的佛手称为广佛手。本研究以广佛手多糖为对象,采用酶活力和细胞模型探究其体外降血糖活性及机制。结果表明,广佛手多糖FCP-2-1对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶和血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）活力的半抑制质量浓度（half-maximal inhibitory concentration,IC50）分别为2.74、0.87 mg/mL和0.85 mg/mL。在3T3-L1脂肪细胞中,广佛手多糖各分离纯化组分均能显著促进细胞葡萄糖转运,改善细胞的脂代谢,降低肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α的分泌量。其机制可能是FCP-2-1通过促进磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,也称AKT）通路中PI3K、葡萄糖转运体4、AKT和磷酸化-AKT蛋白的表达,缓解细胞的胰岛素抵抗,恢复细胞正常代谢。     

辣椒红色素和辣椒碱体内抗氧化活性及降血脂功能

目的：初步探究辣椒红色素和辣椒碱富集组分对高血脂症小鼠的抗氧化和降血脂作用。方法：在饲喂高脂饲料的同时,采用不同剂量的辣椒红色素和辣椒碱灌胃小鼠28 d后,研究不同剂量的辣椒红色素和辣椒碱组分对高血脂症小鼠肝脏组织的抗氧化作用,测定肝组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）活力及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;研究辣椒红色素和辣椒碱组分对高血脂症小鼠的降血脂作用,测定小鼠血清中总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）含量。结果：与高脂模型组相比,辣椒红色素和辣椒碱各剂量组小鼠体质量显著降低（P＜0.01或P＜0.05）。辣椒红色素和辣椒碱各剂量组小鼠的GSH-Px、SOD和CAT活力显著高于高脂模型组（P＜0.01或P＜0.05）,MDA含量显著高于高脂模型组（P＜0.01或P＜0.05）。辣椒红色素和辣椒碱各剂量组小鼠血清TG、TC、LDL-C含量与高脂模型组相比显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,辣椒红色素和辣椒碱各剂量组小鼠HDL-C含量显著高于高脂模型组（P＜0.01或P＜0.05）。结论：辣椒红色素和辣椒碱具有一定的体内抗氧化和降血脂作用。     

藜麦蛋白肽的酶解制备及体外降血脂与降尿酸活性研究

为研究藜麦蛋白降血脂肽的最佳酶解工艺条件和降尿酸活性,本研究以藜麦为原料提取蛋白,采用胰脂肪酶抑制率为活性指标,通过单因素实验和响应面分析法优化降血脂肽的制备工艺,并对藜麦蛋白肽的胰脂肪酶抑制活性、牛磺胆酸钠结合活性、胆固醇酯酶抑制活性、黄嘌呤氧化酶抑制活性和氨基酸组成进行分析表征。结果表明,藜麦降血脂肽的最优酶解条件为pH1.6、酶解温度42.9℃、底物浓度3.03%、酶解时间1 h和酶底比0.2%,所得酶解液的胰脂肪酶抑制率理论值为90.43%,实际值为90.93%±0.10%。该条件下制备的最优酶解物表现出优异的体外降血脂效果,其胰脂肪酶抑制率和胆固醇酯酶抑制率的IC₅₀分别为7.49μg/mL和4.73 mg/mL,牛磺胆酸钠结合率的EC₅₀为0.53 mg/mL。此外,最优酶解物显示出良好的黄嘌呤氧化酶抑制效果(IC₅₀=5.97 mg/mL),表明其具有体外降尿酸的作用。氨基酸分析表明,藜麦蛋白肽的必需氨基酸含量丰富(34.23%),并且疏水性氨基酸和酸性氨基酸百分含量分别为34.11%和31.66%。藜麦蛋...     

板栗壳黄酮结构分析及其对胰脂肪酶活力的抑制作用

在分析板栗壳黄酮结构的基础上，研究其对胰脂肪酶的抑制作用及类型。采用醇提法提取板栗壳中的黄酮，并用AB-8大孔吸附树脂进行纯化，冻干后得到的黄酮含量为（107.50±1.00）mg/g，提取得率为（5.66±0.05）%。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用技术对板栗壳黄酮进行结构分析，鉴定出8 种黄酮类化合物。采用对硝基苯酚法测定胰脂肪酶活力，分别考察板栗壳黄酮对胰脂肪酶的抑制效果及不同反应条件下板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响，结果表明，板栗壳黄酮对胰脂肪酶有较好的抑制作用，半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC50）为0.074 mg/mL，且使胰脂肪酶最适pH值向碱性偏移。通过Lineweaver-Burk双倒数作图法确定其抑制类型为非竞争性抑制，抑制常数Ki＝53.19 mg/mL。由此可见，板栗壳黄酮是一种效果良好的胰脂肪酶抑制剂。     

地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制作用

目的:探讨地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性的抑制作用。方法:采用X-5大孔树脂纯化地参结合酚提取物,并用Folin-酚法测定地参结合酚提取物酚含量;同时,采用HPLC对地参结合酚提取物的组成进行分析;以抑制率为考察指标,测定地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性的抑制作用。结果:地参结合酚提取物酚含量为155.55~164.95 μg GAE/mg,主要的酚类化合物单体为咖啡酸(40.67~72.18 μg/mg EDW)和迷迭香酸(22.01~46.22 μg/mg EDW);抑制α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的IC₅₀值范围分别为2.0275~3.7538和1.4438~3.1030 mg/mL。结论:地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶抑制剂具有显著的抑制作用,可作为α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶抑制剂。     

米糠多肽的制备和体外降血脂、降血糖活性分析及结构鉴定

以米糠蛋白为原料，运用超声波-微波辅助酶法制备米糠多肽(RBP)。以多肽得率为指标，利用正交试验优化制备工艺，并对3组RBP进行体外降血脂、降血糖活性分析及结构鉴定。结果表明：RBP最佳制备工艺为酶解温度50℃、超声功率250 W、酶解pH 9.0、液料比20∶1 (mL/g)、加酶量6 000 U/g、超声时间60 min,在此条件下制得的多肽得率为66.78%±0.28%;3组RBP降血脂降血糖能力大小为RBP-1>RBP-2>RBP-3;扫描电镜显示RBP为蜂窝块状结构，且RBP-1明显小于RBP-2与RBP-3;红外图谱显示RBP有明显的蛋白质特征吸收峰；RBP-1的疏水性氨基酸占总氨基酸含量的45%,展示出较好的体外降血脂、降血糖活性。     

酶促酯交换反应制备柚皮苷酯及其抑制HepG2细胞的增殖活性

本文研究了非水相条件下利用固定化脂肪酶~(IM)TL催化柚皮苷的酯交换反应,得到了一系列带有不同链长脂肪酸的柚皮苷酯。固定化脂肪酶~(IM)TL对反应显示出高催化活性,其底物转化率均达到90%以上。在4 mL叔戊醇体系中,50 mg ~(IM)TL酶,柚皮苷:酰基供体=1:20,50℃的条件下,反应3 h后,区域选择性达99%以上。在对柚皮苷酯进行液相分析、质谱和核磁鉴定后,发现酰化产物为柚皮苷-6’’-O-酯。研究发现柚皮苷酯的Clog P发现随着链长的增长而增加,其中柚皮苷肉豆蔻酯的Clog P值为6.50。HepG2细胞抑制实验的结果显示柚皮苷酯对HeG2细胞增殖的抑制活性与柚皮苷酯的脂溶性相关。相较于柚皮苷,柚皮苷酯对HepG2细胞具有更好的抑制增殖作用。带有长链脂肪酸的柚皮苷肉豆蔻酯具有更加良好的脂溶性,对HepG2细胞增殖抑制作用更强(2.28%)。以上研究表明酶促合成生成的柚皮苷酯比柚皮苷具有更广阔的应用前景。     

红毛藻多酚提取工艺优化及抗氧化活性

为研究红毛藻多酚提取工艺及其抗氧化活性,采用溶剂浸提法提取多酚,选取提取时间、提取温度、乙醇体积分数、料液比为单因素,进一步通过正交试验优化确定最佳提取工艺。以DPPH和ABTS自由基清除率为指标,评价红毛藻多酚的抗氧化活性。结果显示,红毛藻多酚的最佳提取工艺为:浸提温度70 ℃,浸提时间70 min,乙醇体积分数60%,料液比1:10 g/mL,此条件下多酚提取量为（9.67 ± 0.14）mg/g。抗氧化活性评价显示,红毛藻多酚对DPPH和ABTS自由基有一定的清除能力,其IC₅₀值分别为0.313、0.445 mg/mL。研究结果表明正交优化提取红毛藻多酚的工艺简单可行,此方法提取多酚具有较强的抗氧化活性。红毛藻多酚具有开发为天然抗氧化剂的潜力,有较好的应用前景。     

红毛藻可溶性成分提取方法

对用不同方法提取红毛藻可溶性成分的提取效果进行了比较，同时用正交实验确定了酶解的最佳提取条件。结果表明：酶解法的提取效果最好，能有效地保持红毛藻的天然颜色，经纤维素酶（1％）预处理后，红毛藻的提取率可达59.15%。     

山楂多糖提取工艺优化及其降血糖、降血脂活性

本文优化了山楂多糖的微波辅助提取工艺,并对其降血糖降血脂活性进行了研究。在考察固液比、提取温度、微波功率、提取时间对山楂多糖提取量影响的基础上,采用Box-Behnken响应面法对提取工艺进行优化。通过测定初步纯化的山楂粗多糖对α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶抑制率和DPPH·清除率,评价山楂多糖的降血糖、降血脂活性。结果表明,山楂多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度63 ℃,微波功率500 W,提取时间7 min,在此条件下山楂多糖提取量为(147.10±0.32) mg/g。山楂粗多糖对α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶抑制率和DPPH·清除率的IC₅₀分别为(99.22±0.89) μg/mL、(22.50±0.79) mg/mL、(185.80±0.64) μg/mL,表明山楂粗多糖具有一定的降血糖、降血脂作用。     

红毛菜多糖组成及结构的初步研究

对福建产红毛菜(Bangiafusco-purpurea)的热水提取物采用Sevage法脱蛋白,乙醇沉淀得粗多糖。经DEAE-32和SephadexG-200柱层析纯化,得到3种多糖PY1、PY2和PY3,其中PY3为主要的多糖。PY3紫外光谱和理化鉴定显示它不含蛋白质和核酸;化学组成分析得出该多糖半乳糖的含量为65.9%,硫酸根含量为9.53%;元素分析表明该多糖C:N:S摩尔比约为72:2:3;该多糖的水解产物经气相色谱分析,主要由半乳糖及其衍生物组成,有少量木糖存在,半乳糖和木糖的摩尔比值为11:1;红外光谱揭示它基本不含3,6-内醚一半乳糖的特征吸收,却有较强的硫酸基吸收峰;推测该多糖可能主要由6-硫酸基-半乳糖和β-D-半乳吡喃糖为重复二糖的多糖,可能是一种原琼胶。     

红树莓多糖降血脂作用

以红树莓为原料,采用复合酶法对红树莓多糖进行提取,再经过DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和葡聚糖凝胶柱层析进行分离纯化,并且分别采用高效液相凝胶色谱法和气相色谱法测定分子量和单糖组成,通过动物实验对其降血脂作用进行研究。结果表明:RRP-I分子量为11220.1845 Da,单糖组成为由葡萄糖组成的均一多糖。灌胃RRP-I后的高血脂大鼠,血清中的四项指标TG(甘油三酯)、TC(总胆固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白)水平降低,HDL-C(高密度脂蛋白)水平升高。RRP-I低、中、高剂量组大鼠血清中TG、TC和LDL-C水平均呈下降趋势,而HDL-C呈上升趋势,呈现出一定量效关系,表明RRP-I具有降血脂作用。以上结果表明RRP-I可以改善高血脂症大鼠的血脂水平,为红树莓多糖降血脂药物提供理论依据。     

南非叶总黄酮的降血脂作用

目的:研究南非叶总黄酮对高血脂模型小鼠脂质代谢的影响。方法:以昆明种小鼠为实验动物,随机分成6组:空白对照组、高脂模型组、辛伐他汀阳性对照组(25 mg/kg)和南非叶总黄酮低、中、高组(10、50、100 mg/kg)。空白对照组喂以基础饲料,5组试验组喂以高脂饲料,小鼠灌胃南非叶总黄酮,4周后称重并解剖,测定血清中总甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量,计算动脉粥样硬化指数和肝指数。结果:与模型组比较,南非叶总黄酮能显著降低高血脂小鼠血清中TG、TC、LDL-C的含量,提高HDL-C含量,并有效降低动脉粥样硬化指数和肝指数。其中100 mg/kg南非叶总黄酮试验组效果最好,与模型组相比,TG、TC值和LDL-C值分别降低了28.29%、17.55%和63.32%,HDL-C值提高了44.20%。结论:南非叶总黄酮具有显著的降血脂作用。     

黄伞子实体多糖的初步纯化及降血脂研究

目的：探讨黄伞子实体多糖的纯化方法及对高脂血症小鼠降血脂作用。方法：子实体多糖经中性蛋白酶和S e v a g 法联合除蛋白,用高脂饲料建立高脂血症模型,给药高、中、低剂量组分别为4 0 0 、2 0 0 、100mg/(kg bw·d),5 周后测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果：黄伞子实体多糖能显著降低TC(高、低剂量组P ＜ 0.05)、TG(中剂量组P ＜ 0.05,低、高剂量组P ＜ 0.01)、LDL-C(中、高剂量组P ＜ 0.05,低剂量组P ＜ 0.01)水平,提高HDL-C 水平(低、高剂量组P ＜ 0.05,中剂量组P ＜ 0.01)和动脉粥样硬化因子(AI)(高剂量组P ＜ 0.05)。结论：黄伞子实体多糖具有降低小鼠高血脂症、预防动脉粥样硬化的作用。