枸杞中绿原酸对转化生长因子-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）纤维化的干预效果。方法：质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型，用不同质量浓度绿原酸处理纤维化细胞，细胞毒性实验（cell counting kit-8，CCK-8）检测绿原酸对CFs增殖的影响；酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测纤维化标志蛋白胶原蛋白（collagen，Col）I、Col III和免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）检测Twist1、Acta2、Snail2及纤维化蛋白S100A4等mRNA表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白及其磷酸化表达水平。结果：CCK-8检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能抑制细胞异常增殖；ELISA和免疫荧光检测表明，枸杞中分离得到的绿原酸能下调纤维化标志蛋白Col I、Col III和α-SMA的表达；qPCR检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调纤维化转录调控因子Acta2、Twist1、Snail1、Snail2、Smad4及纤维化蛋白S100A4的mRNA表达（P＜0.001）；Western blot检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达（P＜0.001）。结论：在本研究质量浓度范围内，枸杞中分离得到的绿原酸抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化过程，其机制可能与TGF-βl/Smads信号通路有关。     

尿石素A对转化生长因子-β1诱导的人近端肾小管上皮细胞纤维化的影响

为探究尿石素A(urolithin A,UA)对人近端肾小管上皮细胞（HK-2）纤维化的干预效果和潜在作用机制，本研究建立转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的HK-2纤维化模型，考察对照组、TGF-β1模型组（4 ng/mL处理48 h）、UA低浓度组（5μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1）、UA高浓度组（10μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1）对HK-2细胞的影响。试验结果表明：UA干预能改善TGF-β1引起的HK-2形态变化并显著降低细胞纺锤体指数（P <0.01）；降低纤维化标物Col I、Col III、Vimentin、Snail和Slug和炎症标志物IL-1β、IL-6、MCP-1、NLRP3的表达（P <0.01）；下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的相对表达（P <0.01）。上述研究表明UA能减轻TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化，其作用的机制可能是通过下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路来实现的。本研究能为开发天然活性成分UA用于延缓...     

枸杞多糖抑制TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞活化作用机制

目的：探究宁夏枸杞多糖对转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）诱导的心脏纤维化细胞模型干预作用。方法：分离培养小鼠原代心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs），用质量浓度10 ng/mL TGF-β1作用于CFs，建立心脏纤维化细胞模型，采用宁夏枸杞多糖进行处理，观察细胞形态；免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平；实时荧光定量聚合酶链式反应检测Snail、Twist和S100A4 mRNA的表达水平。结果：与对照组相比，模型组加入TGF-β1后，CFs细胞的形态由梭形变得狭长，细胞数目显著增多；α-SMA蛋白相对表达量升高；TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平升高；Snail、Twist和S100A4的mRNA表达水平高度显著升高（P＜0.001）；给予宁夏枸杞多糖处理，可高度显著抑制TGF-β1诱导的CFs增殖（P＜0.001），减少CFs细胞中α-SMA及TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达，高度显著下调Snail、Twist和S100A4的mRNA表达（P＜0.001）。结论：枸杞多糖对TGF-β1诱导的CFs纤维化具有改善作用，其作用机制与抑制TGF-β1/Smads信号通路有关。     

复方胶原蛋白肽粉对皮肤慢性紫外线损伤小鼠的改善作用及机制研究

目的：观察复方胶原蛋白肽粉对小鼠皮肤慢性紫外线损伤的改善作用,并探讨其作用机制。方法：ICR雌性小鼠随机分成正常组、模型组、复方胶原蛋白肽粉组、鱼胶原蛋白肽组。使用紫外光疗仪模拟日光照射小鼠背部皮肤建立皮肤慢性紫外线损伤模型。每周对小鼠皮肤表观进行评分,每3周拍照记录一次小鼠皮肤外观,9周后采用干燥法测定小鼠皮肤含水量;苏木精-伊红（HE）染色法观察小鼠皮肤组织病理形态学变化;采用FRAP法检测小鼠皮肤组织中总抗氧化能力（T-AOC）水平;酶联免疫吸附（ELISA）法检测皮肤组织中I型胶原蛋白（Col I）、弹性蛋白（ELN）、透明质酸（HA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、糖基化终末产物（AGEs）水平;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测皮肤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、转化生长因子β受体2(TGF-βR2)、Smad2、Smad3、Smad7蛋白表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测皮肤组织中TGF-β1、TGF-βR2、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达水平。结果：与...     

桑叶生物碱对D-半乳糖诱导小鼠肠道屏障损伤的改善作用及机理

目的：探讨桑叶生物碱对小鼠肠道屏障损伤的改善作用,旨在为桑叶的开发利用提供理论依据。方法：采用D-半乳糖诱导建立小鼠氧化损伤模型,造模成功后每天灌胃低（50 mg/kg mb）、中（100 mg/kg mb）、高（200 mg/kg mb）剂量的桑叶生物碱,45 d后测定各组小鼠血清中D-乳酸（D-lactic acid,D-LA）浓度、脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）含量、肠型脂肪酸结合蛋白（intestinal fatty acid binding proteindityrosine,iFABP）质量浓度以及二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）的活力,取小肠组织进行苏木精-伊红染色观察组织病理学改变,实时定量聚合酶链式反应测定3 种紧密连接蛋白（闭合蛋白（Occludin）、Claudins、ZO-1）的mRNA表达水平。结果：不同剂量的桑叶生物碱可显著改善模型组的以上指标水平,以高剂量的作用效果最佳。与模型组相比,高剂量桑叶生物碱使D-LA、LPS、iFABP水平分别降低了22.14%、32.12%、19.98%（P＜0.05）,DAO活力降低了23.22%（P＜0.05）,使Occludin、Claudins、ZO-1的mRNA表达水平分别上调了272.78%、81.16%、154.67%（P＜0.05）。此外,小肠组织病理切片显示,桑叶生物碱可以显著改善肠细胞凋亡、排列紊乱的现象,并恢复细胞间的紧密连接。结论：桑叶生物碱可有效改善肠道屏障损伤,其机制可能与其能够显著上调Occludin、Claudins、ZO-1的mRNA表达水平,改善肠组织的病理学损伤,恢复细胞间的紧密连接结构有关。     

桑叶生物碱对高脂饮食诱导小鼠肝损伤的改善作用及机理

目的：探讨桑叶生物碱对高脂饮食诱导小鼠肝损伤的改善作用与机理,为桑叶的科学利用提供参考。方法：用高脂饲料喂饲小鼠的同时灌胃不同剂量的桑叶生物碱,于第4、8、12、16周末检测小鼠肝脏系数和血浆谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）活力;取肝组织进行苏木精-伊红染色观察组织病理学改变;实时定量聚合酶链式反应测定肝组织炎症因子白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和细胞凋亡因子Bax、Bcl-2 mRNA表达水平。结果：与高脂对照组比,随着桑叶生物碱灌胃剂量的增加和时间的延长,小鼠肝脏系数及ALT、AST活力显著下降（P＜0.05）,肝脏中脂质沉积和脂肪变性得到改善,IL-10、Bcl-2 mRNA表达水平显著上升（P＜0.05）,TNF-α、Bax mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）。200 mg/kg mb桑叶生物碱灌胃16 周能使肝损伤小鼠机体各指标恢复到正常水平。结论：桑叶生物碱对高脂饮食导致的肝损伤有良好的改善作用,其机制可能与调节炎症因子（TNF-α、IL-10）和细胞凋亡因子（Bax、Bcl-2）的mRNA表达水平有关。     

桑叶生物碱对氧化应激小鼠糖脂代谢异常及肝损伤的改善作用

目的：探究桑叶生物碱对氧化应激所致小鼠糖脂代谢异常及肝损伤是否具有改善作用,旨在为桑叶生物碱的深入利用提供理论依据。方法：采用连续20 d腹腔注射1 000 mg/kg mb D-半乳糖建立小鼠氧化损伤模型,分别对造模成功的小鼠灌胃低（50 mg/ kg mb）、中（100 mg/kg mb）、高（200 mg/kg mb）剂量的桑叶生物碱及抗氧化剂还原型谷胱甘肽（glutathione（GSH）,200 mg/kg mb）,于灌胃第0、4、8、12周末取样,测定各组小鼠空腹血糖、血脂浓度及肝损伤指标的变化。结果：在本实验周期及剂量范围内,与模型组相比,阳性药物组和桑叶生物碱中、高剂量组小鼠的空腹血糖浓度、血浆总胆固醇浓度、甘油三酯浓度,肝损伤指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力均显著下降（P＜0.05）;同时,桑叶生物碱高剂量组与阳性药物组接近,均恢复到正常水平,表明桑叶生物碱对小鼠糖脂代谢异常及肝损伤的改善作用呈现较明显的剂量依赖效应,但无明显时间依赖效应。肝脏组织切片观察结果也显示阳性药物组和桑叶生物碱各剂量组小鼠的肝脏病变程度明显减轻。结论：桑叶生物碱可以改善氧化应激所致小鼠的糖脂代谢异常和肝损伤,其机制可能与抑制氧化应激的发生发展有关。     

黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及衰老相关基因的影响

目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检测黑咖啡提取物对细胞中Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)含量的影响,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测黑咖啡提取物作用后细胞中ColⅠ和MMP-1 mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较,黑咖啡提取物可抑制HSF细胞中MMP-1合成(P0.05),促进ColⅠ合成(P0.05);使ColⅠmRNA表达水平升高(P0.01),而MMP-1 mRNA表达水平降低(P0.01)。结论黑咖啡提取物通过促进ColⅠ和抑制MMP-1表达,对胶原蛋白代谢具有改善和调节作用,可延缓皮肤衰老。     

组方提取物A的抗光化功效及其机理研究

长期紫外线照射会引发诸多皮肤相关疾病,皮肤的保养越来越受到学者们的广泛关注。本文研究组方提取物A对大鼠抗光老化的影响。通过病理学分析和电镜检测照射部位皮肤组织病理学形态及超微结构;采用免疫组化和荧光定量PCR检测皮肤基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-2、MMP-9和Ia抗原的表达以及皮肤组织中I型胶原、III型胶原、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)基因表达情况。研究表明:与模型对照组相比,组方提取物A低、中、高剂量组照射部位皮肤真皮间质血管扩张、炎细胞浸润、成纤维细胞增生减轻,真皮弹力纤维变性、局灶性蓄积减轻,皮肤表皮厚度、真皮层成纤维细胞数显著降低,照射部位皮肤的超微结构得到改善,提取物A可降低皮肤转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,提高皮肤III型胶原的表达。因此,组方提取物A具有较好的抗光老化功效。     

樟芝提取物Fr.3抑制TGF-β1诱导的肝纤维化机制

探讨樟芝菌丝体正己烷提取物Fr.3组分对TGF-β1诱导的肝星状细胞(CFSC-8B)活化的影响及作用机制。采用TGF-β1诱导CFSC-8B活化,通过MTT、WST-1、小室迁移、qRT-PCR及western blotting法检测Fr.3组分对TGF-β1诱导后的CFSC-8B细胞增值、迁移及细胞外基质的变化,并研究了其对TGF-β1介导的Smad、PI3K、MAPK信号通路中相关蛋白质表达的影响。Fr.3组分的IC_(50)值为54.56μg/mL;在细胞存活率80%以上范围内,Fr.3组分(20μg/mL)可显著抑制TGF-β1诱导的CFSC-8B细胞增值及迁移、明显下调ECM中的相关基因的表达水平及降低α-SMA、Col1、p-Smad2、p-ERK、p-P38及p-AKT的蛋白质表达水平。樟芝菌体正己烷提取物Fr.3可通过调控TGF-β1介导的Smad、PI3K、MAPK信号通路来抑制肝纤维化。     

蒙古扁桃种仁不同极性部位对博来霉素致大鼠肺纤维化的保护作用

目的:观察蒙古扁桃药材不同极性部位对博来霉素致大鼠肺纤维化的影响。方法:通过气管内注射博来霉素建立肺纤维化大鼠模型,给予蒙古扁桃治疗后,HE、Masson染色评估肺组织病理变化及检测肺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,检测肺组织中TGF-β1、Smad3和α-SMA通路蛋白表达,观察蒙古扁桃不同极性部位对博来霉素致大鼠肺纤维化形成影响。结果:与模型组比较,石油醚、正丁醇部位提取物可显著(P<0.05)降低肺纤维化小鼠肺指数,显著(P<0.05)升高肺组织SOD活性,减轻小鼠肺泡炎和肺纤维化程度,并显著(P<0.05)降低肺组织中MDA、肺组织中TGF-β 1、Smad 3和α-SMA mRNA的表达。结论:蒙古扁桃药材四种活性部位中,石油醚、正丁醇部位提取物是对博来霉素致大鼠肺纤维化具有较好保护作用的活性部位。机制是通过清除活性氧抵抗脂质过氧化作用,下调Smad 3,抑制TGF-β1和α-SMA的表达发挥抗肺纤维化的作用。     

The anti-photoaging and moisturizing effects of <Emphasis Type="Italic">Bouea macrophylla</Emphasis> extract in UVB-irradiated hairless mice

Ultraviolet (UV) light, a main cause of photoaging, leads to collapse of skin structure, resulting in wrinkle formation and dehydration. The present study assessed the anti-photoaging and moisturizing effects of Bouea macrophylla extract (BRE). UVB-irradiated hairless mice were orally administered with BME (300 mg/kg/day) for 8 weeks. BME ameliorated wrinkle formation, skin thickening, and inelasticity. BME upregulated COL1A1, COL3A1, COL4A1, and COL7A1 mRNA levels through activation of the transforming growth factor-β (TGF-β)/Smad pathway, thereby recovering the content of collagen reduced by UVB. Further, BME suppressed UVB-induced matrix metalloproteinase (MMP)-3 and MMP-13 expression and inhibited MMP-2 and MMP-9 activity by mediating the mitogen-activated protein kinases (MAPKs)/activator protein-1 (AP-1). BME improved moisture content by stimulating the expression of cornified envelope proteins and filaggrin-processing enzymes. Overall, the results show that BME prevents photoaging and promotes moisturization in UVB-irradiated hairless mice, suggesting its potential as a nutraceutical candidate for anti-photoaging and moisturizing effects.     

蒙古扁桃不同极性部位对肝纤维化大鼠的保护作用及机制研究

探讨蒙古扁桃不同极性部位对四氯化碳致肝纤维化大鼠的作用及可能机制。雄性SD大鼠分为7组,每组10只。以四氯化碳建立肝纤维化大鼠模型,将成模大鼠分为模型组、水飞蓟素组(0.05 g/kg)阳性药组和蒙古扁桃石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物组,同批未给四氯化碳的大鼠为正常对照组。给药8周后,测血清中的丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、透明质酸（hyaluronic acid, HA）、层粘连蛋白（laminin,LN）、Ⅲ型前胶原（type Ⅲ collagen,PC-Ⅲ）和Ⅳ型胶原（type Ⅳ collagen ,Col-Ⅳ）含量并计算肝指数和脾指数;同时测肝组织中MDA、SOD、羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）含量及转化生成因子β1（Transforming growth factor β1 protein,TGF-β1）、Smad3（mothers against decapentaplegic homolog）和Smad7的表达。与模型组比较,蒙古扁桃药材各极性部位大鼠的体质量显著增加（P<0.05）,血清和组织中MDA显著降低（P<0.05）,血清中SOD显著升高（P<0.05）,石油醚、水部位大鼠肝指数显著降低（P<0.05）;病理学检查结果显示,蒙古扁桃药材各部位给药组大鼠肝纤维化有明显改善;蒙古扁桃石油醚部位和正丁醇部位可显著降低血清中AST、ALP、HA、PC-Ⅲ含量（P<0.05）及下调组织中HYP、TGF-β1和Smad3的水平（P<0.05）;蒙古扁桃正丁醇部位可显著降低血清中ALT含量（P<0.05）。蒙古扁桃药材石油醚、正丁醇提取物对肝纤维化有显著改善作用,是保护肝纤维化的优选活性部位,其机制可能是通过调节胶原合成异常及TGF-β1/Smad 信号通路来发挥作用。     

CTGF-siRNA对TGF-β1诱导的肝星状细胞胶原分泌的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的小RNA(CTGF-siRNA)对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)胶原分泌的影响。方法:实验分为5组:正常组(单纯HSC-T6细胞组)、对照组(TGF-β1诱导组)、siRNA组、非特异siRNA组、lipo组(脂质体组)。培养大鼠HSC-T6细胞,以10ng/mL终浓度的TGF-β1对培养的HSC-T6细胞进行诱导,再通过脂质体法将CTGF-siRNA转染入HSC-T6细胞,通过RT-PCR、Western blotting方法研究各实验组细胞中CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen type I,Col 1a1)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA及蛋白的表达水平。结果:正常组细胞内CTGF有低水平的表达,在给予TGF-β1诱导后表达水平显著升高(P0.05);TGF-β1刺激24h后,靶向转染入特异性siRNA后,CTGF、Col 1a1、FN及α-SMA的表达均显著下调(P0.05)。结论:本研究提示,通过RNA干扰使CTGF基因沉默后,在体外可明显抑制HSC-T6肝成纤维细胞的表型转化及细胞外基质的合成,进一步提示CTGF是促肝纤维化的关键性细胞因子,而RNA干扰是一种特异高效的很有前途的干预手段,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。     

The protective effects of long-term oral administration of marine collagen hydrolysate from chum salmon on collagen matrix homeostasis in the chronological aged skin of Sprague-Dawley male rats

To investigate the long-term effects of marine collagen hydrolysate (MCH) from Chum Salmon skin on the aberrant collagen matrix homeostasis in chronological aged skin, Sprague-Dawley male rats of 4-wk-old were orally administrated with MCH at the diet concentrations of 2.25% and 4.5% for 24 mo. Histological and biochemical analysis revealed that MCH had the potential to inhibit the collagen loss and collagen fragmentation in chronological aged skin. Based on immunohistochemistry and western blot analysis, collagen type I and III protein expression levels in MCH-treated groups significantly increased as compared with the aged control group. Furthermore, quantitative real-time polymerase chain reaction and western blot analysis showed MCH was able to increase the expressions of procollagen type I and III mRNA (COL1A2 and COL3A1) through activating Smad signaling pathway with up-regulated TGF-βRII (TβRII) expression level. Meanwhile, MCH was shown to inhibit the age-related increased collagen degradation through attenuating MMP-1 expression and increasing tissue inhibitor of metalloproteinases-1 expression in a dose-dependent manner. Moreover, MCH could alleviate the oxidative stress in chronological aged skin, which was revealed from the data of superoxide dismutase activity and the thiobarbituric acid reactive substances level in skin homogenates. Therefore, MCH was demonstrated to have the protective effects on chronological skin aging due to the influence on collagen matrix homeostasis. And the antioxidative property of MCH might play an important role in the process.     

桑叶生物碱对D-半乳糖诱导小鼠肠道菌群紊乱的调节作用

目的:探究桑叶生物碱对D-半乳糖诱导小鼠肠道菌群失衡的改善作用,为桑叶生物碱的开发利用提供依据.方法:采用D-半乳糖诱导建立小鼠氧化损伤模型,然后灌胃低(50?mg/kg?mb)、中(100?mg/kg?mb)、高(200?mg/kg?mb)剂量的桑叶生物碱,45?d后测定小肠组织中活性氧(reactive oxyge...